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艰难梭菌感染的相关研究进展
近年随着艰难梭菌高毒力菌株( BI/NAP1/027型)的出现,艰难梭菌感染( clostridium difficile infection, CDI)的发病率和病死率在世界各地均呈上升趋势,但我国现尚缺少系统性的CDI流行病学监控数据,这对其临床诊断和治疗提出新的挑战。将CDI检测作为常规检查,重视其流行病学监测,并针对性控制CDI的危险因素以避免CDI在我国医院爆发具有重要意义。
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针对性护理措施在预防院内艰难梭菌相关腹泻中的作用
目的：探讨护理措施在预防医院内获得艰难梭菌相关腹泻中的作用。方法：选取2016年1～8月在我院外科住院使用抗生素超过3 d出现腹泻的高危易感患者68例作为研究对象，并随机等分为对照组与研究组，其中对照组给予常规护理措施，研究组给予有针对性预防护理举措，比较CDAD发病率。结果：研究组CDAD发病率明显低于对照组，差异比较有统计学意义（P＜0．05）。研究组住院时间及医疗费用均明显少于对照组，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论：有针对性的预防护理举措对医院内获得艰难梭菌相关腹泻的预防至关重要，值得重视。
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FDA已受理默沙东单抗产品bezlotoxumab的生物制品许可申请
美国制药巨头默沙东近日宣布，FDA已受理单抗产品bezlotoxumab的生物制品许可申请（ BLA），这是一种实验性抗毒素（ an-titoxin），用于预防艰难梭菌（ C．difficile）感染的复发。
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医院ICU环境艰难梭菌污染及多位点序列分型调查研究
目的 了解ICU环境艰难梭菌的污染情况、分布趋势及其耐药情况,为开展有效预防控制提供一定参考.方法 用采样海绵在广州市三甲医院ICU内部环境采集标本,使用ChromID艰难梭菌鉴定平板进行分离培养,可疑菌株用厌氧菌-棒状杆菌鉴定卡(Anaerobic and Coryneform Card,ANC)通过VITEK鉴定.对阳性菌株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分子型别鉴定及药敏试验.结果 共采集150份标本,分离到9株艰难梭菌(阳性率6.00％),分属5种ST:ST54、ST37、ST8、ST42和ST302.其中4株ST54型分属3家不同医院;ST37型2株分别来源于两家不同医院;推车阳性率高,洗手池和脉搏血氧计其后,病服、呼叫铃及床扶手也分离到艰难梭菌.环境分离株对甲硝唑和万古霉素高度敏感.美洛培南、氨苄西林和哌拉西林也可作为环境艰难梭菌感染治疗的可选药物.结论 未在医院ICU环境中发现艰难梭菌流行,也未出现优势定值株.本研究提示要及时彻底消毒医院环境,特别是ICU推车及洗手池等表面,消除传播隐患.
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抗生素相关性腹泻的发病机制及诊治原则
抗生素相关性腹泻（Antibiotic-associate diar-rhea ，AAD）是指应用抗生素后发生的、无法用其他原因解释的腹泻。近年来，由于抗菌药物的广泛应用和新型艰难梭菌菌株的出现，使 A AD 的发生率呈现上升的趋势，引起了人们的高度重视。目前尚无统一的A AD诊断标准。如果在近期或正在接受抗生素治疗以及治疗后2个月内发生的腹泻，每天≥3次，连续2天以上，均应考虑 A AD 的可能［1］。本文对A AD的发病机制及诊治原则作一综述。
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艰难梭菌感染的机制与防治进展
艰难梭菌是引起医源性感染的重要病原菌之一，可引起发热、腹泻、肠炎等疾病，严重者可并发肠穿孔及腹腔感染，且存在复发性感染的风险，严重威胁着患者的生命健康。随着抗生素的滥用，艰难梭菌的耐药性逐渐增强，其感染率逐年上升，治疗难度越来越大，复发及死亡人数也随之上升。探讨艰难梭菌的感染机制，从中发现阻断病情进展的有效疗法是当前临床工作的重中之重。本文综述艰难梭菌的致病机制，并探讨其防治进展，以期为临床诊疗提供新的参考和借鉴。
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1例直肠癌术后并发肠瘘引起腹泻继发艰难梭菌相关性腹泻的护理
腹泻为外科围术期常见的并发症，腹泻的诊断为每日排水样大便≥3次，且量>200 g (或250 mL)[1]，按照病因可分为疾病相关性腹泻、喂养相关性腹泻及药物相关性腹泻3大类。不同类型的腹泻治疗方案完全不同，特别是药物相关性腹泻容易与本身有腹泻的混淆，容易被误诊为普通肠道感染和细菌性痢疾，导致治疗不当，延误病情。艰难梭菌性是属于药物相关性腹泻的一种，可发生在应用抗生素初期至停用抗生素2周~6周[2]，临床表现差异较大。艰难梭菌相关性腹泻两大危险因素：艰难梭菌暴露和抗生素使用[3]。住院日的延长增加了艰难梭菌的暴露时间，伴随抗生素的使用，艰难梭菌的感染率呈逐渐升高趋势[4]，因此早期诊断，及时治疗，对艰难梭菌感染后疾病的治疗和转归至关重要。2016年7月我科收治1例直肠癌术后并发肠瘘继发艰难梭菌相关性腹泻，经过医生及时诊断，积极治疗及全面护理，取得满意效果。现报告如下。
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去甲万古霉素临床应用调查分析
去甲万古霉素(norvancomycin)为国产糖肽类抗生素,主要含N-去甲基万古霉素,也含少量万古霉素,其效价0.4 g相当于0.5 g万古霉素.去甲万古霉素抗菌谱似万古霉素,对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌(包括产酶株和耐甲氧西林株)、化脓性链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、艰难梭菌等有强大的抗菌作用,对革兰阴性杆菌、分枝杆菌、真菌等感染无效.
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甲硝唑联合利奈唑胺、非达霉素和万古霉素对艰难梭菌体外抗菌活性研究
目的 本研究旨在探讨甲硝唑与3种抗生素(利奈唑胺、非达霉素、万古霉素)分别联用对临床分离的艰难梭菌的体外抗菌活性,为临床联合用药提供实验依据.方法 将甲硝唑与其它3种抗菌药在体外单独以及联合应用作用于32株艰难梭菌菌株,采用琼脂二倍稀释法,测定低抑菌浓度(MIC)、计算部分抑菌浓度(FIC)指数,绘制杀菌曲线.评价甲硝唑与其它3种抗菌药物分别联合应用的体外抗菌活性.结果 利奈唑胺、非达霉素、万古霉素分别与甲硝唑在体外联合应用后,利奈唑胺和非达霉素联合用药后MIC值均比单独应用时下降,联合药敏指数均≤2;联合应用对艰难梭菌杀菌速度加快,杀菌作用增强.万古霉素联合甲硝唑MIC值无明显改变.结论 利奈唑胺、非达霉素分别与甲硝唑在体外联合均具有协同抗菌作用,能降低对艰难梭菌的MIC,而万古霉素联合甲硝唑MIC无明显改变.
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酪酸梭菌与婴儿双歧杆菌对艰难梭菌体外生物拮抗作用的研究
用酪酸梭菌(Clostridium butyricum)和婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)单独或联合对艰难梭菌(Clost ridium difficile)进行试管内的生物拮抗作用.将酪酸梭菌、婴儿双歧杆菌单独或酪酸梭菌和婴儿双歧杆菌联合分别与艰难梭菌以一定的比例等量混合后,接种于GAM液体培养基中进行厌氧培养.实验证明酪酸梭菌和婴儿双歧杆菌能明显抑制艰难梭菌的生长,并且两菌联合比各自单独培养时显示出更强的生物拮抗作用.
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住院腹泻患者艰难梭菌快速检测结果分析
目的 了解住院腹泻患者艰难梭菌带菌情况,为抗生素相关腹泻患者的诊断和治疗提供参考.方法 收集2015年9月至2016年8月住院腹泻患者粪便标本163份,用艰难梭菌快速检测试剂盒检测艰难梭菌.结果 艰难梭菌检出总阳性率为20.86％ (34/163),其中春季16.67％、夏季15.79％、秋季17.86％、冬季27.87％,经比较差异无统计学意义(x2=2.943,P＞0.05);成人粪便标本阳性率为22.52％ (25/111),儿童粪便标本阳性率为17.31％ (9/52),差异无统计学意义(x2=0.583,P＞0.05);男性粪便标本阳性率为21.69％ (18/83),女性粪便标本阳性率为20.0％ (16/80),差异无统计学意义(x2=0.202,P＞0.05);艰难梭菌阳性患者抗菌药物平均使用天数为12.74 d,阴性患者为8.21d,差异有统计学意义(t=-7.81,P＜0.01).结论 住院腹泻患者艰难梭菌阳性率高低与抗菌药物使用时间长短有关.
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ICU患者艰难梭菌分离培养与流行病学特征研究
目的 了解ICU患者艰难梭菌的定植和感染情况, 为预防艰难梭菌的流行提供参考.方法 收集2016年9月至2017年6月福建医科大学附属第一医院ICU中139例住院时间>7d的患者的粪便样本, 对其进行选择性厌氧培养和质谱鉴定.对艰难梭菌培养阳性标本进行毒素基因 (tcdA、tcdB、cdt A、cdtB) 的PCR检测以及毒素A、B表型检测.收集所有患者的临床资料, 并对艰难梭菌培养阳性患者的临床特征和实验室检查结果进行单因素分析和多因素回归分析.结果 艰难梭菌检出率为17.27％ (24/139) .其中, 14株艰难梭菌的tcdA和tcdB基因检测阳性, 占58.3％ (14/24) ;10株为tcdA和tcdB基因检测阴性, 占41.7％ (10/24) .所有菌株二元毒素基因 (ctdA/ctdB) 均未检出.单因素分析提示, 高龄、长时间住院、高淋巴细胞数、使用β-内酰胺类抗生素是艰难梭菌定植的高危因素;多因素回归分析提示, 使用β-内酰胺类抗生素是艰难梭菌定植的独立危险因素 (OR=3.881, P=0.039) .结论 我院ICU可能存在艰难梭菌感染和传播的风险, 对具有高龄、长期住院以及使用抗生素等高危因素的患者应进行艰难梭菌的监测, 以防艰难梭菌的传播、感染和艰难梭菌相关性腹泻的发生.
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兰州地区腹泻患者艰难梭菌的感染状况调查
目的 调查兰州地区腹泻患者中艰难梭菌的流行特点,揭示国内艰难梭菌感染的现况.方法 通过细胞毒检测试验和酶联免疫吸附试验对206份临床粪便样品进行毒素检测.结果 206份粪便滤液经细胞毒检测有26份样品使非洲绿猴肾细胞(vero细胞)圆缩化,确认含有艰难梭菌毒素;经酶联免疫吸附试验有28份为阳性,其中23份与细胞毒检测结果一致,与细胞毒试验的符合率为88.5％.结论 兰州地区住院腹泻患者中艰难梭菌感染率约为12.62％.
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具有临床代表性的艰难梭菌感染小鼠稳定模型的构建
目的 构建临床代表性好、稳定性佳的艰难梭菌感染小鼠模型,为艰难梭菌感染相关疾病提供研究工具.方法 选择C57BL/6、BALB/c、昆明小鼠,经抗生素诱导后,分别予以不同浓度(108 CFU/mL～1010 CFU/mL)的临床分离菌株混悬液灌胃,观察不同品系小鼠不同时间点腹泻、全身情况及结肠组织病理学变化.结果 灌菌后,BALB/c小鼠1010 CFU/mL浓度组全部出现腹泻,死亡率为16.7％;其他实验组小鼠腹泻程度差异较大或仅部分出现轻度腹泻.腹泻小鼠表现为稀烂便甚至水样便和湿尾现象,体重减轻,肠道病理显示结肠黏膜充血水肿伴炎性细胞浸润.结论 经5种抗生素灌胃9 d+克林霉素腹腔注射诱导,1010 CFU/mL艰难梭菌活菌混悬液灌胃后构建的BALB/c小鼠艰难梭菌感染模型稳定.
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艰难梭菌细胞毒素B功能区的克隆及序列分析
目的 克隆艰难梭菌(Clostridium difficile,C.d)细胞毒素B羧基末端功能区(CDB3)基因,并对其进行测序及生物信息学分析.方法 利用PCR技术扩增CDB3基因,并将其定向插入pET-22b(+)载体中,以DNA自动分析仪进行序列测定,并以生物信息学软件分析其生物学特性.结果 成功克隆了艰难梭菌CDB3基因,经测序表明与GenBank中分布的Clostridium difficile VPI10463的ToxinB3基因序列完全一致.DNAstar软件预测其蛋白质的相对分子量(Mr)约为71.3 kD,并显示出良好的抗原性.结论 研究获得了序列正确的CDB3基因,为其重组表达及其相关研究奠定了良好基础.
关键词： 艰难梭菌 细胞毒素B功能区蛋白 序列分析 生物信息学分析 -
住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植及相关特征
目的 了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染(Clostridium di ficile infection,CDI)患者中分离的菌株进行同源性分析.方法 采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012年6月石家庄三所医院的601份粪便标本进行厌氧培养,筛选出艰难梭菌;应用PCR方法检测A、B毒素基因并进行核糖体分型,Ntsys PC 2.0软件进行同源性分析.结果 601份住院非腹泻儿童粪便标本的艰难梭菌定植率为25.3％ (152/601),其中产毒株定植率为18.3％ (110/601);2岁以下婴儿与2～18岁儿童定植率分别为20.6％ (81/394)、34.3％(71/207).PCR核糖体分型共分有23个型别,其中6种主要型别的菌株占82.2％ (125/152).与该地区成人CDI患者来源菌株的12个型别相比,有10个型别相同.结论 石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率不同年龄段有差异,产毒株的定植率较高,且与引起成人CDI的菌株有同源性.提示艰难梭菌可能在儿童与成人间相互传播,尤其是无症状儿童作为艰难梭菌的储存库可能会污染医院环境,成为医院感染的潜在因素.
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使用不同抑酸剂的医院获得性艰难梭菌感染风险的Meta分析
目的 系统评价使用不同抑酸剂时医院获得性艰难梭菌感染的风险,为临床医生选择抑酸剂提供依据.方法 计算机检索PubMed、EMBASE、The Cochrane Library、CNKI、WanFang Data、CBM和VIP等数据库,搜集有关质子泵抑制剂(PPI)、组胺-2受体拮抗剂(H2RA)与医院获得性艰难梭菌感染风险相关性的文献,使用Stata 12.0软件进行Meta分析.结果 共有14篇符合纳入标准的文献,其中病例一对照研究10篇,队列研究4篇.Meta分析结果显示,使用PPI的患者医院获得性艰难梭菌感染风险比使用H2RA的患者高33.1％,差异具有统计学意义[OR=1.331,95％CI (1.185～1.496),P＜0.01].进一步按研究类型、用药目的的不同进行了亚组分析,结果 均表明使用PPI的患者医院获得性艰难梭菌感染率明显高于使用H2RA的患者.使用漏斗图、Egger's法和Begg's法进行发表偏倚检测,结果表明纳入的研究均不存在发表偏倚.敏感性分析结果发现,异质性可能来源于Dubberke的研究,排除Dubberke的研究后再重新进行整合分析,异质性较前下降明显,并且合并OR值较前增大.结论 使用PPI的患者医院获得性艰难梭菌感染风险比使用H2RA的患者高33.1％.
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中药复方对艰难梭菌毒素基因tcd A/tcd B体外表达的影响
目的 探讨中药复方治疗抗生素相关性腹泻(antibiotic associated diarrhea,AAD)的药理机制.方法 应用荧光定量PCR技术检测2种中药复方(参苓白术散和理中汤)对2株艰难梭菌临床分离株(A+B+和A-B+)体外培养下毒素基因表达的影响.结果 在A+B+艰难梭菌中,参苓白术散组对tcd A和tcdB基因的表达均有显著或是完全抑制,理中汤也有显著的抑制；而对于A-B+艰难梭菌,2种中药复方则完全抑制tcdB基因的表达.结论 通过影响毒素基因的表达可能是中药复方治疗AAD的药理学机制之一.
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艰难梭菌实验室快速鉴定方法检验效能的比较
目的 评价3种艰难梭菌实验室鉴定方法的快速性及准确性.方法 2013年6月至2013年11月,收集136名ICU患者共248份标本进行24 h、48 h厌氧培养,并进行鉴定,同时对大便标本提取DNA进行tcdB毒素基因检测.以48 h培养结果为参考标准,评价24小时培养法和PCR扩增tcdB基因法鉴定艰难梭菌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值.结果 136名ICU发生腹泻的患者中,11名患者共有12份标本48 h培养为艰难梭菌阳性,艰难梭菌感染率为8.09％ (11/136),标本阳性率为4.84％(12/248).24小时培养法及PCR扩增tcdB基因法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为75.00％、100％、100％、98.74％和83.33％、99.15％、83.33％、99.15％.结论 提取大便DNA tcdB毒素基因是快速、灵敏度和特异度均较高的方法;48小时培养法时间相对较长,但稳定可靠,并可以保留菌株进行后续试验;24小时培养法,时间短、简便但会漏诊某些阳性病例.
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粪便标本艰难梭菌三种培养方法的比较
目的 比较粪便标本中艰难梭菌三种培养方法的差异性,寻找适合临床实验室使用的艰难梭菌培养方法.方法 将健康儿童的300份粪便标本分别用快速芽孢孵育法、乙醇直接处理法、富集芽孢培养法进行培养,并对三种培养方法的差异性进行统计学比较.结果 300份粪便标本快速芽孢孵育法培养出艰难梭菌51例,检出率为17.0％;乙醇直接处理法培养出48例,检出率为16.0％;富集芽孢培养法培养出44例,检出率为14.7％.三种方法的检出率差异无统计学意义(P=0.7352,P＞0.05).结论 乙醇直接处理法、快速芽孢孵育法简单快速,适合临床实验室进行艰难梭菌的快速培养;富集芽孢培养法杂菌少,适合大量艰难梭菌培养便于结果的观察及进一步的处理.
