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中国部分城市艰难梭菌携带毒素基因特征分析
目的 了解中国5个城市艰难梭菌携带毒索基因特征,为中国艰难梭菌感染诊治提供试验依据.方法 收集2013年6月-2015年6月中国上海、杭州、宁波、郑州和南京5个城市分离自住院患者和环境表面的艰难梭菌,采用多重PCR的试验方法,对所有菌株进行tcdA/tcdB/cdtA/cdtB 4个毒素基因检测,分析所携带的毒素基因特征.结果 中国5个城市共成功复苏出艰难梭菌408株,371株来自患者的艰难梭菌经多重PCR检测,tcdA+,tcdB+基因阳性299株,阳性率为80.59％,tcdA-、tcdB-阳性44株,阳性率为11.86％;37株来自环境的艰难梭菌经多重PCR检测,tcdA-、tcdB-阳性15株,阳性率40.54％;tcdA-、tcdB+阳性9株,阳性率24.32％;中国部分城市的艰难梭菌携带毒素基因以A+B+毒素基因为主,产双性毒素基因占1.08％.结论 研究所揭示的艰难梭菌毒素基因特征应引起临床医师高度关注,尤其是在选择以检测毒素为主的诊断技术时,应考虑不同方法检测毒素基因的能力.
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北京一所教学医院艰难梭菌感染分析
目的 研究2014-2016年医院艰难梭菌感染情况.方法 2014年6月-2016年5月,临床标本的毒素检测采用酶联免疫法(EIA);随机选择69例非重复住院患者的毒素送检粪便同时进行EIA、GeneXpert PCR和艰难梭菌培养并比较,结合病历回顾研究培养和/或毒素阳性患者的感染及治疗.结果 艰难梭菌培养和毒素检测同时送检的非重复患者640例,85例培养或/和毒素阳性,培养阳性率为8.91%,毒素阳性率为7.97%;培养阳性率>10%的科室有胃肠外科、肾内科、风湿免疫内科、消化内科;毒素阳性率>10%的科室有肾内科、骨肿瘤科、风湿免疫内科、胃肠外科、消化内科.标本送检占比56.88%的血液科,其培养、毒素阳性率仅分别为8.24%、5.49%;随机选择的69例非重复患者标本,有9例属于艰难梭菌感染,阳性率为13.04%,培养的灵敏度、特异度分别为66.67%、98.33%;EIA的灵敏度、特异度分别为44.44%、93.33%;PCR的灵敏度、特异度分别为100%、95.00%;相关因素分析,"腹泻时长≥48h"、"每日腹泻≥3次"在艰难梭菌感染组与非感染组中具有显著性差异;培养阳性或毒素阳性均有阳性提示意义,若伴随腹泻症状,应重点考虑艰难梭菌感染并予以万古霉素、甲硝唑和/或肠道菌群调节药物.结论 应规范送检标本,选择合适检验方法,重视艰难梭菌感染,避免其成为我国的公共健康威胁.
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不同产毒类型艰难梭菌耐药性特征分析
目的 通过研究临床艰难梭菌菌株的临床特征和耐药性,为临床防治艰难梭菌提供理论依据.方法 收集2015年全年分离自临床的艰难梭菌,采用PCR技术检测其毒素基因,采用琼脂稀释法检测其耐药性,对患者的临床资料进行分析.结果 共收集临床送检粪便标本144份,分离培养出艰难梭菌33株,艰难梭菌阳性检出率为22.92％;科室分布以神经外科、神经内科和消化科为主;分离所得到的艰难梭菌体外实验均对万古霉素、甲硝唑和替加环素敏感,对红霉素和亚胺培南耐药检出株数多,其次为克林霉素;33株艰难梭菌毒素基因检测结果A+B+菌株24株,A-B+菌株1株;未检测到二元毒素基因cdtA和cdtB;产毒菌(25株)和非产毒菌(8株),两组菌株均对万古霉素、甲硝唑和替加环素敏感;非产毒艰难梭菌和产毒菌株对抗菌药物红霉素、亚胺培南、克林霉素、利福平和左氧氟沙星的耐药率比较,虽差异无统计学意义,但均高于产毒菌株;患者感染艰难梭菌后,均出现不同程度的腹泻,使患者病情加重,住院时间延长,并出现2例死亡病例.结论 非产毒菌株对多种抗菌药物耐药率均高于产毒菌株,并出现对万古霉素敏感性降低的菌株,提示本地区艰难梭菌耐药性可能增加,甚至可能出现耐万古霉素的艰难梭菌.
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江苏地区医院艰难梭菌流行病学研究
目的 通过对江苏地区两所不同规模医院的高危人群进行艰难梭菌筛查,以了解医院内艰难梭菌的感染和定植,从而为预防艰难梭菌的流行提供参考数据.方法 2015年11月对A医院和B医院高危科室的所有住院患者进行肛门拭子采样,共采集122份标本,所有的标本经厌氧培养,VIDAS荧光酶联免疫技术检测艰难梭菌毒素A/B,同时利用多重PCR检测技术测定其毒素基因.结果 A医院接受检测的104例患者中艰难梭菌培养阳性29例,阳性率为27.88％,其中感染10例、定植1 9例;B医院的18例患者中艰难梭菌培养阳性9例,阳性率为50.00％,其中感染1例、定植8例;38株艰难梭菌中有25株艰难梭菌A/B毒素检测阳性;多重PCR结果显示,25株为tcdA和tcdB双阳性,4株tcdA阳性tcdB阴性,9株tcdA和tcdB双阴性,38株艰难梭菌均未检测到二元毒素基因.结论 江苏地区不同规模医院的高危科室均存在艰难梭菌感染和传播的风险,对高危人群的腹泻患者进行艰难梭菌的检测,有利于病情的确诊和尽快采取有效的治疗.
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乡村医疗机构与城市医院来源的艰难梭菌MLST分型对比研究
目的 初步了解农村社区艰难梭菌流行状况及分子生物学特征.方法 对河南省济源市某乡村医疗机构送检的7株艰难梭菌进行生化鉴定和分子生物学方法鉴定,并进行MLST分型分析,同时与北京某三甲医院的84株艰难梭菌进行对比,用eBURST软件聚类分析,寻找其中可能的关联.结果 源自河南济源市某乡村医院的7株菌均属艰难棱菌,PCR毒素基因鉴定结果显示,其中两株为A-B+菌株,其MLST分型结果是ST37;5株为A+B+菌株,其中4株对应ST35,1株对应ST3；两重来源的菌株中均是毒素基因A+B+菌株占优势；乡村医疗机构的7株艰难棱菌中未发现新的与David MLST数据库中不同的ST型别,未发现不同于北京城市医院的ST型别.结论 David方案适合种群结构和全球流行病学研究,且其数据库全球共享,便于数据交换；该次研究中未发现新的ST型别,所有菌株ST呈散在分布.
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临床患者粪便标本中艰难梭菌感染状况研究
目的 探讨医院艰难梭菌带菌及感染状况,分析艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的临床特征,为临床提高艰难梭菌分离率以及采取积极有效的防控措施奠定基础.方法随机收集20例要求做粪便培养的患者标本,采用艰难梭菌毒素A/B检测试剂盒进行毒素检测,对标本进行厌氧培养与分离,并进行耐氧实验,用API 20A生化条进行确证.结果 20例患者经艰难梭菌选择性培养基培养后,8株疑似菌落进行涂片镜检和耐氧实验,6株革兰阳性杆菌耐氧实验阳性,再经API 20A鉴定,4株为艰难梭菌,占所有患者的20%;毒素阳性1例,占5%.结论艰难梭菌的感染与某些内科基础性疾病的存在相关;水样的粪便标本更易于培养出艰难梭菌.
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多重聚合酶链反应方法检测艰难梭菌毒素基因研究
目的 探讨同时检测艰难梭菌毒素A、B基因和二元毒素基因的多重聚合酶链反应(PCR)方法.方法 收集2014年1-9月医院120例住院腹泻患者的粪便标本 ,用艰难梭菌选择性培养基CCFA分离培养艰难梭菌 ;采用法国生物梅里埃公司厌氧菌鉴定试剂盒鉴定 ;采用酶免夹心与终点荧光检测相结合技术(ELFA ) ,检测艰难梭菌毒素A、B基因 ,并分析其毒素特征 ;将艰难梭菌纯培养出的菌落用多重PCR方法测定艰难梭菌的毒素A、B基因和二元毒素基因.结果 120例腹泻患者送检粪便标本中 ,分离培养出19株艰难梭菌 ,艰难梭菌分离率达15 .8% ;应用免疫学方法检测毒素检出率为52 .63% ;用多重PCR方法艰难梭菌A、B毒素基因检出率为94 .7% ;15例患者送检粪便标本检测艰难梭菌A、B毒素阳性中 ,10株分离培养并鉴定出艰难梭菌 ;105例患者送检粪便标本检测艰难梭菌A、B毒素阴性中 ,有9例分离培养并鉴定出艰难梭菌.结论 利用多重 PCR检测艰难梭菌毒素A、B基因和二元毒素基因 ,较传统的免疫学方法敏感性高 ,能够准确地区分艰难梭菌毒素基因的类型 ,多重PC R是一种快速、特异的一步筛选艰难梭菌毒素基因的方法.
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艰难梭菌在高风险科室医院感染流行趋势研究
目的：探讨高风险科室住院患者中艰难梭菌感染或定植流行趋势，为艰难梭菌有效预防与控制措施的提出提供理论依据。方法收集2014年9月医院感染高风险科室住院的128例患者肛拭子标本，经厌氧培养，通过VIDAS荧光酶联免疫技术进行艰难梭菌毒素A／B检测，利用多重PCR技术进行艰难梭菌毒素基因检测，并对艰难梭菌阳性患者的临床病理特征进行分析。结果128例患者中艰难梭菌培养阳性22例，阳性率17．19％；22株艰难梭菌中有21株为A／B毒素表型呈阳性，占95．45％，1株未检出A／B毒素；22例艰难梭菌培养阳性患者均为无症状携带者，其中90．91％的患者近期使用过抗菌药物。结论医院感染高风险科室的产毒艰难梭菌检出率较高，应注重该类患者的艰难梭菌监测和有效预防控制措施的落实。
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老年患者发生艰难梭菌相关性腹泻的调查
目的 了解老年住院患者艰难梭菌相关性腹泻的发生率及其危险因素,为临床诊治及采取积极有效的预防提供依据.方法 运用艰难梭菌培养和PCR检测毒素基因A和B的方法,对住院腹泻的老年患者作艰难梭菌相关性腹泻诊断,采用回顾性调查分析其危险因素.结果 832例老年患者共有93例发生艰难梭菌相关性腹泻,发生率11.2％,其基础疾病以慢性阻塞性肺疾病加重、重症肺炎、肺炎为常见,发生率分别为16.9％、12.5％和12.1％.女性患者发生率为13.2％,较男性患者的发生率9.6％高;抗菌药物的使用以β-内酰胺类、喹诺酮类、大环内酯类运用多和广泛.结论 艰难梭菌相关性腹泻在老年患者中发生率较高,加强艰难梭菌感染的认识,防止交叉感染.
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腹泻患者产毒素艰难梭菌阳性率的荟萃分析
目的：分析我国腹泻患者粪便标本中产毒素艰难梭菌（CD）的阳性率，为明确艰难梭菌感染（CDI）的疾病负担及制定相关预防控制策略提供依据。方法采用荟萃分析方法，按照预先制定的检索策略，检索 Pubmed／M edline、EmBase、中国生物医学文献数据库（CBM ）和万方数据库，根据纳入和排除标准选定目标文献，提取数据进行率的合并。结果共有32篇文献符合纳入标准，分别来自10个省（或直辖市）的12个城市，包括6861例腹泻患者，经荟萃分析后发现，腹泻患者粪便标本中产毒素CD的阳性率为15．0％；抗生素相关性腹泻（AAD）患者中产毒素CD的阳性率明显高于其他腹泻患者；与酶联免疫法（ELISA ）相比，采用聚合酶链反应法（PCR）对CD毒素具有较高的检出率。结论我国腹泻患者粪便标本中产毒素CD的阳性率较高，与欧美国家的检出水平相似，提示我国的CDI及其疾病负担也不容忽视。
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艰难梭菌感染复发的临床预测与危险因素荟萃分析
目的：系统荟萃分析和评价艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection ，CDI）相关危险因素的证据，为临床医师、卫生管理部门对高危人群的合理诊治、预防复发提供有益的参考和借鉴。方法遵循 PRISM A指南进行荟萃分析，通过搜索MEDLINE等数据库中标题和摘要中同CDI复发（rCDI）相关的研究，所有纳入的研究要求均采用多因素分析模型，收集研究设计、研究人群和相关危险因素等资料，采用随机效应模型和计算总的相对危险度，采用Review M anager 5．0对提取的数据进行分析。结果共21项，发表时间为1997－2015年，获得15830例患者临床资料纳入分析，纳入的研究中3项为病例对照研究、4项为前瞻性队列研究、2项随机对照研究、其余12项研究均为回顾性队列研究，所有的纳入研究的NOS评分均＞7分，属于高质量研究；分析发现rCDI常见的独立危险因素为高龄（≥65岁）、随访期间使用抗菌药物、使用质子泵抑制剂（PPIs ）、合并肾功能不全以及宿主免疫功能不全。结论多种危险因素与rCDI相关，合理使用抗菌药物和质子泵抑制剂可能有助于减少rCDI。
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艰难梭菌感染治疗进展
艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)是抗生素相关性腹泻(antibiotic-associated diarrhea,AAD)的常见原因.由于抗菌药物不合理使用,AAD发病有日益增多的趋势,已引起了广大医务工作者的高度重视.艰难梭菌是一种条件致病菌,约占正常人肠道菌的3.0％,为革兰阳性厌氧杆菌,其致病因子是艰难梭菌毒素A和B,确诊需要检测粪便中细胞毒素.
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伪膜性肠炎的治疗与预防
伪膜性肠炎(PMC)是主要发生在结肠,也可累及小肠的急性黏膜坏死、纤维素渗出性炎症,黏膜表面覆有黄白或黄绿色伪膜.多是在应用抗菌药物后导致正常肠道菌群失调,能难梭菌(CD)大量繁殖,产生毒素而致病~([1]).
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艰难梭菌感染的流行病学和疾病负担研究进展
近年来艰难梭菌感染（CDI）率不断上升，CDI已经成为全球性的健康问题。目前我国仍没有关于艰难梭菌感染的大型流行病学调查数据。本研究根据国内外的相关文献报道，综述不同人群CDI的流行情况及其引起的疾病负担。分析表明不同人群CDI流行情况有差异，65岁以上人群是主要的感染人群，而抗菌药物滥用是CDI感染主要的风险因素。另一方面，CDI可导致患者住院时间延长、死亡率增加以及医疗负担加重。因此，早期认识和监测CDI流行病学变化情况对临床诊疗和减轻疾病负担具有重要的意义。
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艰难梭菌相关性腹泻实验室检测新进展
有资料显示,15%～25%的抗生素相关性腹泻(AAD)以及90%的伪膜性肠炎是由艰难梭菌(Clostridium difficile)引起的,新近暴发的涉及美国38个州及欧洲17个国家的艰难梭菌相关性腹泻(CDAD),与2003年加拿大和美国新出现的高致病菌株有关,具有症状明显加重、复发率提高、死亡率上升的特点.
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神经外科患者术后抗生素相关性肠炎的诊治
目的总结神经外科患者术后预防性应用抗生素后出现肠炎的临床特点及治疗经验. 方法回顾性分析了患者在住院期间、且应用抗生素后发生腹泻及全身症状的特征、相关化验结果. 结果抗生素相关性腹泻多出现在应用抗生素后5～9 d,依症状轻重不同可表现为单纯性腹泻、腹泻伴全身感染中毒性表现,便常规可见到红、白细胞,常规便培养阴性,口服去甲万古霉素或甲硝唑有效. 结论对症状典型、除外其他类型的腹泻后,可试验性应用去甲万古霉素或甲硝唑治疗.
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腹泻患儿艰难梭菌感染的调查研究
目的：调查苏州市腹泻患儿艰难梭菌感染（CDI）的状况并分析其相关因素，为降低其感染率提供参考依据。方法以2013年6－10月在苏州大学附属儿童医院消化科住院的腹泻患儿共176例作为研究对象，采用实时荧光PCR方法检测艰难梭菌看家基因 tpi及A／B毒素基因 tcdA／tcdB进行艰难梭菌初筛及致病性诊断，探讨其危险因素。结果在176例腹泻患儿中初筛艰难梭菌阳性34例，阳性率为19．32％，确诊CDI 22例，感染率12．50％，其中男性占59．09％、女性占40．91％；统计分析表明年龄、性别、城乡分布及有无抗菌药物应用史差异均无统计学意义。结论腹泻患儿中艰难梭菌感染率较高，艰难梭菌感染率与患儿年龄、性别、城乡分布及抗菌药物应用史无显著相关。
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恶性肿瘤患者艰难梭菌相关性腹泻的临床危险因素分析
目的 探讨肿瘤患者中艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的发病情况及其危险因素.方法 收集2010年9月至2011年12月间277例恶性肿瘤患者腹泻的粪便标本,进行艰难梭菌毒素A/B检测、粪便厌氧培养和粪便常规检测,并对艰难梭菌阳性患者的临床病理特征和实验室检查结果进行单因素和多因素分析.结果 277例肿瘤腹泻患者中,共检出艰难梭菌毒素阳性者41例(14.8％),其中艰难梭菌毒素检测和艰难梭菌培养同时阳性11例,占26.8％(11/41).单因素分析结果显示,应用抗生素、应用质子泵抑制剂、低蛋白血症和全血白细胞水平与肿瘤患者CDAD的发生均无关(均P＞0.05);肿瘤患者接受化疗、接受放疗、粪便潜血阳性和粪便白细胞镜检阳性与CDAD的发生均有关(均P＜0.05).多因素分析结果显示,接受化疗和粪便潜血阳性是肿瘤患者发生CDAD的独立危险因素(均P＜0.05).结论 接受化疗、粪便潜血阳性是肿瘤患者发生CDAD的独立危险因素.应定期对接受化疗和粪便潜血阳性的肿瘤患者进行粪便艰难梭菌毒素A/B检测和厌氧培养,预防CDAD的发生.
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艰难梭菌毒素A和毒素B羧基端抗原区段的表达及抗原性分析
目的 构建艰难梭菌毒素A和毒素B的原核表达载体,获得融合表达抗原,并鉴定其抗原活性. 方法以ATCC43255菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得毒素A和B羧基端( C端)基因片段,并进行原核表达获得毒素A和B羧基端抗原区段. 利用艰难梭菌毒素检测试剂盒对毒素A和B羧基端抗原区段的抗原性进行鉴定. 结果 成功构建了艰难梭菌毒素A和毒素B的原核表达载体,并获得能被相应特异性抗体所识别的毒素A和B羧基端抗原区段. 结论 获得毒素A和B羧基端抗原区段具有很好的抗原活性,为进一步制备相应抗体并建立艰难梭菌毒素A和B的免疫检测方法奠定了基础.
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艰难梭菌tcdC基因的研究进展
致病型艰难梭菌（ Clostridium difficile，CD）分泌的TcdA和TcdB毒素是主要的毒力因子，其基因表达受到致病性决定区（ pathogenicity locus，PaLoc）基因簇中多个因子调控。有研究表明，PaLoc中tcdC基因有可能编码一种对tcdA和tcdB基因表达具有负调控作用的蛋白因子，但也有研究结果与上述结论不同。关于tcdC基因功能尚存争论，其在致病过程中的作用机制仍不明确。该文主要针对艰难梭菌tcdC基因结构、功能等方面进行了综述，为进一步深入研究CD的致病机制并探索新的药物治疗靶点奠定理论基础。
