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中药柴贝止痫汤对海人酸致痫大鼠脑组织BCRP及MVP表达的调节作用
目的:观察柴贝止痫汤对海人酸致痫大鼠模型脑组织耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、主穹窿蛋白(MVP)表达的作用.方法:本研究采用侧脑室注射海人酸的方法建立癫痫持续状态后慢性难治性癫痫大鼠模型,分为正常组、假手术组、模型组、卡马西平组、中药组和中西药组共6组,给药3个月后取新鲜脑组织分别进行蛋白质印迹法(Western blot)以及RT-PCR来观察各组大鼠脑内BCRP及MVP表达的情况并比较组间差异.结果:正常组、假手术组大鼠皮层的BCRP的表达无明显差异;与假手术组比较,模型组BCRP表达升高(P ＜0.01);与模型组比较,中药组及中西药组BCRP的表达降低(P＜0.05),而MVP的表达中西药组与模型组相比未见明显统计学差异.结论:柴贝止痫汤可降低海人酸致痫大鼠脑组织BCRP的表达,而对于MVP表达的作用还需要进一步的研究论证.
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海人酸致痫大鼠中多药耐药相关蛋白1和主穹窿蛋白的表达及作用
目的:探讨多药耐药相关蛋白1(MRP1)和主穹窿蛋白(MVP)在难治性癫痫中的耐药机制.方法:用免疫组化法检测海人酸(KA)致痫大鼠海马组织中MRP1和MVP的表达,应用SPSS17.0软件进行统计分析.结果:KA组的MRP1和MVP的表达均比对照组明显增高(P<0.01).KA组的MRP1和MVP的表达相似,随时间段逐渐升高,第3天、7天与第1天比较表达显著增高(P<0.05).结论:MRP1和MVP可能与难治性癫痫的耐药有关.
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多药耐药蛋白及其在难治性癫(癎)中作用的研究进展
难治性癫(癎)的耐药性研究已取得了许多突破性进展.近年发现,难治性癫(癎)与多药物耐药蛋白存在着密切联系.文中介绍3种主要多药耐药蛋白(P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、主穹窿蛋白)的结构和功能,并对其近年在难治性癫(癎)耐药中作用的研究进展作一综述.
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托吡酯联合丙戊酸治疗对婴儿痉挛症患儿外周血淋巴细胞主穹隆蛋白表达的影响
目的 通过观察抗癫痫药物对婴儿痉挛症患儿外周血淋巴细胞主穹窿蛋白(MVP)表达的影响,探讨婴儿痉挛症耐药的部分机制.方法 以2014年1月-2016年2月无锡市儿童医院门诊及住院收治的婴儿痉挛症患儿30例为治疗组,选取同期来院体检的健康儿童30例为正常对照组.婴儿痉挛症患儿确诊后立即口服丙戊酸、托吡酯,治疗时间均超过6个月;用药前、用药后6个月应用免疫蛋白印记(Western blot)方法检测外周血淋巴细胞MVP蛋白的表达.结果 治疗组用药6个月后总效率66.7%.正常对照组儿童外周血中有少量MVP表达.婴儿痉挛症患儿用药前MVP大量表达,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗组在用药后6个月MVP较用药前降低,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 MVP可能参与婴儿痉挛症耐药的发生,丙戊酸联合托吡酯可以控制婴儿痉挛发作,并可能下调MVP的表达.
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拉莫三嗪对海人酸致(痼)大鼠海马中主穹窿蛋白表达的影响
目的 建立大鼠难治性癫痫模型,观察主穹窿蛋白(MVP)的表达及拉莫三嗪(LTG)对其表达的影响,探计MVP是否与难治性癫痫耐药相关.方法 将140只28 日龄大鼠随机分成海人酸组(KA组)80只、对照组60只.KA组海马注射KA 1 μg,对照组注射相同剂量的9g·L-1盐水(NS).注射后连续观察8h,按照Racine癫痫行为分级,癫痫发作达Ⅳ级以上并出现癲痫持续状态的大鼠若2周后出现自发性反复发作惊厥则为造模成功.将造模成功的60只大鼠随机分成KA组30只、KA+LTG组30只,将对照组60只大鼠随机分成NS组30只、NS+ LTC组30只,用药组均于癫痫自发性发作反复发作后开始用药,将各组从给用药组大鼠灌药开始按处死时间不同分成1周组、3周组、5周组,于各时间取材后用免疫组织化学法检测各组大鼠海马组织(CA3区)中MVP的表达.结果 1.大鼠瘌性行为:NS组、NS+LTG组大鼠无(癎)性发作,进入慢性期后,KA组、KA+ LTG组大鼠出现Ⅰ～Ⅴ级的自发性反复(癎)性发作.KA+ LTG组发作频率较KA组明显降低(P＜0.05).2.NS组,NS+LTC组大鼠海马有少量MVP阳性细胞表达,其随时间延长逐渐减少,NS+ LTG组MVP免疫组织化学评分(IHS)与NS组比较差异无统计学意义(P ＞0.05)；KA组MVP阳性细胞随时间点逐渐升高,第5周未达高峰,与NS组各时间点比较,MVP的IHS均显著增高(pa＜0.01)；KA+ LTG组表达趋势:在CA3区,第3周与第1周比较评分明显增加(P＜0.05),第5周与第3周比较有下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0 05).KA+ LTG组与KA组在第1周、第3周比较差异无统计学意义(P＞0.05),与第5周比较差异有统计学意义(P＜0.05)；各时间点KA+LTG组与NS+ LTG组比较,MVP的IHS均明显增高(Pa＜0.05).结论 MVP可能参与难治性癫(癎)耐药的发生,LTG通过控制大鼠(癎)性发作,而间接下调MVP的表达.
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颞叶癫痫主穹窿蛋白表达及其作用研究
目的 探讨主穹窿蛋白(major vault protein,MVP)在颞叶癫痫大鼠模型脑组织的表达及其与难治性癫癎耐药是否相关.方法 用氯化锂-匹鲁卡品制作颞叶癫癎模型,并将它分为药物有效组和耐药组;用免疫组化和Western blot法检测MVP表达.结果 MVP主要表达在海马和皮质区的小胶质细胞,血管内皮细胞,血管周围的星形胶质细胞也有表达,神经元中少见表达;耐药组MVP表达较药物有效组和对照组明显增高,具有统计学意义(P<0.05).结论 耐药大鼠模型中MVP过量表达,提示MVP可能与难治性癫癎的耐药性有关.
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环氧化酶-2选择性抑制剂塞来昔布对癫癎持续状态大鼠脑内主穹隆蛋白表达的影响
目的 观察环氧化酶-2选择性抑制剂塞来昔布对癫癎持续状态大鼠脑内主穹隆蛋白(MVP)表达的影响,探讨其在治疗难治性癫癎中的作用及可能机制,为难治性癫癎的新药治疗提供理论依据.方法 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为空白对照组(n=16)、癫癎模型组(n=22)和塞来昔布干预组(n=22),氯化锂-匹鲁卡品诱发大鼠癫癎持续状态模型成功后,各组均有16只大鼠纳入实验.采用免疫组化法和Western blot法检测各组大鼠额叶皮质区及海马区MVP的表达情况.结果 癫癎模型组大鼠脑内MVP的表达水平较空白对照组显著增高(P＜0.01);塞来昔布干预后的大鼠脑组织中MVP表达水平较癫癎模型组显著下降,但仍高于空白对照组(P＜0.01).结论 塞来昔布可降低MVP在癫癎持续状态大鼠脑组织中的高表达,有望为治疗难治性癫癎提供新方法.
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左乙拉西坦对难治性癫痫患者外周血淋巴细胞主穹窿蛋白表达的影响
目的:研究左乙拉西坦对难治性癫痫患者外周血主穹窿蛋白(MVP)表达的影响,探讨其在难治性癫痫中的作用.方法:收集2012年09月至2013年02月无锡市儿童医院难治性癫痫患者30例,男18例,女12例,年龄(5.2±1.8)岁.这些患者均口服左乙拉西坦超过12个月,分为用药前(B组)、用药6个月(C组)和12个月(D组)3组.选取同期来院体检的健康儿童30例为对照组(A组),男16例,女14例,年龄(5.5±2.9)岁.应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测外周血中MVP基因,免疫蛋白印记(Western Blot)方法检测MVP蛋白的表达,结果经统计学处理.结果:空白对照组外周血中有少量MVP表达(mRNA:1.133 ±0.152、蛋白:0.020±0.008);难治性癫痫患者用药前MVP大量表达(mRNA:1.788±0.097、蛋白:0.209±0.012),与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05).左乙拉西坦治疗组在用药后6个月(mRNA:1.657±0.126,蛋白:0.196±0.012)、12个月(mRNA:1.466±0.199,蛋白:0.180±0.008)均较对照组减低(P＜0.05);用药6个月、12个月两组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:MVP可能参与癫痫耐药的发生,LEV可以控制癫痫发作,并可能下调MVP的表达.
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左乙拉西坦对红藻氨酸致发育期癫痫幼鼠海马主穹窿蛋白表达的影响
目的:建立发育期慢性癫痫大鼠模型,观察海马主穹窿蛋白(MVP)的表达及左乙拉西坦(LEV)对其表达的影响.方法:腹腔注射红藻氨酸(KA)1 mg/kg(浓度0.5 mg/ml),建立大鼠慢性癫痫模型,注射后连续观察8h,癫痫发作达5级以上并出现癫痫持续状态的大鼠,且两周后出现自发性反复惊厥发作者视为模型成功.将造模成功后的40只大鼠随机分为未治疗组(KA组)20只,左乙拉西坦治疗组(KA+ LEV组)20只,另取40只大鼠腹腔注射生理盐水,并分为NS组20只、NS+ LEV组20只.用药组均于癫痫自发性反复发作后开始用药,疗程为6周,然后将所有大鼠断头取脑,用免疫组化及RT-PCR法测定大鼠海马内MVP及其mRNA的表达.结果:(1)大鼠海马MVP的阳性细胞计数与MVP的mRNA表达趋势相一致.(2) NS组、NS+ LEV组大鼠海马有少量MVP阳性细胞及mRNA表达,NS+ LEV组MVP阳性细胞数及mRNA的含量与NS组相比差异无统计学意义(P ＞0.05)；KA组MVP阳性细胞计数及mRNA的含量与NS组相比显著增高(P ＜0.05)；KA+ LEV组与KA组相比,MVP的阳性细胞及mRNA含量减少(P＜0.05).结论:MVP可能参与慢性癫痫耐药的发生,LEV可以控制大鼠痫性发作,并下调MVP的表达.
