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复方守宫散抗人胃癌裸鼠移植瘤血管生成的实验研究
目的 通过研究复方守宫散对VEGF、bFGF的影响,探讨其抑制血管生成的机理.方法裸鼠皮下接种人胃癌MKN-45细胞悬液,待肿瘤直径长至 0.5cm左右,随机分组,分别给予生理盐水、5-FU、1、2、4mg/kg/d 复方守宫散进行干预,共6周.治疗前后及治疗期间用游标卡尺测量肿瘤大直径和小直径,计算肿瘤体积.采用S-P 免疫组织化学法检测复方守宫散对裸鼠皮下胃癌组织中 VEGF、bFGF表达的影响.结果 治疗前各组裸鼠肿瘤体积无明显差异 (P>0.05).治疗结束后,复方守宫散各组及5-FU组肿瘤体积及重量小于生理盐水组 (P<0.05),而且复方守宫散对肿瘤生长的抑制作用呈现剂量依赖性,5-FU的抑瘤效果强于中、高剂量复方守宫散 (P<0.05).免疫组织化学检测结果显示,与生理盐水组比较,复方守宫散和5-FU均能下调裸鼠皮下胃癌组织中 VEGF、bFGF的表达(P<0.05),并且存在剂量依赖性.复方守宫散中低剂量组 VEGF 表达高于5-FU组,复方守宫散各组 bFGF 表达亦高于5-FU组(P<0.05).结论 复方守宫散抗血管生成的机理可能是通过抑制VEGF、bFGF的表达,导致肿瘤血管生成受到抑制.
关键词： 复方守宫散 胃癌 血管生成 血管内皮细胞生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 -
健脾活血方对SMMC-7721肝癌裸鼠抑瘤作用的研究
目的 观察健脾活血方对肝癌裸鼠皮下移植瘤模型细胞凋亡和血管生成的影响,探讨其可能的作用机制.方法 建立SMMC-7721肝癌荷瘤裸鼠模型.将60只雄性荷瘤裸鼠随机分为空白组、模型组、5-Fu组和健脾活血方高、中、低剂量组,每组10只.健脾活血方各剂量组给予相应浓度健脾活血方药液灌胃,每日1次,5-Fu组给予5-Fu隔日腹腔注射,连续2周.2周后比较各组裸鼠体质量、瘤质量和抑瘤率,免疫组化检测血管内皮生长因子(VEGF)和VEGF受体2(VEGFR-2)的蛋白表达,计算微血管密度(MVD),qRT-PCR检测Caspase-3和生存素(Survivin)的mRNA表达.结果 与模型组比较,各给药组VEGF、VEGFR-2蛋白表达,MVD和Caspase-3、Survivin mRNA表达均降低,其中5-Fu组和健脾活血方高剂量组作用明显(P<0.05).结论 健脾活血方可能通过抑制血管生成和诱导细胞凋亡作用抑制肿瘤生长.
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中药促进脑缺血血管生成研究进展
单味药及其有效成分、中药复方及中成药对血管的促进、抑制作用为目前研究热点,但中药对脑缺血后促进血管生成的作用及机制相关研究尚未深入.本文对中药促进脑血管生成的中医理论、体外研究、在体研究进行综述,并对通过Notch和Wnt信号通路调控血管生成的机制研究进行重点阐述,为药理作用机制研究及新药研发提供参考.
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中医药对冠状动脉侧支循环及有关生长因子的影响
冠状动脉侧支循环是指当某一冠脉主支或分支存在严重狭窄或闭塞时,由其它分支发出的为缺血区心肌供血的交通支.对于冠状动脉病变严重的心肌缺血,传统的药物治疗效果有限:而冠状动脉的介入治疗和旁路移植术均存在较高的再狭窄发生率.因此,促进缺血心肌区域侧支循环的建立、健全或血管新生已成为当前心血管领域的研究热点之一.冠状动脉侧支循环的建立和血管新生在很大程度上依赖于有关生长因子的作用,在已知的潜在促进心肌侧支血管生成的生长因子中,以成纤维细胞生长因子(FGF)和血管内皮生长因子(VEGF)为重要.本文就近年来中医药对冠脉侧支循环及FGF、VEGF的研究进展综述如下.
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三棱丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成及VEGF,TNF-α表达的研究
目的:考察三棱丸(SLW)抑制子宫内膜异位症(EMS)血管生成作用及机制.方法:以SLW作用于子宫内膜异位症大鼠模型,免疫组化方法检测异位内膜组织中微血管密度(MVD)、血管生成因子VEGF及TNF-α蛋白的表达,RT-PCR方法检测异位组织中VEGF mRNA和TNF-α mRNA的表达.结果:SLW能有效降低MVD,抑制异位内膜组织中VEGF,TNF-α蛋白和mRNA的水平.结论:SLW具有良好的抗EMS血管生成作用,其作用机制与抑制血管生成因子VEGF,TNF-α的水平有关.
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黄芪注射液载入修饰胶原促进血管再生的研究
目的:将黄芪载入胶原支架内,通过对胶原支架进行修饰,观察黄芪是否具有促血管生成活性及探讨可能的生物学机制.方法:将5,10μL黄芪注射液载入修饰后的胶原内,通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM,Chicken Chorioallantoic Membrane)实验模型,从胶原周围微血管再生数量、胶原内血红蛋白含量、胶原干重、CD_(34)抗原免疫组化标记等指标来考察黄芪注射液对肝素修饰后胶原促血管再生的作用.结果:黄芪联合肝素修饰后的胶原能够产生与血管内皮生长因子相当的疗效,血管计数、胶原血红蛋白含量、CD_(34)的表达均显著性增加(P＜0.01,与单纯胶原组比较);与单纯胶原组相比,胶原+黄芪10ul组胶原干重显著增加(P＜0.05).结论:黄芪注射液载入修饰后的胶原具有良好的促血管再生作用.
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桃红四物汤Ⅱ号抑制小鼠B16黑色素瘤生长及VEGF,KDR/FLK-1表达
目的:观察桃红四物汤Ⅱ号对小鼠B16黑色素瘤生长、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(KDR/FLK-1)表达及肿瘤微血管密度(MVD)值的影响.方法:采用C57BL/6J小鼠皮下接种B16黑色素瘤细胞建立模型,分别给予2.5,5,10 g·kg-1桃红四物汤Ⅱ号水煎剂、环磷酰胺0.05g·kg-1及联合用药桃红四物汤Ⅱ号10 g·kg-1+环磷酰胺0.025 mg·kg-1,检测各组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值.结果:桃红四物汤Ⅱ号5,10 g·kg-1及联合用药组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值均较生理盐水组明显降低(P<0.01).结论:桃红四物汤Ⅱ号能抑制小鼠B16黑色素瘤的生长,其抗肿瘤机制可能与抗血管生成作用有关.
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塔斯品碱对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制探讨
目的:研究塔斯品碱对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用及其机制.方法:建立小鼠S180肉瘤动物模型,利用该模型观察塔斯品碱的体内抗肿瘤作用.通过免疫组织化学Elivision plus法检测肿瘤组织内微血管密度(MVD)及血管内皮细胞生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),凋亡基因Bcl-2,Bax蛋白表达情况.结果:塔斯品碱对小鼠S180肉瘤具有抑制作用,瘤体血管内的VEGF,bFGF,Bcl-2,Bax蛋白表达逐渐下降,Bax/Bcl-2比值逐渐上升,存在良好的量效关系.结论:塔斯品碱能够抑制小鼠S180肉瘤的生长,其机制可能与降低瘤体组织内VEGF,bFGF,Bcl-2和Bax的蛋白表达,促进血管内皮细胞凋亡有关.
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补阳还五汤诱导脑缺血后血管生成促进侧脑室下区神经母细胞迁移
目的:研究补阳还五汤诱导脑缺血后血管生成对侧脑室下区神经母细胞迁移的影响及机制.方法:采用线栓法诱导小鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血30 min,分假手术组、模型组、补阳还五汤组和内皮抑素组.补阳还五汤组缺血后24h开始灌胃补阳还五汤(20 g·kg-1),内皮抑素组在灌胃补阳还五汤同时皮下注射内皮抑素(10μg/只),每天1次,连续14 d.缺血后第14天,采用免疫荧光法检测缺血周边区微血管密度和神经母细胞数量,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF) mRNA和蛋白表达.结果:与模型组比较,补阳还五汤组缺血周边区微血管密度和神经母细胞数量显著增多(P＜0.01),SDF-1和BDNFmRNA和蛋白表达增加(P＜0.01);与补阳还五汤组比较,内皮抑素组小鼠缺血周边区微血管密度和神经母细胞数量显著减少(P＜0.01),SDF-1和BDNF mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.01).结论:补阳还五汤促进脑缺血后血管生成有助于侧脑室下区神经母细胞向缺血周边区迁移,机制可能与上调SDF-1和BDNF表达有关.
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新藤黄酸体外抗肺癌血管生成的作用机制研究
为了观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对肺癌血管生成的影响及初步的作用机制.该实验以新藤黄酸处理肺腺癌A549细胞的条件培养基培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立非直接接触型细胞共培养体系;应用Matrigel胶建立HU-VEC的二维培养模型,观察新藤黄酸对血管生成的影响;DAPI染色倒置荧光显微镜下观察新藤黄酸对HUVEC细胞凋亡的影响;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术分析新藤黄酸对HUVEC凋亡率的影响;Western blot法检测新藤黄酸对HUVEC中PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt,VEGF蛋白表达的影响;采用PTEN-siRNA转染细胞后,RT-PCR法检测PI3K,Akt基因的表达水平.结果表明,新藤黄酸能明显抑制血管生成,其抑制效果与剂量相关;DAPI染色荧光显微镜下可见HUVEC可出现凋亡形态特征;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测结果显示新藤黄酸诱导HUVEC细胞凋亡;Western blot法检测结果表明新藤黄酸下调了p-PI3K,p-Akt蛋白的表达水平,而对PI3K,Akt蛋白表达影响不明显.RT-PCR法检测表明PTEN-siRNA转染入细胞后,能上调PI3K,Akt mRNA基因的表达.体外研究表明新藤黄酸能抑制肺癌血管生成,抑制血管生成的机制可能与PI3K/Akt信号通路有关.
关键词： 新藤黄酸 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 肺癌A549 血管生成 细胞凋亡 -
巴戟天寡糖促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成研究
目的:探讨巴戟天寡糖(MOO)对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响.方法:运用血清药理学的方法制备含药血清.60只鸡胚随机分为MOO低、中、高剂量组及生理盐水(NS)阴性对照组、空白血清对照组、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)阳性对照组,每组10只.孵育7 d后建立CAM模型,将NS、空白血清、bFGF(2 500 U·mL~(-1))、MOO 3种剂量含药血清分别加在CAM表面的载体上,继续孵育3 d后制备cAM标本,观察血管生成表现,并进行新生血管计数.结果:MOO各剂量组与bFGF组血管生成表现明显优于NS组与空白m清组.MOO各剂量组新生血管数目较空白血清组均明显增加(P<0.05),但药效均弱于bFGF组(P<0.05).与MOO低剂量组相比,中、高剂量组新生血管数显著增加(P<0.05),但两者之间无显著性差异.NS组与空白血清组新生血管数目之间无显著性差异.结论:MOO可促进鸡胚绒毛尿囊膜的血管增生,具有一定的促血管新生作用.
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补气活血药对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区域新生血管的影响
目的:探讨补气活血药物对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区新生微血管数目以及VEGF,bFGF蛋白表达的影响.方法:构建大鼠急性心肌梗死动物模型.造模成功后,将大鼠随机分为:假手术组、模型组、丹参-黄芪(1∶2)组、丹参-黄芪(1∶1)组、川芎-黄芪(1∶2)组、丹参组、川芎组、赤芍组、麝香保心丸组,每组5只.各给药组按照13.5 g·kg-1 ·d-1灌胃,每日1次,共给药3周.采用免疫组化SP法检测心肌组织中vWF的表达,计数微血管数目(MVC);采用Western blotting印迹法检测心肌组织中VEGF,bFGF蛋白的表达.结果:假手术组、模型组、各给药组大鼠梗死心肌边缘区域均可见vWF因子标记染色的新生微血管,假手术组大鼠心肌中新生微血管不明显,模型组大鼠梗死心肌边缘区域可见到少量新生成的微血管,各给药组大鼠梗死心肌边缘区域可见较多新生微血管.模型组与假手术组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);各给药组与模型组相比较差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).假手术组大鼠心肌中的VEGF,bFGF的蛋白表达少,模型组与之相比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),各给药组与模型组相比较,VEGF,bFGF的蛋白表达有较显著的增多,差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:丹参、川芎、赤芍、丹参-黄芪(1∶2)组、丹参-黄芪(1∶1)组、川芎-黄芪(1∶2)组药物可以促进血管的生成,推测这些药物促进血管生成的机制可能是通过促进VEGF,bFGF的蛋白表达,从而增加VEGF,bFGF的含量以促进新生血管的生成.
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石见穿提取物通过阻断血管生成抑制肿瘤生长的研究
目的:观察石见穿提取物对移植性肿瘤生长的抑制作用,并对其可能机制进行研究.方法:采用肝癌H22小鼠移植性肿瘤模型.小鼠右侧腋下接种肝癌H22细胞后,第2天随机分为5组,即模型组、石见穿提取物高、中、低(40,10,2.5g·kg-1)剂量组和阳性药环磷酰胺(CTX)对照组.给药10 d后,于第11天称体重,处死小鼠剥离瘤块并称重,计算抑瘤率,免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织中VEGF的表达和微血管密度(MVD).另结合肝癌H22鸡胚尿囊膜移植瘤模型,建模后第2天尿囊腔给药,于第6天观察各组鸡胚存活情况及各组存活鸡胚移植瘤(以肿瘤直径2mm为成瘤阳性)及血管的生长情况.结果:与模型组比较,石见穿提取物高、中、低剂量组的抑瘤率分别为26.44％ (P ＜0.05),42.28％ (P ＜0.01),32.59％(P＜0.05),并可显著降低肝癌H22小鼠移植性肿瘤组织中VEGF的表达和MVD(P ＜0.01).此外肝癌H22鸡胚尿囊膜移植瘤模型试验结果显示石见穿提取物可抑制肿瘤血管的生成,其中低剂量组(6.25 g·L-1)对肿瘤血管生成的抑制作用为明显,血管抑制率为50.67％ (P ＜0.01).结论:石见穿提取物对肝癌H22小鼠移植性肿瘤的生长具有抑制作用,这种作用可能是通过下调肿瘤组织中VEGF表达和MVD,阻断肿瘤血管生成而发挥的.
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蝎毒多肽提取物联合化疗抑制LeWis肺癌血管生成实验研究
目的:观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤血管生成的抑制作用并探讨可能的机制.方法:54只C57BL/6J小鼠皮下接种小鼠肺癌Lewis细胞,7 d后随机分为荷瘤对照组、化疗组和PESV组.以环磷酰胺对荷瘤小鼠进行化疗建立肿瘤化疗模型.按不同用药方法对3组小鼠进行干预,隔日测量肿瘤体积.各组每7 d处死6只小鼠,实验共进行28 d.以免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织Ⅷ因子,α-SMA,D114及Notchl蛋白表达水平.以Ⅷ因子标记微血管,计算微血管密度(MVD),以α-SMA标记成熟有功能的血管,计算血管成熟度.以RT-PCR方法检测肿瘤组织D114,Notchl基因水平表达.结果:PESV抑瘤率为42.21%.PESV组肿瘤体积与化疗组存在明显差异(P＜0.05),与荷瘤对照组有显著差异(P＜0.01).PESV组Ⅷ因子表达水平显著低于化疗组(P＜0.05).化疗组肿瘤组织α-SMA表达低于荷瘤对照组(P＜0.01),PESV组显著低于化疗组(P＜0.01).化疗组Dll4及Notch1第28天表达低于荷瘤对照组(P＜0.05),PESV组肿瘤D114及Notch1第21天表达显著低于化疗组(P＜0.05).结论:PESV可对Lewis肿瘤血管生成起抑制作用,其机制可能与抑制肿瘤微环境中血管生成相关因子D114及Notch1有关.
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莪术醇对斑马鱼的血管生成活性及作用机制研究
目的:初步研究莪术醇促进血管生成的活性及作用机制,为临床用药提供依据.方法:采用斑马鱼生物模式,观察莪术醇对斑马鱼胚胎体节间血管生长、成鱼剪尾后血管再生和仔鱼切尾后组织再生情况.采用相对荧光定量PCR法检测仔鱼切尾后体内血管内皮生长因子(VEGFA)及受体(VEGFR2)基因的表达.结果:莪术醇能使斑马鱼胚胎体节间血管侧生出新的血管,使成鱼剪尾后血管再生加快,使仔鱼切尾后尾部再生加快.且莪术醇能提高仔鱼体内VEGFA及VEGFR2基因的表达量,促进仔鱼切尾后的尾部再生.结论:莪术醇能促进斑马鱼的血管生成,提高仔鱼切尾后体内VEGFA及VEGFR2基因的表达量,促进尾部再生.
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蝎毒多肽提取物抑制肝癌H22细胞化疗期间再增殖实验研究
目的:观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)对H22肝癌荷瘤小鼠化疗期间再增殖的抑制作用并探讨可能的机制.方法:96只Balh/c小鼠皮下接种小鼠肝癌H22细胞,随机分为模型组、PESV高、低剂量组和荷瘤对照组.以5-Fu对荷瘤小鼠进行化疗建立再增殖模型.按不同的用药方法对4组小鼠进行干预,每周测量肿瘤体积2次.各组每7 d处死6只小鼠,实验共进行35 d.以免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织CD105,PCNA,VEGF,PDGF蛋白水平表达.以CD105标记微血管,计算微血管密度(MVD).结果:荷瘤对照组肿瘤体积在13～24 d增加迅速,荷瘤对照组小鼠在第27天全部死亡,模型组肿瘤体积在17 d前增长较快,在第17～22天增加较慢,之后体积增加又较快,在第31天全部死亡.PESV高、低剂量组肿瘤体积全程缓慢增加,体积在17 d以后显著低于模型组,PESV高低剂量组之间仅在第17天存在差异(P<0.05).免疫组织化学检测显示,模型组肿瘤组织第31天PCNA表达水平高于第21,28天(JP<0.01),PESV高、低剂量组表达水平显著低于模型组(P<0.01),PESV高、低剂量组仪在第17天存在显著差异(P<0.05).免疫组织化学检测显示,与PESV高、低剂量组相比,模型组CD105-MVD在第21,28天(P<0.05),第35天(P<0.01)存在显著差异,PESV高低剂量组之间无差别.模型组VEGF表达第35天高于第21,28天(P<0.05),PESV高、低剂量VEGF表达在第21,28,35天表达水平均显著低于模型组(P<0.01),PESV高低剂量组无差别.模型组肿瘤PDGF表达水平逐渐下降,PESV高,低组在第21天表达水平低,之后逐渐增高,PESV高低剂量组之间在第35天存在显著差异(P<0.01).相关性分析显示,肿瘤组织VEGF表达水平与肿瘤组织CD105-MVD呈正相关(r=0.669).结论:PESV可抑制H22肿瘤在化疗期间再增殖作用,其机制可能是抑制血管生成和使肿瘤血管正常化.
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匍匐大戟醇提物抗肿瘤及抑制血管新生作用
选取未曾研究过的云南新平产匍匐大戟,系统研究其抗肿瘤血管生成作用机制.制备匍匐大戟醇提物,取其浸膏配制成合适浓度为受试药,采用经典小鼠的急性毒性实验方法测定大耐受量(MTD).同时取正常细胞及肿瘤细胞,给药后通过MTT法检测其IC50.原代培养大鼠胸主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cells,RAECs),通过体外iCELLigence实时细胞分析实验、细胞迁移实验、细胞小管形成实验分别检测匍匐大戟醇提物对RAECs的增殖、迁移和成管能力的影响,并通过应用Western blot方法检测Akt,p-Akt,eNOS,p-eNOS,TGF-β1,Smad3等血管新生相关信号通路蛋白的表达情况.通过建立人肝癌裸鼠移植瘤模型,给以匍匐大戟醇提物,检测裸鼠体重、肿瘤体积、瘤质量等,应用ELISA法检测各组裸鼠血清中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血小板衍生生长因子BB(platelet-derived growth factor,PDGF-BB)的水平,并进行HE染色观察移植瘤组织形态.匍匐大戟醇提物对小鼠的大耐受量MTD为94.29 g·kg-1.匍匐大戟醇提物对大鼠成肌细胞(L6细胞株)无明显抑制作用,对人肝癌细胞株HepG-2、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12、人非小细胞肺癌细胞株A549、人宫颈癌细胞细胞株Hela均有显著性的抑制作用,且匍匐大戟醇提物在体外能够显著抑制RAECs的增殖、迁移和小管形成,并且促进RAECs中AKT和eNOS的磷酸化及增加TGF-β1和Smad3蛋白表达.同时,匍匐大戟醇提物可显著性抑制裸鼠在体肿瘤的生长并降低肿瘤裸鼠血清中VEGF的产生,但可增加PDGF-BB因子的含量.匍匐大戟醇提物对肿瘤生长及血管生成具有显著的抑制作用,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一.
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补阳还五汤上调miRNA-210表达促进人脑微血管内皮细胞血管生成
目的 体外研究miRNA-210在补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)促进人脑微血管内皮细胞(HBMECs)血管生成中的作用及其机制.方法 制备BYHWD含药血清,脂质体2000将miRNA-210 inhibitor转染至HBMECs,HBMECs分为空白血清组(10％正常对照血清)、BYHWD含药血清组(10％ BYHWD含药血清)、miRNA-210 inhibitor阴性对照组(NC 10％BYHWD含药血清+miRNA-210 inhibitor NC)和miRNA-210 inhibitor组(10％ BYHWD含药血清+miRNA-210 inhibi-tor);采用Ml-r、Transwell和管腔形成实验分别检测HBMECs增殖、迁移和管腔形成;qRT-PCR检测m iRNA-210、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)mRNA表达,WesternBlot检测VEGF和VEGFR2蛋白表达.结果 与空白血清组比较,BYHWD含药血清组HBMECs增殖、迁移和管腔形成增加(P＜0.01),miRNA-210、VEGF和VEGFR2mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01).与BYHWD含药血清组比较,miRNA-210 inhibitor组HBMECs增殖、迁移和管腔形成减少(P＜0.01),VEGF、VEGFR2mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01).结论 BYHWD可促进HBMECs血管生成,其机制可能与其上调miRNA-210表达激活VEGF信号通路有关.
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肺岩宁方组分对小鼠肿瘤血管生成与MMP-2、 MMP-9关系的研究
目的 观察中药肺岩宁方组分对C57BL/6小鼠Lewis肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9 mRNA及蛋白表达的影响.方法 建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,随机分为模型组、肺岩宁组、益气组、补肾组和抗癌组.灌胃21天,第22天处死,取肿瘤组织,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（SP法）检测C57BL/6小鼠Lewis肿瘤MVD,逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）法和SP法检测MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达水平.结果 肺岩宁组、补肾组、抗癌组小鼠肿瘤MVD均较模型组和益气组显著降低(P＜0.01,P＜0.05),而益气组与模型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).肺岩宁及其拆方的各组MMP-2 mRNA和蛋白（除益气组外）表达显著低于模型组(P ＜0.05,P＜0.01),补肾组、抗癌组肿瘤MMP-2 mRNA表达也显著低于益气组(P＜0.05)；肺岩宁组、补肾组、抗癌组的小鼠肿瘤MMP-9 mRNA和蛋白表达均显著低于模型组和益气组(P＜0.05,P＜0.01).结论 补肾、抗癌中药抑制肿瘤血管生成的靶点可能与抑制MMP-2、MMP-9表达、保护肿瘤微环境有关.
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艾灸对血管性痴呆大鼠海马内VEGF、flt-1、bFGF及bFGF-r表达的影响
目的 观察艾灸对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、fam样酪氨酸激酶-1(fms-like tyrosine kinase-1,flt-1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF),和碱性成纤维细胞生长因子受体(basic fibroblast growth factor receptor,bFGF-r)的表达水平的影响,研究灸法在治疗血管性痴呆中的促血管生成机制.方法 选取Wistar雄性老年大鼠,双侧颈总动脉缺血再灌注-硝普钠注射法制备大鼠血管性痴呆模型,电脑随机数字表法随机分为3组:艾灸组、西药组、模型组,并设假手术组对照.艾灸组取百会、大椎、神庭穴艾灸治疗,西药组茴拉西坦灌胃,15天为1个疗程,均为2个疗程.神经行为学评分并结合跳台仪检测治疗前、第2疗程后学习记忆成绩；免疫组化检测各组大鼠海马VEGF、bFGF及其受体fit-1、bFGF-r的表达.结果 经2个疗程治疗后,动物跳台实验的潜伏期、错误次数及神经行为学评分,艾灸组及西药组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),艾灸组与西药组比较潜伏期及神经行为学评分差异也有统计学意义(P＜0.05).表明艾灸、西药在提高VaD大鼠潜伏期,降低VaD大鼠错误次数以及对神经行为学评分影响均有显著疗效,而艾灸组明显优于西药组(P＜0.01,P＜0.05).艾灸组及西药组与模型组比,海马内表达VEGF、fit-1、bFGF的灰度值差异均有统计学意义,bFGF-r的表达仅艾灸组与模型组比较差异有统计学意义；VEGF、fit-1艾灸组与西药组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 艾灸在改善VD大鼠行为学评分及提高记忆成绩均有确切疗效,其作用机制可能存在着艾灸调控VD大鼠海马内VEGF、fit-1、bFGF和bFGF-r的表达水平,特别是上调关键因子VEGF、fit-1表达,促进了要害部位的血管生成,并终激发了脑内神经的损伤修复机制.
