首页 > 文献资料
-
三氧化二砷染毒小鼠肝脏中砷甲基化水平与肝脏氧化应激的关系
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)染毒小鼠肝脏组织中砷甲基化水平的变化及其与肝脏氧化应激关系,为揭示砷甲基化水平在砷毒性机制中的作用提供依据.方法 将40只昆明种小鼠随机分为对照组(0.9％生理盐水)、As2 O3低中高剂量组(1.0、2.0和4.0 mg/kg)组,连续灌胃5周;采用高效液相色谱与原子荧光联用技术(HPLC-HGAFS)测定肝脏组织中三价无机砷(As3+)、五价无机砷(As5+)、一甲基胂(MMA)、二甲基肿(DMA)含量及构成比(％),计算砷一甲基化指数(PMI)、二甲基化指数(SMI);利用试剂盒测定丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC).结果 随着As2O3剂量增加,小鼠肝脏组织中各形态砷代谢产物含量增加(P ＜0.001),砷甲基化水平(iAs％、MMA％、DMA％、PMI、SMI)提高(P＜0.001);小鼠肝脏MDA显著高于对照组(P ＜0.001),GSH、SOD、T-AOC显著低于对照组(P ＜0.001);1 mg/kg染毒剂量时,PMI与T-AOC呈负相关(P＜0.05),SMI与GSH、SOD呈负相关(P＜0.05);在2 mg/kg染毒剂量时,PMI、SMI与MDA呈正相关(P＜0.05)而与GSH、SOD呈负相关(P＜0.05);在4 mg/kg染毒剂量时,PMI与MDA呈正相关(P＜0.05),PMI、SMI与GSH、SOD呈负相关(P＜0.05).结论 随着砷染毒剂量的增加,小鼠肝脏组织中各种形态砷含量增多,砷甲基化水平提高,进而导致小鼠肝脏氧化损伤严重.
-
三氧化二砷对卵巢癌细胞端粒酶活性及hTERT蛋白表达的影响
目的观察三氧化二砷(As2O3 )对卵巢癌细胞株A2780端粒酶活性的影响.方法应用端粒酶多聚酶联反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法检测As2O3作用后卵巢癌细胞系A2780细胞端粒酶活性的变化并使用流式细胞仪检测hTERT蛋白表达.结果 0.25μmol/ L As2O3 (24～72 h) 可抑制卵巢癌细胞系A2780的端粒酶活性及hTERT蛋白表达,抑制作用呈时间依赖性效应.结论 As2O3可以通过降低hTERT蛋白表达进而抑制卵巢癌细胞的端粒酶活性.
-
三氧化二砷及化疗序贯治疗原始细胞增多及转化的骨髓增生异常综合征的临床观察
联合化疗在高危及转化的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic sydrome,MDS)治疗中的总体疗效不太满意,而且骨髓抑制严重.我院2000-2005年对高危MDS尝试应用砷剂及联合化疗的治疗方法,获得了初步的满意疗效.现报告如下.
-
三氧化二砷联合全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病的临床观察
利用三氧化二砷(As2Oa,以下简称砷剂)或全反式维甲酸(ATRA)治疗急性髓细胞性白血病(APL)已进行了深入的研究.本文对应用砷剂联合ATRA治疗APL进行了临床观察.
-
砷化物对大鼠记忆能力的影响
砷在自然界分布很广,多以重金属的砷化合物和硫砷化合物形式存在.天然水中含微量砷,水中含砷量高,除地质因素外,平时主要来自工业废水和农药的污染,战时来自化学战剂的染毒,投毒也可使水中出现较高浓度的砷.无素砷一般无毒,砷化物(如三氧化二砷AS2O3)有毒,且绝大部分属高毒,其毒性大小与水中的溶解度和价态有关[1].砷有蓄积性,长期经口摄取低剂量砷化物(AS2O3)可造成体内蓄积,引起中毒,可产生心理、行为的影响[2].通过大鼠7,45,90天的饮水染毒观察砷化物亚急性脑巯基的变化及其记忆力的影响.
-
原花青素对砷致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用研究
目的 探讨原花青素(PC)对As2O3所致雄性小鼠的生殖毒性的拮抗作用.方法 选用昆明种雄性小鼠60只,随机分配到对照组、As2O3组,PC组、砷+PC低、中、高剂量组；As2O3按4.0 mg/kg·bw染毒剂量灌胃；PC按100、200和400 mg/kg剂量灌胃；连续染毒5周后,取其睾丸、附睾检测生殖相关指标.采用2×2析因设计和单因素方差分析方法进行分析.结果 As2O3组小鼠体重(26.44±1.87)g、睾丸质量(0.219±0.022)g、睾丸指数0.832％±0.105％均低于对照组[(35.73±3.44)g,(0.252±0.034)g,(1.487％±0.398％),差异有统计学意义(P＜0.01)].As2O3与PC对小鼠体重(F=60.480,P＜0.001)、睾丸脏器指数(F=948.611,P＜0.001),精子计数(F=87.322,P＜0.001),精子畸形率(F=171.304,P＜0.001)交互作用有统计学意义,对睾丸质量的交互作用无统计学意义(F=2.398,P=0.130).As2O3+ PC中、高剂量组的体重、睾丸质量、精子计数均高于As2O3组,精子畸形率低于As2O3组.结论 原花青素对砷致雄性小鼠生殖毒性具有拮抗作用,高剂量拮抗作用效果明显.
-
叶黄素对砷致小鼠肝脏损伤的拮抗作用
目的 探讨叶黄素对三氧化二砷(As2O3)所致小鼠肝脏氧化损伤的拮抗作用.方法 将60只昆明小鼠(雌雄各半)随机分为空白组、对照组、As2O3组、叶黄素组和As2O3+叶黄素组,每组12只.As2O3与叶黄素溶液的灌胃剂量分别为5和40 mg/kg·bw,时间分别为70和35 d.称量小鼠体重、肝重并计算肝脏系数;测定肝组织天冬氨酸转氨酶(AST)与丙氨酸转氨酶(ALT)活力、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、总抗氧化能力(T-AOC)水平、一氧化氮(NO)含量.结果 与对照组相比,As2O3组体重、GSH含量、SOD活力、T-AOC水平、NO含量降低,肝重、肝脏系数、AST与ALT活力、MDA含量升高(P＜0.05);与As2O3组比较,As2O3+叶黄素组的体重、GSH含量、SOD活力、T-AOC水平、NO含量均升高,肝重、肝脏系数、AST与ALT活力、MDA含量均降低,差异均具有统计学意义.结论 叶黄素能够拮抗砷所致小鼠的肝脏毒性和氧化损伤.
-
葡萄籽原花青素对砷致雄性小鼠肝脏毒性拮抗作用研究
目的 探讨葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对三氧化二砷(As2O3)所致雄性小鼠肝脏毒性的干预效果及其抗氧化损伤机制在其中的作用.方法 应用2×2析因设计按体重分层将40只昆明种雄性小鼠随机分为对照组(0.9％生理盐水)、As2O3组(4.0 mg/kg)、GSPE组(400 mg/kg)和As2O3 (4.0 mg/kg)+GSPE(400 mg/kg)组,每组10只,连续灌胃5周;称量小鼠体重、肝重并计算肝脏系数;测定肝组织天冬氨酸转氨酶(AST)与丙氨酸转氨酶(ALT)活力、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、总抗氧化能力(T-AOC)水平;GSPE与As2O3的交互作用采用析因设计方差分析.结果 与对照组相比,As2O3组体重、GSH含量和T-AOC水平降低(P＜0.05),肝重、肝脏系数、AST与ALT活力、MDA含量升高(P＜0.05).析因分析显示As2O3与GSPE两种因素对上述指标的交互作用均有统计学意义(P＜0.05).与As2O3组相比,As2O3+ GSPE组体重、GSH含量、T-AOC水平升高(P＜0.05),肝重、肝脏系数、AST与ALT活力、MDA含量降低(P＜0.05).结论 GSPE可能通过抗氧化损伤机制拮抗砷致雄性小鼠的肝脏毒性.
-
孕期/哺乳期砷暴露对子鼠脑发育的影响
目的 观察孕期/哺乳期环境水平砷暴露对子鼠中枢神经系统发育的影响.方法 对昆明种小鼠全孕期和哺乳期以自由饮水方式连续染毒,饮水砷浓度分别为l、4和16 mg/L,对出生3和21d的子鼠以ICP-MS法测定脑砷含量,HE染色观察脑形态发育.结果 子鼠脑砷含量随母鼠饮水砷浓度升高而升高,呈剂量-反应关系(P＜0.05).光学显微镜下脑形态发育:与对照组比较,染砷子鼠大小脑皮层变薄,大脑单位面积神经元数目减少;染砷子鼠海马出现锥体细胞水肿、核浓缩,锥体细胞层变薄、锥体细胞层数减少,神经毡空隙增大等改变.结论 孕期/哺乳期砷暴露可致子鼠脑形态发育异常;后者可能是砷神经发育毒性的解剖学基础.
-
三氧化二砷染毒小鼠肝功能及砷甲基化水平变化
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)染毒小鼠肝脏组织中砷甲基化水平的变化及其与肝功能损伤的关系,为揭示砷甲基化水平在砷毒性机制中的作用提供依据.方法 将40只昆明种小鼠随机分为对照组(0.9％生理盐水)、As2O3低中高剂量组(1.0、2.0和4.0 mg/kg)组,连续灌胃5周;采用高效液相色谱与原子荧光联用技术(HPLC-HGAFS)测定肝脏组织中三价无机砷(iAs3+)、五价无机砷(iAs5+)、一甲基胂(MMA)、二甲基胂(DMA)含量,并计算砷一甲基化指数(PMI)、二甲基化指数(SMI);利用试剂盒测定天冬氨酸转酶(AST)与丙氨酸转氨酶(ALT)活力.结果 随着As2O3剂量增加,小鼠肝脏组织中各形态砷代谢产物含量增加(P＜0.001),砷甲基化水平(iAs％、MMA％、PMI、SMI)提高(P＜0.001);小鼠肝脏系数、ALT、AST显著高于对照组(P＜0.001);在l mg/kg染毒剂量时,MMA％与ALT、AST呈负相关(rALT=-0.667,PALT=0.005;rAST=-0.649,PAST=0.042),DMA％与ALT呈正相关(r=0.742,P=0.014),SMI与ALT、AST呈正相关(rALT=0.672,rAST=0.649,P＜0.05).结论 随着砷染毒剂量的增加,小鼠肝脏组织中各种形态砷蓄积增多,砷甲基化水平提高,转氨酶活性升高,致小鼠肝功能损伤.
-
砷诱导的肝癌细胞凋亡及端粒酶活性改变
目的研究三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其机制.方法 1 μmol/L As2O3处理培养的人肝癌HCC-9204细胞48 h,用形态学观察、细胞超微结构分析和流式细胞仪检测等方法鉴定细胞凋亡.用噻唑蓝(MTT)比色试验观察蛋白质合成抑制剂放线菌素D对As2O3凋亡诱导作用的影响.用TRAP-PCR-ELISA法检测As2O3处理前后肝癌细胞端粒酶活性的变化情况.结果 1 μmol/L As2O3作用48 h后,HCC-9204细胞出现了典型的凋亡形态学改变和超微结构变化;流式细胞仪检测到大量Annexin-阳性、PI-阴性细胞;放线菌素D可明显拮抗As2O3的凋亡诱导作用.细胞凋亡发生后端粒酶活性显著降低,A450/A630值从2.874降为0.767.结论 As2O3可以有效诱导肝癌细胞凋亡,端粒酶活性降低可能是其中的机制之一.
-
慢性砷暴露对小鼠肾组织DNA损伤及牛磺酸和维生素C的保护作用
目的 探讨砷对肾组织DNA氧化性损伤以及牛磺酸和维生素C的保护作用.方法 小鼠60只,随机分为6组,即:低剂量组(1 mg/L As2O3)、中剂量组(2 mg/L As2O3)、高剂量组(4 mg/L As2O3)、牛磺酸保护组(4 mg/L As2O3+150 mg/kg牛磺酸)、维生素C保护组(4 mg/L As2O3+45 mg/kg维生素C)以及生理盐水对照组,用HE染色法进行组织病理学观察,用免疫组化检测肾组织内8-OH-dG的水平.结果 各染砷组小鼠肾组织出现不同程度细胞肿胀,胞浆空泡变性等病理学改变.免疫组化表明砷暴露组8-OH-dG的表达显著增高.牛磺酸和维生素C保护组肾组织病理学变化较轻,8-OH-dG表达较少(P＜0.01).结论 慢性砷暴露可引起小鼠肾组织DNA氧化性损伤和病理变化,牛磺酸和维生素C具有保护作用.
-
葡萄籽原花青素对砷致小鼠肝脏毒性预防保护作用的研究
目的 观察葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对三氧化二砷(As203)所致肝脏毒性的预防保护效果,揭示其可能机制.方法 将84只昆明种小鼠,随机分为35 d空白组、70 d空白组、35 d GSPE组、70 d GSPE组、砷染毒组、GSPE预防组和GSPE干预组,每组12只,雌雄各半,以GSPE 400 mg/kg、As2035 mg/kg为剂量灌胃给药.测定小鼠体重、肝重、肝脏系数、肝匀浆中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、总抗氧化能力(T-AOC)水平,血清中天冬氨酸转氨酶(AST)与丙氨酸转氨酶(ALT)活力.结果 砷染毒组ALT和AST活性、MDA含量显著高于70 d空白组,SOD活性、GSH含量、T-AOC水平显著低于70 d空白组(P＜0.05);砷染毒组与GSPE干预组、70 d GSPE预防组相比,血清ALT、AST活力增高(P ＜0.05);70 d GSPE预防组ALT及AST活性、MDA含量均低于35 d GSPE干预组(P＜0.05),SOD活性、GSH含量、T-AOC水平均高于35 d GSPE干预组(P＜0.05);GSPE干预组和GSPE预防组较砷染毒组,SOD活力、T-AOC水平、GSH含量均升高,MDA含量均降低(P＜0.05).结论 砷染毒前35 d对小鼠进行GSPE预防性干预,可提高肝脏组织抗氧化能力,有效减轻砷致肝脏毒性作用.
-
三氧化二砷对小鼠小脑氧化还原相关酶基因表达谱的影响
目的 应用基因芯片技术观察三氧化二砷(As2O3)对小鼠小脑组织氧化还原相关酶基因表达谱的影响.方法 昆明种小鼠30只随机分为3组,即生理盐水对照组、低剂量组(1 mg/L As2O3染毒组)和高剂量组(4 mg/L As2O3)染毒组),连续染毒60 d,断头法处死小鼠,利用基因芯片技术检测基因表达谱的变化.结果 基因芯片筛选结果显示,与对照组比较,染砷组中差异表达2倍及以上的基因有18条,其中表达上调的基因有12条,表达下调的基因有6条.高剂量组与低剂量组及对照组比较,表达上调的基因有Ndufa4、Ndufa6、Gpx3、Adil、Rrm2b,表达下调的基因有Spr、Hsd17b11、Ogfod1、Ndufab1.与对照组比较,染砷组中Cyp51、Phgdh、Dhrs4、Prdx4、Aldh1a、1810063805Rik、Glrx表达上调,Prdx2、1110020P15 Rik表达下调.结论 As2O3对小鼠小脑的氧化还原相关酶基因表达谱具有明显的影响,提示这些小脑氧化还原相关酶基因很可能是砷的神经毒作用的靶点.
-
三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展
细胞凋亡(apoptosis)是一个主动的由基因决定的自动结束生命的过程,由于其受到严格的由遗传机制决定的程序性调控,又称编程性细胞死亡(programmedcell death,PCD).细胞凋亡是生物生长发育过程中不可缺少的一个重要方面.及时清除不再需要的细胞,如在胚胎发育中完成生理功能而退化的细胞、被病原体感染的细胞等,才能保证个体正常发育及维持正常的生理功能.
-
三氧化三砷治疗难治性早幼粒细胞白血病报道
目前,以全反式维甲酸(ATRA)进行诱导治疗早幼粒细胞白血病(APL)的完全缓解(CR)率已达85%～90%,但其不足之处是缓解时间短,易复发,容易出现维甲酸综合症和快速发展的严重耐药性,对复发难治性APL的再缓解效果差.近年来报道三氧化二砷(As2O3)对初发APL疗效较好,对复发性APL也有较好疗效,但砷剂对难治APL疗效如何报道较少.我们用As2O3治疗3例难治性APL,获得较好疗效,报告如下.
-
抑制野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1提高肺腺癌细胞对砷剂的敏感性
目的 研究抑制野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WiP1)提高肺腺癌细胞对砷剂的敏感性及其分子机制.方法 设计并合成WIP1编码基因的靶向siRNA,以Lipofectimient 2000转染入肺腺癌A549细胞,从而抑制WIP1蛋白的表达.运用Western-blot检测抑制WIP1对三氧化二砷(As2O3)诱导的P53磷酸化蛋白及其下游效应因子的影响;采用流式细胞术检测抑制WIP1后细胞凋亡情况;以噻唑蓝(MTT)法检测抑制WIP1后细胞的存活率.结果 以siRNA技术成功将A549细胞中WIP1 mRNA和蛋白表达水平均抑制70％左右.相同浓度As2O3 (5 ～ 40 μmol/L)处理后,WIP1表达抑制组细胞中P53 serl5表达低于对照组,而P53 ser46表达显著高于对照组.此外,相同浓度As2O3(10 ～40 μmol/L)处理后,WIP1表达抑制组中P53 ser15下游效应因子-P53上调凋亡诱导蛋白(P53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)的表达水平显著低于对照组,而P53ser46下游效应因子——细胞周期调节蛋白P21的表达显著高于对照组.与之对应的是,相同剂量As2 O3(5～ 40 μmol/L)作用下,WIP1表达抑制组细胞的凋亡率和细胞死亡率均显著高于对照组.结论 抑制肺腺癌细胞中WIP1的表达可通过促进P53磷酸化进程提高砷引发肺腺癌细胞凋亡的效率.
关键词： 野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1 三氧化二砷 凋亡 增敏 A549细胞 -
亚砷酸钠和三氧化二砷对人正常肝细胞增殖与凋亡效应的影响
目的 研究亚砷酸钠和三氧化二砷对人正常肝细胞L02增殖与凋亡效应的影响.方法 分别采用亚砷酸钠和三氧化二砷处理人正常肝细胞L02,比色实验和集落形成实验检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,试剂盒法测定细胞内活性氧水平和谷胱甘肽含量,微核实验评价细胞染色体损伤.结果 随着亚砷酸钠或三氧化二砷染毒浓度的增加,L02细胞的存活率、集落形成率和谷胱甘肽含量均下降,而集落形成抑制率、凋亡率、活性氧水平和微核率均增加,此外细胞周期都被阻滞在G2/M期.结论 亚砷酸钠和三氧化二砷均能诱导人正常肝细胞L02活性氧增加和谷胱甘肽含量下降,继而引起细胞染色体损伤、细胞凋亡、细胞周期阻滞和细胞生长抑制,提示氧化应激是亚砷酸钠和三氧化二砷“致癌”与“治癌”共同的分子机制.
-
白藜芦醇与三氧化二砷联合处理诱导肺腺癌细胞凋亡及其机制探讨
目的 探讨白藜芦醇(RES)与三氧化二砷(As2O3)联合处理诱导肺癌细胞凋亡的作用及机制.方法 以人肺腺癌A549细胞为研究对象,按处理方式分为对照组、单独RES或As2O3处理组及二者联合组,观察RES和As2O3联合处理对细胞存活率、集落形成率、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、线粒体膜电位、细胞凋亡等的影响;同时,加入谷胱甘肽合成酶抑制剂L-丁硫氨酸亚砜胺(L-BSO),观察RES是否通过GSH耗竭导致细胞内ROS蓄积,进而增强As2O3诱导的细胞凋亡.结果 RES单独作用于细胞时,在浓度大于20μmol/L时,A549细胞存活率随浓度的增加而下降.与As2O3单独处理相比,加入60 μmol/L RES组的集落形成率、细胞凋亡率、ROS水平、GSH含量、线粒体膜电位的变化及细胞色素c和Cas-3水平的差异均有统计学意义(P＜0.05).经谷胱甘肽合成酶抑制剂BSO预处理后,RES和As2O3诱导的细胞凋亡由30.0％增加至77.7％,同时细胞内GSH含量锐减而ROS大量蓄积.结论 RES与As2O3联合处理与RES和As2O3单独处理相比,可诱导更多的A549细胞凋亡,其机制可能是RES和As2O3联合处理可降低GSH含量,诱导ROS产生与蓄积,使线粒体膜电位下降和细胞色素c释放入细胞质,活化Cas-3,终诱导细胞凋亡.
-
三氧化二砷亚急性染毒对雄性小鼠生殖与免疫毒性的研究
目的 探讨As_2O_3,亚急性染毒对雄性小鼠生殖与免疫毒性作用.方法 24只清洁级KM雄性小鼠,分为对照组、低、中及高剂量染砷组.分别给予去离子水,As 2.0、4.0、8.0mg,kg体重灌胃染毒7天.实验结束后剖杀动物取睾丸、附睾称重、计算器官指数并测定附睾精子数,摘取免疫器官胸腺、脾脏称重、计算免疫器官指数.结果 (1)高剂量组睾丸及附睾重量低于正常对照组(P<0.05),但各组睾丸指数与对照组没有差异;各染砷组精子数均低于对照组(P>0.05),且中、高剂量组精子畸形率上升显著(P<0.05);(2)中、高剂量组免疫器官重量及指数降低,且高剂量组脾脏重量及指数显著低于对照组(P<0.05).结论 As_2O_3可致小鼠某些生殖和免疫毒性指标改变.
