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河北省1997～1999年恙虫病血清学分型研究
用间接免疫荧光法,对27例恙虫病病人的血清进行分型,均被证实为Gilliam血清型.同时发现Gilliam血清型与kato和karp两个血清型存在不同程度的血清学交叉反应.结论:河北省恙虫病属Gilliam血清型.
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抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义
目的:检测各种肾小球疾病患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)并探讨其临床意义.方法:应用间接免疫荧光法(IIF)检测20例正常人及131例各种肾小球疾病患者血清中ANCA.结果:131例患者中有11例ANCA阳性(阳性率为8.4%),且均为P-ANCA阳性,而20例正常对照组无1例阳性(P＜0.05).ANCA阳性中以新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,分别为67%、25%、16.7%.新月体性肾炎与IgA肾病等原发性肾小球疾病组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:ANCA在各种肾小球疾病中并不少见,尤其是新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,推测ANCA可能在这些疾病的发病机理中起了一定的作用.
关键词： 抗中性粒细胞胞浆抗体 肾小球疾病 间接免疫荧光法 -
北京地区成人呼吸道感染病原体的检测分析
目的 探讨北京地区成人呼吸道感染的病原学流行特点,为临床诊疗提供病原学依据.方法 采用间接免疫荧光法检测人血清中8种呼吸道病原体的IgM抗体,根据不同性别、年龄、年份和季节的病原体阳性率进行统计分析.结果 1 219例患者中呼吸道病原体阳性率为49.4％,其中甲型流感病毒阳性率高,其他依次为嗜肺军团菌、乙型流感病毒、肺炎支原体、副流感病毒、肺炎衣原体、腺病毒和呼吸道合胞病毒;呼吸道感染患者中男性患者病原体阳性率显著高于女性患者(P＜0.01);不同年龄组病原体阳性率比较差异有统计学意义,以18 ～39岁年龄组高,其次为40 ～ 59岁年龄组,上述两组病原体阳性率显著高于其他两个年龄组(P＜0.01);不同年份病原体阳性率比较差异有统计学意义,2014年显著高于2013年(P＜0.01);不同季节病原体的阳性率比较差异有统计学意义,春季显著高于夏季、秋季和冬季(P＜0.01).结论 本地区成人呼吸道感染病原体阳性率在性别、年龄、年份和季节性存在差异,病原体以甲型流感病毒和嗜肺军团菌为主.
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肾移植术后巨细胞病毒pp65检测的临床意义
目的 探讨肾移植受者术后,巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测在活动性巨细胞病毒感染中的意义.方法 用间接免疫荧光法检测肾移植受者术后HCMV-pp65,同时用酶联免疫捕获法检测HCMV-IgM抗体,共采集91份血标本.结果 91份血标本中,HCMV-pp65阳性24份(26.4％),HCMV-IgM抗体阳性4份(4.4％),在24例HCMV-pp65抗原血症阳性的患者中,有20例出现HCMV感染症状及HCMV病.结论 HCMV-pp65在活动性巨细胞病毒感染的检测中具有早期、准确的优点,可辅助临床对HCMV感染进行早期诊断与治疗.
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如何评价系统性红斑狼疮的自身抗体检测
系统性红斑狼疮(SLE)是一种系统性的自身免疫病.其发病机理与自身免疫有关,血清学的特点是具有多种自身抗体.本病可发生在任何年龄,多见为育龄妇女,临床表现大多发病急缓不一,可为发热、皮疹、秃头、胸膜炎、心包炎、肾炎、溶血性贫血、白细胞减少、血小板减少和中枢神经系统(CNS)受累等,因此常被误诊或漏诊.当今免疫学的飞速发展也极大地促进了临床医学的发展尤其是风湿病学的发展.随着免疫学的发展,自身抗体的检测已成为诊断SLE的重要手段.目前常检测的自身抗体有抗核抗体、抗胞浆抗体、抗细胞膜抗体等,所用的检测方法也不尽相同,其结果的敏感性及特异性也各异.因此作为临床医生正确评价自身抗体的检测对SLE诊断的临床意义是非常重要的. 1 抗核抗体(autoantibody to nuclear antigen,ANA) 1948年Hargraves发现狼疮细胞后,人们认识到ANA.自从1957年间接免疫荧光法问世后人们才对ANA有了深入的了解.ANA过去是指抗细胞核成分(DNA,RNA,蛋白质和酶)的抗体,目前认为抗核抗体是抗核酸(nucleic acid)和核蛋白(nucleoprotein)抗体的总称,某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富.ANA在多种疾病中均呈阳性,但以SEL、药物性狼疮和混合性结缔组织病(MCTD)为多见且滴度也高,ANA检测是弥漫性结缔组织病的筛选实验.临床上不能仅凭ANA阳性就诊断SLE,还应做进一步检查并结合临床表现.常用抗核抗体的检测方法有:(1)狼疮细胞检查;(2)间接免疫荧光法(IFA).其中狼疮细胞检查由于其敏感性和特异性差,目前在国际上基本上被淘汰,但在我国一些基层医院目前仍在应用.IFA是目前国际上应用广泛的一种检测ANA的方法.但不同的底物因所含的抗原不完全相同其敏感性和特异性也不相同,因此用IFA检测到的结果亦不尽相同.如鼠肝含SSA/RO抗原远低于HEP-2细胞,可导致含SSA/RO抗体的血清在鼠肝为底物时检测ANA呈阴性而改用为底物时为阳性.这说明用一种底物检测阴性时并不能就此判定检测ANA阴性.临床上常用鼠肝、鼠肾的冰冻切片或HEP-2细胞为底物作为核抗原.用IFA检测ANA可发现有不同的核型,在临床上其具有不同的意义.均质型(homogeneous):核呈均匀染色,此种染色型别和抗组蛋白抗体有关,引起狼疮细胞形成,许多自身免疫病病人血清中有此种染色型别的抗核抗体.核膜型:称周边型(membranous)近核的边缘部分着染较强的荧光中心厚发暗,与此型相对应的为抗双链DNA抗体,多见于系统性红斑狼疮的病人,特别是有肾炎的狼疮病人.斑点型(speckled):核内散布大小不等着染荧光的斑点,此型相关的抗体为抗可溶性核抗原抗体,呈现此型的血清应进一步做有关特异性抗体的检测.核仁型(nucleolus):仅核仁着染荧光.此类染色型别与核内的核糖体抗体有关,这种抗体多见于系统性红斑狼疮的病人.除系统性红斑狼疮外,SSc病人的阳性率可达到40%.着丝点型(centromere):此种染色型别的检测必须以组织培养细胞为底物,才能检测到染色特点为分裂时相的细胞核,核膜消失,染色体向两端整齐排列,着丝点部位着染荧光,荧光斑点不会超过染色体数.着丝点抗体过去认为是CREST综合征的标记抗体,现发现在系统性红斑狼疮和干燥综合征中也可存在.ANA存在一个谱,不同的ANA其临床意义也不一样.根据细胞内物质的理化特性和分布部位,将ANA分为4大类:(1)抗DNA抗体;(2)抗组蛋白抗体:(3)抗非组蛋白抗体或抗ENA抗体;(4)抗核仁抗体.
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不同方法检测抗双链DNA抗体性能评估及临床应用
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)为自身免疫性疾病,以青年妇女多见,临床表现为多器官、多系统受累,早期诊断有助于控制病情和改善预后[1].患者血清中可出现多种自身抗体,抗双链DNA(dsDNA)抗体是SLE的特征性血清标志物,被列为美国风湿病学会修订的SLE分类标准之一.临床用于病情活动程度、肾脏受累和治疗监测的指标[2].抗dsDNA抗体早能在SLE诊断前9年检测到,但也能在非SLE(如慢性活动性肝炎)患者血清中被发现[3].
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聚合酶链反应和间接免疫荧光法对角膜内皮炎病原诊断的比较研究
目的 探讨聚合酶链反应(PCR)和间接免疫荧光法(IIF)对角膜内皮炎的病原学诊断价值.方法 分别应用PCR和IIF对临床诊断为角膜内皮炎患者的房水进行单纯疱疹病毒检测,同时以老年白内障患者的房水作为对照,并做统计学分析.结果 16例角膜内皮炎患者的房水中,用PCR法检测阳性11例,阳性检出率为68.75%,20例对照组房水中无1例阳性,二者有显著性差异(P﹤0.05);13例角膜内皮炎患者的房水中,用IIF法检测阳性4例,阳性检出率为30.77%,20例对照组房水中无1例阳性,二者有显著性差异(P﹤0.05);角膜内皮炎患者的房水中PCR阳性检出率(68.75%)与IIF阳性检出率(30.77%)差异有统计学意义(P﹤0.05).结论 PCR法和IIF法均可作为角膜内皮炎的病原学快速诊断,但PCR法比IIF法敏感,可首选.
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大泡性角膜病变水通道蛋白和Na+K+-ATP酶表达变化
目的 研究水通道蛋白1(Aquaporin-1,AQP1)、水通道蛋白4(Aquaporin-4,AQP4)和Na+,K+-ATP酶在人大泡性角膜病变角膜中的表达变化,探讨其在大泡性角膜病变发生机制中的作用.方法 运用免疫荧光技术和免疫印迹方法分别测定人大泡性角膜病变角膜和正常角膜中AQP1、AQP4和Na+,K+-ATP酶的表达变化.结果 大泡性角膜病变角膜AQP1表达量升高而AQP4和Na+,K+-ATP酶表达量下降.结论 本实验结果表明,AQP1、AQP4和Na+,K+-ATP酶在角膜组织水容量调节中具有重要意义,它们的异常表达可能与大泡性角膜病变的病理改变有一定关联.
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北京地区1942例儿童急性呼吸道感染病原体检测结果分析
目的：分析北京地区儿童急性呼吸道感染的病原学流行特点，为临床诊疗提供病原学依据。方法采用间接免疫荧光法检测人血清中8种呼吸道病原体的IgM抗体，根据不同性别、不同年龄和不同季节的病原体阳性率以及合并感染情况进行统计学分析。结果本组1942例患儿，检出病原体者528例，阳性率27.2%。其中，甲型流感病毒检出阳性率(22.6%)高，其他依次为乙型流感病毒、腺病毒、嗜肺军团菌、肺炎支原体、副流感病毒、肺炎衣原体和呼吸道合胞病毒。检出病原体的528例阳性患儿中，感染双重病毒者134例(25.4%)，感染三重及三重以上病毒者39例(7.4%)。全部1942例患儿中，男性患儿病原体阳性率(27.9%)和女性患儿阳性率(25.9%)之间，差异无统计学意义(P>0.05)；不同年龄组中，≤1岁组病原体阳性率(19.0%)显著低于其他3个年龄组，差异均有统计学意义(P<0.05)；不同季节病原体的阳性率有差异，春、秋季的病原体阳性率(42.6%和39.7%)显著高于夏、冬季的阳性率(27.2%和27.5%)，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论年龄和季节是北京地区儿童呼吸道病原体感染的特异性因素，病原体混合感染率较高，病原体全年以甲型流感病毒为主，其他病原体流行有季节性特点。
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肝病相关抗体的检测及临床应用
[目的]探讨肝病相关抗体在肝脏疾病中的应用价值.[方法]选取乙型肝炎病毒(HBV)感染者(HBsAg、抗HBc阳性)53例;丙型肝炎病毒(HCV)感染者(抗HCV阳性)83例;不明原因肝功能异常者(各类肝炎病毒感染指标均阴性,但ALT或AST升高>40IU/L)86例,同时选择健康体检者60例作为对照组.采用间接免疫荧光法(IIF)检测各组抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA);采用免疫印迹法检测抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗体、抗肝肾微粒体抗体I型(LKM-1)、抗肝细胞浆抗体1型(LC-1)、抗线粒体抗体Ⅱ型(AMA-M2),并分析各组阳性率.[结果]在间接免疫荧光法检测中,ANA、AMA、SMA的阳性率分别为正常对照组6.7%、0.0%、0.0%;乙型肝炎组39.6%、1.8%、3.8%;丙型肝炎组,53.0%、15.7%、20.5%;不明原因肝功异常组,53.5%、12.8%、17.4%.经χ2检验除乙型肝炎组的AMA和SMA外,其他各病例组3项抗体阳性率均与正常对照组有显著性差异(P<0.01).在免疫印迹法检测中,抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗体阳性1例,抗肝肾微粒体抗体(LKM-1)3例,抗肝细胞浆抗体1型(LC-1)1例,抗线粒体抗体Ⅱ型(AMA-M2)5例.[结论]肝病相关抗体的检测在慢性肝病的诊断和鉴别诊断中有重要的临床意义.
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ANA滴度、抗ds-DNA滴度检测与自身免疫性疾病相关性及临床应用价值探讨
[目的]探讨抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(抗ds-DNA)抗体在自身免疫性疾病中的诊断价值,找出能及时为临床提供快捷可靠检验数据的检测手段. [方法] 用间接免疫荧光法检测ANA,用金标免疫斑点法检测抗ds-DNA,并以健康体检者作对照,以此评价滴度检测方法的临床应用价值.[结果] 检测227例系统性红斑狼疮(SLE)患者阳性率为100%,其中活动期病人75例,滴度在1∶1000以上占92%,非活动期病人152例滴度在1∶100～1∶320之间的占98.7%;抗ds-DNA阳性率为89%,其中活动期病人滴度在1∶8以上的占25.3%,非活动期病人滴度在原倍～1:2之间的占80.3%;295例风湿性关节炎(RA)患者ANA阳性率为42.7%,抗ds-DNA阳性率为0.7%;339例急慢性肾炎患者ANA阳性率为29%,抗ds-DNA的阳性率为3%. [结论] RA和肾病患者血清中ANA、抗ds-DNA均有阳性,但滴度较低,而SLE患者血清中ANA滴度较高,尤其是活动期时,两种抗体滴度的联合检测可显著提高SLE的诊断,及与其他自身免疫性疾病的鉴别诊断.
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抗核抗体滴度检测方案的优化和价值
目的：探讨采用间接免疫荧光法（IIF）检测抗核抗体滴度的方案优化和价值。方法：间接免疫荧光法（IIF）。结果：一种优化方案是我们将标本先做1：100的稀释度，然后再把阳性标本取出加做1：320，1：1000，1：3200，＞1：3200的滴度的方案，ANA滴度结果与标准方案的结果一致。另一种优化方案则是只需做1：100，1：1000，1：3200甚至只需做1：100，1：1000的方案，ANA滴度结果与标准方案的结果也一致。结论：我们采用的两种优化方案操作都取得了很好的结果，不但减少了很多繁琐的稀释操作，也减少了观察荧光的时间，大大提高了工作效率。另外，ANA试剂和仪器成本高，这两个方案也可以节省试剂，提高经济效益。
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呼吸道病毒特异性IgM检测对儿童呼吸道感染的指导意义
目的：统计分析急性呼吸道感染患儿5种常见呼吸道病毒特异性IgM的检出情况用以指导临床。方法：2012年1月～12月我院儿科住院急性呼吸道感染患儿1609例，收集血清采用间接免疫荧光方法检测呼吸道合胞病毒（ RSV）、腺病毒（ ADV）、甲型流感病毒（ IVA）、乙型流感病毒（ IVB）、副流感病毒（ PIV）特异性IgM。结果：1609例患儿检出阳性标本263例（16.35％），IVB 检出率多，共136例（8.45％），其余依次为 IVA 63例（3.92％）、PIV 62例（3.85％）、ADV 44例（2.73％）、RSV 42例（2.61％）。不同年龄组患儿阳性标本检出率不同，差异具有统计学意义（χ2＝134.822，P＜0.01），随年龄增长阳性标本检出率逐渐增高，学龄期儿童检查率高（34.55％）；IVB、PIV、IVA阳性标本检出率在不同年龄阶段的比较差异具有统计学意义（χ2分别为102.660、86.145、39.791，均P＜0.05），IVB 和IVA以学龄期儿童检查率为高，分别达20.00％和8.64％，PIV以学龄前儿童检出率高（12.07％）。不同呼吸道病毒IgM阳性检出率在不同月份有各自的特点，IVB在3月和10月出现两个检出高峰，检出率分别达20.15％和11.11％；IVA在3月和5月出现两个检出高峰，检出率分别达10.27％和11.81％；PIV、RSV检出率在1～6月份平缓上升，在3月份检出率高，分别达7.98％和6.46％，随后检出率又平稳下降；ADV在3、4、5三个月份检出率为高，检出率达6.19％。结论：5种呼吸道病毒检出阳性率达16.35％，尤以IVB检出率为高；呼吸道病毒特异性IgM阳性检出率随年龄增长而逐渐增高，IVB和IVA以学龄期儿童感染率高，而PIV以学龄前儿童感染率高；5种呼吸道病毒感染在2012年有各自的流行特点。
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急性呼吸道感染儿童9种呼吸道病原体IgM抗体检测分析及其与空气污染的相关性探讨
目的:了解并探讨急性呼吸道感染儿童9种呼吸道病原体IgM抗体检出情况及其与空气污染的相关性.方法:实时记录天津市2015年6月~2017年5月空气质量检测数据,并收集同期于天津市儿童医院住院的急性呼吸道感染患儿的血清,采用间接免疫荧光法检测9种呼吸道病原体,了解其检出情况并分析其与空气污染物之间的相关性.结果:共检测33078例患儿,其中病原体阳性者共有8364例,病原体检出总阳性率为25.29%,包括腺病毒(ADV)152例(0.46%)、Q热立克次体(COX)9例(0.03%)、肺炎衣原体(CPN)14例(0.04%)、甲型流感病毒(FLuA)3例(0.01%)、乙型流感病毒(FLuB) 930例(2.8%)、嗜肺军团菌(LP)96例(0.29%)、肺炎支原体(MP)6719例(20.3%)、副流感病毒(PIV)326例(0.99%)、呼吸道合胞病毒(RSV)115例(0.35%).MP和FLuB为主要病原体.天津市调查期间PM2.5、PM10、NO2的平均浓度值均处于较高水平;PM2.5浓度高,PM10次之.AQI、PM2.5、PM10、NO2、SO2浓度与住院病例数均具有相关性,PM10.0、NO2、SO2浓度与病原体总的阳性例数具有相关性,SO2浓度与MP阳性病例关系为密切.结论:天津市儿童医院2015年6月~2017年5月就诊患儿9种呼吸道病原体检出阳性率以MP高,其次是FluB.天津市空气污染严重,AQI、空气污染物浓度与住院病例数以及病原体总的阳性例数都有关,SO2浓度与MP阳性病例关系密切.
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反复呼吸道感染患儿细胞免疫状态的研究
反复呼吸道感染(RRI)为小儿常见的呼吸道疾病,其发病原因与多种因素有关.因其反复发作的临床特点,越来越引起人们的重视.临床上一般以抗生素及免疫增强剂如胸腺肽、转移因子等进行治疗.机体的细胞免疫在抗感染免疫方面发挥着重要作用.RRI患儿的细胞免疫状态如何、怎样有效合理地使用免疫增强剂,改善机体的免疫状态尚未完全确定.为了探讨该病的发病机理、为临床预防和治疗提供合理方案,本文采用间接免疫荧光法和3H-TdR掺入法,检测了2000年4月～2001年2月期间,在我院治疗的24例RRI患儿外周血T淋巴细胞亚群数、T淋巴细胞增殖转化功能、白细胞介素-2(IL-2)诱导水平及活性,观察患儿的细胞免疫功能.
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58例原发性胆汁性肝硬化患者自身抗体特征分析
目的:探讨自身抗体对原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的诊断应用价值.方法:用间接免疫荧光、免疫印迹法检测了58例PBC患者抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA),并对AMAM2亚型及抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)、抗肝肾微粒体Ⅰ型(LKM-1)和抗肝特异性胞浆Ⅰ型抗体(LC-1)等肝脏疾病相关的自身抗体进行检测.结果:PBC患者自身抗体以AMA和AMAM2亚型为主.其阳性率分别为96.5%和93.1%.患者的抗体滴度均大于1∶100,其中有8例出现ANA和SMA,1例出现AMA和SLA/LP同时阳性,表现与Ⅰ型和Ⅲ型自身免疫性肝炎重叠.另有19例AMAM2阳性患者进行肝穿病理检查时,12例(63.7%)患者病理提示符合PBC诊断.结论:自身抗体对PBC有诊断意义,注重自身抗体的检测对明确自身免疫性肝病有重要的临床意义.
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冠状病毒感染细胞抗原片法检测SARS患者血清中特异性抗体
目的:检测SARS患者血清中特异性抗冠状病毒抗体及其滴度变化,协助临床确诊SARS.方法:用本次爆发SARS患者鼻腔抽吸液分离的冠状病毒感染新生恒河猴肾细胞,制备抗原片,用间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体.结果:汕头地区7例SARS患者血清内均有特异性抗冠状病毒抗体,且恢复期抗体滴度比急性期的滴度增高4倍以上.结论:用冠状病毒感染细胞抗原片对怀疑感染SARS的患者血清进行特异性抗体检测,可协助临床确定SARS的诊断.
关键词： 严重急性呼吸道综合征 抗冠状病毒抗体 间接免疫荧光法 -
间接免疫荧光法与印迹法检测抗核抗体的相关性研究
抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是以是非特异性自身抗体的总称，分布于人体的各种体液中，如血清、组织液、尿液、胸水等［1］，用于自身免疫性疾病的诊断、鉴别、疗效的评价、预后等环节有十余年，自身免疫性疾病是一种病理性的免疫应答，表现为自身组织器官等功能障碍［2］。对于 ANA 的检测，有条带酶联免疫分析法、免疫扩散、免疫印迹法、悬浮微阵列及抗原芯片多种方法［3，4］，临床常用的主要有两种方法，即间接免疫荧光法（IIF）与印迹法（LIA）。间接免疫荧光法（IIF）检测 ANA，而印迹法（LIA）检测 ANA 谱。在临床应用这两种方法检测抗核抗体时，二者的结果有时并不完全一致［5］。因此，为研究间接免疫荧光法与印迹法检测抗核抗体的诊断效果，探讨两种方法检测抗核抗体的一致性及相关性，以期为临床自身免疫性疾病的诊疗提供借鉴，现将研究内容报道如下。
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ANA、抗ENA抗体法联合检测214例自身免疫性疾病的结果分析
自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)患者的血清中存在多种特异性或相关性自身抗体[1],本试验采用间接免疫荧光法(IIF)和免疫印迹法(IBT)对AID患者血清中的抗核抗体(ANA)和抗ENA多肽抗体谱进行检测,结果报道如下.1 对象与方法1.1 对象 2009年1月-2010年6月我院门诊和住院AID患者214例,年龄15-89岁.系统性红斑狼疮(SLE)108例、干燥综合征(SS)27例、混合性结缔组织病(MCTD)15例、类风湿性关节炎(RA)45例、原发性胆汁性肝硬化(PBC)5例、系统性硬化症(PSS)7例、特发性血小板减少性紫癜(1TP)7例.
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稳定表达水通道蛋白-4细胞株的建立及应用价值
目的 构建水通道蛋白-4 (AQP4)真核表达载体,转染HEK293细胞建立稳定表达AQP4的HEK293细胞株,并将其应用价值与现有的酶联免疫吸附(ELISA)法进行比较,为视神经脊髓炎(NMO)的诊断提供新的方法.方法 用RT-PCR法从小鼠小脑皮质中克隆AQP4基因,将其连入质粒pcDNA3.1,构建AQP4真核表达载体pcDNA3.1 -AQP4；用脂质体转染法将重组质粒转染HEK293细胞,G418筛选稳定表达细胞株；RTPCR和间接免疫荧光法(IFA)检测AQP4基因的表达情况；以稳定细胞株为底物用IFA法检测81例患者血清抗AQP4抗体,并与ELISA检测方法进行比较.结果 琼脂糖电泳显示RT-PCR扩增出993 bp的条带；与载体连接后得到酶切正确的重组质粒；RT-PCR扩增出一条与目的基因一致的条带；IFA法检测转基因HEK293细胞,呈抗AQP4阳性.IFA法检测患者血清中AQP4抗体的敏感性为93.3％,特异性为97.4％,正确指数为90.7％,与ELISA法一致性为96.3％.结论 成功克隆并构建小鼠AQP4基因真核表达载体,成功建立稳定表达AQP4的HEK293细胞株,该细胞株对NMO具有良好的检测效果,有望在NMO的临床诊断中发挥重要作用.
