重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位: 重庆市教育委员会
- 主办单位: 重庆医科大学
- 影响因子: 0.72
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0253-3626
- 国内刊号: 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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弥散加权成像ADC值测量在脑脓肿诊断中的应用价值
目的:探讨弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)和表观弥散系数(apparent diffusion eoefficients,ADC)值测量在脑脓肿诊断和鉴别诊断中的应用价值.方法:10例中经手术病理(8例)或临床随访(2例)证实的脑脓肿,在术前或治疗前接受了常规MRI检查及DWI,弥散敏感系数(b值)采用:b=0s/mm2及b=1000s/mm2,测量了脓腔、脓肿壁、脓肿周围水肿带以及对侧相应正常白质区的ADC值,并计算其平均值.结果:10例脓腔的ADC平均值为(0.57±0.11)×10-3mm2/s,脓肿壁ADC平均值为(1.14±0.06)×10-3mm2/s,脓肿周围水肿带ADC平均值为(1.74±0.21)×10-3mm2/s,对侧相应正常白质区ADC平均值为(0.77±0.05)×10-3mm2/s,它们之间均存在显著性差异(F=165.25,P<0.001;按α=0.05标准行组间比较SNK法检验两两存在显著性差异,P<0.05).结论:DWI的ADC值测量能发现脑脓肿脓腔ADC值的明显降低,且能区分脓肿壁及脓肿周围水肿带,在脑脓肿的诊断与鉴别诊断中有很大的应用价值.
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胚胎大鼠神经干细胞的分离培养及其鉴定
目的:通过培养了解神经干细胞(neural stem cell,NSC)生物学特性,为深入研究其体内外分化奠定基础.方法:分离培养大鼠胎脑NSC.通过单细胞克隆实验检测其自我更新能力、增殖能力和生物学特性;免疫细胞化学检测NSC特征性标志nestin表达和分化能力;BrdU掺入实验检测细胞增殖状态;并比较EGF、bFGF对鼠NSC增殖刺激作用.结果:体外传代培养获得的NSC具有多向分化能力、很强的自我更新能力、表达nestin;NSC扩增迅速;传代培养的NSC性能稳定;联合运用EGF、bFGF对NSC增殖作用较单用强.结论:成功培养扩增了大鼠NSC;EGF、FGF联合作用能促进大鼠NSC增殖.
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茶多酚与EGCG对人乳癌细胞株侵袭影响的研究
目的:观察茶多酚和EGCG[(-)-epigallocatechin-3-gallate表没食子儿茶素没食子酸酯]对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231粘附和侵袭运动能力的影响.方法:用125μg/ml茶多酚、EGCG处理后人乳腺癌MDA-MB-231高转移细胞株,分别用MTT法、Transwell侵袭运动实验来研究茶多酚、EGCG对细胞的粘附和侵袭运动能力的影响.结果:经茶多酚、EGCG处理后,MDA-MB-231对细胞外基质成分的粘附能力降低,同时侵袭能力降低.结论:茶多酚和EGCG可能通过抑制肿瘤细胞的粘附和侵袭运动能力来发押预防肿瘤侵袭的作用,茶多酚的抗粘附侵袭能力表现较EGCG显著.
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甲磺酸加替沙星葡萄糖注射液与左氧氟沙星注射液治疗细菌性感染临床疗效观察
目的:评价国产甲磺酸加替沙星葡萄糖注射液治疗呼吸道感染及泌尿道感染的疗效与安全性.方法:25例患者接受甲磺酸加替沙星葡萄糖液200mg,静脉滴注,每日2次;25例接受左氧氟沙星注射液200mg,静脉滴注,每日2次,疗程5~14天.结果:试验组和对照组痊愈率和有效率分别为64%、56%(P>0.05)与92%、88%(P>0.05).两组的细菌阳性率、消除率分别为96%、100%和68%、100%.临床分离的41株致病菌对甲磺酸加替沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、司帕沙星、头孢噻肟的敏感率分别为100%、95.12%、95.12%、92.68%、97.56%,无显著性差异(P>0.05).两组不良反应发生率分别为30.77%和20%,无显著性差异(P>0.05).结论:甲磺酸加替沙星葡萄糖液治疗中、重度细菌感染安全、有效.
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高碘诱导甲状腺细胞凋亡及其机制研究
目的:探讨高碘对正常甲状腺细胞凋亡作用及其相关机制.方法:用不同浓度的碘化钠(NaI)在加或不加白细胞介素β1(IL-1β)和甲巯咪唑(MMI)的情况下干预培养的人正常甲状腺细胞,观察细胞形态的变化,用流式细胞仪检测细胞的凋亡率,免疫组化分析凋亡相关蛋白Fas、FasL、p53的表达情况.结果:用高浓度碘干预的甲状腺细胞变圆、脱壁、逐渐死亡,流式细胞仪检测显示甲状腺细胞随碘的剂量增加凋亡率增加,IL-1β进一步促进了高碘导致的凋亡,而MMI可阻断高碘导致的甲状腺细胞凋亡,高碘处理后凋亡蛋白Fas、FasL表达明显增加,而p53却没有明显变化.结论:高碘呈剂量依赖式的诱导甲状腺细胞的凋亡,IL-1β可促进高碘的这种作用.高碘导致的甲状腺细胞凋亡主要通过Fas/FasL途径,而非p53介导.高碘的甲状腺细胞凋亡作用并不是由碘离子(I-)引起,而是与活跃的碘分子(I2)及其形成的各种化合物密切相关.
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辛伐他汀改善急性心肌梗死后心室重塑与心功能的实验研究
目的:观察辛伐他汀对急性心肌梗死后大鼠心室重塑及心功能的影响,并探讨其可能的机制.方法:结扎大鼠冠状动脉前降支造成心肌梗死模型,给予辛伐他汀干预.8周后,测定心脏重量指数、血流动力学指标、心肌及血液中总-氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,并与假手术组比较.结果:心肌梗死组大鼠右室重量指数(RVWI)、左室重量指数(LVWI)升高(P<0.01),外周动脉压(APS)、舒张压(APD)均降低,心率增快(P<0.01).左室收缩压(LVSP)和心室收缩期室内压上升速率(+dp/dtmax),心室舒张期室内压下降速率(-dp/dtmax)下降(P<0.01),左室舒张末压(LVEDP)升高(P<0.01).血清和心肌NOS、iNOS活性下降(P<0.01).辛伐他汀干预组较心肌梗死组(M组)RVWI、LVWI下降(P<0.01),APS、APD、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax均回升(P<0.01),LVEDP回落(P<0.01);血清和心肌NOS、iNOS活性升高.结论:辛伐他汀减轻左室重塑,改善心功能.
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羟氯喹增加胰岛素抵抗大鼠模型胰岛素敏感性的实验研究
目的:观察羟氯喹对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响.方法:高脂大鼠灌服羟氯喹后用正常葡萄糖钳夹试验测定胰岛素敏感性(GIR60-120),并测量血糖、血脂和胰岛素等.结果:(1)高脂喂养4周,大鼠的空腹血糖、胰岛素、血脂、体重均显著增高,胰岛素敏感性下降.(2)服用羟氯喹、罗格列酮和二甲双胍2周后,高脂大鼠的胰岛素敏感性显著改善,GIR60-120值分别为9.3±1.2、11.6±1.4、9.8±1.3、mg·kg-lmin-1,服用羟氯喹大鼠的血糖、血脂显著低于服安慰剂的高脂大鼠.结论:(1)高脂喂养法成功地制备了胰岛素抵抗大鼠模型.(2)羟氯喹能增加胰岛素敏感性,其作用与二甲双胍相似,但不及罗格列酮;羟氯喹对血糖、血脂也有一定的改善作用.
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COPD机械通气并发呼吸机相关肺炎的综合分析
目的:分析慢性阻塞性肺病(COPD)患者机械通气治疗后并发呼吸机相关肺炎(VAP)的危险因素、发病特点和病原菌分布特点.方法:采用回顾性研究方法,对122例COPD并发呼吸衰竭行机械通气治疗的患者,根据是否并发VAP分为感染组和未感染组,分析其临床特点、病原菌分布及药敏特点等.结果:COPD并发VAP常缺乏典型的临床表现,感染病原菌以革兰氏阴性菌为主,混合细菌感染以及合并真菌感染占较高比例,感染细菌对多种抗生素耐药.VAP的发生率为55.8%,营养状况、合并症、机械通气时间抗生素应用时间、应用糖皮质激素等因素与VAP的发生有关.结论:COPD并发VAP常缺乏典型的临床表现,VAP的发生与多种因素有关,感染病原菌复杂、耐药率高、耐药谱广.通过综合防治措施有助于预防和治疗VAP.
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兔眼前段碱烧伤后房水细胞因子和一氧化氮在眼内炎症反应中的作用
目的:探讨兔眼前段碱烧伤后房水中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及一氧化氮(NO)于眼内炎性反应严重程度之间的关系.方法:将新西兰白兔随机分为正常对照组和碱烧伤组,并于术后1、3、7、14、30天观察术后眼内炎症反应,包括房水细胞计数和分类,同时测定房水TNF-α、NO2/NO3-含量.采用SPSS软件包对实验数据进行方差分析和q检验.结果:碱烧伤后不同时间房水中细胞总数、TNF-α水平及NO2-/NO3-含量均比正常对照组增高,单核巨噬细胞及TNF-α、NO2-/NO3-于7~14天高峰.房水中细胞总数、TNF-α水平及NO2-/NO3-含量与眼内炎性反应严重程度变化规律基本一致,即炎性反应重时含量高.结论:碱烧伤后眼内炎性反应的严重程度与房水细胞因子TNF-α水平及NO含量变化有密切关系.
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Genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3诱导内皮细胞迁移的作用及机制探讨
目的:研究Genistein对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3诱导人内皮细胞系ECV-304迁移的作用,以探讨Genistein抑制血管生成作用的机理.方法:采用微孔滤膜培养小室及双室联合细胞培养方法,观察在0.5%BS培养条件下,SKOV3细胞或其条件培养基诱导的ECV-304细胞迁移以及Genistein对SKOV3细胞或其条件培养基诱导的ECV-304细胞迁移的影响;用免疫组化方法检测血管生长因子VEGF、bFGF及TGFβ-l蛋白的表达水平.结果:SKOV3细胞或其条件培养基对内皮细胞均有较强的趋化作用,Genistein对SKOV3细胞或其条件培养基诱导的ECV-304细胞迁移有呈剂量依赖性的抑制作用.20μmol/L Genistein处理ECV-304细胞48h后,VEGF、bFGF蛋白的表达水平降低,而TGFβ-1蛋白的表达水平升高.结论:GenIStein可明显抑制人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3及其条件培养基对人内皮细胞系ECV-304细胞的诱导迁移作用Genistein可能通过抑制促血管生成调节因子VEGF和bFGF的蛋白表达,增强血管生成的负性调节因子TGFβ-1的蛋白表达来抑制这种迁移诱导作用.
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负载宫颈癌肿瘤裂解物的树突状细胞诱导的淋巴细胞反应
目的:利用树突状细胞(dendritic cell,DC)递呈肿瘤抗原的生物学特性,观察DC负载宫颈肿瘤裂解物抗原后能否促进同种异体T淋巴细胞增殖,并且活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL).方法:宫颈癌患者外周血单核细胞体外经粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)诱导产生DC,肿瘤裂解物和TNF-α共同促其成熟,与异体T淋巴细胞混合共育,以MTT法测定T细胞的增殖程度.结果:宫颈癌患者外周血来源DC无论负载肿瘤组织裂解物还是传代肿瘤细胞裂解物,均可促进异体T细胞大量增殖,二者间无显著差异(P<0.05).结论:DC能递呈宫颈癌肿瘤抗原,诱导产生大量抗原特异性CTL,提示负载肿瘤裂解物的DC具有为宫颈癌患者进行特异性免疫治疗的临床应用前景.
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大鼠创伤性脑损伤后胰岛素抵抗的研究
目的:探讨大鼠创伤性脑损伤后是否存在胰岛素抵抗现象.方法:采用大鼠自由落体脑损伤模型(Feeney'smodel),分别在伤前1/2h及伤后6、12、24、48、72、120h测定轻、中、重型脑损伤动物的血糖和血清胰岛素值.运用正常血糖-高血胰岛素钳夹技术,检测大鼠重型创伤性脑损伤后24h后BG60-120、GIR60-120、ISI等3个反映胰岛素敏感性的指标.结果:中、重型创伤性脑损伤后大鼠血糖含量升高的同时血清胰岛素水平升高,大鼠重型创伤性脑损伤后24hBG60-120显著地升高,GIR60-120、ISI显著地降低.结论:在重型创伤性脑损伤急性期,大鼠血糖和血清胰岛素水平均显著地升高,高水平的胰岛素未能起到相应的降低血糖的作用,与机体产生胰岛素抵抗有关.
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重症肌无力胸腺切除术后机械通气的探讨
目的:探讨重症肌无力胸腺切除术后机械通气的危险因素.方法:1987年1月至2003年8月,我科共收治重症肌无力患才42例,运用统计软件对年龄、性别、病程、临床分型、病理类型、手术时间、术前吡啶斯的明用量、术前激素的使用等因素进行多因素logistic回归模型分析.结果:影响机械通气的主要危险因素有:临床分型、病理类型,且呈正相关.结论:重症肌无力胸腺切除术后临床分型、病理类型等因素可作为是否延长机械通气的选择指征.
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超急性脑梗塞的磁共振波谱分析
目的:探讨超急性脑梗塞的代谢特点及演变规律,为超急性期溶栓治疗和神经保护剂的使用提供病理生理学依据.方法:健康家兔12只,随机分成假手术组5只,大脑中动脉闭塞(MCAO)组7只,采用1.5T超导MR成像仪,Probe 2000多体素MRS软件包进行扫描.MCAO组,选取缺血后0.5h、1h、2h、3h、4h和6h时间点对梗塞区及其镜像区进行磁共振波谱(MRS)分析.结果:(1)假手术组:双侧代谢物对称分布,两侧氮-乙酰门冬氨酸/胆碱类复合物(NAA/Cho),磷酸肌酸和肌酸/胆碱类复合物(Pcr+Cr/Cho)没有显著差别(P>0.05).(2)MCAO组:Lac在缺血0.5h时即可在梗塞区检测到,随缺血时间的延长呈上升趋势.NAA和Pcr+Cr在缺血2h后各时间点与相应镜像区比较均出现降低(P<0.05或>0.01.Cho在缺血3h内保持稳定,4h和6h时间点出现降低(P<0.05).结论:梗塞区脑组织无氧代谢在超急性期持续存在,神经元损伤及能量代谢障碍始于缺血后2h,细胞膜及髓鞘的破坏始于缺血后4h.提示对脑梗塞干预治疗(包括溶栓和神经保护剂的使用)的时间越早越好.
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三氧化二砷诱导人肝癌细胞凋亡及相关分子机制研究
目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞凋亡时,细胞周期及细胞周期调节蛋白的变化,探讨As2O3抗肝癌作用的分子机制.方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡率;透射电镜观察细胞形态变化及细胞凋亡情况;免疫细胞化学检测cyclinD1、cyclinA、p21蛋白的表达.结果:As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G0/G1、S期,与对照组比较,Aa2O3在诱导SMMC-7721细胞发生凋亡的同时,p21蛋白的表达水平显著增高(对照组1.128;As2O3组:3.794),cyclinD1、cyclinA蛋白的表达水平明显下降(对照组:3.647,2.833;As2O3组:1.133,1.179).结论:As2O3能干扰细胞周期的进程,诱导SMMC-7721细胞凋亡.其作用机制与上调p21蛋白及下调cyclinD1、cyclinA蛋白的表达有关.
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体内转导逆转录病毒HSVtk基因对鼠膀胱癌生长的影响
目的:观测瘤体和腹腔内注射逆转录病毒载体HSVtk基因对膀胱癌的作用.方法:用鼠膀胱癌细胞(T739)分别建立鼠背部和腹腔肿瘤模型.含HSVtk基因的病毒上清瘤体和腹腔内注射,联合丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)治疗观察肿瘤大小及动物存活时间.结果:接种后约1周所有动物长出肿瘤.HSVtk/GCV处理后,组织原位杂交显示瘤细胞内HSVtk基因mRNA表达.背部和腹腔肿瘤生长明显受到抑制,动物平均存活时间延长(P<0.05)结论:瘤体和腹腔内注射逆转录病毒载体能将HSVtk基因导入膀胱癌细胞,联合GCV治疗显示出较强的抑瘤效应.
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降纤酶治疗急性脑梗死的临床再评价--前瞻性随机双盲对照研究
目的:通过随机、双盲、安慰剂对照的临床研究,对降纤酶治疗急性脑梗死的有效性及安全性进行客观评价.方法:将在我院神经内科就诊的65例急性脑梗死病人随机分为降纤酶组和对照组.降纤酶的首剂量为10U,第2、3次剂量为5U,在发病24h内开始治疗.对照组按同样方式给予安慰剂.评定的终点指标包括脑卒中的临床神经功能缺损程度评分、Barthel指数、副作用、血浆纤维蛋白原(FIB)水平及发病3个月和1年时的病死率及脑卒中复发率.结果:(1)与对照组比较,降纤酶组治疗后血浆FIB水平明显下降(P<0.001),没有增加出血事件及其他副作用的发生.(2)治疗后14天神经功能缺损程度评分、3个月时Barthel指数评分及病死率,降纤酶组与对照组比较差异无显著性.(3)随访1年时,两组病死率比较,差异无显著性,但卒中复发率对照组高于降纤酶组(P<0.05).结论:降纤酶是降解血浆FIB安全有效的药物.在本研究方案下,降纤酶未显示出优于目前治疗急性脑梗死,常用药物的临床疗效.其在适应证、治疗剂量、给药方法及用药时限等方面与临床疗效的关系有待进一步研究.
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危重高血压性脑出血围手术期治疗
目的:探讨危重高血压性脑出血围手术期治疗的意义.方法:回顾性分析近年我科采用微侵袭手术方法治疗危重高血压性脑出血围手术期治疗,包括控制血压,加强呼吸道管的护理,抗生素的合理应用和方案选择以及高血糖、脑水肿、消化道出血、营养等对症治疗.结果:50例危重高血压性脑出血患者,死亡9例,病死率为18%;3月后随访,日常生活能力(Activity Daily Living,ADL)Ⅰ~Ⅲ达76%.结论:危重高血压性脑出血治疗不仅需要手术方法的微侵袭,而且围手术期积极的病理生理学、病原学、营养和对症治疗,对危重患者能否获得较长的生存时间和较好的生存质量至关重要.
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二硝基苯磺酸诱导的鼠溃疡性结肠炎动物模型
目的:建立一种由2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)动物模型.方法:用18%的DNBS乙醇溶液0.25ml灌肠,在Wistar大鼠上建立UC模型.结果:DNBS/乙醇灌肠后,实验鼠出现血性腹泻,持续2~3天,而粘液性腹泻持续时间长达21天.结肠病理表现为充血、水肿、局限于粘膜内的溃疡、杯状细胞排空、隐窝脓肿等.结论:DNBS/乙醇诱导的鼠UC模型类似于人UC,具有操作简单、重复性好、毒性小、价廉的优点.
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食管贲门癌合并糖尿病的围手术期处理
目的:探讨总结食管贲门癌合并糖尿病的围手术期营养支持和并发症防治经验.方法:回顾分析了本组1976年~2003年7月,74例食管贲门癌合并糖尿病开胸手术病例.结果:本组病例占同期食管贲门癌手术病例的6.1%,总的并发症发生率12.2%(其中肺部感染2例,伤口感染1例,吻合口瘘2例,高渗非酮性昏迷2例及低血糖2例);死亡1例,围手术期死亡率1.4%(肺部感染致呼吸衰竭).结论:食管贲门癌合并糖尿病在其手术中并不少见(6.1%).充分术前准备,加强术中麻醉管理和术后营养支持,有利于降低食管癌、贲门癌合并糖尿病患者围手术期并发症和死亡率.
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HepG2/Adm裸鼠移植瘤的建立及多药耐药特性评价
目的:建立一种人肿瘤多药耐药(MDR)细胞株裸鼠移植瘤模型并探讨其多药耐药机制,为体内研究逆转肿瘤多药耐药提供模型.方法:SPF级动物常规饲养,裸鼠腋窝皮下接种1×109个细胞,观察其成瘤率及生长特性;MTT法检测药物敏感性;流式细胞术、PR-PCR法检测裸鼠移植瘤细胞与原代细胞的耐药特征.结果:HepG2/Adm裸鼠移植瘤的成瘤率100%;HepG2/Adm细胞及HepG2/Adm裸鼠移植瘤对阿霉素(ADM)的IC50分别为4.21μg/ml和4.10μg/ml,两者比较未见显著性差异(P>0.05).原代及裸鼠体内HepG2/Adm的p-gp、MRP及LRP的表达率分别为92%和91.8%,88.7%和88.1%、81.1%和80.7%,差异无显著意义;二者MDR相关基因mRNA表达量无差异(P>0.01).结论:以细胞建立的裸鼠移植瘤模型具有多药耐药特性,为研究人肿瘤MDR提供了理想的动物模型.
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携带IRES的BMP2绿色荧光蛋白表达载体的构建和表达
目的:构建携带有BMP2基因的pIRES2绿色荧光蛋白表达载体,为BMP2在体内外表达及蛋白定位提供标记.方法:酶切pCDAN3.1-BMP2质粒,获得BMP2cDNA片段并亚克隆至pUC18载体上,随后用SalⅠ单酶切pUC18-BMP2,再次获得BMP2cDNA,同时用SalⅠ将载体pIRES2-EGFP线性化后去磷酸化修饰.连接二者构建重组质粒.酶切筛选阳性克隆并鉴定插入的方向.重组质粒转染细胞,用激光共聚焦显微镜、RT-PCR及流式细胞仪检测基因在细胞内的定位、表达及转染效率;结果:重组载体经酶切和测序证明构建正确,并在细胞中表达.结论:成功构建了pIRES2-BMP2-EGFP表达载体,为研究BMP2的细胞内定位提供了一个重要而方便的工具.
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Wnt/β-连环蛋白信号途径活性的分析系统的建立
目的:建立Wnt/β-连环蛋白信号途径功能活性的分析系统.方法:首先构建一个表达β-连环蛋白-绿色荧光蛋白的融合蛋白的载体,pCMV-bcGFP;再用之转染HEK293细胞,用G418和LiCl筛选出稳定表达该融合蛋白的细胞,克隆建株并鉴定.结果:成功获得稳定表达该融合蛋白的细胞株,即293-bc-GFP细胞株;在荧光显微镜下以及蛋白质印迹分析证实:所获得的293-bc-GFP细胞株表达该融合蛋白的基础水平极低;用Wnt1和LiCl处理后可以明显地使该融合蛋白在细胞内的水平升高.结论:上述结果提示该分析系统是以Wnt依赖的方式、受β-连环蛋白调节的.该分析系统可以用作一个功能报告系统,以鉴定肿瘤发生中导致β-连环蛋白信号途径失调的潜在的上游因子,也同样可以用于筛选那些特异抑制人类肿瘤中β-连环蛋白信号途径活性的潜在的抗癌分子.
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重组SARS-CoV刺突蛋白基因片段的原核表达及纯化
目的:冠状病毒(SARS-CoV)的刺突蛋白(spike glycoprotein,S蛋白)是病毒的主要结构蛋白之一,也是重要的病毒抗原,重组S蛋白的表达可用于检测病毒感染后血清抗体.方法:根据抗原性预测分析结果,将S蛋白中抗原决定簇的编码基因重新拼接成两个新的基因,通过全基因合成方式直接合成至原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,Ni-NTA试剂盒纯化目的蛋白.结果:SDS-PAGE证实重组S蛋白的表达,并被纯化.结论:重组刺突蛋白的表达及纯化,可做为检测SARS-CoV抗体的抗原,有助于进一步开展SARS-CoV相关研究.
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奥沙利铂对 K562细胞体外生长的影响
目的:观察奥沙利铂对人白血病K562细胞的作用.方法:检测奥沙利铂对K562细胞作用的时间效应和剂量效应,在电镜下观察奥沙利铂作用后细胞形态变化;用流式细胞仪分析细胞周期的改变.结果:随着作用时间及药物浓度的增加,奥沙利铂对K562细胞的增殖抑制作用就越明显.0.016mmol/L奥沙利铂作用72h,K562细胞生长抑制率达85%,形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞和细胞凋亡.结论:奥沙利铂诱发的人白血病细胞的凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关.
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单肺通气、人工胸水辅助高强度聚焦超声治疗肝肿瘤的安全性观察
目的:为评估单肺通气、人工胸水隔离肺组织对位于肝脏膈顶部和肝边缘区域肿瘤进行高强度聚焦超声(HIFU)治疗的安全性.方法:12例肝肿瘤患者在双腔气管插管全麻下,右侧胸腔注入生理盐水形成人工胸水,HIFU治疗时左肺进行100%FiO2通气.于插管前(Base值)、双肺通气30min(DLV30)、单肺通气(OLV)15min、30min、60min、120min,再次双肺通气30min(DLV'30分别抽血气分析;持续监测ECG、HR、MAP、SPO2、PETCO2;治疗后1d、7d胸部X片观察胸水转归.结果:所有患者在人工胸水单肺通气期间血气和血液动力学各指标均保持稳定.PO2在双肺和单肺通气期间均高于Base;P分别<0.01和0.05,PCO2、pH均稳定,MAP在DLV30min;OLV30min、60min下降,但在生理正常值范围内;人工胸水7天时各例患者均完全吸收.结论:单肺通气、人工胸水是协助HIFU治疗肿瘤有效安全的方法.
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肝癌中P27的表达及其意义
目的:研究P27蛋白在肝细胞癌中的表达和意义.方法:选取经手术治疗的肝癌患者标本50例,癌旁组织22例,正常肝组织9例,用免疫组化方法检测这些组织中P27表达指数(P27LI).结果:肝癌组织中P27LI比癌旁组织高(P=0.002),而癌旁组织比正常对照肝组织高(P=0.007).P27蛋白的表达与肿瘤的分化、分期、肿瘤直径大小以及有无门静脉侵犯和有无肝内转移相关.P27LI≥50%的肝癌患者术后生成时间明显延长(P=0.004).结论:P27在早期肝癌中有阻止癌细胞增殖的作用,其在肝癌组织中的表达有助于判断肿瘤的进展程度,是一个有用的预后指标.
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C-反应蛋白对初发急性脑梗死患者神经功能康复预测的相关性研究
目的:根据发病或入院时血清和脑脊液C反应蛋白(CRP)浓度预测初发急性脑梗死患者出院时的神经功能康复.方法:本实验将46例初发急性脑梗死住院患者作为观察组,25例与观察组相匹配的骨折、阑尾或胆囊摘除手术病人以及健康体检者作为对照组;检测其血液及脑脊液CRP的含量;并应用SPSS 10.0统计软件包进行统计学分析;结果:ACI患者血液和脑脊液CRP显著高于恢复期患者和对照组(P<0.01);血液和脑脊液NSE含量与出院时神经功能缺损程度呈显著正相关(P<0.01);结论:脑脊液或血清中的CRP浓度,反映了神经元的损害程度,也是脑组织破坏后较合适的生化标记物;有助于预测初发脑梗死患者出院时神经功能康复,也可以作为筛选早期康复对象的依据.
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血管紧张素Ⅱ与糖尿病大鼠足细胞损害的实验研究
目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在糖尿病大鼠肾小球滤过屏障外层足细胞损害中的作用,以探讨糖尿病肾病的发生机制.方法:实验大鼠分为3组:正常对照组(C)、糖尿病组(D)和氯沙坦治疗病鼠组(DT),实验第5周末检测肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和尿白蛋白排泄率(UAER)的水平,利用透射电子显微镜观察肾脏足细胞超微结构,同时用免疫组化技术检测肾小球足细胞损伤标志蛋白-desmin蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,糖尿病组大鼠肾皮质SOD和CAT活性显著降低,而MDA含量明显增加,肾小球内desmin蛋白表达上调,足细胞部分足突融合,尿白蛋白排泄率增高;AngⅡ1型受体拮抗剂氯沙坦明显减轻糖尿病大鼠肾皮质SOD、CAT、MDA及肾小球内desmin蛋白表达的改变,减轻足细胞足突融合,降低尿白蛋白排泄率.结论:糖尿病时AngⅡ参与增高肾组织氧化应激,损害肾小球滤过屏障外层足细胞的结构和功能,促使糖尿病肾脏损害和蛋白尿的发生.
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结核性胸液淋巴细胞行为的单细胞定量研究
目的:为探讨结核性胸液淋巴细胞行为的特点及在病理过程中的意义.方法:采用单细胞微管吸吮技术,分别检测正常人外周血淋巴细胞、结核性胸膜炎患者外周血淋巴细胞、胸液中淋巴细胞与肺血管内皮细胞的粘附特点.结果:结核性胸膜炎患者外周血淋巴细胞的粘附性(2.83±0.43Pa)较正常人(1.21±0.25Pa)明显增强,但结核性胸液中淋巴细胞的粘附性(1.67±0.39Pa)却与正常人无明显差别.结论:结核性胸膜炎患者外周血淋巴细胞处刺激激活状态,其粘附性升高有利于贴壁向血管外游走进而向胸膜腔渗出.结核性胸液中淋巴细胞粘附性呈现正常水平可能系由于胸液中高浓度游离型上皮来源的粘附分子将其表面表达的粘附分子饱和的缘故.此现象提示胸液中的淋巴细胞,不易回吸收,其去除多以凋亡方式,好籍助外力清除(胸穿抽液).
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心包穿刺置管引流术在较大量心包积液中的临床应用
目的:探讨心包穿刺引流术的方法、引流时间、引流的体位、引流液量的控制.方法:患者取半卧位,超声心动图定位穿刺点、穿刺深度及方向.40例患者均经剑突下进针.采用Seldinger's法,将中心静脉导管送入心包腔内,连接无菌引流袋引流积液.结果:40例患者心包穿刺均获成功,未出现并发症.引流导管留置时间1~7天,平均1.5±2天.引流积液量180~2000ml,平均750±600ml.穿刺引流后患者胸闷、气促明显改善,颈静脉怒张消失.术后患者心率减慢,有显著性意义(相应为105±30次/min,91±31次/rain,P<0.05).心功能亦获明显改善.结论:seldinger导管法用于心包穿刺安全,可避免损伤心肌,引流彻底,疗效可靠.
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监测麻醉用于门诊隆胸术的观察
目的:观察监测麻醉(MAC)用于门诊隆胸术是否优于传统的区域阻滞麻醉.方法:32例受术者分为MAC组和对照组(Con),MAC组给予芬太尼、异丙酚后行区域阻滞麻醉;对照组行传统的区域阻滞麻醉.结果:麻醉效果:MAC组优良率高于Con组P<0.01;MAP和HR的改变:MAC组P>0.05;Con组术中高于术前P<0.05;呼吸:两组的SpO2低值比较P>0.05;局麻药毒性反应:Con组高于MAC组P<0.01;术毕至离院时间:PADSS评分≥9分,所需的时间≥120min,两组均无1例.结论:MAC用于门诊隆胸术优于传统的区域阻滞法.
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甲亢131I治疗后垂体-甲状腺轴平衡的恢复过程初探
目的:探讨甲亢131Ⅰ治疗后垂体-甲状腺轴平衡的恢复过程,以指导甲亢131Ⅰ治疗后的随访治疗.方法:对我科1997~2000年行住院131Ⅰ治疗的甲亢病人322例定期随访,并测定血清T3、T4和TSH,随访时间3年.结果:131Ⅰ治疗后,甲亢病人血清甲状腺激素和TSH浓度恢复正常的百分概率均逐渐升高,TSH恢复正常的时间明显落后于甲状腺激素恢复正常的时间;部分病例在4~6月有一过性甲低,但绝大多数病例在1年左右恢复正常.结论:甲亢病人经131Ⅰ治疗后,甲亢症状基本在1年内得到控制,但其垂体-甲状腺轴平衡还处在继续恢复中.
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胸骨后甲状腺肿的临床诊治
目的:探讨胸骨后甲状腺肿的临床特点、诊断与外科治疗.方法:回顾性分析28例手术切除胸骨后甲状腺肿病人的临床资料,均经病理证实.结果:28例胸骨后甲状腺肿病人中原发性3例,继发性25例;临床表现主要为颈部包块(25例)、胸闷不适(23例)和呼吸困难(8例).胸部X线检查结合131Ⅰ扫描是术前的重要诊断手段.术后早期发生失语1例,无手术死亡.术后3例复发.结论:疑有本病时应行胸部X线检查及131Ⅰ同位素扫描以期早期诊断.外科手术是本病唯一有效的治疗方法,其预后较满意.
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YL-1型针穿刺碎吸术治疗高血压脑出血死亡原因分析
目的:评估YL-1型针穿刺碎吸术治疗高血压脑出血的价值.方法:对138例采用YL-1型颅内血肿穿刺碎吸术治疗高血压脑出血进行回顾性LOGISTIC回归分析,分别比较年龄、手术时间、入院时GCS和血肿量与病死率的关系.结果:①各年龄组病死率无差别;②出血时间越短,病死率越高;③入院时GCS越低,病死率越高;④血肿量越大,病死率越高.结论:本研究表明年龄不能作为限制YL-1型针穿刺碎吸术指征,手术效果取决于血肿量的大小、出血时间以及入院时GCS.
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静脉腔内激光治疗下肢静脉曲张
目的:评估静脉腔内激光治疗下肢静脉曲张的适应症、治疗效果及术后并发症.方法:38例下肢静脉曲张患者63条患肢中的59条采用静脉腔内激光治疗,另4条患肢配合手术治疗.治疗后3天、7天、1月、3月、9月进行随访.结果:63条患肢中的62条首次治疗后大隐静脉闭塞完全,1条再次治疗后大隐静脉闭塞完全.未出现严重的并发症,随访2~9月无复发.结论:静脉腔内激光治疗是一种有效和安全的治疗下肢静脉曲张的微创新技术;适用于CEAP静脉功能临床分级C2~C6的下肢静脉曲张患者,可联合手术治疗;并发症较少.
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中脑周围非动脉瘤性蛛网膜下腔出血临床分析
目的:探讨中脑周围非动脉瘤性蛛网膜下腔出血(PNSH)的临床特征.方法:分析18例PNSH患者床表现、CT特征、治疗及预后.结果:本组PNSH患者均无意识障碍,Hunt-Hess分级Ⅰ~Ⅱ级.均有头痛,呕吐15例,脑膜刺激征阳性14例,局灶性神经功能障碍2例.所有病例均治愈出院.结论:PNSH患者临床症状轻,并发症少,预后好.应避免重复造影.
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韦氏环原发性非霍奇金淋巴瘤误诊分析
目的:探讨韦氏环原发性非霍奇金淋巴瘤(NHL)临床和病理误诊的原因和避免误诊的措施.方法:回顾性分析我院近10年来韦氏环原发性非霍奇金氏淋巴瘤92例患者的临床资料.结果:92例韦氏环原发性NHL中临床误诊18例,病理误诊72例,1临床和病理均误诊的有18例,平均每例病理误诊约2~3次.误诊疾病为慢性扁桃体炎、扁桃体肥大、咽炎、淋巴组织增生等.全部72例后经病理确诊为非霍奇金淋巴瘤.结论:韦氏环原发性非霍奇金淋巴瘤临床特征缺乏特异性,病理表现复杂,适当取材和依据免疫组化尽早确诊是重要的.
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泌尿系统肿瘤的介入栓塞治疗(附47例报告)
目的:评价介入栓塞治疗泌尿系统肿瘤的疗效,提高介入栓塞治疗泌尿系统肿瘤的水平.方法:采用Seldinger法行经皮穿刺股动脉插管,以无水乙醇碘油混合剂、明胶海绵为主要栓塞物,用选择性或/和超选择性插管技术栓塞治疗肾癌37例、肾错构瘤8例、晚期膀胱癌2例.其中,术前栓塞33例;治疗性栓塞14例.结果:33例肾癌患者栓塞术后肿瘤体积缩小、肾周水肿带明显,手术时出血减少;1例栓塞术后肿块无改变,1月后改行手术治疗;2例Ⅳ期病人行治疗性栓塞,术后存活12~17个月,未再出现血尿;另1例切除术后肿瘤复发患者,行肿块栓塞术后并发截瘫.8例肾错构瘤行栓塞术后随访8个月~5年余,肿瘤体积均有不同程度缩小,无血供,无复发.2例晚期膀胱癌患者行栓塞治疗后出血停止,显著改善生存质量.结後论:介入栓塞治疗泌尿系统肿瘤是一种有效的方法,能提高手术成功率,能大程度保留正常肾组织或显著改善生存质量.其并发症较少,但个别病例往往后果极其严重,应引起高度重视.
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重症阿片类中毒及其纳洛酮抢救的疗效观察
目的:探讨重症阿片类中毒的临床特点及其纳洛酮的疗效.方法:观察32例急诊收治的重症阿片类中毒患者的临床特征,以及纳洛酮治疗后患者的意识和呼吸的改变、起效时间及治愈率.结果:重症阿片类中毒患者临床上表现为意识障碍、呼吸抑制、瞳孔缩小、血压下降,严重的可出现呼吸、心跳骤停.经纳洛酮抢救后,患者呼吸恢复、神志转清,血压恢复正常,而且起效迅速,治愈率可达90.6%.结论:重症阿片类中毒患者病情危重,纳洛酮治疗起效迅速、疗效肯定,值得临床广泛使用.
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缬沙坦在体外对充血性心力衰竭患者血清TNF-α的影响
目的:检测充血性心力衰竭(CHF)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)的浓度变化;观察缬沙坦对CHF患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌TNF-α、NO的影响,探讨缬沙坦治疗CHF的细胞因子机制.方法:12例Ⅲ一Ⅳ级的CHF患者静脉血离心取PBMC,分别加入缬沙坦和脂多糖,使缬沙坦终浓度为(0、0.01、0.1、1)μmol/L,经24h孵化后,检测培养上清液中TNF-α、NO的浓度.结果:CHF患者血清TNF-α、NO显著高于对照组(P<0.01).心功能Ⅳ级组明显高于心功能Ⅲ级(P<0.01).不同病因CHF患者之间TNF-α、NO差异无显著性.不同浓度的缬沙坦对正常人和CHF组PBMC分泌TNF-α、NO均有抑制作用,且随着缬沙坦浓度的升高,TNF-α、NO的分泌呈下降趋势.结论:CHF的程度与TNF-α、NO浓度的相关程度提示TNF-α、NO在CHF的发生和发展中起重要作用,缬沙坦能够直接抑制PBMC分泌TNF-α、NO,可能是血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗CHF的细胞因子机制之一.
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铸造(牙合)垫式可摘局部义齿修复重建咬合3年临床观察
目的:分析造成咬合失调的原因,测定用铸造(牙合)垫式可摘局部义齿进行咬合重建治疗前后的咀嚼效率,比较颞下颌关节紊乱病的临床变化.方法:对73例临床诊断为咬合失调的病例,采用铸造(牙合)垫式可摘局部义齿修复,重建咬合,分别于修复前、修复后3个月和3年,采用ATP肠溶性被膜颗粒吸光度法进行咀嚼效率测试,检查颞下颌关节紊乱病临床症状的变化.结果:铸造(牙合)垫式义齿修复前后咀嚼效率有显著性差异,颞下颌关节紊乱病的临床症状得到缓解.结论:铸造(牙合)垫式可摘局部义齿修复的方法能够有效地重建咬合关系,恢复咀嚼功能,并使颞下颌关节紊乱病的临床症状得到缓解.
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开胸手术后抗利尿激素分泌失调综合征的诊断和处理
目的:探讨开胸手术后抗利尿激素分泌失调综合征(syndrome of inappropriatesecretion of antidiuretic hormone,SIADH)诊断和处理的一些相关问题.方法:对3例开胸手术(1例食管癌根治手术,1例贲门癌根治手术,1例右上肺叶切除术)后发生SIADH的临床资料进行回顾性分析.结果:3例患者均为男性,平均年龄71.4岁(67.5~74岁);在开胸手术后第3~4天,不明原因出现精神症状(谵妄状态),血钠125~126mmol/L、尿钠74.9~l0lmmol/L、血浆渗透压255~280mo sm/kgH2O及尿渗透压540~695mosm/kg H2O;限水800~1000ml/24h 4~6天内血、尿钠及血、尿渗透压恢复正常,精神症状消失.结论:本组开胸手术后发生SIADH均为老年人,常在术后第3~4天左右以不明原因的精神症状为首发症状,根据血、尿钠及血、尿渗透压等可以明确诊断,通过以限水为主的治疗后可在4~6天内治愈.SIADH原因可能与大型手术后应用呼吸机正压辅助呼吸、强烈精神刺激、剧烈疼痛及应激反应使ADH分泌增多有关.
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BECKMAN CX3 DELTA检测脑脊液和尿液总蛋白的应用与评价
目的:评价BECKMAN CX3 DELTA测定脑脊液和尿液总蛋白的优缺点.方法:BECKMAN CX3 DELTA(以下简称CX3)改良双缩脲法测定脑脊液和尿液总蛋白,与磺基水杨酸法相比较.结果:CX3改良双缩脲法和磺基水杨酸法测定脑脊液总蛋白结果(-x±s)分别为303.85±80.44mg/L和297.3±79.43mg/L,两法测定结果无显著性差异(P>0.05);尿液标本无论是正常对照组或病人组,两法的测定结果均有显著性差异(P<0.01).其中维生素C、尿酸对尿蛋白测定有正干扰;加入30%H2O2可消除一部分尿酸等还原物质的干扰,但不甚理想.结论:BECKMAN CX3 DELTA能快速准确地测定脑脊液蛋白,但由于尿液成份复杂,在测定尿蛋白时存在较大偏差,不适合临床采用.
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输液对检验结果的影响
目的:探讨输液过程中采血对检验结果的影响及输液完什么时间采血对检验结果无影响.方法:实验分成4组,每组20人,受试过程均在空腹下进行,所有受试者在输液前采1次血,然后前臂静脉滴注0.9%NaCl 500mi.第1组在输液1h同侧肘窝采血;第2组在输液1h异侧肘窝采血;第3组,输液完后异侧肘窝采血;第4组输液完后1h异侧肘窝采血.分别检测RBC、WBC、HGB、PLT、K+、Na+、Cl-、Ca2+、GLU、BUN、Cr、TP、ALB、AST、ALT、TBIL、GGT、ALP.结果:输液中同侧采血对检验结果影响很大,均有显著性差异(P<0.05);输液中异侧采血及输液完立即采血对很多检测项目结果影响较大;输液完1h采血对检验结果无影响.结论:避免在输液及输液完立即采血,急需时应在输液肢体的异侧采血.
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妥泰治疗多发性抽动症临床研究
目的:观察妥泰治疗儿童多发性抽动症的疗效及其副作用.方法:将多发性抽动症112例患儿随机分为治疗组和对照组各56例.治疗组采用妥泰按1~2mg/(kg·d)每日2次吞服,对照组采用氟哌啶醇1~6mg/d,每日分2~3次口服.治疗期间每月定期门诊复诊.结果:治疗组有效率为83.92%,对照组有效率为80.35%.两组有效率比较差异无显著性(x2=0.061,P>0.05);两组副作用相比有极显著差异(x2=49 863,P<0.0001).结论:妥泰与氟哌啶醇治疗TS同样有效,但副作用较氟哌啶醇明显减少,同时可有效减轻合并症状.
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吻合器痔上粘膜环切术临床疗效观察
目的:探讨吻合器痔上粘膜环切术(PPH)治疗重度痔的疗效.方法:随机采用PPH手术(PPH组11例)和痔环形切除术(对照组12例)治疗重度痔.结果:PPH组手术时间及术后住院时间均较对照组明显降低.PPH组术后疼痛程度轻,持续时间短,术后并发症少.结论:与传统的痔环形切除术相比,PPH手术具有操作简单,手术时间短,术后疼痛轻,并发症少,恢复快等优点,但远期疗效有待进一步观察.
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早期呼吸训练对冠脉搭桥术后患者肺功能恢复的效果评价
目的:探讨冠脉搭桥术后(OPCAB)患者早期使用呼吸训练器对改善肺功能防止肺部并发症的效果.方法:随机将80例不停跳冠脉搭桥患者分为呼吸训练(A)和对照(B)两组进行治疗.结果:呼吸训练组大吸气量在呼吸训练后第1天与对照组有显著差异(P<0.05),第2天至第6天有极显著差异(P<0.01);呼吸训练3天内大吸气量增加尤为明显,两组有显著差异(P<0.05),肺膨胀不全的发生率亦明显减少.结论:术后早期使用呼吸训练器对改善肺功能防止肺部并发症,促进患者康复有良好的效果.为老年手术患者康复提供了一种有效的治疗方法.
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血气分析标本采集的部位探讨
血气分析标本采集的快速与准确,不但可减少病人的痛苦,节约时间,也可帮助医生及时准确地判断病情,采用进一步的治疗.部分文献上虽提到股动脉、桡动脉、肱动脉、足背动脉采血[1-3],也总结了股动脉、桡动脉、肱动脉采血成功率[1],但各部位采血有何优缺点,结果是否有差异却未见报道;理想的采集部位,不但要求结果准确,采集成功率高,并发症少,而且因为该类患者常病情危重,治疗护理措施复杂,因此还要求尽量不干扰其他治疗.
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急性淋巴细胞性白血病并发多器官功能衰竭1例
1 临床资料患者,女,53岁,因发热9天,呕吐、气促1天入院.入院前9天无明显诱因出现发热,体温高达39.9℃,伴畏寒、头疼.在当地医院多次查血常规,白细胞(WBC)在15.0×109~20.0×109/L之间,分类不详.予抗感染、对症等治疗4天,体温下降,症状缓解出院.1天前发生非喷射性呕吐,呼吸急促急诊入院.查体:神清,对答切题.体温37℃,呼吸20次/min,脉搏82次/min,血压108/63mmHg.轻度贫血貌,双侧瞳孔等大,0.4cm,皮肤粘膜无黄染,无淤斑、淤点,浅表淋巴结不大,胸骨无压痛,心肺阴性,肝脾未及,神经系统无阳性体征.实验室检查:WBC 26.0×109/L,中性粒细胞39%,成熟淋巴细胞29%,幼稚淋巴细胞29%,血小板(BPC)74.0×109/L,血红蛋白105g/L;尿素氮2.6mmol/L,肌酐59μmol/L.
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先天性食管闭锁的诊断及外科治疗 (附7例报道)
先天性食管闭锁(congenital esophageal atresa,CEA)是一种严重的新生儿消化道畸形,自然死亡率极高.2001年前我院尚无1例手术成功.随着现代围产医学和新生儿外科的发展,近年来CEA的手术成功率已大为提高.本文对我院两年来手术治疗的7例CEA病例进行总结分析,现报告如下.
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咳嗽变异性哮喘31例分析
咳嗽变异性哮喘(cough variantasthma,CVA),又称咳嗽型哮喘.于1972年由Giauser首先提出该病名.现将近十年我院收治咳嗽变异性哮喘31例,报道如下.
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卵巢移行细胞癌3例
卵巢移行细胞癌(transitional cell carcinoma,TCC)是一类来源于卵巢表面上皮向尿路上皮衍化形成的肿瘤,其组织形态类似于移行上皮且缺乏典型的Brenner瘤成分.卵巢TCC发病率低、恶性程度高、预后差,对其正确诊断、合理治疗及预后评估,都有待妇产科医师的进一步探索和研究.现就我院1985年1月至2003年1月间收治的3例卵巢TCC患者作回顾性分析,并探讨其临床特点、治疗方法及预后.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 z1 |