首页 > 文献资料
-
清金抗扩饮对支气管扩张模型大鼠的白细胞、中性粒细胞及其弹性蛋白酶作用探讨
目的 探讨清金抗扩饮对支气管扩张症(简称“支扩”)模型大鼠的作用及其的疗效机理.方法 建立SD大鼠支扩模型,按随机数字表法随机分为5组,分别为清金抗扩饮高剂量组(灌胃剂量为86.414 g/kg·d-1)、清金抗扩饮低剂量组(灌胃剂量为43.207g/kg·d-1)、左氧氟沙星组(左氧氟沙星液灌胃)、支扩模型组(生理盐水灌胃)、空白对照组(生理盐水灌胃)；治疗2周后观察肺组织病理学特点,外周血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及炎症细胞水平,肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平的变化.结果 清金抗扩饮能显著抑制支扩大鼠血TNF-α水平,高剂量组(137.133±6.1646) ng/L,与支扩模型组(160.425±9.9293) ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05);血中白细胞水平,高剂量组为(1.106±0.3580) 109/L、低剂量组(1.086±0.2433) 109/L,与支扩模型组(2.017±0.3373) 109/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；气道扩张程度、肺组织NE水平,高剂量组为(80.697±4.5877) ng/L、低剂量组(80.747±3.6925) ng/L,与支扩模型组(100.040±9.9138) ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 清金抗扩饮对支气管扩张症的治疗作用可能通过减轻炎症反应,抑制NE表达实现.
关键词： 清金抗扩饮 支气管扩张症 肿瘤坏死因子-α 中性粒细胞弹性蛋白酶 -
从α1-抗胰蛋白酶缺乏症理解中医理论“肝令人咳”
2500多年来,“肝令人咳”这一中医理论一直指导着中医医师的临床实践.本文以α1-抗胰蛋白酶缺乏症为切入点,通过从现代医学对α1-抗胰蛋白酶在体内的生成、生理功能、代谢及缺乏所引起的疾病等方面的研究诠释了这一理论的正确性.
关键词： α1-抗胰蛋白酶 肺气肿 慢性阻塞性肺气肿 中性粒细胞弹性蛋白酶 中医理论 -
固本止咳中药对慢性阻塞性肺疾病模型小鼠肺组织中弹性蛋白酶表达的影响
目的:观察固本止咳中药对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠肺组织中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)表达的影响,探讨固本止咳中药治疗COPD抗炎性反应的作用机制及NE与分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的内在联系.方法:采用鼻腔滴入脂多糖加熏香烟的方法建立COPD小鼠模型,分为空白对照组、模型对照组、固本止咳中药组;运用免疫组化方法检测小鼠肺组织中NE表达水平,采用ELISA方法检测小鼠气道SIgA分泌水平.结果:模型对照组肺组织中NE表达气道SIgA分泌水平较空白对照组显著增多(P＜0.01,P＜0.05),固本止咳中药组较模型对照组显著减少(P＜0.01,P＜0.05).结论:固本止咳中药可改善COPD模型小鼠肺组织及气道黏膜炎性浸润状态.
-
止嗽散加减方对慢性阻塞性肺疾病寒燥模型大鼠表皮生长因子受体及中性粒细胞弹性蛋白酶的影响
目的 观察止嗽散加减方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)寒燥模型大鼠表皮生长因子受体(EGFR)及中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的影响.方法 利用气管滴注弹性蛋白酶结合烟熏90 d建立COPD模型,在此基础上予以寒燥应激90 d建立COPD寒燥模型.将COPD寒燥模型大鼠随机分为寒燥组和中药组,中药组连续干预7 d.第97日处死大鼠,观察其肺组织病理形态.RT-qPCR和Western blot分别检测肺组织EGFR mRNA和蛋白表达,ELISA检测血清和肺泡灌洗液NE含量.结果 COPD组、寒燥组、中药组肺组织EGFR mRNA和蛋白表达较对照组均升高,中药组肺组织EGFR蛋白表达较COPD组和寒燥组均降低;COPD组、寒燥组和中药组血清和肺泡灌洗液NE含量较对照组升高,寒燥组肺泡灌洗液NE含量高于COPD组,中药组肺泡灌洗液NE含量低于寒燥组.结论 止嗽散加减方可能通过降低寒燥COPD模型大鼠肺组织EGFR和NE的水平,达到治疗COPD的目的.
关键词： 慢性阻塞性肺疾病 寒燥 止嗽散加减方 表皮生长因子受体 中性粒细胞弹性蛋白酶 -
银屑1号对Trappin-2刺激下肿瘤坏死因子α干预造模的HaCaT细胞分泌NE、Trappin-2的影响
目的 探讨银屑1号治疗银屑病的可能作用机制.方法 24只大鼠随机分为银屑1号组、雷公藤组、空白组, 每组8只.银屑1号组大鼠给予银屑1号煎煮浓缩液196 g/ (kg·d) 灌胃, 雷公藤组给予雷公藤多甙片混悬液6 mg/ (kg·d) 灌胃, 空白组给予生理盐水灌胃, 均每日2次, 每次5 ml, 连续5天, 制备含药血清.体外培养Ha Ca T细胞, 以肿瘤坏死因子α (TNF-α) 刺激Ha Ca T细胞建立银屑病细胞模型.实验设置空白组、雷公藤组、抑制剂组、银屑1号组、抑制剂+银屑1号组.空白组、雷公藤组、银屑1号组分别加入基础培养基3.8 ml与相应含药血清, 抑制剂组、抑制剂+银屑1号组分别加入空白含药血清和银屑1号含药血清, 同时均加入Trappin-2 (0.3μg/ml) 培养基3.8 ml.体外培养48 h, 检测Ha Ca T细胞中中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 、Trappin-2含量及NE、Trappin-2 mRNA表达.结果 与空白组比较, 雷公藤组、抑制剂组、银屑1号组、抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2含量及mRNA含量明显降低 (P＜0.05或P＜0.01).与雷公藤组比较, 抑制剂组、银屑1号组、抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2含量及mRNA表达明显升高 (P＜0.01).与抑制剂组比较, 银屑1号组、抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2表达明显降低 (P＜0.05或P＜0.01);银屑1号组NE mRNA表达明显升高 (P＜0.01);抑制剂+银屑1号组Trapppin-2mRNA表达降低 (P＜0.05).与银屑1号组比较, 抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2含量及mRNA表达明显降低 (P＜0.05或P＜0.01).结论 银屑1号可降低Ha Ca T细胞中NE、Trappin-2含量及基因表达水平, 从而减轻炎症反应, 可能是其治疗银屑病的作用机制之一.
关键词： 银屑病 银屑1号 中性粒细胞弹性蛋白酶 Trappin-2 -
重组慢病毒LV5-NE的构建及NE促进NB4细胞增殖
目的 构建重组慢病毒LV5-NE筛选纯NB4/LV5-NE细胞株,探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖的影响,为研究NE致白血病的可能机制奠定基础.方法 以质粒pCMV-myc-NE为模板得到PCR产物NE,将NE基因连接到穿梭载体pGLV10/U6/GFP/Puro后酶切验证,将序列正确的质粒与包装质粒pGag/Pol、pRey、pVSV-G共转染293T细胞.测定病毒滴度.实验分为空白组、LV5-NC组和LV5-NE组,病毒感染NB4细胞72 h后用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞.用Westemblot检测NE在NB4细胞中的蛋白表达以及其切割作用;CCK-8法观察NB4细胞增殖能力;流式细胞术测定NB4细胞周期和凋亡;Western blot检测pAkt和Akt以及Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 成功构建表达NE的慢病毒LV5-NE,筛选得到纯NB4/LV5-NE细胞株,NE对NB4细胞的增殖有明显促进作用(P＜0.05)结论NE在NB4细胞株中稳定表达后中可促进NB4细胞的增殖,其增殖作用可能通过激活PI3K/Akt通路调节.
关键词： 中性粒细胞弹性蛋白酶 慢病毒构建 增殖 凋亡 NB4细胞 -
吸烟者血清α1-抗胰蛋白酶、中性粒细胞弹性蛋白酶及组胺的变化
慢性阻塞性肺疾患(COPD)是常见病、多发病。吸烟是COPD发病的重要因素，但其发病机理至今尚未完全阐明。九五期间我们的工作曾表明，吸烟伴有COPD者血清α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)明显低于不伴有COPD者[1]，提示α1-AT可能是一重要的宿主高危因素。
-
鞭虫乳清酸蛋白TtWAP-3的原核表达、纯化及其活性研究
目的 克隆、原核表达人鞭虫(Trichuris trichiura)乳清酸蛋白TtWAP-3,分析其生物学活性. 方法 分别以鞭虫成虫前端及尾端cDNA为模板,通过PCR扩增TtWAP-3编码基因;将TtWAP-3编码基因克隆至原核表达载体pET32a-sumo,构建重组表达质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目的蛋白并进行Ni-NTA亲和纯化和SUMO酶酶切,用发色底物法检测rTtWAP-3对蛋白酶的抑制活性. 结果 在成虫前端及尾端均成功克隆获得TtWAP-3编码基因序列,构建的原核表达重组质粒pET32a-sumo/TtWAP-3在大肠埃希菌表达rTtWAP-3,该蛋白对人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和人蛋白酶3(PR3)有抑制活性,其抑制人NE(20 nmol/L)、人PR3 (200 nmol/L) 50％活性的浓度分别约为2.25 μmol/L和5.34 μmol/L. 结论 成功获得原核表达的重组TtWAP-3,该蛋白对人NE及人PR3均有抑制作用,为研究TtWAP-3对宿主的免疫调节作用奠定了基础.
关键词： 鞭虫 乳清酸蛋白 原核表达 中性粒细胞弹性蛋白酶 蛋白酶3 -
黄连素对NASH小鼠NE/α1-AT失衡的干预研究
目的 探讨NE/α1-AT失衡在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)发生发展中的作用及其意义以及黄连素对其影响.方法 8周龄C57 BL/6JApoE-/-雄性小鼠26只,按体重随机分为正常对照组(正常饮食,SC组,n=8)、高脂组(高脂高胆固醇饮食,HFHC组,n=8)、黄连素干预组(n=10).黄连素干预组6周起予以20 mg/kg/d黄连素灌胃,喂养12周处死所有小鼠,称体重肝湿重,检测肝功能和血脂,肝组织油红0染色评估脂肪变,HE染色评估炎症改变.酶联免疫反应(ELISA)检测肝组织中NE、α1-AT浓度,免疫组化染色及蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测NE表达情况,RT-PCR法检测小鼠肝组织α1-AT的mRNA表达.结果 高脂组和正常对照组相比,高脂组小鼠ALT、AST均有明显升高,TG明显高于对照组.高脂组小鼠HE染色可见明显脂肪变及炎症灶并伴有明显气球样变,造模终点其NAS积分5-8分,达到NASH诊断标准.高脂组NE浓度及活性明显升高,α1-AT水平降低,NE/α1-AT比值较正常组升高;黄连素干预组炎症气球样变较高脂组减少.黄连素干预组小鼠ALT、AST较对照组升高明显,且较高脂组AST明显下降,黄连素干预组小鼠NE/α1-AT较高脂组明显下降.结论 高脂高胆固醇喂养ApoE-/-小鼠12周可成功建立NASH小鼠模型,NE与α1-AT在非酒精性脂肪性肝炎发生发展中有明显的变化,NE/α1-AT失衡在NASH中起到重要作用;黄连素可减轻NASH小鼠肝脏内脂质沉积和炎症程度,并可改善NE/α1-AT失衡,具有防治NASH作用.
关键词： 非酒精性脂肪性肝炎 黄连素 中性粒细胞弹性蛋白酶 α-1抗胰蛋白酶 -
中性粒细胞弹性蛋白酶和IL-8在大鼠哮喘中的作用及地塞米松调控
目的观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和IL-8在大鼠哮喘中的作用及地塞米松(DM)对其功能的影响.方法采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组(A组)、正常对照组(B组)、地塞米松治疗组(C组),对周围血内中性粒细胞(PMN)进行分离纯化,ELJSA法检测血PMN和支气管肺泡灌洗液(BALF)中NE和IL-8的表达水平.结果A组血PMN和BALF中NE、IL-8表达水平均显著高于B组(P＜0.01),C组均显著低于A组(P＜0.01).C组血PMN中NE的表达水平显著高于B组(p＜0.05),而BALF中则无显著性差异(P＞0.05).C组血PMN和BALF中IL-8的表达水平与B组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).BALF和肺组织中PMN计数A组显著高于B组(P＜0.01),肺组织中PMN计数C组显著高于A组(P＜0.01),而两组BALF中PMN占细胞总数的百分比差异无统计学意义(P＞0.05).BALF中PMN计数和IL-8呈显著正相关(P＜0.05).结论PMN、NE和IL-8参与了哮喘的炎症过程,PMN可能通过合成IL-8、NE起作用,其合成功能可以被地塞米松所抑制.IL-8与PMN在BALF中浸润密切相关.
-
急性肺损伤患者血清中中性粒细胞弹性蛋白酶活性的变化
目的检测急性肺损伤(ALI)患者血清中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,探讨其临床意义.方法选择符合ALI患者22例,健康对照组15例.计算动脉血氧分压(PaO2)与吸入气氧浓度(FiO2)比值,测定NE活性、α1-抗胰蛋白酶α1-AT)浓度和活性、白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)浓度等.结果ALI患者的NE活性、IL-6和IL-8均明显高于健康对照组,而α1-AT活性较健康组降低(P＜0.05).ALI患者中死亡组(10例)的NE活性明显高于存活组(12例)(P＜0.01).而且ALI患者的血清NE活性与PaO2/FiO2呈显著负相关(r=-0.874,P＜0.01).结论ALI患者的NE活性明显升高,α1-AT活性显著降低,出现蛋白酶-抗蛋白酶失衡,而且血清NE活性水平与患者的肺损伤严重程度和预后密切相关.
关键词： 急性肺损伤 中性粒细胞弹性蛋白酶 α1-抗胰蛋白酶 预后 -
姜黄素对百草枯中毒大鼠肺组织胶原面积及TNF-α、IL-6、NE表达的影响
目的 观察姜黄素对百草枯中毒大鼠肺组织胶原面积及TNF-α、IL-6、NE表达的影响,以探讨姜黄素治疗百草枯中毒的可能机制.方法 SPF级Wistar大鼠108只,随机(随机数字法)分为空白对照组(B组)、百草枯染毒组(PQ组)、姜黄素治疗组(PC组),PQ组及PC组给予百草枯(50 mg/kg)(北京华都生物科技)一次性灌胃染毒复制中毒模型,同时空白对照组给予等量生理盐水灌胃;灌胃30 min后,PC组给予姜黄素(sigma公司)200 mg/kg一次性腹腔注射,B组、PQ组注射等体积生理盐水,常规饲养.于3d、7d、14 d,行HE染色、Masson染色观察肺组织病理形态学、胶原纤维的分布及变化,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL-6)含量,免疫组织化学法观察肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的表达及变化.结果 与B组比较,PQ组各时间点肺组织均有不同程度的肺泡炎,以7d时为严重;肺组织弥漫性纤维化,大量胶原纤维沉积,14 d胶原纤维沉积严重;NE表达明显增强,14 d明显.血清TNF-α、IL-6含量亦显著升高(P＜0.05,P＜0.01);与PQ组比较,PC组各时间点肺泡炎及肺纤维化程度均有明显减轻,NE表达明显减弱,TNF-α、IL-6含量亦显著降低(P＜0.05).结论 抑制炎症因子及NE的表达,降低大鼠的肺泡炎和肺纤维化程度,可能是姜黄素治疗百草枯中毒肺的作用机制之一.
-
肿瘤相关中性粒细胞的研究进展
肿瘤微环境除肿瘤细胞自身外,还存在各种免疫细胞及间质细胞,其中免疫细胞主要包括中性粒细胞、巨噬细胞、NK细胞、淋巴细胞及树突状细胞等.近年来研究发现,肿瘤相关中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TANs)分泌多种蛋白酶(如中性粒细胞弹性蛋白酶、基质金属蛋白酶等)、活性氧及细胞因子(如IL-1、IL-12、TNF-α等),在肿瘤生长,转移,血管形成和免疫调节方面发挥重要的作用,并且外周血中中性粒细胞与淋巴细胞的比值(NLR)与临床预后密切相关.目前,TANs的作用越来越受到人们的重视,本文回顾近年来发表的文献,作一综述.
-
西维来司钠对大鼠重症急性胰腺炎炎症反应的治疗作用
目的:检测重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠血清中中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)、白介素-6(interfilon-6,IL-6)的含量及胰腺病理学改变,探讨西维来司钠对大鼠SAP的治疗作用.方法:采用经十二指肠乳头逆行胆胰管注射5％牛磺胆酸钠的方法制备大鼠SAP模型;药物治疗组静脉输入西维来司钠,切取胰腺组织行病理学评分,测定血清中NE、IL-6及淀粉酶的含量.结果:牛黄胆酸钠胰胆管注射可以制作典型的急性胰腺炎模型,其血清淀粉酶升高、胰腺病理损伤符合急性胰腺炎表现.西维来司钠治疗组血清淀粉酶值及NE、IL-6含量较模型组降低,有显著性差异(3 h:5636.22±713.57 vs5835.75±681.52,16.99±3.28 vs 22.93±4.74,181.86±36.56 vs 281.82±30.79;6 h:5743.44±624.93 vs 6253.66±533.99,23.63±4.47 vs31.81±4.69,184.15±28.56 vs 319.39±21.73;12 h:7098.93±698.42 vs 8420.74±779.72,24.46±5.02 vs 39.21±6.23,192.52±37.65 vs354.21±23.72,均P＜0.05)；且药物治疗组胰腺损伤的组织病理学评分较模型组降低,有显著性差异(P＜0.05).NE、IL-6与胰腺病理学评分相关性分析显示,血清中NE、IL-6含量与胰腺损伤程度呈正相关.结论:西维来司钠能够降低血清中NE、IL-6浓度,减轻胰腺组织的病理损伤,减轻SAP急性期的炎症反应.
关键词： 急性胰腺炎 西维来司钠 中性粒细胞弹性蛋白酶 白介素-6 -
胰腺移植物ICAM-1的表达及信号转导的因素
目的:探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)抑制剂对细胞间黏附因子-l(ICAM-1)在大鼠胰腺移植物的表达及转导信号的影响.方法:采用大鼠胰十二指肠移植模型,实验组给予NE抑制剂(ONO-5046,10 mg/kg).体外实验检测NE及多种相关试剂对大鼠内皮细胞ICAM-lmRNA表达的影响及基因转导信号的调控作用.结果:对照组胰腺移植物中ICAM-]mRNA呈高水平表达,而实验组经ONO-5046处理后明显下调其表达,有显著性差异.NE刺激大鼠内皮细胞上调ICAM-lmRNA表达水平,而ONO-5046则明显抑制其表达;特异性钙离子载体增强该细胞的ICAM-1mRNA表达,相反,磷脂酶C抑制剂、钙离子螯合剂及核因子κB抑制因子则下调NE诱导的ICAM-lmRNA表达水平.结论:NE增强ICAM-l在胰腺移植物的表达与细胞钙离子内流及磷脂酶C的信号转导有关.
-
香烟提取物对大鼠肺泡巨噬细胞活性及基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1平衡的影响
自1963年Laurell及Eriksson报道α1抗胰蛋白酶(α1-AT)与肺气肿的关系以来,蛋白酶/抗蛋白酶失衡在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用成为研究热点.近年研究表明,中性粒细胞弹性蛋白酶主要在α1-AT缺乏的COPD中起作用,而吸烟相关的COPD发病机制则有待于深入研究.
-
慢性阻塞性肺疾病患者痰中性粒细胞弹性蛋白酶和基质金属蛋白酶9的表达及其与气流受限的关系
慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制主要为蛋白酶-抗蛋白酶失衡.我们通过痰诱导探讨COPD急性加重期及稳定期患者痰中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)的表达及其与气流受限的关系.
-
血液透析对慢性肾功能衰竭患者血浆髓过氧化物酶水平的影响
目的 探讨慢性肾功能衰竭维持性血液透析患者透析前、后血浆髓过氧化物酶水平的变化,分析其可能的原因及意义.方法 收集40例维持性血液透析患者透析前、后血标本各4 ml,其中2 ml置于乙二胺四乙酸抗凝管,2 ml置于普通试管,低温离心后分别收集血浆和血清.采用酶联免疫吸附法分别检测血浆髓过氧化物酶及血清中性粒细胞弹性蛋白酶的水平并比较透析前、后的变化.结果 透析前、后血浆髓过氧化物酶水平分别为(161±33)μg/L和(426±188)μg/L,治疗前、后比较差异有统计学意义(P＜0.01);透析前、后血清中性粒细胞弹性蛋白酶水平分别为(191±33)μg/L和(193±34)μg/L,治疗前、后比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在维持性血液透析患者中应用肝素作为抗凝剂透析后,血浆髓过氧化物酶水平的升高并非由中性粒细胞释放所致,很可能是由肝素刺激血管壁固化髓过氧化物酶释放所致.
关键词： 血液透析 髓过氧化物酶 中性粒细胞弹性蛋白酶 -
肝细胞移植解决α1抗胰蛋白酶缺乏
[动态]遗传性的α 1抗胰蛋白酶缺乏会引发肝病和肺气肿.肝脏合成的该蛋白的正常功能是抑制降解肺部结缔组织的中性粒细胞弹性蛋白酶.该病的典型形式是突变的α1抗胰蛋白酶低效分泌并积累在肝细胞中,因而降低了蛋白酶抑制剂的活性,导致肝损伤和肺气肿.鉴于变异蛋白的积累增加了肝细胞的压力,美国科学家近研究了向表达该变异蛋白的转基因鼠模型移植表达野生型α1抗胰蛋白酶的肝细胞能否有效.
-
前列腺液中性粒细胞弹性蛋白酶测定在慢性前列腺炎诊断中的意义
文献报道过氧化物酶阳性的白细胞和中性粒细胞可作为下尿路感染性疾病的炎症标记物[1].2005年9月至2005年12月我们采用ELISA方法检测35例慢性前列腺炎(CP)患者前列腺液(EPS)中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)浓度,探讨NE在CP诊断中的意义,现报告如下.
