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对碳青霉烯类抗菌药不敏感肠杆菌科细菌耐药性分析
目的：了解我院临床分离的对碳青霉烯类抗菌药不敏感的肠杆菌科细菌对常用抗菌药物的耐药性。方法：收集2013年4月-2014年3月我院临床分离的30株对碳青霉烯类抗菌药不敏感的肠杆菌科细菌，使用由美国BD公司生产的Phoenix-100全自动细菌鉴定/药敏系统进行菌株鉴定和药敏试验，产碳青霉烯酶的表型确证采用改良Hodge试验。结果：30株对碳青霉烯类抗菌药不敏感的肠杆菌科细菌对多黏菌素、阿米卡星和复方新诺明的敏感率较高，依次为100.0%，73.3%和66.7%；对碳青霉烯类抗菌药亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为100.0%和86.7%；对氨苄西林、头孢菌素类、含β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂和单环β-内酰胺类抗菌药的耐药率均为100.0%；对其余抗菌药的耐药率均在60.0%以上。30株菌的改良Hodge试验阳性率为86.7%（26/30）。结论：对碳青霉烯类抗菌药不敏感的肠杆菌科细菌对常用抗菌药物表现为高度多重耐药，为高产碳青霉烯酶菌株。为防止产碳青霉烯酶基因的流行，临床应合理使用抗菌药物并加强对肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的监测。
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亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因及同源性分析
目的 研究本院近3年临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药现状、同源性及碳青霉烯酶基因型.方法 收集2006年1月-2009年7月临床分离存活的、非重复的亚胺培南耐药及敏感对照株鲍曼不动杆菌,进行扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)分子鉴定菌种,采用琼脂稀释法测定菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的MIC;采用基因间重复序列引物PCR(REP-PCR)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性;用多重PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶包括TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型、PER-型及IMP-、VIM-型碳青霉烯酶和OXA型碳青霉烯酶分布特点.结果 274株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)对头孢菌素类、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、喹喏酮类抗生素敏感率＜10%,对米诺环素敏感率为41.2%;对多黏菌素B 100%敏感.2006年1月-2009年7月期间共检出5个克隆,主要为A1耐药克隆株于不同病房的暴发流行.β-内酰胺酶检测出OXA-23、-66、-69、-72、-58型碳青霉烯酶及PER-1型酶.blaOXA-23-like与blaOXA-51-like基因同时存在的CRAB株为53.6%(147/274).未检出IMP-、VIM-型碳青霉烯酶及TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型β-内酰胺酶.结论 CRAB克隆株的传播是造成我院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因.OXA-51-like、OXA-23型酶为对CRAB对碳青霉烯类耐药的主要碳青霉烯酶.
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碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌筛选及临床分析
目的 筛选碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)及现状分析.方法 采用K-B法及配套GN卡上机鉴定、改良Hodge法试验、EDTA纸片协同试验筛选碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌.结果 2015年7月~2016年12月,本院临床科室送检标本分离碳青霉烯类肺炎克雷伯菌菌株36株.结果表明,碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌院内尤其是重症医学科病房感染严重,其多重耐药现象突出.结论 建议开展其同源性分析及监测肺炎克雷伯菌流行情况,应引起医院高度重视.
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碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究进展
碳青霉烯类抗生素是目前临床上抗菌谱广、抗菌活性强的非典型β-内酰胺类抗生素，然而随着碳青霉烯类药物在临床上的广泛应用，细菌对其耐药性不断增加，给临床抗感染治疗带来了新的挑战。为延缓其耐药现象的发展，本文从产生碳青霉烯酶、结合位点改变、外膜孔蛋白缺失或减少、主动外排泵过度表达、细菌生物膜系统等5个方面介绍了碳青霉烯类抗生素的耐药机制，为进行新的药物设计与开发提供依据，同时为临床医师谨慎、合理地应用碳青霉烯类药物提供参考。
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鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因分析及同源性研究
目的 分析鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因型和医院感染鲍曼不动杆菌同源性.方法 回顾性分析2013年1月～2014年8月非重复分离的68株耐碳青烯酶鲍曼不动杆菌(CRAB),多重PCR的方法检测6种常见的β-内酰胺酶基因IMP、VIM、OXA-23、OXA-24、OXA-58和OXA-51,并对其中确定为医院感染的8株用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因同源性分析.结果 68株多重耐药鲍曼不动杆菌全部检出OXA-23、OXA-51基因,其余基因均未检出;8株经PFGE同源性分析提示为同一来源克隆株,且同源性较高.结论 我院临床分离的耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌主要携带OXA-23、OXA-51基因型,且存在克隆传播.
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碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐药机制及同源性分析
目的 探讨碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐药机制及同源性.方法 选取2014年10月～2016年3月南昌仁爱妇产医院、南昌大学第二附属医院、抚州市第一人民医院检验科分离出的60株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌作为研究对象,采用药敏实验分析耐药率、改良Hodge试验及乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测碳青霉烯酶、聚合酶链反应(PCR)扩增耐药基因并确定基因型、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性.结果 60株菌株对抗菌药物的耐药率前3位依次为:头孢西丁(100.0％)、头孢他啶(90.0％)、氨曲南(90.0％),多黏菌素B耐药率低(5.0％);改良Hodge试验阳性率为76.7％,EDTA协同试验阳性率为81.7％;60株菌株中检出碳青霉烯酶基因39株,其中KPC-2 3株,IMP-4 24株,IMP-8 12株,携带其他β-内酰胺酶基因45株;60株菌株经PFGE分为A-O 20种不同的型别59株,仅有1株多次分型均未成功.结论 阴沟肠杆菌耐药机制主要与KPC、IMP基因有关.
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我院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染特点及碳青霉烯酶基因型分析
目的 研究丽水市中心医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的感染特点、药物敏感性和碳青霉烯酶基因携带情况.方法 收集2011年3月-2015年12月期间丽水市中心医院共140株CRE的临床资料并分析,Vitek 2-Compact鉴定细菌,K-B纸片法进行药物敏感性试验,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,PCR扩增常见的碳青霉烯酶基因KPC、IMP、VIM、NDM和OXA-48.结果 140株CRE以肺炎克雷伯菌为主(占70.71％),其次为产气肠杆菌(占6.44％)和阴沟肠杆菌(占5.71％).标本来源以痰液为主(占69.29％),其次为尿液(占12.86％)、分泌物和血液(均各占4.29％).临床科室分布以重症监护室为主(占44.29％),其次为神经外科(占18.57％)和血液内科(占5.00％).药敏结果提示CRE对大部分β内酰胺类药物高度耐药,耐药率＞80％,对米诺环素、阿米卡星的耐药率分别为14.78％和35.43％.改良Hodge试验有127株阳性(阳性率为90.71％).PCR扩增及基因测序比对结果提示99株携带KPC-2基因,14株携带IMP-4基因,2株携带IMP-1基因,13株携带NDM-1基因.结论 CRE对多种抗菌药物高度耐药,耐药基因以KPC为主,其次为IMP和NDM,临床应根据药物敏感性结果合理选用抗菌药物,做好院感监测及防护,以防止耐药菌株的传播和流行.
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嘉兴地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染特点和耐药性分析
目的 调查嘉兴地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的分布及耐药性,为临床提供合理的诊治与预防控制,为院感监测提供流行病学资料.方法 收集本地区五家综合性医院2013年1月—2014年2月期间59株CRE的临床资料,对其细菌分布、标本来源、科室分布、细菌耐药性进行统计分析;细菌鉴定及药敏采用VITEK-2Compact细菌鉴定系统,并采用K-B法复核碳青霉烯类药敏结果.改良Hodge试验(MHT)检测碳青霉烯酶表型,IP/IPI复合纸条检测金属酶表型.结果 检测到的CRE以肺炎克雷伯菌为主,占44.1％,其次为阴沟肠杆菌,产气肠杆菌等;感染标本以尿液为主,占52.5％,痰为第2位,占39.0％;临床科室以ICU为主,其次为神经外科、呼吸内科等;药敏结果示,对阿米卡星、复方新诺明、庆大霉素的耐药率为42.4％、47.5％、55.9％,对其他抗菌药物的耐药率均较高.MHT试验59株中45株阳性,占76.3％;其中金属酶13株阳性,占28.9％(13/45).结论 本地区CRE选择抗菌药物的范围较窄,做好多药耐药菌的控制,对防止耐药菌株的流行具有重要意义.
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肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的研究进展
碳青霉烯类抗生素是目前抗菌谱广、抗菌活性强的非典型β-内酰胺类抗生素，因其具有对超光谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶高度稳定的特点，已成为临床治疗严重细菌感染重要的抗菌药物之一。随着其在临床治疗中的广泛应用，细菌耐药现象日益严重。作为临床感染主要的病原菌，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药性的出现给全球公共健康带来巨大威胁。细菌对碳青霉烯类抗生素重要的耐药机制是产碳青霉烯酶，而肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶是重要的碳青霉烯酶之一。
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156株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床分布特点及其药物敏感性检测
目的 了解河南省商丘市第一人民医院(以下简称“我院”)碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)临床分布特点及其对临床常用抗菌药物的敏感性.方法 收集我院2014年1月～2017年7月临床分离的CRKP,分析其对常用抗菌药物的敏感性,纸片扩散法检测其碳青霉烯酶和金属酶.结果 共收集CRKP 156株,科室分布和标本种类分别以重症监护病房(73.7％,115/156)和呼吸道标本(76.3％,119/156)为主.药敏试验结果显示,对多黏菌素、替加环素、米诺环素、四环素敏感率分别为100.0％、92.8％、88.5％,64.1％;对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、氯霉素、阿米卡星和左氧氟沙星的敏感率分别为39.7％、30.1％、29.5％和23.1％;对β内酰胺类、头孢菌素类及其复合制剂均高度耐药.78.2％ CRKP产生碳青霉烯酶(122/156),分离4株金属酶阳性菌株.结论 重症监护病房、神经科、老年医学科患者呼吸道感染是CRKP防控重点.碳青霉烯酶是本地CRKP耐碳青霉烯类抗菌药物的主要方式;CRKP对多粘菌素与四环素类之外的抗菌药物严重耐药;在我院多黏菌素、替加环素、米诺环素可作为CRKP临床感染救治的备选药物.
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非发酵菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶及碳青霉烯酶分析
目的 了解非发酵菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和碳青霉烯酶的情况,以期为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 应用VITEK-2全自动微生物分析系统对临床分离非发酵菌进行鉴定.按照美国临床实验室标准化委员会(CLSL/NCCLS 2010版)推荐的纸片扩散法检测156株非发酵菌对常见的15种抗生素耐药情况;按照NCCLS推荐的确认试验(双纸片增效试验)检测菌株产ESBLs情况;采用两种改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型确证.结果 临床分离的156株非发酵菌前3位为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌,均呈现高耐药率.鲍曼不动杆菌产ESBLs率为27.6%,铜绿假单胞菌产ESBLs率为37.5%.鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶率为50.0%,铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶率为13.3%.两种改良Hodge试验检测鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的一致性较好,检测铜绿假单胞菌碳青霉烯酶的一致性一般,但是无不确定结果.结论 非发酵菌耐药率较高,产ESBLs和碳青霉烯酶情况已相当严重,检测碳青霉烯酶阳性的铜绿假单胞菌时,PAE-MHT(以肺炎克雷伯菌ATCC 700603作为指示菌的改良Hodge试验)优于MHT(以大肠埃希菌ATCC 25922作为指示菌的改良Hodge试验).
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鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶的研究
目的 了解鲍曼不动杆菌耐药谱及碳青霉烯酶的研究.方法 用VITEK60型全自动药敏分析系统鉴定药敏系统及纸片扩散法进行药敏实验;PCR扩增和测序分析检测碳青霉烯酶VIM、IMP、OXA-23和OXA-24.结果 217株鲍曼不动杆菌中头孢哌酮/舒巴坦耐药率低,其次是亚胺培南,再者是头孢他啶和哌拉西林/他唑巴坦;头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶的中介率分别是27.6%和19.8%;20株亚胺培南耐药菌中, PCR 扩增VIM、IMP和OXA-24均阴性;OXA-23基因扩增显示19株(95%)阳性,PCR产物并经序列分析证实为OXA-23.结论 碳青霉烯类抗生素的长期广泛应用使鲍曼不动杆菌的耐药率不断升高;产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要原因.
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产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌研究进展
产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌自1998年被发现后,迅速在世界各地传播流行;其耐药机制主要与外膜蛋白缺失、产KPC酶有关;检测须经过表型筛选、菌株确证试验、基因检测等技术确定;替加环索联合多粘菌素B治疗产KPC肺炎克雷伯菌是常规方法;产KPC肺炎克雷伯菌传播速度快,须加强预防控制.
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2012美国疾病预防控制中心耐碳青霉烯类肠杆菌控制指南简介
碳青霉烯类药物是治疗革兰阴性杆菌感染特别是肠杆菌科细菌的强效-內酰胺类药物[1]。一旦碳青霉烯类药物耐药，临床治疗此类菌株感染将面临极大困难。目前，碳青霉烯类药物耐药的肠杆菌科菌（carbapenem-resistant Enterobacteriaceae， CRE）已在很多国家出现和报道[2-5]。在美国地区传播的CRE耐药表型多为产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（Klebsiella pneumonia carbapenemase，KPC），其流行特征具有区域甚至院际差异性。美国自2009年以来，除产KPC肠杆菌科菌外，已分离到多种不同的产金属β内酰胺酶菌株，包括NDM型、VIM型及IMP型。这些产金属β内酰胺酶菌株在其他国家更为普遍，而在美国一般是在其他流行区域接受过治疗的患者体内发现。
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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因分布情况及其同源性探讨
目的:了解对碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯杆菌(CR-KP)中碳青霉烯酶的主要类型及流行情况.方法:收集我院2016年1月至2017年12月对厄他培南、亚胺培南或美罗培南药敏试验结果不敏感的CR-KP共34株,根据CLSI M100S-27th文件的改良碳青霉烯灭活试验确证其是否为产酶菌株,通过PCR方法扩增5种碳青霉烯酶基因(bla KPC、bla IMP、bla OXA-48、bla VIM、bla NDM),PCR扩增产物进行测序明确基因型;通过脉冲场凝胶电泳对肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果:34株肺炎克雷伯菌经改良碳青霉烯灭活试验确证均为产酶菌株,PCR检测显示均为KPC-2型酶.脉冲场凝胶电泳(PFGE)结果显示34株菌可分为5组,其中1、2、4组为主要流行菌株.结论:院内存在以KPC-2为主要耐药基因的CR-KP克隆株的流行,且主要以重症医学科耐药株流行,34株菌间存在不同程度的亲缘关系.
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深圳市人民医院近8年耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌感染特征及其克隆变迁
目的 调查深圳市人民医院近8年耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(CRAB)感染临床特征、耐药机制及其克隆变迁.方法 收集2002至2009年深圳市人民医院院内感染患者分离鲍曼不动杆菌;琼脂稀释法检测亚胺培南等抗菌药对鲍曼不动杆菌低抑菌浓度(MICs);聚合酶链反应(PCR)和DNA测序分析CRAB碳青霉烯酶基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性;依据中国鲍曼不动杆菌感染诊治与防控专家共识,回顾性调查CRAB感染患者病历资料.结果 2002至2009年共收集到87例CRAB院内感染患者,以呼吸道感染常见,占69.0％(60/87),其次为血流感染占8.0％(7/87)、伤口感染占8.0％ (7/87)和腹腔感染占6.9％ (6/87).80.5％ (70/87) CRAB来源于重症监护病房(ICu).2009年CRAB感染迅速增多,占48.3％(42/87),以呼吸道感染为主(34/42).87株CRAB共获8种PFGE型别.2002至2006年,CRAB感染主要流行携带blaOXA-58-like基因的CRAB克隆A;2007至2008年主要流行CRAB克隆A和携带blaOXA-23-like基因的CRAB克隆C;2009年携带blaOXA-23-like基因对碳青霉烯高度耐药的CRAB克隆D取代克隆A和C,成为深圳市人民医院CRAB病原菌的主要克隆.结论 携带blaOXA-23-1ike基因的CRAB高耐药克隆D造成深圳市人民医院2009年CRAB感染迅速流行.
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不动杆菌属细菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制及用药选择
随着现代先进诊疗技术的开展、抗生素和免疫抑制剂的广泛使用,不动杆菌的临床检出率逐年增多,此菌已成为引起严重致死性院内感染主要病原菌,常引起医院获得性肺炎、菌血症、泌尿系统感染、脑膜炎、软组织感染以及腹腔内感染等,尤其在重症监护室(ICU)患者中常见.碳青霉烯类抗生素是目前所使用的抗菌药物中抗菌谱广,抗菌活性强,具有快速杀菌作用的一类抗菌药物,但随着此类药物的广泛使用,细菌也逐渐出现了耐药.国外学者[1]在1991年首次发现耐碳青霉烯类抗生素不动杆菌且为多重耐药菌株以来,不断有学者报道[2,3]耐碳青霉烯类抗生素不动杆菌属菌株.近来报道了[4,5]产生获得性碳青霉烯酶多起在ICU、血液病房多重耐药不动杆菌感染引起的暴发流行,使不动杆菌感染治疗陷入无药可用的境地,病死率很高,临床治疗面临着严峻的挑战.本文综述了不动杆菌属对碳青霉烯类抗生素耐药机制和治疗的进展.
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MALDI-TOF MS检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的应用价值
目的 评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)方法快速检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的价值.方法 以34株产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及50株碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌为研究对象,美罗培南与细菌37℃孵育2h后,上清液进行MALDI-TOF MS检测.结果 碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌的质谱峰有3个,质荷比(m/z)依次为384、406、428；而产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌由于可以水解美罗培南,其质谱峰有6个,m/z依次为358、380、402、424、446、468,通过质谱峰的变化可以鉴定产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,MALDI-TOF MS法与测序法结果高度一致(P=1.000).结论 MALDI-TOF MS可以快速、准确检测产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌,指导临床合理使用抗生素.
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阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶的基因型与临床感染的特征分析
目的 了解医院产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌的主要基因型,并对其临床感染特征进行分析,为临床采取积极的防控措施奠定基础.方法 收集2007年1月至2014年12月临床非重复分离的阴沟肠杆菌,筛选碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的菌株,通过改良Hodge试验(MHT)及乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测碳青霉烯酶表型,PCR 扩增碳青霉烯酶基因型blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48及blaNDM-1 ,阳性结果进行DNA测序并Blast比对确定分型.对耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌进行接合试验,通过药敏试验和基因扩增验证接合情况.同时收集耐药菌株感染患者的临床资料,分析其临床感染流行病学数据.结果 经MHT、EDTA协同试验及PCR扩增测序共检测出产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌64株,其中70.3%(45/64)来自院内感染,29.7%(19/64)来自社区感染;64株菌主要分离于分泌物占65.6%(42/64),痰标本占23.4%(15/64),临床分布以骨外科、烧伤科、重症监护室及儿科为主,分别占43.8%、21.9%、18.8%及14.1%;床位变更、侵袭性操作及留置导管是产酶菌株产生的高危因素,产酶株感染患者在细菌分离前住院天数较多,治愈率更低,住院总天数更多,使用头孢类加酶抑制剂复合制剂及碳青霉烯类频次更高(均P<0.05);除多粘菌素及替加环素外,64株菌对常见抗菌药物呈现多重耐药趋势;Blast 比对显示,29 株为blaIMP-4型,35株为blaIMP-8型,未检出blaVIM、blaOXA-48、blaNDM-1基因型;接合试验证实接合子与供体菌具有相似的耐药性,可扩增出相同的耐药基因.结论 阴沟肠杆菌耐药情况日趋严重,IMP-4型和IMP-8 型碳青霉烯酶是菌株产酶的主要型别,耐药基因可通过质粒进行水平传播且已在医院科室中局部流行,必须及时控制耐药菌株产生的高危因素.
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改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌
目的：用改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌，初步推测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行情况。方法筛选2011年-2012年对碳青霉烯类抗生素耐药以及敏感性下降或者碳青霉烯类抗生素敏感而一种以上三代头孢菌素耐药的肠杆菌科细菌20株，用改良Hodge试验检测其碳青霉烯酶。结果20株菌中15株呈多重耐药，其中2株菌改良Hodge试验阳性，分别为肺炎克雷伯菌1株，大肠埃希菌1株。结论改良Hodge试验阳性提示所测菌株中有产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌存在，因此要加强对此类细菌的院内感染管理监测。
