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  • 卵巢癌患者血清miR-210、miR-126与临床病理特征及预后关系探讨

    作者:王冰;徐臻;赵虎;周晓水;王武亮

    目的:研究卵巢癌患者血清微小RNA-210(miR-210)和微小RNA-126(miR-126)表达水平及其与患者临床病理特征及预后的关系.方法:选取102例本院确诊的卵巢癌患者作为观察组,另选取同期本院健康体检的女性志愿者102例为对照组.采用qRT-PCR法检测两组血清miR-210、miR-126相对表达量,根据检测中位值将miR-210、miR-126分为高表达组与低表达组,观察其与患者临床病理特征的关系,受试者工作特征曲线(ROC)法分析miR-210、miR-126表达对卵巢癌的预测价值,Kaplan-Meier分析卵巢癌患者生存,logistic多元回归分析影响卵巢癌发生的危险因素.结果:与对照组相比,观察组血清miR-210表达水平升高,miR-126表达水平降低(P<0.05);miR-210、miR-126均与患者淋巴结转移、FIGO分期、分化程度及糖类抗原125水平相关,且miR-210与组织类型相关(P<0.05);miR-210、miR-126的曲线下面积分别为0.789、0.836,敏感度分别为96.6%、67.8%,特异度分别为51.2%、95.4%;miR-210低表达组无生存进展期(PFS)、总体生存时间(OS)均高于高表达组,miR-126高表达组PFS、OS均高于低表达组(P<0.05);miR-210、miR-126均为影响卵巢癌发生的独立危险因素.结论:卵巢癌患者的血清miR-210上调表达,miR-126下调表达,均与卵巢癌发生发展有关,均可能作为临床诊断、监测病情及评估预后的重要指标.

  • 补阳还五汤上调miRNA-210表达促进人脑微血管内皮细胞血管生成

    作者:胡辉;储利胜;孙斯琪;李琳;方燕;顾晶晶;张建平

    目的 体外研究miRNA-210在补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)促进人脑微血管内皮细胞(HBMECs)血管生成中的作用及其机制.方法 制备BYHWD含药血清,脂质体2000将miRNA-210 inhibitor转染至HBMECs,HBMECs分为空白血清组(10%正常对照血清)、BYHWD含药血清组(10% BYHWD含药血清)、miRNA-210 inhibitor阴性对照组(NC 10%BYHWD含药血清+miRNA-210 inhibitor NC)和miRNA-210 inhibitor组(10% BYHWD含药血清+miRNA-210 inhibi-tor);采用Ml-r、Transwell和管腔形成实验分别检测HBMECs增殖、迁移和管腔形成;qRT-PCR检测m iRNA-210、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)mRNA表达,WesternBlot检测VEGF和VEGFR2蛋白表达.结果 与空白血清组比较,BYHWD含药血清组HBMECs增殖、迁移和管腔形成增加(P<0.01),miRNA-210、VEGF和VEGFR2mRNA和蛋白表达增加(P<0.01).与BYHWD含药血清组比较,miRNA-210 inhibitor组HBMECs增殖、迁移和管腔形成减少(P<0.01),VEGF、VEGFR2mRNA和蛋白表达减少(P<0.01).结论 BYHWD可促进HBMECs血管生成,其机制可能与其上调miRNA-210表达激活VEGF信号通路有关.

  • Micro RNA-210诱导大鼠急性心肌梗死区域内微血管新生作用机制研究

    作者:饶大勇;樊仲国;朱灏;邵明学;李小波;田乃亮

    目的 研究micro RNA-210(miRNA-210)在大鼠急性心肌梗死(AMI)中调节微血管新生作用并探讨其相关机制.方法 将大鼠按1:1随机分为:假手术组(Sham组)、心肌梗死+阴性病毒对照组(AMI+NV)、心肌梗死组(AMI+PBS)、心肌梗死+miRNA-210激动剂体内转染组(AMI+miRNA-210 agonist).术后4周以微血管密度(MVD)为效应终点,检测各组内miRNA-210、肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA;检测HGF及肌球蛋白重链(β-MHC)的表达,小干扰RNA(siRNA)处理HGF,以WB检测效应终点.结果 AMI+miRNA-210 agonist组HGF表达水平、微血管密度(MVD)随miRNA-210表达增加而显著增加;低氧环境下siRNA显著抑制HUVECs中HGF表达,CD 31表达水平也显著下降;AMI+miRNA-210 agonist组大鼠心脏收缩功能更为优越.结论 心肌内miRNA-210过表达可上调梗死区域内HGF表达水平,促进血管新生,改善心脏收缩功能.

  • 血清外泌体miR-210作为肾透明细胞癌非侵入性诊断生物标志物的研究

    作者:王雪刚;杨剑斌;陈晨羲;赵松涛;许斌;陈斌;刘荣福;邢金春

    目的 探讨肾透明细胞癌组织细胞来源的血清外泌体miRNA作为肾癌诊断的生物标志物的价值.方法 收集2015年6月至2016年6月我院行手术治疗的30例肾透明细胞癌患者的组织标本和相应的血清标本,男20例,女10例.年龄45 ~ 70岁,平均57岁.选取同期与患者年龄、性别匹配的30例排除肿瘤的健康者作为对照,男20例,女10例.年龄42 ~ 70,平均56岁.结合肾透明细胞癌组织microarray芯片检测结果,利用实时定量PCR检测比较miR-210、miR-224、miR-452、miR-34a等4个miRNAs在肾癌组织、肾癌患者血清和肾癌患者血清外泌体的表达差异,以及在癌旁组织和健康者血清中的表达情况.利用ROC曲线计算诊断肾透明细胞癌的敏感性和特异性.结果 miR-210、miR-224、miR-452在肾癌组织中表达明显高于癌旁组织,相对的倍数变化分别为20.51、54.08和2.48,差异有统计学意义(P <0.05);miR-34a表达的相对的倍数变化为1.53,差异无统计学意义(P>0.05).肾癌患者血清中miR-210的表达明显高于健康者,相对的倍数变化为2.45,差异有统计学意义(P<0.05);但miR-224、miR-452、miR-34a表达的相对的倍数变化分别为1.26、1.03和1.22,差异无统计学意义(P>0.05).miR-210在肾癌患者血清外泌体中表达明显高于健康者,相对的倍数变化为2.32,差异有统计学意义(P<0.05).ROC曲线表明血清外泌体miR-210诊断肾透明细胞癌的敏感性和特异性分别为92.1%和80.0%,曲线下面积为0.8789.结论 检测血清外泌体miR-210对于肾透明细胞癌早期诊断具有一定的价值.

  • 微小RNA-210在急性脑梗死中的表达及意义

    作者:赵菁;高波;翟博智

    目的:观察急性脑梗死(ACI)患者血中微小RNA-210(miR-210)的表达,探讨其诊断ACI的临床价值。方法采用回顾性研究方法,选择2011年1月至2014年3月发病48 h内入住天津市天津医院的ACI患者80例,选择同期30例健康体检者作为对照。取受试者外周血,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血清miR-210表达;绘制受试者工作特征曲线(ROC),评价miR-210对ACI的诊断价值;结合患者接受治疗前的病理生理特征,判定miR-210与临床生理指标的关系。结果 ACI患者血清中miR-210表达明显低于健康对照者(2-ΔΔCt:1.349±0.043比1.923±0.107,t=6.567,P<0.000)。ROC曲线分析结果显示,miR-210诊断ACI的敏感度为90.4%,特异度为76.2%,ROC曲线下面积(AUC)为0.804〔95%可信区间(95%CI)=0.700~0.908〕。不同性别、年龄和脑梗死面积ACI患者之间miR-210表达(2-ΔΔCt)无明显差异(男性与女性:1.33±0.13与1.31±0.06,t=3.562,P=0.473;≤60岁与>60岁:1.32±0.12与1.31±0.09,t=2.351,P=0.264;大梗死灶、小梗死灶与腔隙性梗死:1.31±0.02、1.33±0.11与1.31±0.06,F=1.236,P=0.087),但随脑梗死程度加重,ACI患者miR-210表达(2-ΔΔCt)呈逐渐降低趋势(轻、中、重度:1.53±0.11、1.33±0.11、1.08±0.04, F=5.394,P=0.014)。结论 miR-210在ACI患者血清中表达降低,且与疾病严重程度相关,可以作为新的血清学指标用于ACI的诊断参考。

  • 微小RNA-210研究进展

    作者:张露;戴琼艳;赵琳;段满林

    背景 微小RNA(micmRNA,miRNA)是体内重要的基因水平调节物质,它能调控约1/3的人类蛋白编码基因表达.体内组织细胞缺氧后,miRNA水平发生变化,其中变化显著的是微小RNA-210(microRNA-210,miR-210).目的 由于miR-210易受低氧诱导,综述miR-210在低氧下的生物化学功能,并探讨其潜在的临床应用.内容 概述miR-210在线粒体代谢、血管生成、DNA修复和细胞存活等方面的作用.趋向 为miR-210相关疾病的诊疗提供参考.

  • miR-210在乳腺癌组织中表达的临床意义及其对三阴性乳腺癌细胞恶性行为的影响

    作者:刘文斌;高妮娜

    目的 探究微小RNA-210(miR-210)在乳腺癌组织中的表达及临床意义,并探究其在体外对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及转移能力的影响.方法 收集湖南省肿瘤医院病理科2013年12月至2015年9月乳腺癌组织及相应癌旁组织标本各82例,荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测组织及细胞中miR-210的表达水平,分析miR-210与患者临床资料及预后的关系.三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231转染含miR-210全长的载体作为实验组,转染空白载体作为对照组,CCK-8实验检测两组细胞增殖能力,Transwell侵袭及迁移实验检测两组细胞转移及侵袭能力.结果 qRT-PCR结果显示乳腺癌组织中miR-210的表达水平为0.198±0.014,显著高于癌旁组织的0.084±0.009,差异具有统计学意义(t=8.141,P<0.001);三阴性乳腺癌组织miR-210表达水平为0.254±0.026,显著高于非三阴性乳腺癌组织0.167±0.015,差异具有统计学意义(t=3.175,P=0.003).miR-210高表达、低表达两组患者TNM分期、分子分型差异有统计学意义(χ2=7.859,P=0.005;χ2=7.053,P=0.008);而miR-210高表达的患者4年生存率显著低于低表达患者(49.37%:76.80%),差异具有统计学意义(χ2=4.743,P=0.024).qRT-PCR结果显示,实验组细胞miR-210的表达水平为0.517±0.038,显著高于对照组细胞的0.284±0.022,差异具有统计学意义(t=9.280,P<0.001).CCK-8实验结果显示实验组细胞48、72及96 h时增殖能力显著高于对照组细胞(3.771±0.452:3.206±0.314;7.662±0.619:6.736±0.552;15.477±1.425:11.592±1.243),差异具有统计学意义(t=2.296,P=0.025;t=2.496,P=0.019;t=4.594,P=0.001).Transwell侵袭实验结果显示实验组细胞下室面细胞数为(107.8±13.0)个,显著高于对照组细胞的(74.4±10.9)个,差异具有统计学意义(t=3.732,P=0.001);迁移实验结果显示实验组细胞下室面细胞数为(136.5±18.5)个,显著高于对照组细胞的(87.4±15.7)个,差异具有统计学意义(t=4.256,P<0.001).结论 miR-210在乳腺癌组织中高表达,且与患者病情进展、肿瘤恶性程度及预后密切相关,体外miR-210可促进三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的恶性行为,是潜在的分子标志物及靶向治疗位点.

  • 血清miR-210和CA199联合检测在胰腺癌诊断中的应用

    作者:陈文举;陈美芳;王攀;周勇;沈波

    目的 研究胰腺癌患者血清miR-210的表达及意义,探讨血清miR-210与CA199联合检测在胰腺癌早期诊断中的价值.方法 选取37例胰腺癌患者和40例健康对照者,应用实时荧光定量PCR检测血清中miR-210的表达水平;化学发光法检测血清中CA199含量;受试者曲线(ROC)分析miR-210、CA199及两者联合对胰腺癌的诊断价值.结果 与对照组相比,胰腺癌患者血清中miR-210表达上调,CA199含量增加,差异均有统计学意义(P<0.05).ROC分析结果显示,miR-210诊断胰腺癌的敏感度和特异度分别为80.9%和91.3%,均高于CA199(敏感度、特异度分别为63.2%、88.9%),miR-210和CA199联合检测的敏感度(95.5%)较单项指标明显提高.结论 胰腺癌患者血清miR-210的表达上调,miR-210诊断胰腺癌的敏感度和特异度均高于CA199;两指标联合可明显提高诊断的敏感度.血清miR-210有潜力成为胰腺癌早期诊断的分子标志物之一.

  • 右美托咪定预处理对小鼠肺缺血-再灌注损伤时微小RNA-210表达的影响

    作者:徐刚;卢锡华

    目的 观察右美托咪定(Dex)预处理对小鼠肺缺血/再灌注损伤(PIRI)时微小RNA(miRNA,miR)-210表达的影响.方法 采用C57BL/6J小鼠在体单侧原位PIRI模型.按照随机数字表法将小鼠45只随机分为3组,每组15只:假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和Dex预处理组(Dex组).Dex组于缺血前30 min经腹腔注射Dex 25 μg/kg,Sham组和I/R组分别经腹腔注射等量生理盐水.各组实验结束后处死小鼠,留取左肺,分别检测肺组织湿/干重比(W/D)和总肺水含量(TLW),光镜观察肺组织形态学并测定肺泡损伤率(IAR),电镜观察肺组织超微结构改变,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测肺组织miR-210表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡指数(AI).结果 与Sham组[4.34 ±0.25、3.33 ±0.24、(5.73±1.96)%、(4.86±0.97)%]比较,I/R小鼠组肺组织W/D (5.95 ±0.43)、TLW (4.68±0.42)、IAR[(40.47±5.93)%]和AI[(35.36±5.93)%]均升高(P<0.05),肺组织miR-210表达(4.73±0.78比1.07 ±0.38)上调(P<0.05),肺组织形态学结构及超微结构均发生损伤.与I/R组比较,Dex组肺组织W/D (5.36 ±0.14)、TLW (4.25 ±0.18)、IAR[(14.72±3.57)%]和AI[(16.49±2.51)%]均降低(P<0.05),肺组织miR-210表达(1.53 ±0.45比4.73 ±0.78)下调(P<0.05),肺组织形态学结构及超微结构损伤均减轻.结论 Dex预处理可能通过下调肺组织miR-210的表达,减少肺组织细胞凋亡,从而减轻小鼠I/R所致的急性肺损伤.

  • miR-210基因和KCMF1蛋白在先兆子痫胎盘中的表达及意义

    作者:干丽敏;杜敏;尚蓝天

    目的 探讨miR-210基因和KCMF1蛋白在先兆子痫(PE)患者胎盘中的表达水平及临床意义.方法 选取14例重度PE患者、27例轻度PE患者、12例正常孕妇为研究对象,分别检测比较她们的血压、尿蛋白(UPC)、体重指数(BMI)以及胎盘中miR-210和KCMF1表达情况,对miR-210与KCMF1表达的关系、miR-210和KCMF1的表达分别与血压、UPC水平的关系进行相关性分析.结果 轻度PE组患者SBP、DBP、UPC水平显著高于正常对照组(P<0.05),重度PE组患者SBP、DBP、UPC水平显著高于轻度PE组(P<0.05).轻度PE患者胎盘中miR-210的表达水平显著高于正常对照组、KCMF1表达水平显著低于正常对照组(P<0.05);重度PE组患者胎盘中miR-210的表达水平显著高于轻度PE组、KCMF1表达水平显著低于轻度PE组(P<0.05).轻度、重度PE组患者胎盘中miR-210和KCMF1的表达水平均呈负相关(P<0.05);轻度、重度PE组患者胎盘中miR-210的表达和SBP、DBP、UPC水平均呈正相关(P<0.05),KCMF1表达和SBP、DBP、UPC水平均呈负相关(P<0.05).结论 PE患者胎盘中miR-210表达上调,KCMF1表达下调,miR-210可能通过调控KCMF1的表达水平进而影响PE的发生发展.

  • 干扰黑色素瘤细胞A375中miR-210的表达对细胞转移及金属基质蛋白酶相关分子的影响

    作者:梁艳;牟宽厚;韩丹;黄知平

    目的 探究黑色素瘤中微小RNA-210 (miR-210)的表达情况及干扰人黑色素瘤细胞A375中miR-210的表达对细胞转移能力及金属基质蛋白酶(MMP)表达的影响.方法 收集西安交通大学第一附属医院病理科2016年3月1日至2017年5月31日的37例皮肤恶性黑色素瘤组织,17例交界痣组织及30例正常皮肤组织,荧光定量链式聚合酶反应(qPCR)检测组织中miR-210的表达情况.体外培养A375细胞,慢病毒转染空白载体及小干扰RNA(siRNA)介导的干扰miR-210载体于A375细胞中,分别作为对照组及干扰组细胞,qPCR检测两组细胞miR-210、MMP-2及MMP-9 mRNA表达水平,Western blot实验检测两组细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达水平, Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭能力,Transwell迁移实验检测两组细胞迁移能力.结果 与交界痣及正常皮肤组织相比,黑色素瘤组织miR-210表达显著增高[(0.165±0.060)vs(0.076±0.033)及(0.048±0.046)],差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,干扰组细胞miR-210 [(0.153±0.037) vs (0.372±0.041)]、MMP-2 mRNA [(0.175±0.053)vs(0.424±0.038)]及MMP-9 mRNA[(0.323±0.068)vs(0.610±0.102)]表达水平显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,干扰组细胞MMP-2[(0.114±0.016)vs(0.356±0.047)]及MMP-9[(0.263± 0.030)vs(0.571±0.084)]蛋白表达水平显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,干扰组细胞侵袭细胞数显著减少[(36.9±8.7)个vs(72.3±10.5)个],干扰组细胞迁移细胞数也显著减少[(45.3±9.4)个vs(78.3±12.6)个],差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 恶性黑色素瘤中miR-210存在高表达,体外干扰A375细胞miR-210的表达可介导MMP分子表达下调,进而抑制细胞转移能力,是潜在的分子靶向治疗位点.

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