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β-catenin 和 GSK-3β在红藻氨酸点燃动物模型颞叶癫痫形成中的变化
目的：探讨经典的 Wnt／β-catenin 信号分子β-catenin、GSK-3βmRNA 在红藻氨酸（KA）致痫大鼠颞叶癫痫形成中的时间变化过程及丙戊酸钠（VPA）对其表达的影响。方法利用生后30天的雄性 SD 大鼠，经皮下注射 KA 制成颞叶癫痫动物模型后，应用 Real-time PCR 技术检测 KA 后不同时期大鼠海马组织中 Wnt 信号通路分子β-catenin 和 GSK-3βmRNA 的表达，并观察抗癫痫药物丙戊酸钠对其表达的影响。结果 KA 致痫后在颞叶癫痫形成过程中，KA 组急性期β-catenin mRNA 的表达（0.76±0.06）较对照组（1.00±0.00）显著下降，差异有统计学意义；癫痫形成初期的表达（1.00±0.07）与对照组，差异无统计学意义；慢性期的表达（1.33±0.25）与对照组比较显著增高，差异有统计学意义。KA 组动物海马组织急性期 GSK-3βmRNA 的表达（0.72±0.12）较对照组（1.00±0.00）显著下降，癫痫形成初期（0.41±0.12）较对照组也降低，差异均有统计学意义；慢性期（0.82±0.10）与对照组比较，差异无统计学意义。红藻氨酸＋丙戊酸钠组大鼠海马组织 GSK-3β和β-catenin mRNA 的表达，在颞叶癫痫形成的不同阶段与对照组比较，与 KA 组有相同的变化趋势，但两组间比较，差异均无统计学意义。结论 Wnt5a 可能通过经典的 Wnt 信号通路调控 KA 点燃颞叶癫痫大鼠海马神经发生参与颞叶癫痫的产生。丙戊酸钠的抗痫作用机制与大鼠海马β-catenin、GSK-3β信号分子无关。
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补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化GSK-3β、p38MAPK及ERK1/2蛋白的影响
目的:观察补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化糖原合成激酶3β( GSK-3β)、p38丝裂原活化蛋白激酶( p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2( ERK1/2)蛋白的作用.方法:3月龄SD雌性大鼠灌胃制备空白血清和含药血清,并分离培养1日龄新生鼠颅骨成骨细胞.实验分为空白血清组和含药血清组,分别采用MTT、ELISA、Western-blot等方法检测两组成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌及磷酸化GSK-3β、p38 MAPK和ERK1/2蛋白的变化.结果:与空白血清组相比,含药血清组可明显促进成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌,并促进胞内磷酸化p38 MAPK和ERK1/2蛋白的表达,对磷酸化GSK-3β蛋白的表达未见明显影响.结论:补肾活血复方含药血清可促进大鼠成骨细胞的增殖和分化,提高p38 MAPK和ERK1/2蛋白磷酸化水平.
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葛根素对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用
目的:探讨葛根素(puerarin,Pue)在心肌细胞氧化应激损伤中的保护作用.方法:利用H2O2处理心肌H9c2细胞,建立氧化应激损伤模型.采用激光扫描共聚焦显微镜成像法测定线粒体膜电位,用MTT法观察Pue对细胞增殖的影响,利用Western blotting法检测Pue对GSK-3β、Akt活性的影响.结果:Pue明显减轻H2O2诱发的心肌细胞线粒体损伤,但PI3K抑制剂渥曼青霉素(wortmannin,Wort)对此作用没有影响;Pue能够增加GSK-3β(Ser9)蛋白的表达,而未增加Akt(Ser473)蛋白的表达.结论:Pue通过使GSK-3β失活,抑制mPTP的开放,从而减轻氧化应激诱发的心肌细胞损伤,而PI3 K/A kt信号传导通路并未参与此过程.
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补肾益脑灸法通过Wnt信号通路影响围绝经期抑郁症大鼠海马神经发生
目的:基于Wnt信号通路观察补肾益脑灸法对围绝经期抑郁症大鼠海马神经干细胞分化标记物表达的影响并探讨其治疗机制.方法:60只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、假手术组、西药组和艾灸组5组,采用去势和慢性不可预见刺激结合制备围绝经期抑郁症大鼠模型.连续治疗28 d,观察大鼠一般情况变化、动情周期、体质量及糖水消耗实验结果,运用ELISA法检测海马组织中的GFAP、Tuj-l、GSK-3β、β-catenin,RT-PCR法检测海马组织中的GSK-3βmRNA、β-catenin mRNA表达.结果:遣模后其他组较空白组表现出抑郁行为,而治疗后抑郁行为好转,西药组、艾灸组及假手术组较模型组海马组织中GFAP、GSK-3β及GSK-3βmRNA的表达量增加,Tuj-1、β-catenin及β-catenin mRNA表达量有所减少.结论:补肾益脑灸法可以通过调节海马Wnt通路GSK-3β、β-catenin的表达调控海马神经干细胞的定向分化,对围鲍经期抑郁症起到治疗作用.
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丹参酮ⅡA抑制主动脉瓣成肌纤维细胞向成骨细胞样表型转化的机制
心脏瓣膜钙化是与多种病因有关、由心脏瓣膜细胞主动调节的病理生理过程.该研究以体外培养的猪主动脉瓣成肌纤维细胞作为研究对象,用与心脏瓣膜钙化有关的病理因素肿瘤坏死因子α(TNF-α) 50 μg·L-1处理细胞,将50 mg·L-1丹参酮ⅡA磺酸钠(TSN)与TNF-α共同孵育细胞72 h(3 d),120 h(5 d).采用Western blotting技术和Real-time PCR技术分别检测细胞中的平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)、骨样表型相关的骨形成蛋白2(BMP2)、碱性磷酸酶(ALP)和Wnt/β-catenin信号通路上的关键效应蛋白GSK-3β,β-eatenin基因表达的变化.研究发现,TNF-α能使成肌纤维细胞α-SMA的表达明显增加而成为有转化活性的细胞;骨相关蛋白BMP2,ALP的蛋白和mRNA在对照组和TSN组几乎没有表达,而在TNF-α组表达显著增加(P＜0.01),呈现出成骨细胞样表型;Wnt/β-catenin信号通路中的上游调节蛋白GSK-3β的蛋白及mRNA表达在TNF-α组显著下调(P＜0.01),关键效应蛋白β-catenin的蛋白表达显著增加,但mRNA与对照组、TSN组比较没有明显差异;TSN对TNF-α的这种病理性影响可以起到一定的抑制作用(P＜0.05),并且存在时间依赖性效应(P＜0.05).炎性因子TNF-α可能通过激活心脏瓣膜成肌纤维细胞中的Wnt/β-catenin信号通路,促使心脏瓣膜成肌纤维细胞向成骨细胞样表型转化,进而导致心脏瓣膜的钙化.丹参酮ⅡA能够通过影响GSK-3β蛋白的活性,调控Wnt/β-catenin通路的信号传导,对由炎症所致的瓣膜钙化性疾病起到防治作用.
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亚硝胺致食管癌前病变时Wnt通路抑制因子的变化及膈下逐瘀汤的影响
目的:探讨甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发食管癌前病变Wnt通路抑制因子的变化及膈下逐瘀汤的影响.方法:Wistar大鼠按3.5 mg·kg-1体重剂量皮下注射MBNA溶液,每周2次,造模首日起以膈下逐瘀汤16,8g·kg-1剂量灌胃给药,于造模第10周处死各组大鼠,观察食管黏膜病理变化,荧光定量PCR检测sFRP1,sFRP4,Axin1,Axin2,GSK-3β mRNA转录水平,Western blot检测β-catenin蛋白水平.结果:MBNA诱导下,模型组大鼠食管黏膜病理学检查呈轻度不典型增生,膈下逐瘀汤高、低剂量组与模型组比较病理形态学与组织学均未有明显改善;模型组大鼠食管组织sFRP1,sFRP4,Axin1,Axin2基因转录水平较对照组降低(P ＜0.05或P＜0.01),β-catenin蛋白水平较对照组升高(P＜0.01),膈下逐瘀汤低剂量组sFRP4,Axin1,Axin2基因转录水平较模型组升高(P ＜0.05或P＜0.01),β-catenin蛋白水平较模型组降低(P＜0.01).结论:上调β-catenin蛋白水平、下调Wnt通路抑制因子转录水平从而增强Wnt通路活性是MBNA致大鼠食管癌前病变的可能分子机制之一,膈下逐瘀汤虽可下调β-catenin 蛋白水平、上调Wnt通路抑制因子转录水平,但不足以阻断MBNA诱发的食管癌前病变.
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GSK-3β过表达促进人胶质瘤细胞增殖及侵袭
目的 分析糖原合酶激酶-3(Glycogen Synthase Kinase-3β,GSK-3β)在胶质瘤细胞中的表达水平,探讨GSK-3β对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制.方法 RT-PCR及Western blot分析GSK-3β在人正常星形胶质细胞1800及A172、T98G、U87和U251 4种胶质瘤细胞中的表达水平;将构建的pcDNA3.1(+)-GSK-3β(rGSK-3β)重组表达载体及PAX3 siRNA转染人胶质瘤细U87,MTT法检细胞活力,Transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 与1800细胞相比,4种胶质瘤细胞中GSK-3β的表达水平明显增高(P＜0.05).GSK-3β过表达促进了U87细胞的增殖,同时加强了侵袭细胞的数目(P＜0.05).分析表明,GSK-3β重组体转染显著加强细胞中PAX3的水平(P＜0.05);当用PAX3 siRNA转染沉默细胞中PAX3的水平后,GSK-3β过表达诱导的细胞的增殖及侵袭能力明显降低(P＜0.05).结论 GSK-3β在胶质瘤细胞中过表达,且有可能通过PAX3来调控胶质瘤细胞的增殖及侵袭.
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GSK-3β在相关疾病中的作用及致病机制的研究进展
糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是一种存在于所有真核细胞质中的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,分为α和β两种亚型.研究显示GSK-3β在调控糖代谢,细胞炎症反应,神经及心脏功能和生殖功能中具有重要作用.其致病机制主要是通过磷酸化不同信号通路关键酶从而参与细胞新陈代谢,增殖,衰老,凋亡等生理活动的调控过程.本文主要对GSK-3β可能导致的多种疾病及其发病机制进行综述.
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介孔二氧化硅纳米颗粒经氧化应激所致肾细胞毒性及GSK-3β在其中的作用
研究氧化应激及GSK-3β在介孔二氧化硅纳米颗粒(MSNs)诱导肾细胞毒性中的作用及机制,以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)在此毒性中的保护作用.选用NRK-52E大鼠的肾小管上皮细胞,将其直接或用1μmol/L NAC预处理,然后暴露于400 μg/mL MSNs中.采用MTT法测定细胞活力,采用JC-1荧光染色法检测线粒体膜电势,采用western blot法检测GSK-3β等蛋白水平,并测定抗氧化物SOD、GSH和CAT活性.NRK-52E细胞暴露于MSNs内24 h即出现严重的细胞毒性,其IC50为(438.6±7.1) μg/mL.400 μg/mL MSNs作用24 h后,细胞的存活率下降到47.57％±2.03％,胞内SOD、GSH、CAT活性水平分别下降到39.74％±2.23％、51.42％±3.08％、46.05％ ±3.71％ (P ＜0.001).400 μg/mL MSNs还可显著活化GSK-3β,崩解线粒体△Ψm,促进线粒体Cyt C漏出,并剪切激活Caspase-3,引起细胞死亡(P ＜0.001);1μmol/L NAC干预后可显著缓解400 μg/mL MSNs引起的这些变化(P＜0.01).MSNs通过激活GSK-3β信号通路来诱导肾细胞氧化应激损伤,NAC可以改善线粒体功能,提高细胞抗氧化能力,减轻此损伤.
关键词： 介孔二氧化硅纳米颗粒 氧化应激 GSK-3β 肾毒性 N-乙酰半胱氨酸 -
经典Wnt/β-catenin信号通路在朊病毒感染细胞模型SMB-S15中抑制的研究
目的 检测经典Wnt/β-catenin信号通路在朊病毒感染的细胞模型SMB-S15中的功能状态.方法 运用real time-PCR方法检测了朊病毒感染的细胞模型SMB-S15中,经典Wnt/β-catenin信号通路调控的靶基因mRNA表达水平;应用Western Blot方法检测稳定感染羊瘙痒因子Chandler株的小鼠神经细胞系SMB-S15中经典Wnt/β-catenin信号通路的相关调控蛋白及靶蛋白的表达.结果 与磷酸戊聚糖治愈的细胞对照SMB-PS相比,SMB-S15细胞中经典Wnt信号通路的靶基因cyclin D1、c-myc、survivin转录水平均有显著下调.经典Wnt信号通路的调控蛋白中,磷酸化p-catenin (Ser33,37,Thr41)表达明显上调,且其靶基因cyclin D1的蛋白表达明显下调,失活形式磷酸化糖原合成激酶(GSK-3β Ser9)表达明显下调.结论 在朊病毒感染的细胞模型SMB-S15中经典Wnt/β-catenin信号通路被抑制.
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肺腺癌细胞 A549及其顺铂耐药细胞株A549/DDP中GSK-3β蛋白磷酸化水平的差异
目的：研究人肺腺癌细胞系A549和其顺铂耐药细胞系A549/DDP中GSK-3β的磷酸化和胞内分布以探讨GSK-3β在顺铂耐药中的作用。方法蛋白质免疫印迹法检测A549/DDP和A549细胞质和细胞核中总GSK-3β、p-GSK-3βser9和p-GSK-3βtyr6的表达。MTT法、流式细胞术分别检测顺铂耐药性、肺癌细胞凋亡率。结果 A549/DDP细胞胞质中p-GSK-3βser9水平明显高于A549细胞（P＜0.01），顺铂的处理增加了A549/DDP细胞中p-GSK-3βser9的水平（P＜0.01），相反却减少了A549细胞中p-GSK-3βser9的水平（P＜0.01）。A549/DDP 细胞质中 p-GSK-3βtyr6水平明显低于 A549细胞（P＜0.01），顺铂的处理减少了A549/DDP细胞中p-GSK-3βtyr6的水平（P＜0.01），却增加了A549细胞中p-GSK-3βtyr6的水平（P＜0.01）。结论细胞质中GSK-3β活性受抑可能是非小细胞肺癌顺铂耐药的原因。
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全身振动训练对大鼠骨骼肌的改善及其作用机制研究
目的 通过观察全身振动性训练法(WBV)对去卵巢(OVX)大鼠骨骼肌中过氧化物酶体增殖剂激活受体( PPARγ),β-连环蛋白和磷酸化糖原的表达合成酶激酶-3(P-GSK-3β)蛋白质表达的影响,探讨WBV对绝经大鼠骨骼肌的作用机制.方法 将雌性大鼠随机分成正常对照组(Sham组,n=10),去卵巢组(OVX组,n=10),17β-雌二醇治疗组(E2组,n=10)和全身振动性训练组(WBV组,n=10).测定各组大鼠血清E2和黄体生成素(LH)水平,以及PPARγ、β-连环蛋白和P-GSK-3β在骨骼肌中的表达.结果 OVX组大鼠血清LH比Sham组和E2组明显升高(P＜0. 05). OVX组大鼠血清E2水平与Sham组、E2组和WBV组相比明显上升(P＜0. 05). OVX组骨骼肌PPARγ表达较Sham组显著升高(P＜ 0. 05),而β-连环蛋白和P-GSK-3β蛋白表达较Sham组均显著降低(P＜ 0. 05).在WBV或雌激素替代治疗的干预下,WBV组或E2组的PPARγ表达均显著低于OVX组(P＜0. 05),β-连环蛋白和P-GSK-3β蛋白表达均显著高于OVX组(P＜0. 05).结论 WBV能有效预防OVX大鼠的骨质流失,并提高骨质强度,这可能与抑制OVX大鼠骨骼肌中GSK-3β和PPARγ活性来激活β-连环蛋白信号传导通路有关.
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跑台运动对去卵巢大鼠肝脏 GSK-3β 和 PPAR-γ 蛋白表达的影响
目的:观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠肝脏糖原合成激酶-3β(GSK-3β)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)蛋白表达的影响.方法:80只雌性3月龄SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组、去卵巢静止组、去卵巢运动组和雌激素组,每组20只.除假手术组外,其他三组均切除双侧卵巢,假手术组行相同手术,但不切除卵巢,只切除与卵巢等大的脂肪.去卵巢运动组每周进行5次跑台训练,每次45 min、速度18m/min、坡度5°;雌激素组每周颈部皮下注射3次17β-雌二酵,剂量为25μg/kg体重.各组于去卵巢手术后第7和14周时,各处死一半大鼠取材,用Western blotting方法检测肝脏组织GSK-3β、在Ser9位点磷酸化的GSK-3β(P-GSK-3β)和PPAR-γ蛋白表达量.结果:手术后第7周和14周时,去卵巢静止组大鼠肝脏P-GSK-3β/GSK-3β比值和PPAR-γ蛋白表达量均显著低于假手术组、去卵巢运动组和雌激素组.结论:中等强度跑台运动显著增加去卵巢大鼠肝脏P-GSK-3β/GSK-3β比值和PPAR-γ蛋白表达量.
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丙泊酚对成年大鼠的认知功能及海马CA1区糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的影响
目的:观察丙泊酚麻醉对成年大鼠空间认知功能及海马CA1区GSK-3β水平的影响.方法:成年SD大鼠经尾静脉注射丙泊酚麻醉6h,苏醒后24 h接受莫里斯水迷宫(Morris Water Maze,MWM)训练,观察全身麻醉对大鼠认知功能的影响;采用免疫荧光和Western blot技术,检测大鼠海马CA1区GSK-3β水平的变化.结果:与对照组相比,丙泊酚麻醉组大鼠在MWM任务的隐藏平台(P＜0.01)、反向平台(P＜0.01)和空间探索实验(P＜0.05)的空间学习和记忆能力显著下降;同时伴有CA1区磷酸化的GSK-3β(p-GSK-3β)表达水平的下降(P＜0.05),GSK-3β水平不变(P＞0.05).结论:丙泊酚麻醉可引起成年大鼠空间学习和记忆功能损害,其机制可能与降低海马CA1区的GSK-3β的磷酸化水平有关.
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佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响
目的 探讨佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响及可能的作用机制.方法 利用CCK-8法测定佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1的体外抑制活性,并绘制1、10、100 μmol·L-13个浓度的佛手柑内酯对2种鼻咽癌细胞作用后的生长曲线,然后利用PI染料法检测各组细胞的周期分布.利用Western blotting检测CDK4、CDK6、CDK2、Cyclin D1和Cyclin E2的蛋白表达量,并检测各组β-catenin、GSK-3β及GSK-3β的S9位点蛋白磷酸化水平.结果 佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1具有较显著的体外抑制活性,呈明显的浓度依赖性(CNE-2:r=0.926,P＜0.05;HONE-I:r=0.959,P＜0.05)及时间依赖性(CNE-2:r =0.991,P＜0.05;HONE-1:r =0.963,P＜0.05),随着佛手柑内酯浓度的增加,两鼻咽癌细胞处于G0-G1期的细胞数目比例上升,S期与G2-M的比例下降.相对于对照组,佛手柑内酯能显著降低实验组细胞CDK4、CDK6、CDK2、Cyclin D1、Cyclin E2和β-catenin的蛋白表达量,但对GSK-3β的蛋白表达水平无显著影响,对GSK-3β的S9位点蛋白磷酸化水平的影响也无明显规律.结论 佛手柑内酯能通过阻滞鼻咽癌细胞周期运行抑制其体外增殖能力,这一过程可能与部分周期蛋白的下调及wnt/β-catenin信号通路的被抑制有关.
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芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖、凋亡的影响及机制探讨
目的 观察芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖与凋亡的影响及其机制探讨.方法 分别采用0、15、30、60 μmol/L的芒柄花黄素作用T739细胞后,CCK8法检测T739细胞的增殖情况,流式细胞术检测凋亡率的变化,Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡情况,Western blot检测GSK-3β、Axin、β-catenin蛋白含量变化.结果 15、30、60 μmol/L的芒柄花黄素以浓度和时间依赖方式明显抑制T739细胞的增殖(P＜0.05),且作用T739细胞48 h后凋亡率随药物剂量增加显著上升(P＜0.05),呈浓度-效应关系.Hoechst33258染色显示T739细胞随药物浓度的升高,凋亡明显增多.Western blot法显示GSK-3β及Axin蛋白表达随药物浓度升高而增加(P＜0.05),β-catenin 蛋白水平则随药物浓度升高而降低(P＜0.05),且均呈浓度-效应关系.结论 芒柄花黄素对T739细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与芒柄花黄素上调GSK-3β、Axin蛋白表达和降低β-catenin蛋白水平有关.
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氯化锂对脑缺血预处理后PI3K/AKT/GSK3β通路的影响机制
目的:研究脑缺血预处理(CIPC)中氯化锂对PI3K/AKT/GSK3β信号通路调节变化及影响.方法:制作脑缺血、CIPC及氯化锂干预模型,进行神经功能缺损评分;TTC法脑组织染色计算脑梗死体积;应用Western blotting检测AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β(ser9)、Mcl-1的蛋白表达.结果:与脑缺血组比较,氯化锂组及CIPC组p-AKT、Mcl-1、p-GSK-3β(ser9)的蛋白表达均增高,神经功能缺损评分及脑梗死体积降低(P<0.05);与CIPC组比较,氯化锂组进一步提高了p-AKT、Mcl-1、p-GSK-3β(ser9)的蛋白表达、降低了神经功能缺损评分及脑梗死体积(P<0.05).结论:脑缺血预处理增高p-GSK-3β(ser9)表达,增加p-AKT、Mcl-1的表达.氯化锂可加强脑缺血预处理的这一神经保护作用.
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MicroRNA-153对靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响
目的 mir-153可负调控阿尔茨海默病(Alzheimer'S disease,AD)主要致病基因APP及APLP2的蛋白表达,降低其胞内降解片段(intracellular domains,ICDs)的生成.因ICDs具有转录活化及促凋亡活性,本研究旨在探讨mir-153对这两个靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响,以期进一步阐明mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用.方法 构建mir-153稳转细胞系及mir-153转基因小鼠,Western blot检测该细胞系及小鼠脑内磷酸化GSK-3β、Tau及其总蛋白的表达;Aβ42肽和H2O2分别处理mir-153稳转细胞系,MTS法检测细胞增殖活性的改变,流式细胞术检测细胞凋亡水平的改变.结果 mir-153稳转细胞系中磷酸化GSK-3β及其总蛋白的表达下调,Tau磷酸化水平降低.mir-153转基因小鼠脑内,磷酸化GSK-3β及其总蛋白的表达降低,磷酸化Tau及其总蛋白水平均无明显变化.Aβ42肽和H2O2损伤作用下,mir-153稳转细胞系的增殖活性显著降低,凋亡水平增加.结论 mir-153可负调控靶基因下游信号分子GSK-3β的表达;高表达mir-153可降低细胞抗损伤的能力.
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GSK-3β蛋白在胶质瘤中的表达水平及临床意义
目的：检测正常脑组织和不同级别胶质瘤中GSK-3β的表达以及其意义。方法：收集41例胶质瘤和9例正常脑组织，利用免疫组织化学SP法检测GSK-3β在组织中的表达，分析其表达在不同级别胶质瘤中的差异，进而明确其在胶质瘤进展中的作用。结果：GSK-3β在正常脑组织中呈高表达，为棕黄色细颗粒状，主要表达定位于细胞质中，其在胶质瘤组织中呈低表达，两组比较差异有统计学意义（P<0.01）。进一步的分析发现，GSK-3β的表达水平随着肿瘤级别的升高而逐步下降，WHO分级中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级间比较差异有统计学意义（P<0.01）。但GSK-3β的表达水平与患者的性别和年龄无关（P>0.05）。结论：GSK-3β的表达随着胶质瘤恶性程度的增加而逐步下降，表明其在胶质瘤的发生发展中可能具有抑癌作用，GSK-3β有望成为治疗胶质瘤的一个新靶点。
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硒、锌对老年性痴呆模型小鼠APP酶解通路的保护作用及机制研究
目的 研究硒、锌对老年性痴呆(Alzheimer's,AD)模型小鼠酶解通路的保护作用及机制.方法 选用健康雄性2月龄昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组(NC)、AD模型组、硒[Se,7.5 μg/(kg bw)]+AD组、锌[Zn,5 mg/(kg bw)]+AD组、硒[Se,7.5 μg/(kg bw)]+锌[Zn,5 mg/ (kgbw)]+AD组、脑复康[Piracetam,230 mg/(kgbw)] +AD共6组,每组10只.连续60d腹腔注射D-半乳糖[150 mg/(kg bw)],建立老年性痴呆模型,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中α、β、γ-分泌酶含量以及脑组织中Aβ1-40含量;Western-blot法检测脑组织中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化Tau (Ph-tau)蛋白水平.结果 ELISA法显示,与AD组比较,硒、锌可以增强α-分泌酶活性,抑制β、γ-分泌酶的活性,且硒锌联合作用增强,脑组织中Aβ 1-40含量明显降低.Western-blot法检测显示,与NC组比较,AD模型组GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平升高,而硒、锌处理组和硒锌联合作用组,GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平明显降低.结论 硒、锌通过增加内源性α-分泌酶的活性,抑制β、γ-分泌酶的活性,减少Aβ1-40的生成,降低GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平,可能对AD的发病及进展有一定预防保护作用.
