MK-801对甲基汞致大鼠脑皮质Nrf2及HO-1、γ-GCS、GPx-1表达的影响

目的 观察甲基汞对大鼠脑皮质Nrf2、HO-1 、γ-GCS 、GPx-1 mRNA和蛋白表达的影响,探讨MK-801对其是否具有拮抗作用.方法 Wistar大鼠随机分成4组,对照组:皮下及腹腔注射生理盐水；低、高剂量甲基汞染毒组:皮下注射生理盐水,2h后分别腹腔注射4和12μmol/kg的氯化甲基汞,MK-801预处理组:皮下注射0.3μmoL/kg的MK-801,2h后腹腔注射12 μmol/kg的氯化甲基汞；注射容量为5 ml/kg,干预隔日1次,染毒每日1次,连续干预与染毒4周.后一次染毒24 h后,处死大鼠取大脑皮质,测定大脑皮质汞含量及Nrf2、HO-1、γγ-GCS、GPx-1 mRNA及蛋白表达水平.结果 随着染汞剂量的增加,脑内汞含量明显升高；脑皮质内Nrf2 、HO-1、γ-GCS的mRNA及蛋白表达均明显升高,GPx-1的mRNA及蛋白表达明显降低.MK-801预处理组较高剂量甲基汞染毒组Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达明显降低,GPx-1的mRNA及蛋白表达明显升高,对γ-GCS的mRNA及蛋白表达未见明显改变.结论 甲基汞可导致大鼠脑皮质Nrf2、HO-1、γ-GCS的mRNA及蛋白表达上调和GPx-1的mRNA及蛋白表达下调,MK-801对甲基汞致大鼠脑皮质Nrf2、HO-1、γ-GCS、GPx-1表达的变化有一定的拮抗作用.

HO-1不同活性真核表达载体的构建及鉴定

目的：构建含有HO-1基因的重组载体并将其稳定转染到肝癌细胞系HepG2中。方法采用PCR技术扩增wtHO-1/mHO-1G143H基因片断,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接pcDNA3.1(+)载体与目的片段,转化DH5a菌株感受细胞，获得阳性重组质粒。采用脂质体法转染HepG2细胞系，G418筛选抗性克隆,利用半定量RT-PCR、Western blot检测转染细胞系中HO-1基因的表达。结果成功制作了HO-1活性增高和降低的细胞模型。结论 HO-1不同活性真核表达载体的成功构建，为进一步研究HO-1的功能奠定了基础。

栝楼桂枝汤醇提物对氧化应激PC12细胞内NrF2和HO-1mRNA表达的影响

目的 观察栝楼桂枝汤乙醇提取物(EEGLGZD)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)缺氧损伤时细胞内核因子相关因子2(NrF2)和血红素氧合酶1(HO-1)mRNA表达的影响,探讨中药治疗脑卒中后痉挛的作用机制.方法 将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组、模型组、EEGLGZD低剂量组(0.5 mg·mL-1)和EEGLGZD高剂量组(1 mg·mL-1).采用H2O2诱导PC12细胞建立缺氧损伤模型,倒置显微镜观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度EEGLGZD干预后对细胞增殖的影响;RT-PCR测定药物作用后H2O2损伤PC12细胞NrF2和HO-1 mRNA的表达.结果 MTT检测显示,与模型组比较,EEGLGZD高剂量组和低剂量组的PC12细胞增殖率明显增加(P＜0.01);与EEGLGZD低剂量组比较,高剂量组细胞密度明显增加(P＜0.01).RT-PCR检测显示,与模型组比较,EEGLGZD高剂量和低剂量组的PC12细胞内NrF2和HO-1 mRNA的表达明显增加.结论 栝楼桂枝汤醇提物对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能与上调NrF2和HO-1 mRNA的表达有关.

电针对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和HO-1的影响

血管性痴呆(vascular dementia,VD)是指各种脑血管疾病引起的脑功能障碍而产生的获得性智能损害综合征[1].近年研究发现,电针可以改善VD患者及模型大鼠的学习记忆能力[2-3].大脑皮质和海马神经元凋亡与学习记忆密切相关[4].一氧化碳(carbon monoxide,CO)与神经元细胞凋亡坏死密切联系[5].本研究以皮质和海马神经元为研究对象,选择CO产生限速酶血红素氧化酶(heme oxygenase,HO)基因、细胞凋亡调控基因Bcl-2及Bax为切入点,探讨电针对VD学习记忆作用的分子机制.

针刺保肝护脑对脑缺血再灌注肝损伤大鼠血红素氧合酶-1表达的影响

目的:探讨针刺保肝护脑对脑缺血再灌注肝损伤大鼠血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法:将40只SD雄性大鼠随机分为4组,制作缺血再灌注模型,测试行为学、血清ALT、AST、HO-1含量、肝组织HO-1含量.结果:电针治疗后与模型组相比,针刺对照组和针刺保肝护脑组神经功能缺损评分显著减少(P＜0.01),尤以针刺保肝护脑组效果更为明显(P＜0.05).模型组血清ALT、AST水平显著增高(P＜0.01),而血清HO-1和肝组织HO-1含量明显降低(P＜0.01)；电针治疗后针刺对照组和保肝护脑针法组血清ALT、AST水平明显降低(P＜0.01),血清HO-1和肝组织HO-1显著升高(P＜0.01),尤以针刺保肝护脑组各项变化更为显著(P＜0.05).结论:针刺保肝护脑对脑缺血再灌注大鼠的治疗效果较单纯头穴针刺更为显著,其治疗机理与调节HO-1表达密切相关.

黄芩茎叶总黄酮对高甘油三酯血清刺激的VSMCs增殖的影响

目的:观察黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对单纯高甘油三酯血清(HTG)刺激的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用及可能的分子机制.方法:体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,HTG诱导其增殖,观察SSTF对细胞增殖、细胞周期、CO含量、血红素氧化酶-1(HO-1)平EFLK/p-ERK蛋白表达的影响.结果:50HD mg·L~(-1)的SSTF可明显抑制HTG诱导的VSMCs增殖,增加VSMCs培养上清液中CO的生成量,抑制细胞周期进程(P＜0.05,P＜0.01),并呈时间和剂量依赖趋势;500 mg·L~(-1)的SSTF显著诱导细胞ERK/p-ERK蛋白的表达(P＜0.01),但是对HO-1蛋白的表达无影响.结论:SSTF通过阻滞细胞周期进程直接参与抑制VSMCs增殖的作用,ERK信号通路可能参与SSTF介导的细胞保护作用.

急性冠状动脉综合征患者血清APN、HO-1、Ox-LDL水平与冠状病变程度的相关性分析

目的分析急性冠状动脉综合征（ACS）患者血清脂联素（APN）、血红素加氧酶-1（HO-1）、氧化修饰低密度脂蛋白（ ox-LDL）水平与冠状病变程度的相关性。方法纳入138例被怀疑有冠状动脉疾病的患者，经过冠状动脉照影术的检查并伴随心电图检测，将其分为ACS组78例、稳定型心绞痛（ SAP）组41例和正常的冠状动脉组（ NC）组19例；按照冠脉造影结果分为单支病变组28例，双支病变组39例，三支病变组52例。按照冠状动脉病变狭窄程度不同将ACS患者分为：病变狭窄程度≤50％组19例、51％~75％组20例、76％~90％组49例和91％~100％组50例。采用定量的酶联免疫法测定各组血清APN、HO-1、Ox-LDL水平。结果 ACS组和SAP组患者的血清APN、HO-1水平显著性低于对照组，而Ox-LDL水平显著性高于对照组；同时，ACS组患者的血清APN、HO-1水平显著性低于SAP组，而Ox-LDL水平显著性高于SAP组。三支病变组血清APN、HO-1水平显著性低于单支病变组及双支病变组，而Ox-LDL水平显著性高于单支病变组及双支病变组；双支病变组血清APN、HO-1水平显著性低于单支病变组，而Ox-LDL水平显著性高于单支病变组。病变狭窄程度91％~100％组和76％~90％组患者的血清APN、HO-1水平均显著性低于病变狭窄程度51％~75％和≤50％组的患者，而Ox-LDL水平则均显著性高于病变狭窄程度51％~75％和≤50％组的患者；病变狭窄程度51％~75％组患者的血清APN、HO-1水平显著性低于病变狭窄程度≤50％组的患者，而Ox-LDL水平则显著性高于病变狭窄程度≤50％组的患者。结论 ACS患者血清APN、HO-1、Ox-LDL水平与冠状病变程度密切相关，可作为ACS早期诊断的标记物。

血清HO-1水平在获得性噬血细胞综合征中的临床意义探讨

目的 探讨血清血红素氧合酶-1(HO-1)升高在获得性噬血细胞综合征(HPS)中的诊断价值及监测其病情变化的临床意义,为临床诊疗工作的进一步开展提供理论依据.方法 收集首都医科大学附属北京友谊医院2012年3月至2013年5月期间收治的HPS疑似患者129例,根据HLH-2004诊断标准终分为原发性HPS患者8例,确诊获得性HPS组65例,排除组56例.并选取健康志愿者27例,采用酶联免疫吸附法检测所有获得性HPS患者确诊时、排除组患者、健康志愿者及部分获得性HPS临床治疗有效患者治疗2周后血清HO-1浓度,比较各组间差异.结果 获得性HPS确诊组患者血清HO-1浓度明显高于排除组及正常实验对照组(F=36.835,P=0.000).自身免疫性疾病相关性HPS血清HO-1浓度高于感染相关性HPS及淋巴瘤相关性HPS患者,组间比较差异具有统计学意义(F=4.579,P=0.014).监测36例获得性HPS临床治疗有效患者治疗2周后血清HO-1浓度发现,治疗后血清HO-1浓度明显降低,差异有统计学意义(t=2.536,P=0.01).血清HO-1与NK细胞活性、可溶性白细胞介素-2受体(sCD25)均无明显相关性;与铁蛋白有一定相关,但相关系数较小(r=0.273,P=0.028).结论 血清HO-1在获得性HPS患者中明显升高,尤其在自身免疫性疾病相关性HPS患者中明显高于淋巴瘤相关性HPS及感染相关性HPS,这对于诊断自身免疫性疾病相关性HPS具有重要提示意义,HO-1有可能成为监测获得性HPS病情变化的重要指标.

血红素加氧酶-1诱导对移植肾的保护作用

目的 探讨HO-1在大鼠肾移植模型中的肾保护作用.方法 实验分三组,分别为肾移植组(A组)、HO-1诱导剂氯化高铁血红素(heroin)预处理组(B组)和假手术组(C组).各组在术后4、12、24和48h测血肌酐值,并取肾组织做常规病理切片.用免疫组织化学法检测HO-1表达.结果 与C组相比.A、B组HO-1表达明显增加,hemin预处理后,B组表达较A组高.而肾移植后,A、B组肾功能均明显受损.但预处理后B组明显轻于A组.结论 HO-1对肾移植后早期肾功能具有保护作用,HO-1诱导可能成为一种新的有效的肾移植后肾保护措施.

血红素氧合酶-1与中药抗炎抗氧化作用的研究进展

血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)是哺乳动物体内血红素氧化的限速酶,主要存在于细胞的滑面内质网,能降解血红素,产生一氧化碳(carbon monoxide,CO),二价铁离子(Fe2+)以及胆绿素(biliverdin,BV),后者随即在胆绿素还原酶的作用下转化为胆红素(bilimbin,BR).HO存在诱导型HO-1和结构型HO-2、HO-3三种同工酶,分别由不同的基因编码[1].其中,HO-1是研究多的同工酶,由于多种抗炎、抗氧化中药的药理作用与其密切相关,HO-1及其下游产物在中药领域吸引了越来越多的关注.文本就此做如下综述.

HO-1在保护移植器官防止慢性排斥中的作用

血红素加氧酶(HO-1)是在炎症反应过程中的应激反应性酶,是血红素代谢过程中的限速酶,反应产生等摩尔的铁、胆绿素和CO气体.HO-1的表达调节炎症及免疫反应,其中包括移植器官的排斥反应.现已有许多研究证据表明移植器官中HO-1的表达可以防止移植排斥反应的发生.本文主要就HO-1保护移植器官的主要机制以及由HO-1催化血红素产生的代谢产物分别在对抗移植排斥的发生中所发挥的作用及其机制进行讨论.

HO-1在顺铂诱导豚鼠螺旋神经元损伤中的作用

目的：检测血红素加氧酶-1在豚鼠耳蜗螺旋神经节顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Western Blot技术，观察耳蜗螺旋神经元损伤后HO-1在不同组间的表达变化。将32只健康豚鼠随机分为4组，每组8只。A组对照组：按体重以0.9%生理盐水12ml/kg腹腔注射，早晚各一次，持续3天。B组顺铂组：按体重12mg/kg顺铂腹腔注射（IP），早晚各一次，持续3天。C组阿魏酸（FA）+顺铂组：先150mg/kgFA腹腔注射预处理1h，再以12mg/kg顺铂IP，早晚各一次，持续三天。D组FA+锌原卟啉Ⅸ（ZnppⅨ）+顺铂组：同时给予150mg/kgFA+ZnppⅨ15umol/kg IP预处理1h，再以12mg/kg顺铂IP，早晚各一次，持续三天。采用免疫组织化学及Wstern Blot技术检测不同组间螺旋神经元HO-1蛋白表达变化。结果在不同的分组中，HO-1在耳蜗螺旋神经节中表达量不同。空白组中，螺旋神经节组织存在微弱的HO-1表达，其蛋白表达量为0.48±0.07；A组蛋白表达量为0.81±0.07，B组蛋白表达量为0.9±0.05,C组蛋白表达量为0.61±0.07。4个组两两间差异均有统计学意义（p<0.0001）。结论 HO-1在C组中表达量多，B组次之，D组少，表明HO-1可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。

氧化应激蛋白GSTπ及HO-1在烟草相关口腔癌中的表达

目的 检测吸烟与非吸烟者口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中氧化应激蛋白GSTπ、HO-1及核转录因子NF-κB的表达,初步探讨烟草在口腔癌中的作用机制.方法 随机选取40例OSCC福尔马林固定组织标本、20例OSCC新鲜组织标本以及10例正常口腔黏膜标本.采用免疫组织化学染色和荧光定量PCR方法,检测氧化应激蛋白GSTπ、HO-1及核转录因子NF-κB在吸烟与非吸烟者OSCC组织中的表达.结果 OSCC组织中GSTπ、HO-1和NF-κB表达均显著高于正常口腔黏膜(P<0.05).吸烟者OSCC组织中GSTπ、HO-1、NF-κB表达高于非吸烟者(P<0.05).结论 氧化应激蛋白GSTπ、HO-1与烟草相关口腔癌的发生发展密切相关,烟草可能是通过激活核转录因子NF-κB,调控其下游抗氧化基因GSTπ、HO-1表达发挥抗氧化作用的.

HO-1的过表达对大鼠移植后肝脏损伤的影响

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在大鼠同种异体移植肝脏的过表达对移植后早期血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝脏结构功能的影响.方法 90只Wistar大鼠随机分为生理盐水预处理组(S1 组)、钴原卟啉预处理组(S2组)和锌原卟啉预处理组(S3组),每组30只.各组随机取出24只分为供受体,供体于预处理后24h行原位肝移植,余6只仅行预处理,分别于供体预处理后24h、门静脉复流后1h和3h各取6只取血及肝组织,分别检测血清ALT、AST、TNF-α水平、肝组织形态学变化及HO-1蛋白表达水平.结果 ①供肝预处理后24h,各组血清转氨酶及TNF-α水平无显著性差异(P>0.05),门静脉复流后各时间点,S2组血清转氨酶及TNF-α水平均低于S1组和S3组(P<0.05),S1组低于S3组(P<0.05);②供肝预处理后24h,S2组肝脏HO-1蛋白即有较高表达,S1组和S3组只有极少量表达;门静脉复流后各时间点,S2组均高于S1 组S3组(P<0.05),S1组高于S3组(P<0.05);③移植肝门静脉复流后3h,S2组肝脏损伤轻于S1组和S3组,S1组轻于S3组.结论 HO-1在大鼠同种异体移植肝脏中的过表达可减少血清TNF-α释放,显著改善移植后的肝脏功能,减轻供肝的缺血再灌注损伤.

探讨神经胶质瘤患者HO-1异常表达及其意义

目的探讨神经胶质瘤HO-1 mRNA的表达及意义。方法通过荧光实时定量PCR法检测18例神经胶质瘤及癌旁组织HO-1 mRNA的表达。结果神经胶质瘤患者HO-1mRNA的表达水平（1.040±0.026）明显高于对照组（0.760±0.017）（P＜0.05）。结论 HO-1 mRNA的表达在神经胶质瘤患者中明显升高，HO-1在神经胶质瘤发病过程中可起到保护作用。

Nrf2-mediated antioxidant and detoxifying enzyme induction by a combination of curcumin and sulforaphane

血红素加氧酶-1基因敲除小鼠的饲养和鉴定

目的 繁殖并鉴定HO-1基因敲除(HO-1-/-)小鼠.方法 将引进的HO-1基因敲除杂合子小鼠,进行SPF级饲养,与C57BL/6野生型小鼠配种繁殖,提取子代小鼠的基因组DNA,PCR法特异性扩增HO-1基因片段,使用双脱氧测序法测得基因序列.子代小鼠出现3种基因型:野生型、杂合子型及纯合子型.杂合子小鼠进一步配种繁殖,以获得更多的基因敲除纯合子小鼠,纯合子小鼠用以课题研究.结果 HO-1基因敲除杂合子小鼠的饲养和繁殖均获得成功,获得了HO-1基因敲除纯合子和杂合子小鼠.结论 正确的饲养繁殖及鉴定方法是从HO-1基因敲除杂合子小鼠中获得纯合子小鼠的有效途径.

辛伐他汀在心肌细胞缺血再灌注中的作用及机制

目的 研究辛伐他汀在大鼠乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤中的保护作用及分子机制.方法 分离培养乳鼠心肌细胞,建立I/R模型,实验分组:正常对照组(Control组)、缺血再灌注组(I/R组)、辛伐他汀预处理组(Sim,按辛伐他汀浓度分为0.1μmol/L、1.0 μmol/L、10.0 μmol/L的低、中、高三个浓度组)、辛伐他汀+锌原卟啉(Znpp)组、辛伐他汀+全反视黄酸( ATRA)组.使用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,检测细胞上清液中CK,LDH的水平变化.运用Western blot分析HO-1、Nrf2的蛋白表达水平.结果 与I/R组相比,1.0 μmol/L、10.0 μmol/L Sim组细胞凋亡率明显下降,LDH、CK平均值明显下降,而HO-1蛋白水平及Nrf2蛋白水平与I/R相比均明显增加.而Znpp会阻断辛伐他汀预处理对心肌细胞的保护作用,ATAR的加入会抑制Nrf2在细胞核的聚集进而抑制辛伐他汀对HO-1的诱导.结论 辛伐他汀预处理诱导大鼠乳鼠心肌细胞HO-1过表达,抑制缺氧复氧心肌细胞凋亡,作用机制可能与Nrf2 -ARE信号通路相关.

血红素氧合酶1在2型糖尿病及并发症中的作用研究进展

近年来,越来越多的研究结果表明,氧化应激和糖尿病之间密切相关,高糖造成机体的氧化应激状态是氧化与抗氧化之间的失衡.抗氧化系统在糖尿病及其并发症发生过程起着重要的作用.血红素氧合酶(hemeo xygenase,HO)是机体重要的抗氧化系统之一,HO-1是诱导型的HO,其在抗氧化应激损伤中的有益作用不断得到肯定并逐渐成为研究的热点,现重点介绍HO-1在2型糖尿病及并发症中的作用研究进展.

血红素加氧酶-1对食管癌细胞株Eca109增殖及凋亡作用的影响

目的 研究血红素加氧酶-1(heme oxygenase,HO-1)对食管癌细胞株Eca109增殖活性及凋亡作用的影响.方法 利用体外设计合成的靶向抑制HO-1的低分子RNA(siRNA)沉默食管鳞癌Eca109细胞HO-1基因的表达,应用RT-PCR、Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白表达水平,分别以MTS法、流式细胞术检测干扰HO-1后食管鳞癌Eca109细胞增殖和凋亡水平.结果 RT-PCR、Western blot检测结果显示转染HO-1 siRNA可以成功抑制食管鳞癌Eca109细胞HO-1的表达；与空白组、阴性对照组比较,HO-1 siRNA干扰组Eca109细胞增殖能力明显减弱,细胞凋亡率显著增加.结论 HO-1siRNA可有效沉默食管癌细胞HO-1的表达,抑制细胞的增殖活性,促进细胞的凋亡.