抗生素相关腹泻识别与处理

抗生素相关腹泻(AAD)为抗生素应用的重要并发症,可分为感染性AAD及非感染性AAD.感染性AAD常见的病原菌为艰难梭菌,其临床表现严重,并可引起伪膜性肠炎.非感染性AAD为临床常见的AAD类型,临床症状轻.AAD的首要治疗为调整或停用抗生素,并可联用菌群调节剂等,对于怀疑为感染性AAD者,可经验性给予肠道内应用万古霉素或甲硝唑治疗.合理的抗生素、微生态制剂的使用是预防AAD的有效措施.

儿童迁延性和慢性腹泻中艰难梭菌感染的检测

目的 探讨儿童迁延性及慢性腹泻病中艰难梭菌感染情况,对所检测到的艰难梭菌菌株进行核糖体分型,了解其分子流行病学特征.方法 收集2014年10月至2015年5月南京医科大学附属南京市儿童医院门诊和住院迁延性及慢性腹泻患儿的大便标本113例.粪便标本采用PCR法检测毒素A/B基因,阳性PCR产物送测序后进行BLAST比对.根据艰难梭菌16S-23S基因间隔区的多形性运用PCR法对艰难梭菌进行核糖体分型.结果 艰难梭菌阳性标本15例,检出率为13.3％ (15/113),所有阳性标本均能得到测序验证.15株艰难梭菌产毒株中13株系A+B+菌株,2株系A-B+菌株,分别占86.7％(13/15)和13.3％ (2/15).二元毒素基因检测均为阴性.15株艰难梭菌被分为9种核糖体型别,其中R1、R4型别多,分别占20％.结论 我院艰难梭菌以毒素型A+B+为主,R1、R4型是核糖体分型的优势型别,无院内艰难梭菌感染暴发流行的证据.

儿童抗生素相关性腹泻:旧题新说

抗生素是PICU常用药物.腹泻是抗生素治疗常见的不良反应.大多数情况下,抗生素相关性腹泻可分为两类:艰难梭菌相关性腹泻、原因不明的腹泻.一般来说,检测不出的艰难梭菌的抗生素相关性腹泻,通常病情轻微且自限.虽然仅约25％抗生素相关性腹泻由艰难梭菌引起,但目前来看,假膜性肠炎、重症抗生素相关性腹泻多与艰难梭菌有关.由于这个原因,抗生素相关腹泻目前通常被视为艰难梭菌相关性腹泻的同义词.通过对现有的医学文献的历史性回顾,该文对抗生素相关腹泻发病机制、诊断以及防治策略进展进行阐述,供临床医师参考.

病变局部感染在克罗恩病与溃疡性结肠炎发病上的意义

一、同实验性结肠炎发病与病变状态相关的肠道细菌在肠炎研究上,可采取使动物肠道感染致病菌或经肠道投予艰难梭菌或葡萄球菌毒素,或将角叉菜胶或硫酸葡聚糖掺入饮水中喂食以使引发急性肠炎.然而,即使是葡聚糖硫酸钠(DSS)肠炎倘若使肠道无菌化则也会因DSS易感性差异而不致引发,或仅能引起轻症肠炎.

艰难梭菌疫苗研究的现状与展望

艰难梭菌是引起伪膜性肠炎的致病菌.目前国内外均出现了同时耐两种主要治疗药物——甲硝唑、万古霉素的菌株,疫苗研究是防治艰难梭菌的重要手段.国外研制艰难梭菌疫苗近20年,取得了一定进展,本文将对现有的艰难梭菌疫苗的研究现状进行总结,并对疫苗的发展进行展望.

艰难梭菌感染:ICU中如何处理

艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)是重症患者非常重要的院内感染性疾病之一,常与广谱抗菌药物的广泛应用有关,其中肠道菌群失调是重要的因素之一.虽然艰难梭菌感染(CDI)仅占抗菌药物相关性腹泻中的10％～20％,但是目前CDAD的发生率呈明显升高趋势,且根据研究显示,重症患者CDAD的30天病死率已达36.7％.CDAD的临床表现多样,重症患者出现伪膜性肠炎表现,导致患者因严重毒血症而死亡.临床上可通过多种方法进行诊断.治疗上在停用相关抗菌药物后,需要应用抗艰难梭菌治疗、增强免疫及尽快恢复肠道正常菌群,恢复其生态平衡.

3种艰难梭菌实验室鉴定方法的快速性及准确性研究

目的：探讨3种艰难梭菌实验室鉴定方法的快速性及准确性。方法收集2014－04～2014－12间广东省第二人民医院118例ICU患者共234份标本进行24 h和48 h培养研究。并对培养结果进行鉴定。通过基因检测的方法对大便标本提取的DNA进行B毒素检测。然后以48 h培养标本的检测结果作为参考值，对24 h培养检测法和Pcr扩增B毒素基因检测法进行效能的评价，主要有特异度、灵敏度、阴性预测值和阳性预测值。结果对所有标本培养48 h后，9例患者共计10份艰难梭菌标本培养呈阳性，标本阳性率为4.27％，梭菌的感染率为7.62％。24 h培养法的效能对比值分别为：灵敏度76.00％、特异度100.00％、阴性预测值100.00％和阳性预测值97.00％；Pcr扩增tcdB基因检测法的效能对比值分别为：灵敏度82.30％、特异度99.15％、阴性预测值99.15％和阳性预测值82.30％。结论 Pcr扩增B毒素基因检测法用时短，灵敏度和特异度均相对较高，24 h培养法灵敏度略低，可能导致漏诊，48 h培养法用时长，但检测结果可靠。

绍兴地区老年住院腹泻患者难辨梭菌检测结果分析

难辨梭菌又称艰难梭菌,它产生的毒素是难辨梭菌相关性腹泻(CDAD)的主要致病因素,近年来CDAD发病率不断增加.老年住院患者由于免疫功能低下,且患有严重基础疾病,因此难辨梭菌的感染率更高.为了解绍兴地区老年住院腹泻患者中难辨梭菌的感染情况,对其粪便中的难辨梭菌毒素A/B(CDAB)进行了检测,现报告检测结果.

3 种检测艰难梭菌方法的临床应用评估

本研究旨在对3种检测粪便样本中艰难梭菌的方法进行临床应用评估 ,为艰难梭菌的实验室检测提供参考.采用艰难梭菌毒素A/B(Clostridium difficile toxins A and B ,CDAB)酶联免疫荧光检测法、环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂(cycloserin-cefoxitin-fructose agar ,CCFA)常规培养法和显色培养法(chromIDTM )同步检测粪便样本中的艰难梭菌 ,并对培养所得菌株进行 tcdB基因扩增以验证其产毒性.以艰难梭菌培养联合 tcdB基因扩增为参考方法 ,分别计算上述3种方法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值等参数 ,分析其与参考方法的一致性.研究共收集临床粪便样本164份 ,参考方法检测结果为58份阳性 ,106份阴性.经统计分析 ,艰难梭菌毒素 A/B法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为51 .7% 、95 .3% 、85 .7% 和78 .3% ,CCFA常规培养法分别为72 .4% 、98 .1% 、95 .5% 和86 .7% ,而艰难梭菌显色培养法分别为94 .8% 、92 .5% 、87 .3% 和97 .0% .3种方法中 ,艰难梭菌显色培养法与参考方法的一致性高(Kappa=0 .856 ).采用该方法检测粪便样本中的艰难梭菌操作简便 ,成本经济 ,结果判断直观、准确 ,具有较好的临床应用价值.

050 一种生成艰难梭菌B类毒素的新方法

不产A毒素艰难梭菌的毒力

欧洲临床微生物学动态

一、欧洲艰难梭菌诊断方法和试验方案的调查欧洲临床微生物和感染性疾病学会(ESCMID)的欧洲艰难梭菌研究组(ESGCD),近对欧洲微生物实验室所用的艰难梭菌感染诊断方法和试验方案进行了调查.

3种不同方法检测艰难梭菌芽孢率的比较

目的：了解艰难梭菌检测的芽孢率并进行比较。方法采用平板涂布法、相差显微镜计数法和孔雀绿染色法3种检测方法对艰难梭菌 ATCC 43596和 VPI 10463经培养96 h 和120 h 后的芽孢率进行了比较分析。结果显示平板涂布法芽孢检出率高为（25．3％、15．6％），变异较大（SD ＝7．1％，4．3％）；相差显微镜计数法和孔雀绿染色法结果相近分别为（13．3％、9．4％）、（13．4％、9．8％），变异较小（SD ＝1．9％、0．8％）、（SD ＝1．4％、0．9％）。结论在选用平板涂布法检测芽孢率时，建议联合相差显微镜法或者孔雀绿染色法以减少偏移。

艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒的性能评估

目的 对新产品艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒(免疫层析法,C.DIFF QUICK CHEK COMPLETE)进行性能评估.方法 收集临床腹泻患者粪便标本130份,对腹泻粪便标本同时进行艰难梭菌毒素A/B检测试剂盒、艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒和毒素培养检测,以金标准毒素培养法结果作为参比标准,评价各种检测方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值,从而对艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒进行性能评估.结果 毒素培养法检测艰难梭菌的阳性率为13.8%(18/130).与金标准方法相比,艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为55.6%、98.2%、83.3%和93.2%,艰难梭菌毒素A/B检测试剂盒的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为50.0%、95.6%、64.3%和92.1%.结论 艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原及毒素检测试剂盒特异性高,阳性预测值较高,且检测周期短,无需特殊仪器平台,可作为医院门、急诊艰难梭菌感染的初筛试剂盒.

关注分子技术在临床微生物检验中的应用

本期“微生物分子诊断专题”精心组织了6篇文章，包括1篇综述和5篇专著。内容主要围绕临床常见的细菌、真菌和分枝杆菌感染等的诊断、治疗（耐药）、预防和控制问题，重点介绍了分子生物学技术在临床微生物标本的直接检测、基因分型、耐药基因研究、抗原制备及血清学诊断等方面的应用研究。血流感染是一种严重的全身感染性疾病，但血培养存在检验周期长、阳性率低等问题，应用分子生物学技术能够对血流感染中的常见或少见病原菌、分枝杆菌、苛养菌等进行快速鉴定及耐药分析，可以缩短检验周期。艰难梭菌是一种重要的医院感染病原菌，引起抗菌药物相关性腹泻，GeneXpert实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）能够直接检测粪便标本中的艰难梭菌，具有快速、操作简便等优点。光滑念珠菌可引起血流感染等多种感染，且耐药性强，是医院感染中常见的侵袭性真菌，微卫星多态性分析法简便快速，分辨力高于多位点序列分析（MLST），可作为临床实验室光滑念珠菌基因分型方法。近年来白念珠菌对唑类抗真菌药的耐药性有增高趋势。“白念珠菌对唑类耐药的机制和生物膜相关基因的表达”一文提示ERG11基因的过度表达为白念珠菌对唑类耐药的重要机制。菌丝细胞壁蛋白HWP1基因的高表达与白念珠菌生物膜形成相关。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类耐药的主要机制是产生质粒介导的2型肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（KPC-2），“同源重组敲除临床肺炎克雷伯菌质粒blaKPC-2基因”一文建立的λred同源重组法能可靠敲除其质粒上的blaKPC-2，为进一步研究blaKPC-2在肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药中所起的作用奠定基础。“结核分枝杆菌rdESA7-6抗原在耻垢分枝杆菌中的制备及其血清学诊断研究”一文研究制备的结核分枝杆菌融合蛋白-6用于结核病血清学检测具有较好的敏感性和特异性，可用于结核病患者的血清学诊断。

GeneXpert实时荧光定量PCR快速检测艰难梭菌的临床评估

目的：对GeneXpert实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）在快速检测临床粪便标本中艰难梭菌的应用进行评估。方法采用双拭子蘸取临床未成形粪便标本，一支拭子用于GeneXpert实时荧光定量PCR检测艰难梭菌毒素基因tcdB，另一支用于常规厌氧菌培养检测；对GeneXpert实时荧光定量PCR检测结果与常规厌氧菌培养结果的一致性进行统计学分析，并计算GeneXpert实时荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值等参数。结果临床收集到141例未成形粪便标本，GeneXpert实时荧光定量PCR检出艰难梭菌毒素基因tcdB阳性42例，其中常规厌氧菌培养阳性34例，两者一致性较好（Kappa＝0．7750，P＜0．01），GeneXpert实时荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为87．2％、92．2％、81．0％和94．9％。结论GeneXpert实时荧光定量PCR直接检测粪便标本中的艰难梭菌具有检测快速、操作简便等优点，有重要的临床应用价值。

spo0A基因在艰难梭菌生长及芽孢形成中的作用

目的 了解spo0A基因对艰难梭菌临床分离株生长和芽孢产生的影响.方法 采用ClosTron敲除技术构建艰难梭菌临床分离株C25的spo0A基因突变株,分光光度计检测菌液浓度并绘制生长曲线,孔雀绿染色法计数芽孢和营养细胞.结果艰难梭菌临床分离株C25的spo0A基因敲除突变株和敲除前亲代株的48 h生长曲线无明显差异,但突变株不再产生芽孢.结论 spo0A基因是艰难梭菌芽孢形成过程中的关键基因,但并非其生长过程中的主要基因.

治疗艰难梭菌感染的新药 cadazolid 的体外及体内抗菌活性

艰难梭菌感染是医疗相关性腹泻的首要原因，罹患率和病死率居高不下，迫切需要新的治疗药物。cadazolid 是一种新型口恶唑烷酮类药物，目前已用于艰难梭菌感染性腹泻的治疗。本研究对 cadazolid 在体外和体内的抗菌活性进行评估。体外实验中包括利奈唑胺和氟喹诺酮耐药的艰难梭菌，该药的 MIC 范围为0．125～0．5 mg／L。杀菌试验表明，cadazolid在24 h 之内可以杀灭99．9％的艰难梭菌，其作用优于万古霉素。与甲硝唑及万古霉素相比，cadazolid 抑制艰难梭菌在生长稳定期外毒素 A、B 合成，还可有效抑制艰难梭菌芽孢形成。在仓鼠和小鼠的艰难梭菌感染性腹泻模型中的研究表明，cadazolid 疗效确切，无实验动物因腹泻而死亡，与万古霉素的作用相当。以上结果为 cadazolid 用于治疗艰难梭菌相关性腹泻的进一步研究提供了依据。

非达霉素：一种治疗艰难梭菌感染的新选择

艰难梭菌感染是医院内抗生素相关性腹泻的首要病因，甲硝唑和万古霉素是目前用于艰难梭菌感染治疗的推荐药物，但艰难梭菌感染在甲硝唑或万古霉素治疗后的复发率均很高，迫切需要新的治疗药物。非达霉素（PAR‐101，OPT‐80，difimicin）是一种可口服给药的新型大环内酯类抗生素，近日在美国和欧洲获准用于治疗艰难梭菌感染。临床研究表明：与口服万古霉素相比，非达霉素的疗效不比万古霉素差，用药后对艰难梭菌的再燃有抑制作用，并能有效降低艰难梭菌感染的复发率（毒力较强的 N A P1／B1／027菌株除外）。非达霉素的研制为治疗艰难梭菌感染提供了新的选择，并减少了艰难梭菌感染的复发，降低了医疗成本。

艰难梭菌结肠炎的远期预后

2005年作者等曾报道用甲硝唑治疗207例艰难梭菌结肠炎(CDAD)患者的短期疗效.疗程结束后90 d,103例(50%)治愈,46例(22%)治疗失败,58例(28%)复发.后续的临床研究显示CDAD的病程比我们原来认为的更加迁延,符合短期治愈标准的患者仍有可能复发.我们随访了短期治愈的患者和有关资料得到这些患者的远期预后.