中华实验外科杂志
Chinese Journal of Experimental Surgery 중화실험외과잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-9030
- 国内刊号： 42-1213/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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埃兹蛋白在肺癌中的表达及其临床意义
目的 观察埃兹蛋白(Ezrin)在正常肺、肺良性肿瘤组织及肺癌的表达,探讨其表达与肺癌侵袭转移的关系及其临床意义.方法 用免疫组织化学SP法检测45例肺癌组织、23例肺良性肿瘤组织、12例正常肺组织中Ezrin的表达,分析Ezrin与肺癌临床病理因素之间关系.结果 12例正常肺组织及23例肺良性肿瘤组织中未见Ezrin表达,而在45例肺癌组织中Ezrin阳性表达率为61.3%(27/45),两者差异有统计学意义(P<0.05).且Ezrin表达与肺癌分化程度、肿瘤转移相关(P<0.05).与患者年龄、性别、肺癌大小无明显相关(P>0.05).结论 Ezrin表达与肺癌的转移及恶性程度有关,有助于预后判断及治疗方法选择.
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Fas相关磷酸酯酶-1在肝癌中的表达及其临床意义
目的 观察肝癌中Fas相关磷酸酯酶(FAP-1)的表达,探讨FAP-1表达与增殖和凋亡的关系,并分析其意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测60例肝癌及15例癌旁肝硬化组织标本中FAP-1蛋白的表达水平,设置10例正常肝组织为对照组.结果 FAP-1蛋白的阳性表达主要定位在细胞质内,少数也可见胞膜着色.FAP-1蛋白在正常肝组织中未见表达,癌旁肝硬化组织中的表达率为6.7%,而在恶性肿瘤中的阳性表达率分别为78.3%,与前两者比较差异有统计学意义(P<0.01).FAP-1 的表达率随肿瘤的转移临床分期晚和肿瘤分化程度低而增加,并与分化程度和转移性显著相关(P<0.05),而与年龄和肿瘤大小无明显相关(P>0.05).结论 FAP-1在肝癌组织中有广泛表达,且在临床有转移分期晚和病理分级低的组织中表达增高.
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骨髓间充质干细胞-壳聚糖凝胶复合体移植治疗椎间盘退变
目的 观察兔骨髓间充质干细胞.壳聚糖凝胶复合体移植修复椎间盘髓核缺损退变的效果.方法 建立兔椎间盘髓核缺损退变模型,将兔骨髓间充质干细胞-壳聚糖凝胶复合体注射移植入缺损退变模型中,兔继续培养4周后处死,取出移植修复的椎间盘进行组织HE染色、Aggre-can番红O染色及Ⅱ-collagen免疫组织化学染色,与正常椎间盘及未行移植的缺损退变椎间盘进行随机对照,检测移植修复的效果.结果 骨髓间充质干细胞-壳聚糖凝胶复合体可以在缺损的椎间盘中正常生长,并呈现向类髓核细胞分化的趋势,合成分泌Ⅱ-collagen和Aggrecan,维持原椎间盘髓核组织的生物学特性,而缺损退变组髓核组织纤维化、完整性丧失,水分丢失,Ⅱ-collagen合成明显减少(P<0.05).结论 兔骨髓间充质干细胞-壳聚糖凝胶复合体能够修复椎间盘缺损退变.
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siRNA腺病毒载体对兔骨髓基质细胞成脂分化的干扰效应
目的 观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因siRNA腺病毒载体阻断乙醇诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化.方法 培养兔MSCs随机分为7组:N:对照组,M:模型组,CO:感染空载体组,C1:感染无关siRNA组,S1、S2、S3:干扰1、2、3组.将重组腺病毒载体转染细胞,检测MSCs内PPARγ mRNA、osteocalcin mRNA、PPARγ蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量,并计数脂肪细胞.结果 N、M、CO、C1组PPARγ mRNA和osteocalcinmR-NA表达值分别为(0.39±0.02)、(0.75±0.03)、(0.74±0.03)、(0.73±0.02)和(1.09±0.19)、(0.50±0.10)、(0.46±0.12)、(0.49±0.13),M、CO、C1组脂肪细胞多,甘油三酯高,ALP活性与骨钙素量均低.S1、S2、S3组PPARγ mRNA和osteocalcin mRNA表达值分别为(0.28±0.03)、(0.30±0.03)、(0.31±0.01)和(0.92±0.09)、(0.87±0.32)、(0.93±0.25),脂肪细胞数、甘油三酯量、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常,与M、CO、C1组间差异有统计学意义(P<0.05),与N组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 该腺病毒载体能阻断乙醇诱导的MSCs成脂分化.
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不停跳冠状动脉旁路移植手术中的内皮素变化
目的 检测不停跳冠状动脉旁路移植(OPCAB)术中、术后不同时段不同部位血浆内皮素水平,观察手术中各个循环内皮素水平的变化.方法 30例冠心病患者分为两组.A组[15例,男13例,女2例,年龄(57.4±8.25)岁]使用左乳内动脉+大隐静脉移植;B组[15例,均为男性,年龄(50.50±7.05)岁]进行全动脉化移植.手术中各桥血管移植前后,分别取冠状静脉、肺动脉、桡动脉血,检测内皮素水平.术后2、24 h分别取肺动脉、桡动脉血,检测内皮素水平.结果 A组,手术中冠状静脉(34.31±15.10)ng/L、肺动脉(35.79±18.89)ng/L、桡动脉(34.65±15.62)ng/L]血内皮素无显著升高;手术后2 h,肺动脉(45.93±20.58)ng/L、桡动脉(52.68±21.46)ng/L血明显升高;手术后24 h,肺动脉(39.21±23.39)ng/L、桡动脉(33.31±21.54)ng/L血下降至术前水平.B组,搭桥前、左乳内动脉搭桥开放后,冠状静脉(36.77±21.45)ng/L、肺动脉(35.50±24.39)ng/L、桡动脉(33.17±20.80)ng/L血内皮素无明显变化;在剩余移植桥开放后,冠状静脉(52.00±20.86)ng/L、肺动脉(48.84±23.26)ng/L、桡动脉(49.66±21.22)ng/L血显著升高.术后2、24 h,肺动脉(52.52±30.34)ng/L、桡动脉(53.72±33.42)ng/L血维持高水平.结论 OPCAB会引起血浆内皮素水平小幅升高.全动脉与乳内动脉+大隐静脉比较术中血浆内皮素升高较早持续时间较长.
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RNA干扰技术抑制人肺腺癌细胞系A549血管内皮生长因子-165蛋白的表达
目的 观察RNA干扰技术能否有效抑制人肺腺癌细胞系A549血管内皮生长因子(VEGF)-165蛋白的表达.方法 体外合成3条VEGF-165序列特异性双链小RNA(shRNA)及1条阴性对照RNA,应用RNAiFectTMTransfection试剂盒转染细胞.Western blot法检测VEGF-165蛋白的表达,MTT及细胞计数法检测siRNA转染对细胞活性的影响.结果 随时间延长,目的siRNA对VEGF165蛋白表达有不同程度的影响,干扰时间越长,效果越明显.自干扰后24 h起,各组VEGF165蛋白的表达差异有统计学意义(对照组相对灰度为0.96±0.27;干扰组24 h相对灰度为0.81±0.10;48 h:0.52±0.12;72 h:0.36±0.10,P<0.05).噻唑蓝(MTT)比色法检测表明不同浓度siRNA及RNAiFect Reagent对细胞生长均无明显的抑制作用,与对照组之间差异无统计学意义(对照组:0.329±0.013;干扰组为0.329±0.017～0.357±0.042,P>0.05).细胞计数法检测表明不同浓度siRNA及RNAiFect Reagent对细胞生长增殖无明显影响.细胞与对照组之间差异无统计学意义(24 h:对照组1.56±0.11;干扰组1.47±0.12.72 h:对照组4.38±0.38;干扰组4.61±0.41,P>0.05).结论 siRNA可以有效抑制人肺腺癌细胞系A549 VEGF165蛋白的表达.
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凋亡抑制蛋白2在胰腺癌中的表达及其与化疗耐药的关系
目的 观察细胞凋亡抑制蛋白2(c-IAP2)在胰腺癌组织中的表达,探讨c-IAP2表达与胰腺癌细胞对化疗药物耐药性的关系.方法 收集胰腺癌标本32例,应用免疫组织化学染色法观察c-IAP2在胰腺癌及癌旁正常胰腺组织中的表达;体外培养胰腺癌细胞PANC-1,间歇浓度递增法诱导胰腺癌细胞株PANC-1对吉西他滨(Gem)的耐药,噻唑蓝(MTT)检测处理前后细胞对Gem的药物敏感性,免疫荧光和免疫印迹检测c-IAP2蛋白表达水平.结果 c-IAP2在胰腺癌组织均有表达(32/32,100.0%)、癌旁正常胰腺组织(8/18,44.4%)中有表达,胰腺癌表达水平显著强于癌旁正常胰腺组织.c-IAP2的表达强度在不同分化程度的肿瘤组织中的差异有统计学意义(P<0.05).药物培养3个月后,PANC-1对Gem的半数有效浓度(IC50)由(6.03±0.27)mg/L升高至(41.60±1.14)mg/L(P<0.05),免疫荧光和免疫印迹结果显示耐药亚株c-LAP2蛋白表达水平较亲本株升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 C-IAP2在胰腺癌分化程度和对吉西他滨耐药过程中有一定作用.
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脱细胞软骨支架材料的制备及物理性质
目的 探讨脱细胞软骨生物支架材料(ACM)的制作方法,使其在孔隙率、比表面积、弹性模量等物理性质更加接近天然软骨.方法 猪膝关节软骨冻干加工为粉末,0.25%胰酶消化,1%曲拉通洗脱,蒸馏水洗净冻干,8 W 312 nm紫外线照射(UVI)后成型;扫描电镜观察孔径分布,压汞仪测定孔隙率等参数;INSTRON 5544对ACM进行抗雎弹性模量测定.结果 脱细胞生物支架材料为白色,略微发黄,外表呈多孔疏松网状结构,脆性大并有一定弹性;ACM孔隙率为68.54%,平均孔径为47.13 μm;ACM弹性模量为(1.05±0.38)MPa.结论 ACM在孔隙率、比表面积、平均孔径等方面符合关节软骨支架材料的要求.
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血清胰岛素样生长因子-Ⅱ、血管内皮生长因子、白细胞介素一Ⅱ和干扰素-γ水平在肝癌微波消融治疗前后的变化
目的 观察大鼠在肝癌微波消融治疗前后血清胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅱ、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-2和干扰素(IFN)-γ水平的变化.方法 80只SD大鼠,随机分4组,正常组除抽血检测外不做任何处理,其余3组行肝癌细胞种植,对照组尾动脉抽血检测,手术组行手术切除肿瘤,消融组消融肿瘤,ELISA法测定血清IGF-Ⅱ、VEGF、IL-2和IFN-γ水平并比较3周后4组间IGF-Ⅱ、VEGF、IL-2和IFN-γ水平的变化情况.结果 对照组第5周较第3周时血清IGF-Ⅱ[(1.93±0.45) μg/L比(1.16±0.21)μg/L]和VEGF[(395.72±55.28)ng/L比(248.43±1.71)ng/L,P<0.05].经手术治疗或微波消融治疗后血清IGF-Ⅱ(0.65±0.18比0.73±0.16)和VEGF[(129.35±51.46)ng/L比(135.63±33.37)ng/L]水平明显下降,而IL-2、IFN-γ水平则明显升高.结论 IGF-Ⅱ可直接或通过增加VEGF的合成促进肿瘤血管形成,可作为原发性肝癌的诊断、判断愈后与跟踪随访的重要指标.微波消融治疗肝癌是一种有效的方法.
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人工寰齿关节置换后寰枢椎部件抗拔出强度的生物力学研究
目的 观察人工寰齿关节置换后寰枢椎部件抗拔出力强度,评价其生物力学性能.方法 在10具正常成年人尸体寰枢关节湿性标本上行人工寰齿关节置换后,在MTS858 Mini Bion-ix生物力学实验机上行寰枢椎部件大轴向拔出力(F-max)实验.结果 寰椎部件大拔出力(894.36±102.30)N,枢椎部件大拔出力(1227.59±143.35)N,寰椎部件钉道长度(20.69±1.43)toni,枢椎部件钉道长度(24.03±1.31)mm,寰椎部件屈服长度(1.51±0.11)mm,枢椎部件屈服长度(1.59±0.12)mm.寰枢椎部件的大拔出力之间和寰枢椎部件的钉道长度之间差异有统计学意义(P<0.05).寰枢椎部件的屈服长度之间差异无统计学意义(P>0.05).寰枢椎部件大拔出力与钉道长度呈显著正相关(r1=0.880,P<0.05).寰枢椎部件大拔出力与屈服长度也呈显著正相关(r2=0.606,P<0.05).结论 人工寰齿关节置换后寰枢椎部件具有较好的抗拔出力性能.寰椎部件螺钉采用单皮质固定,枢椎部件螺钉采用双皮质固定,钉道长度是影响寰枢椎部件拔出力的蕈要因素.
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微囊化胰岛与滋养细胞对鼠胰岛功能和活性的影响
目的 研究微囊化滋养细胞对胰岛功能和活性的影响.方法 对单独、分别和联合微囊组胰岛素含量及不同条件(5.6、16.7mmol/L葡萄糖、16.7mmol/L葡萄糖+10mmol/L茶碱)下胰岛素释放试验进行检测;监测3组(每组8例)小鼠平均空腹血糖(FIG),将胰岛的功能和活性进行对照.结果 体外,联合组胰岛素含量(288±25)、(292±29)、(203±21)mmol/L及在胰岛素释放试验中的反应性(306±25)、(335±26)、(378±32)mmol/L均好于另两组,差异有统计学意义(P<0.01);移植后,单独组(27.3 d)、分别组(30.5 d)维持FPG<6.0的时间明显少于联合组(66.8 d),联合组恢复高血糖状态的平均时间为91.7 d,差异有统计学意义(P<0.01).结论 滋养细胞与胰岛联合微囊化能够改善胰岛的存活状况,提高其生物活性,并维持其分泌功能.
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携氧型保存液对兔肾的低温保存效果
目的 观察携氧型保存液对兔肾脏低温保存的效果.方法 将60只日本纯种大耳兔随机分为A(H-CA液,保存48h)、B(携氧保存液,保存48 h)、C(UW液,保存48 h)、D(H-CA液,保存72 h),E(携氧保存液,保存72 h)、F(UW液,保存72 h)6组.切取左肾,灌洗并放入该组保存液保存.肾动脉、静脉分别与右侧髂外动脉、髂外静脉端端套管吻合,输尿管腹壁造瘘,同时切除右侧肾脏,检测移植前后肾功能指标.结果 手术成功率95%,携氧型保存液各组术后血肌酐的峰值均低于H-CA液组,且血肌酐恢复正常的时间也较H-CA液组早(P<0.05);以上各指标与UW液组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 含全氟三丁胺携氧型保存液对供肾的保存效果明显好于H-CA保存液,可安全保存兔肾72 h.
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变异型IκBα抑制胶质瘤中Epo、EpoR的表达及肿瘤生长的研究
目的 探讨变异型IκBα(IκBαM)基因对人类多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞中促红细胞生成素(Epe)和其受体(EpoR)表达的调控作用及其与肿瘤血管新生的关系.方法 建立稳定表达IκBαM的人类GBM细胞株并制作裸鼠皮下异位移植瘤生长模型,采用免疫组织化学法分析肿瘤组织中Epo、EPOR和FactorⅧ的表达.同时分析肿瘤组织中的微血管密度以及运用流式细胞术分析凋亡率.结果 各组肿瘤组织中,Epo的阳性细胞表达率分别为(54.8±12.4)%(G36△组)、(65.7±15.6)%(G36△-W组)、(6.1±10.1)%(G36△-M组)和(68.3±11.4)%(G36△-P组);EpoR的阳性表达率分别为(33.6±16.4)%(G36△组)、(37.3±13.9)%(G36△-W组)、(2.5±17.5)%(G36△-M组)和(37.2±14.4)%(G36△-P组).Epo和EPoR在G36△-M组中的表达显著低于其他三组,而在后三组间的表达差异无统计学意义.各肿瘤组织中肿瘤细胞凋亡率分别为(8.31±1.85)%(G36△组)、(8.06±2.08)%(G36△-W组)、(28.35±3.26)%(G36△-M组)及(7.40±2.35)%(G36△-P组),G36△-M组中的肿瘤细胞凋亡率明显高于其他三组;而G36△-M组中的微血管密度明显低于其他各组.结论 IκBαM基因可显著降低人类恶性胶质瘤中Epo和EpoR的表达,进而减弱肿瘤细胞的促血管新生的能力,促进肿瘤细胞凋亡,从而抑制肿瘤组织的生长.
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体外循环对大鼠脑血管功能的影响
目的 观察不同体外循环时间和体外循环模式对脑血管功能的影响.方法 将30只大鼠平均分为5组,分别建立不同体外循环模型.取右大脑中动脉,在不同压力下进行肌源性活动功能检测,观察在不同浓度乙酰胆碱溶液中内皮细胞相关舒张反应强度和利用硝普钠和血管紧张素观察平滑肌细胞相关血管舒缩反应.取海马区脑组织进行微血管内皮细胞超微结构观察.结果 各组大鼠均成功建立和脱离体外循环.代表肌源性活动功能的MCA收缩百分率深低温低流量组为(34.62±2.36)%,深低温停循环组为(33.83±2.28)%,较正常对照组(37.75±1.92)%明显受损(P<0.05).在不同乙酰胆碱浓度下,体外循环组内皮细胞相关的血管舒张率为(8.59±1.48)%,较正常组(24.26±1.90)%明显受损(P<0.05).深低温低流量组和深低温停循环组损伤较常温组明显加重.血管平滑肌相关的收缩舒张功能各组均处于正常范围.结论 体外循环早期即可引起脑血管内皮细胞相关的血管舒张功能受损,深低温转流可引起脑血管自主调节功能降低.而这可能是体外循环后脑损伤的重要机制之一.
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吲哚胺2,3双加氧酶在丁酸钠诱导未成熟树突状细胞介导T细胞无能的机制
目的 观察吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)在丁酸钠诱导不成熟树突状细胞(DC)抑制T细胞免疫反应中的作用.方法 通过粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4体外诱导入外周血来源的DC,第6天加入丁酸钠和不同促成熟因子继续诱导DC分化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Real-time PCR检测各组IDO mRNA的表达.混合淋巴细胞反应检测各组刺激T细胞增殖能力,进一步在丁酸钠组和对照组分别加入IDO的阻断剂1-甲基色氨酸(1-MT)后了解对T细胞增殖能力的改变.结果 RT-PCR结果显示丁酸钠组DC IDO mRNA表达量(0.84±0.01)高于对照组(0.55±0.01)及脂多糖(LPS,0.53±0.01)等诱导成熟组.Real-timePCR进一步显示与对照组比较,丁酸钠组IDO mRNA的表达升高了约(32.03±4.01)倍.MLR显示丁酸钠组DC刺激淋巴细胞增殖指数(1.53±1.0)低于LPS(9.87±3.8)等成熟组DC,并且采用IDO的抑制剂1-MT可以降低抑制T细胞增殖的能力.结论 丁酸钠诱导下DC可能通过IDO途径降解细胞微环境中的色氨酸来发挥对T细胞增殖的抑制作用.
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消炎痛对人肝癌MHCC97L细胞增殖和细胞周期的影响
目的 观察消炎痛(Indomethacin)对有转移潜能的人肝癌MHCC97L细胞增殖和细胞周期的影响.方法 采用0.1、0.2、0.5 mmol/L消炎痛分别作用于MHCC97L细胞,观察细胞增殖、克隆形成率、形态学、生长曲线、流式细胞术分析(FCM).结果 消炎痛明显抑制MHCC97L细胞增殖和克隆形成,呈良好的剂量.效应关系.0.1、0.2、0.5 mmol/L消炎痛处理组细胞增殖抑制率依次升高,克隆形成率依次降低(P均<0.01),镜下可见明显的形态学改变.其中,0.5 mmol/L消炎痛组24、48、72 h细胞增殖抑制率分别为50.6%、47.1%、43.4%;集落形成率为(0.00±0.00)%.0.1、0.2、0.5 mmol/L消炎痛处理组细胞倍增时间分别为110.1、199.3、-614.2 h,与对照组(58.6 h)比较,0.1、0.2 mmol/L消炎痛处理组细胞倍增时间分别延长了2.17倍和3.40倍,而0.5mmol/L消炎痛处理组第6天的细胞均数[(3.4±0.4)×104个]少于初始细胞数(4×104个)结果细胞倍增时间为负值而无法计算.FCM显示,G1期细胞比例随消炎痛浓度增加而增加,S+G2期细胞比例随消炎痛浓度增加而降低(P均<0.01).结论 在一定条件下,消炎痛可抑制人肝癌MHCC97L细胞增殖和克隆形成,其作用部分是通过使细胞周期阻滞在G1期实现.
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小干扰RNA抑制雄激素受体基因表达对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察小干扰RNA技术(siRNA)抑制雄激素受体(AR)基因的表达对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响.方法 化学合成针对AR的siRNA,用脂质体转染T24细胞.采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测AR mRNA和蛋白的变化.转染细胞48 h后用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖活性的变化,流式细胞术检测细胞的凋亡状况.结果 成功的转染T24细胞,实时荧光定量RT-PCR筛选出一条AR mRNA抑制效率高的siRNA,行Western blot检测可抑制AR蛋白表达至70.3%.转染细胞48 h后,T24细胞增殖活性抑制率达到(25.9±5.4)%,细胞凋亡率达到21.61%.结论 应用siRNA干扰技术能有效的抑制AR基因的表达,同时可抑制人膀胱癌T24细胞的体外增殖活性及促进其凋亡的发生.
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手汗症患者手术前后脑血流灌注显像研究
目的 观察手汗症患者手术治疗前后脑血流灌注特点,探讨手汗症中枢神经系统的可能发病机制.方法 采用单光子发射断层扫描(SPECT)方法,对10例手汗症患者行胸交感神经切断术前后的脑血流灌注进行半定量分析,观察术前脑血流灌注特点并比较手术前后的血流灌注变化.结果 10例术前患者中有9例表现为一侧基底节脑血流灌注增高,其中轻度增高1例,明显增高8例.放射性增高灶术前Ra值为(1.70±0.19),手术后下降为(1.10±0.06),平均下降值为(42.00±6.92)%(P<0.05).结论 基底节神经功能活动与手汗症的发病及术后代偿性多汗的出现有一定关系.
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基质金属蛋白酶9及组织型基质金属蛋白酶抑制因子1在大鼠外伤性脑水肿中的表达及意义
目的 探讨大鼠脑损伤中基质金属蛋白酶9(MMP9)及组织型基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)的表达变化规律及意义.方法 采用Feeney自由落体法制作大鼠轻度脑损伤模型,采用干湿重法测定脑组织含水量;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对大鼠脑损伤模型中MMP9及TIMP1 mRNA进行检测并分析两者比值.结果 实验组脑组织含水量(BWC),MMP9mRNA及TIMP1 mRNA表达量及两者比值均明显高于对照组,P值分别为0.013、0.000、0.000及0.011,差异有统计学意义(P<0.05),MMP9 mRNA与TIMP1mRNA表达量及两者比值与BWC均呈正相关,r值分别为0.654、0.355(P<0.05).结论 MMP9/TIMP1的比例失衡可能在外伤性脑水肿的发生发展过程中起重要作用.
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超声波联合曲拉通X-100制备猪去细胞的主动脉支架
目的 探讨超声波联合曲拉通X-100制备猪升主动脉去细胞支架的方法及效果.方法 从体质量相近的中华实验猪制备新鲜主动脉标本280份,随机分为4组:空白对照组、曲拉通X-100(Triton X-100)和SDS(十二烷基磺酸钠)组、曲拉通X-100组、超声波联合曲拉通X-100组,通过组织学及电镜观察、生物力学性能测定、免疫组织化学检测Ln和Fn的蛋白表达变化等分析比较各组去细胞的效果.结果 超声波联合曲拉通X-100组可完全去除动脉内膜细胞,组织形态、生物力学等保持良好.层粘连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)的阳性面积×平均吸光度值分别是0.01470±0.001 60、0.01340±0.000 29,明显优于传统的化学去细胞方法.结论 超声波联合曲拉通X-100组去细胞效果优于传统化学去污剂,是较理想的制备猪动脉去细胞支架的方法.
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超声微泡介导白细胞介素-1受体拮抗蛋白基因体外转染兔软骨细胞的研究
目的 观察超声介导下携白细胞介素-1受体拮抗蛋白基因(IL-1Ra)的微泡体外转染兔软骨细胞的效率和表达.方法 体外分离培养兔软骨细胞,分为单纯质粒组(P)、微泡+质粒组(M+P)、超声+质粒组(U+P)和超声+微泡+质粒组(U+M+P),照射后48 h,荧光显微镜和流式细胞术检测转染效率,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测IL-1Ra基因的mRNA和蛋白表达,台盼兰染色检测细胞生存率.结果 U+M+P组转染效率较其他三组明显提高,为(11.6±1.0)%;且eGFP-C1-IL-1Ra质粒经超声微泡介导转染后可表达IL-1Ra的mRNA和蛋白.结论 超声微泡可介导IL-1Ra基因在兔软骨细胞内的转染和表达,可望成为软骨损伤基因治疗的新方法.
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携带超抗原SEA基因的特异性溶瘤腺病毒载体的构建和鉴定
目的 构建携带超抗原SEA基因的肿瘤特异性溶瘤腺病毒表达载体.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术,从产SEA的葡萄球菌标准菌株ATCC13565基因组DNA中获得SEA全长基因序列,酶切后克隆入pCA13质粒,构建重组病毒质粒pCA13-SEA.将鉴定正确的pCA13-SEA与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3通过Lipofectamine 2000共转染HEK293细胞,经同源重组产生重组腺病毒Ad-SEA.Ad-SEA在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化、测定其滴度.结果 克隆得到771bpSEA全长基因.经PCR扩增、酶切鉴定、序列测定证实,SEA基因成功克隆到溶瘤腺病毒载体中,可实现SEA基因的表达,且病毒滴度达6.5×109pfu/ml.结论 成功构建表达超抗原SEA基因的溶瘤腺病毒载体.
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靶向中期因子反义寡核苷酸的体内抗肿瘤双应
目的 观察靶向中期因子反义寡核苷酸的体内抗肿瘤效应.方法 构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型48只,随机分6组,生理盐水对照组,MK-AS(每日25、50、100mg/kg)组,MK-Sen(每日50mg/kg)组和5-Fu(每日10 mg/kg)组,放免法检测血清AFP浓度,Western blot检测组织MK、p53、bax、bcl-2和Caspase-3蛋白水平.结果 (1)与生理盐水对照组比较,MK-AS治疗组的肿瘤体积明显减小,[(807.75±195.19)mm3比(552.75±84.38)、(532.00±121.57)、(294.50±70.66)mm3],差异有统计学意义(P<0.01);(2)MK.AS治疗组的肿瘤瘤重与生理盐水对照组比较显著降低,[(1.29±0.13)g比(0.70±0.14)、(0.64±0.18)和(0.44±0.18)g],差异有统计学意义(P<0.01);(3)MK-AS明显下调肿瘤组织MK和bcl-2蛋白的表达,而p53、bax、Caspase-3表达上调.结论 MK-AS具有明显的体内抗肿瘤效应;MK-AS的抗肿瘤效应可能与凋亡相关蛋白p53、bax、Caspase-3表达水平的上调和bcl-2的下调有关.
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RNA干扰技术对大肠癌细胞人端粒酶逆转录酶基因的抑制作用
目的 观察RNA干扰对大肠癌细胞中人端粒酶逆转录酶基因(hTERT gene)的抑制效应.方法 大肠癌细胞株HT-29分为Control组、N-hTERT组、Lipofectamine组和sihTERT组;将靶向于hTERT基因的小干扰RNA,转染大肠癌细胞;分别检测大肠癌细胞转染前后的端粒酶活性,hTERTmRNA和蛋白水平,细胞生长增殖和凋亡情况.结果 sihTERT转染大肠癌细胞效率为60%;sihTERT组的端粒酶活性值、hTERT mRNA表达、hTERT蛋白表达、细胞凋亡率分别为0.73±0.14、0.47±0.08、0.37±0.07、49.5%,sihTERT组与其他三组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 靶向于hTERT的siRNA能特异性沉默大肠癌细胞hTERT基因,下调hTERT基因mRNA及蛋白表达水平,降低端粒酶活性,抑制癌细胞生长增殖从而促进大肠癌细胞凋亡.
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特异性环氧合酶-2抑制剂与不同抗癌药联用对胶质瘤细胞生长的影响
目的 观察特异性环氧合酶-2抑制剂依托昔布和塞来昔布(celebrex)与长春新碱(VCR)、顺铂(DDP)、鬼臼噻吩甙(VM-26)等抗癌药联用对胶质瘤细胞增殖的影响.方法 30 μmol/L依托昔布、100 μmol/L塞来昔布与不同浓度的VCR、DDP、VM-26单用、联用48 h.噻唑蓝(MTT)比色法检测各组抑制率,中效原理和金正均法评价特异性环氧合酶-2抑制剂与各抗癌药联用的效果.结果 30μmol/L依托昔布和100 μmol/L塞来昔布单用对胶质瘤细胞增殖抑制率分别为(40.87±1.88)%和(46.81±2.37)%;不同浓度(1、10、100 mg/L)的VCR、DDP、VM-26单用对胶质瘤细胞增殖均有不同程度的抑制作用;依托昔布和塞来昔布与不同浓度VCR、DDP、VM-26联用组的抑制率均高于各药物单用组,具有协同作用.结论 依托昔布和塞来昔布与抗癌药联用后起协同作用,特异性环氧合酶-2抑制剂可作为抗癌药的化疗增敏剂.
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一氧化碳对脑缺血脂质过氧化物及Na+-K+ATP酶的影响及其限速酶在脑缺血中的表达
目的 观察一氧化碳(CO)对局灶性脑缺血脑组织脂质过氧化物及Na+-K+ATP酶的影响以及血红素氧合酶(HO-1)在脑缺血中的表达.方法 将SD大鼠随机分为3组,使用HO诱导剂、HO抑制剂腹腔注射为实验组,对照组注入生理盐水,12 h后制备大鼠局灶性脑缺血模型.缺血后24 h检测CO浓度、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Na+-K+ATP酶活性.对大鼠脑缺血后早期不同时间点进行HO-1免疫组织化学及病理学研究,并应用计算机图像分析技术检测HO-1表达的强弱.结果 与对照组比较,HO诱导剂组CO浓度显著升高1.36倍(P<0.01),HO抑制剂组CO浓度显著降低26.4%(P<0.01).HO诱导剂组MDA减少11.3%(P<0.01),SOD及Na+-K+ATP酶活性分别升高6.8%和20.1%(P均<0.05),而HO抑制剂组MDA增加12.4%(P<0.05),SOD及Na+-K+ATP酶活性分别降低8.2%和18.9%(P均<0.05).免疫组织化学显示缺血后30 min神经元和胶质细胞即有HO-1阳性表达,随着时间推移,HO-1的表达逐渐增强.结论 CO可对局灶性缺血的脑组织起保护作用.脑缺血时脑内HO-1的表达可能是脑组织对自身损伤的恢复机制之一.
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手术创伤后单核细胞-血小板黏附、单核细胞活化功能的表达
目的 动态测定单核细胞-血小板黏附(CD42a+/CD14+)、单核细胞活化功能(HLADR+/CD14+)以观察手术创伤后炎症反应和免疫功能,并评价其临床意义.方法 设计自身前后对照试验,采集22例择期骨科手术患者血液,用流式细胞术测定其术前及术中、术后多个时点CD42a+/CD14+和HLADR+/CD14+的表达,同时检测PLT和WBC计数;观察组术前1天与健康志愿者(20例)进行对照.结果 与T1时刻比较,HLADR+/CD14+于T2时刻开始明显下降,于T4时刻至低35.7±8.2,后逐渐回升(P<0.01),差异有统计学意义(P<0.05);与T1时刻比较,CD42a+/CD14+于12时刻均开始上升,于T4时刻至高29.9±5.0,后逐渐下降(P<0.01);CD42a+/CD14+(%)与PLT、WBC均为正相关(r值分别为0.890和0.814),差异有统计学意义(P<0.01).与对照组比较,观察组术前1 d各指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 HLADR+/CD14+、CD42a+/CD14+是反映术后免疫功能和炎症反应之早期的、灵敏的、可预见的指标.
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阴茎包埋对海绵体内勃起通路的影响
目的 观察阴茎包埋对海绵体内勃起通路的影响.方法 通过建立大鼠隐匿阴茎模型获得实验标本,分2、4、6个月组进行观测.各阶段中包括包埋组、假手术组和正常组.采用紫外分光光度计检测海绵体内一氧化氮合酶(NOS)的活性,免疫组织化学法显示雄激素受体(AR)在海绵体内的表达水平.结果 3个时间段内包埋组NOS活性分别为1.79、1.67、1.24 U/mg·prot,与正常组和对照组比较,酶活性降低随包埋时间延长逐渐显著(2个月组P>0.05,4个月组P<0.05,6个月组P<0.01),但包埋对各阶段大鼠阴茎海绵体内AR表达水平无影响.结论 阴茎包埋可直接影响勃起通路中重要的神经递质一氧化氮合成的关键酶-NOS的活性来影响勃起通路,且这种影响与阴茎包埋时间正相关.
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部分去黏膜游离空肠重建气管的研究
长段气管环形缺损的重建是医学领域中尚未解决的难题.我们应用部分去黏膜游离空肠重建长段气管缺损,探索重建气管后空肠黏膜层的变化及对呼吸道功能的影响.
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hnRNP B1 mRNA在肺癌患者外周血中手术前后的表达变化及其临床意义
不均一核糖核蛋白(hnRNP)B1是hnRNP家族重要的成员之一.研究结果显示hnRNP B1在人体肺癌的过表达具有特异性,与肺癌发生发展密切相关[1,2].我们用Real time FQ-RT-PCR方法检测肺癌患者外周血中hnRNP B1mRNA手术前后表达水平的变化并探讨其临床意义.
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一种自制腹腔镜下简易耻骨后膀胱尿道吻合训练模型
前列腺癌好发于中老年男性,是目前常见的泌尿系统恶性肿瘤之一[1].腹腔镜前列腺癌根治术(LRP)逐渐成为治疗局限性前列腺癌的标准方法.但该手术解剖复杂,操作要求高,对每位尝试者而言都极具挑战,其中难点之一就是膀胱尿道吻合.为了缩短学习曲线,降低手术并发症,我们自制了一套耻骨后膀胱尿道吻合训练模型,试用效果理想.
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放射性配体结合实验检测人脑胶质瘤细胞表皮生长因子受体的数目和活性
胶质瘤是中枢神经系统常见的恶性肿瘤,经过各种综合治疗后疗效依然欠佳[1].部分胶质瘤存在表皮生长因子受体(EGFR)的扩增,抗EGFR治疗有助于抑制EGFR异常的肿瘤的增殖和进展[2].我们应用放射性配体结合实验(RBA)检测EGFR的数目和活性.
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青少年特发性脊柱侧凸基因表达谱的研究
青少年特发性脊柱侧凸是青少年时期的常见疾病,且危害较大.具体的病因与发病机制仍然不清楚.本研究运用基因芯片技术研究青少年特发性脊柱侧凸基因表达谱的差异,对MS的发病进行初步探讨.
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体外脂质体转染兔成肌细胞优化条件的研究
成肌细胞是哺乳动物体内唯一能大量分裂、增殖和迁移的肌前体细胞[1].血管内皮生长因子(VEGF)具有促进血管内皮细胞增殖、促进血管生长的作用[2].我们以脂质体介导VEGF165基因转染成肌细胞,研究转染的佳实验条件.
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孕鼠腹腔注射脂多糖合并缺氧脑瘫动物模型制作及评价
目前脑瘫动物模型的制作方法有感染、缺血缺氧及胆红素等因素导致脑部损伤[1-5],其缺点主要是创伤大、操作复杂、不能逼真模拟人类胎儿在围产期缺血缺氧的过程.我们应用孕鼠腹腔注射脂多糖合并缺氧的方法制作脑瘫动物模型,观察其行为学、神经电生理及脑组织病理变化,旨在建立一种新的、简单易行、微创的、逼真地模拟人类在怀孕晚期宫内感染缺氧致胎儿脑部损伤的动物模型,探讨和总结孕鼠腹腔注射脂多糖合并缺氧脑瘫动物模型的制作和评价方法.
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体外冲击波治疗兔缺血性股骨头坏死过程中骨形态发生蛋白的表达
我们通过观察骨形态发生蛋白(BMP)-2在体外冲击波治疗股骨头缺血坏死过程中的表达特点,探讨其治疗机制.一、材料与方法1.实验模型及分组:成年新西兰大白兔30只,体质量3.0～4.0kg,由武汉大学医学院实验动物中心提供.参照Yamamoto等[1]的方法,30只家兔接受10 μg/kg的脂多糖静脉注射,24 h后重复1次,然后每隔24 h注射40 mg/kg甲基泼尼松龙1次,共3次.
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N-丁基-N2(4-羟丁基)亚硝胺(BBN)诱发PLCε基因敲除小鼠膀胱癌形成的研究
磷脂酶C(PLC)是肌醇磷脂信号通路的关键酶,在哺乳动物中已鉴定出6个族:PLCβ、PLCγ、PLCδ、PLCε、PLCξ、PLCη,至少13个同工酶.PLCε是1998年Shibatohge等[1]在秀丽隐杆线虫体内发现的一种新的PLC亚型,是Ras蛋白的新的效应分子并以GTP-依赖的方式被Ras调控.
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糖酵解抑制剂对低氧胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响
肿瘤内血管生长的滞后及肿瘤细胞快速增殖导致肿瘤细胞缺氧是实体肿瘤微环境的基本特征之一[1].胰腺癌是消化道恶性程度高的恶性肿瘤之一,早期诊断极其困难,预后极差,其5年生存率低于2%.本研究旨在建立体外低氧培养人胰腺癌细胞panc-1的实验模型,观察糖酵解抑制剂2-脱氧-D.葡萄糖(2-DG)对panc-1细胞的生长抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.
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生物血管支架材料上光化学法表面修饰的牢固性
对生物支架材料进行表面修饰以期能提高其再内皮化,从而为临床提供一种理想的移植替代物是目前研究的热点[1].检测修饰方法的可靠性和牢同性的研究,大多是在体外模拟体内血流的环境进行,体内检测的报道尚少,而直接建立动物模型进行检测具有更好的直观性.
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大鼠局部肌肉萎缩模型的建立
A型肉毒素作为一种神经毒素,可选择性地作用于周围运动神经末梢,抑制乙酰胆碱的释放、融合和停靠,产生化学去神经作用,导致肌肉松弛麻痹[1].我们拟通过A型肉毒素注射大鼠局部肌肉,以建立单个目的肌肉萎缩的实验动物模型.
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羟基磷灰石/丝蛋白复合骨材料应用于椎体间融合的研究
羟基磷灰石是一种脆性材料,强度较低,只具有骨引导作用.为提高力学性能以及加快新骨形成,人们通过各种途径引入其他物质对其改性以制成各种羟基磷灰石复合材料[1].我们以成年山羊为动物模型.使用羟基磷灰石-蚕丝蛋白纳米级复合材料(HAp-SF)作为骨移植替代物行椎体间融合,观察其成骨能力.
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重组人肝细胞生长因子在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达
肝细胞生长因子(HGF)具有促进肝细胞再生、抑制肝纤维化及肝细胞凋亡、溶解硬变肝脏纤维组织、减轻肝损害等功能[1].其活性结构为α链与β链通过二硫键连接而形成的异二聚体.
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经食管床吻合术后上消化道功能的临床研究
近年来发现经食管床主动脉弓后食管胃吻合(以下简称食管床吻合)术式,在临床治疗过程及文献报道中其可降低术后胃食管反流(GEB)的并发症,能提高患者术后的生活质量,优于胃纳入胸腔的食管胃重建,主张应推广此术式的应用[1-2].本研究旨在从客观学指标方面对此术式进行评价,以为临床治疗提供依据.
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骨髓源神经干细胞对神经胶质瘤趋化性的研究
神经干细胞(NSCs)是具有增殖、迁移、分化等特点的原始神经细胞.对NSCs的临床期望主要集中在NSCs的替代治疗上,却较少关注其迁移性.我们通过分离纯化骨髓基质干细胞(BMSCs)并诱导分化为NSCs,通过多种途径注入到鼠脑胶质瘤模型,观察骨髓来源的NSCs对神经胶质瘤有无定向迁移性及其分布规律等.
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慢性间歇低氧大鼠动物模型的建立
手术疗法是治疗阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的常用方法,患者由于长期间歇低氧可存在多系统病变,强烈的手术刺激易造成多种围术期并发症[1].建立符合多系统病变的动物模型是进行围术期实验研究的基本条件,本研究旨在应用自行研制的间歇低氧箱建立慢性间歇低氧大鼠动物模型.
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乳腺癌脑转移的影响因素及研究进展
脑转移瘤好发于40～60岁,发病率是颅内原发肿瘤的10倍,系肿瘤患者致残与死亡的重要原因之一.脑转移瘤常见的原发肿瘤为肺癌、乳腺癌、恶性黑色素瘤及肾癌,其中临床症状明显的乳腺癌脑转移的机率为10%～20%[1],居于脑转移瘤的第2位,但加上无临床症状的乳腺癌脑转移患者(15%),真正的患病率可高达30%.
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一种兔颈动脉狭窄模型的建立
目的 建立一种弹性壁兔颈动脉狭窄模型.方法 采用显微缝合方法将兔颈动脉部分连续显微缝合,分别形成狭窄率约25%、50%、75%的血管狭窄模型,对照组行假手术,于术后10、20 d分别进行多普勒超声及数字减影血管造影(DSA)检查,依据多普勒超声及DSA影像计算模型狭窄率,多普勒超声测得狭窄处血流速度波形,计算不同狭窄血管每秒平均血流量.结果 成功制作单侧兔颈动脉狭窄模型15个,25%、50%、75%狭窄组各5个,狭窄率可控,误差在-5%～5%内.与对照组比较,模型组每秒平均血流量(F)均减少(P<0.05),50%狭窄组收缩期峰值流速(Vs)和平均血流速度(Vm)增高(P<0.05),75%狭窄组Vs和Vm减小(P<0.05).结论 应用显微缝合法制作的兔颈动脉狭窄模型,方法简便,成模时间短,狭窄率可控,并且具有弹性壁、可搏动等优点,是一种较为理想的适于分析血流动力学变化的颈动脉狭窄动物模型.
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可复性机械性完全性肠梗阻模型的制作
目的 制备较为稳定的可复性机械性完全性肠梗阻模型.方法 将30只大耳白兔,随机分为正常对照组10只、肠梗阻模型组20只.模型组动物自回盲部插入氟雷氏尿管手术处理后,测定体质量变化、死亡率、内毒素检测和生化指标,对小肠黏膜进行病理形态学观察.结果 可复性机械性完全性肠梗阻模型72 h死亡率为25%,生化指标ALT、LDH、内毒素水平明显升高(P<0.05),小肠黏膜出现明显病理损害,影像学检查及解剖验证,符合机械性完全性肠梗阻标准.并且抽净水囊可解除梗阻.结论 此方法能成功建立可复性机械性完全性肠梗阻模型.
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乳腺癌诊断和治疗研究的热点与方向
乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,其发病率占全身各种恶性肿瘤的7%～10%.近年来,乳腺癌的发病率不断上升,并呈现年轻化趋势.有报告,美国女性乳腺癌的发病率已跃升至1/7,而我国乳腺癌发病率在过去10年中也上升了27%.
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β-catenin的表达在乳腺癌发生发展中的作用
目的 观察β-catenin的表达在乳腺癌发生发展中的作用.方法 采用免疫组织化学Envision+法检测β-catenin在不同病理阶段的乳腺组织中的表达状况.乳腺囊性增生病27例,导管内乳头状瘤25例,囊性增生病伴异型26例,导管内癌(或伴早期浸润)29例,浸润性导管癌58例.结果 β-catenin在乳腺导管内乳头状瘤、囊性增生病、囊性增生病伴异型、导管内癌(或伴早期浸润)和浸润性导管癌中的阳性表达率分别为4.0%、3.7%、23.1%、72.4%和79.3%.各组间表达的差异有统计学意义(P<0.01).β-catenin的单纯膜表达与肿瘤直径的大小、TNM分期和淋巴结转移状况显著相关,直径小的表达率更高(P<0.01).膜表达与肿瘤的组织学分级(P>0.05)、患者年龄均无明显相关(P>0.05).β-catenin的膜浆共表达与淋巴结是否转移显著相关(P<0.05),与临床分期、组织学分级等无明显相关(P>0.05).β-catenin膜浆表达的淋巴结转移率高于膜表达组(P<0.05).结论 β-catenin在囊性增生病伴异型、导管内癌(或伴早期浸润)和浸润性导管癌中的阳性表达率明显高于囊性增生病和导管内乳头状瘤,它的作用可能始于癌变的早期并持续存在.β-catenin的膜浆表达与淋巴结转移呈正相关,提示β-catenin膜浆表达的乳腺癌易发生转移,两者可能是预后不良的因素.β-catenin的膜表达与肿瘤直径的大小、TNM分期和淋巴结转移状况呈负相关,可能提示预后较好.
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熊果酸对MCF-7乳腺癌细胞生长的影响
目的 观察熊果酸对MCF-7乳腺癌细胞增殖、凋亡、细胞侵袭及裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将1、10、100 μmol/L的熊果酸分别作用于乳腺癌MCF-7细胞12、24、48 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力变化及生长抑制率,流式细胞术及Transwell小室法检测熊果酸作用48h时MCF-7细胞周期、细胞凋亡率及细胞侵袭力.将乳腺癌MCF-7细胞接种于裸鼠,成瘤后分为生理盐水对照组、熊果酸低剂量组(每日1 mg/kg)、中剂量组(每日5 mg/kg)和高剂量组(每日25 mg/kg),检测5、10、15 d裸鼠移植瘤体积、肿瘤生长抑制率及15 d时肝肾功能、血常规变化.结果 随熊果酸浓度增加及作用时间延长,MCF-7细胞生长及凋亡发生受到显著影响,100 μmol/L熊果酸作用48 h时,细胞生长抑制率为46.0%,生长周期阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率为(16.48±2.46)%,细胞侵袭力显著下降.熊果酸组裸鼠移植瘤体积显著小于对照组,15 d时熊果酸高剂量组肿瘤体积为(323.5±33.5)mm3生长抑制率为50.9%.各组肝肾功能和血常规无明显变化.结论 熊果酸可引起体外乳腺癌McF-7细胞增殖抑制、细胞凋亡率增加及细胞侵袭力下降,可显著抑制裸鼠乳腺癌移植瘤生长.
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线粒体融合素-2对裸鼠成瘤性及增殖、转移的影响
目的 观察线粒体融合素(mfn)-2对裸鼠成瘸性及增殖瘤的增殖、转移的影响.方法 裸鼠共分为3组:实验组、空载体对照组、空白对照组,分别将3组MCF-7细胞异种移植到无胸腺小鼠体内.建立裸鼠人乳腺癌移植瘤模型,比较3组裸鼠之间肿瘤的大小和重量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测3组肿瘤组织mfn2的表达,免疫组织化学半定量检测核增殖抗原(Ki-67)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 实验组、空载体对照组、空白对照组3组肿瘤瘤体质量(单位:g)分别为1.78±0.13、2.84±0.16、2.77±0.12,实验组裸鼠肿瘤重量明显低于对照组(P<0.05),实验组瘤体的体积与两对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组mfn2基因高表达(P<0.05),两对照组低表达,两对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与两对照组比较,实验组Ki-67的表达升高,而VEGF的表达明显降低(P<0.05).结论 mfn2基因可明显抑制人乳腺癌成瘤,对人乳腺癌裸鼠移植成瘤后的增殖和转移能力有影响.
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乳腺癌病理生物学特性与多肿瘤基因表达的关系
目的 观察多肿瘤基因在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌病理生物学特性的关系.方法 采用免疫组织化学SP染色法对120例乳腺癌组织中多肿瘤基因的表达进行检测[雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体(C-erB-2)、p53、转移抑制基因(mn23)、bcl-2、增殖细胞核抗原(PCNA)、多药耐药蛋白(MRP)],分析其与乳腺癌病理生物学特性的关系.结果 p53、bcl-2的表达在不同乳腺癌激素受体状态中差异有统计学意义,且与ER、PR的表达有显著相关性:p53在ER(-)、PR(-)的乳腺癌中呈现高表达,在ER(+)、PR(+)的乳腺癌中呈现低表达(P<0.01);而bcl-2则相反(P<0.01).bcl-2的表达与月经状态有关,在绝经前乳腺癌组织中的表达明显高于绝经后乳腺癌(P<0.01).PCNA的表达与肿瘤的大小相关,在直径较大的肿瘤(>3 cm)中的表达显著高于直径较小的肿瘤(≤3 cm,P<0.01).结论 p53、bcl-2的表达与ER、PR的状态相关,可作为判断乳腺癌生物学特性和预后的重要指标.
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血清HER-2/neu胞外域在复发转移性乳腺癌患者解救化疗中的临床意义
目的 探讨血清HER-2/neu胞外域(ECD)在复发转移性乳腺癌患者解救化疗中的临床意义.方法 酶联免疫吸附试验检测健康志愿者、良性乳腺疾病患者各27例的血清HER-2/neu ECD水平及27例复发转移性乳腺癌患者化疗前后的血清HER-2/neu ECD水平,结合其临床资料进行统计学分析.结果 健康志愿者与乳腺良性疾病患者血清HER-2/neu ECD水平均低于15μg/L,差异无统计学意义(P>0.05);复发转移性乳腺癌患者化疗前血清HER-2/neu ECD的平均浓度为(47.30±109.06)μg/L,显著高于健康志愿者及乳腺良性疾病患者(P<0.01).血清HER-2/neu ECD水平与原发肿瘤HER-2/neu的表达成正相关(r=0.752,P<0.01).解救化疗有效的患者,化疗3周后血清HER-2/neu ECD水平较化疗前明显降低(P<0.05),化疗3周后与化疗6周后血清HER-2/neu ECD水平差异无统计学意义(P>0.05).化疗前HER-2/neu ECD水平与患者总生存期呈负相关(r=-0.601,P<0.01),而与无进展生存期无明显相关(r=-0.374,P>0.05).化疗前血清HER-2/neu ECD>15 ug/L与HER-2/neu ECD<15 ug/L的患者比较,总生存率前者低于后者(P<0.05),无进展生存率两者间差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清HER-2/neu ECD水平的监测,有助于早期发现乳腺癌的复发转移,指导解救化疗方案的选择,评估患者的疗效及预后.
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乳腺癌易感性与CYP19基因rs4646、rs1008805多态性的相关性
目的 探讨乳腺癌易感性与CYP19基因rs4646(C/A)、rs1008805(A/G)多态性的相关性.方法 采用病例对照研究,应用TaqMan法检测233例浙江地区乳腺癌患者及180例正常人CYP19基因rs4646、rs1008805多态性,基因型分布和乳腺癌发病风险、患者年龄、月经状态及肿瘤临床病理特征的关系采用行x列表X2检验;危险度比值比(OR)及95%可信区间(CI)运用非条件Logistic回归分析计算.结果 (1)病例组中,CYP19基因rs4646(C/A)位点CC、AC、AA基因型的频率分别为47.6%、41.6%、10.7%,而对照组中则分别为52.8%、38.3%、8.9%;病例组中,C、A等位基因的频率分别为68.5%、31.5%,而对照组中则分别为71.9%、28.1%.以CC型为对照,AC、AA型没有增加乳腺癌的发生风险(P>0.05),经年龄分层,亦未发现其与乳腺癌易感性相关.(2)病例组中,CYP19基因rs1008805(A/G)位点从、AG、GG基因型的频率分别为44.6%、43.3%、12.0%,而对照组中则分别为51.4%、40.2%、8.4%;病例组中,A、G等位基因的频率分别为66.3%、33.7%.而对照组中则分别为71.5%、28.5%.以AA型为对照,AG、GG型没有增加乳腺癌的发生风险(P>0.05),经年龄分层,亦未发现其与乳腺癌易感性相关.(3)CYP19基因rs4646(CA/A)和rs1008805(X/G)多态性与乳腺癌患者年龄、月经状况及病理特征均无明显相关.结论 CYP19基因m4646、rs1008805多态性与乳腺癌易感性无明显相关,尚不推荐单独作为未来乳腺癌基因筛查的候选指标.
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反义RNA抑制Ezrin表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响
目的 观察特异性阻断Ezrin的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的增殖和侵袭能力的影响.方法 将anti-pCR3.1-Ezrin质粒经脂质体介导,转染人人乳腺癌细胞MDA-MB-231 6、12和24 h,应用Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ezrin的表达变化情况;转染质粒24h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测抑制Ezrin对MDA-MB-231和MCF-7细胞体外增殖能力的影响,Boyden小室法检测抑制Ezrin对MDA-MB-231和MCF-7细胞体外侵袭能力的影响.结果 转染anti-pCR3.1-Ezrin后,对MDA-MB-231细胞中的Ezrin表达抑制在24 h时达高峰.MTT法比色实验结果显示,MDA-MB-231和MCF-7细胞中转染anti-pCR3.1-Ezrin组、转染空质粒组和对照组的A值分别为0.410±0.018、0.765±0.058、0.795±0.061和0.480±0.021、0.632±0.052、0.648±0.059.转染anti-pCR3.1-Ezrin组细胞的增殖受到明显抑制,抑制率分别为(47.9±3.1)%和(32.0±2.8)%(P<0.05).Boyden小室法检测结果显示,MDA-MB-231和MCF-7细胞中转染anti-pCR3.1-Ezrin组细胞的侵袭能力分别为对照组的(50.5±3.2)%和(74.8±4.6)%(P<0.05).结论 Ezrin在乳腺癌的生长和侵袭过程中发挥重要作用.
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CD44+/CD24-/low在乳腺癌中表达及其临床意义
目的 观察乳腺癌中CD44+/CD24-/low的表达与临床病理特征的关系及其对预后的影响.方法 应用双染免疫组织化学检测144例乳腺癌与30例乳腺良性肿瘤或正常乳腺组织中CD44+/CD24-/low的表达,收集并分析患者的临床病理和随访资料.结果 CD44+/CD24-/low在乳腺良性肿瘤或正常乳腺中表达率为0%～8%,乳腺癌中表达率为0%～75%.67例(46.5%)乳腺癌患者CD44+/CD24-/low表型的细胞>10%,余77例(53.5%)≤10%.CD44+/CD24-/low的表达高低在淋巴结转移(P<0.01)、病理分期(P<0.01)、HER-2表达(P<0.01)以及复发(P<0.01)上差异有统计学意义.CD44+/CD24-/low高表达的肿瘤复发时主要表现为远处转移,尤其是骨转移.CD44+/CD24-/low高表达和低表达的5年无病生存率为65%和82%(P<0.01),5年总生存率为68%和86%(P<0.05),差异有统计学意义.结论 CD44+/CD24-/low的表达可能与乳腺癌的转移有关,有可能作为评估乳腺癌患者预后的参考指标.
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趋化因子受体5促进乳腺癌干细胞的趋化与侵袭
目的 观察趋化因子受体5(CCR5)对乳腺癌干细胞(CD44+CD24-/low)趋化和侵袭作用.方法 应用流式细胞仪分选获得乳腺癌干细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乳腺癌MCF-72个SP侧群细胞(side population)6例样本CCR5 mRNA和蛋白质,在趋化因子5(CCL5)作用下通过趋化小室法检测2个SP侧群细胞趋化活性和侵袭活性,并与CCR5的封闭进行对照研究.结果 CCL5对MCF-7肿瘤干细胞有明显趋化[乳腺癌干细胞(86.0±14.8)个/HP与CD44+CD24+(72.0±13.5)个/HP,t=7.461,P<0.05]和侵袭作用[乳腺癌干细胞(25.0±8.3)个/HP与CD44+CD24+(16.0±5.4)个/HP,t=6.665,P<0.05].结论 CCB5表达能够促进乳腺癌干细胞趋化和侵袭.
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Wnt信号途径在不同性质乳腺组织和细胞中的表达与分布
目的 探讨乳腺癌发生发展中Wnt信号途径的改变及其关机制.方法 用基因芯片和荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测5例乳腺癌患者不同性质乳腺组织和细胞中Wnt信号途径相关基因的表达.结果 与正常乳腺组织比较,癌组织中Frizzled 3、Lrp5、Lrp6、Wnt9a、Wnt10a表达分别上调了8.11、10.28、9.37、15.47、19.63倍(发生频率均≥60%),DDK1、DDK4、WIF1表达分别下调了10.87、9.62、12.05倍(发生频率均≥60%);其中Wnt9a、Wnt10a以及DDK1、DDK4、WIF1表达的改变主要在癌源性成纤维细胞,分别上调40.88、61.59倍和下调38.46、19.61、29.41倍(P<0.01);Frizzled 3、Lrp5、Lrp6表达改变主要在乳腺癌千细胞,分别上调了27.36、31.41、21.25倍(P<0.01).结论 在乳腺癌发生发展过程中,成纤维细胞源性因子Wntga、Wnt10a和DDK1、DDK4、WIF1的改变参与了Wnt信号途径的异常,并主要影响乳腺癌干细胞的自我更新调控.
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胰腺癌基因治疗和免疫治疗的现状与前景
在人类的疾病谱上,胰腺癌显然是难以被攻克的堡垒之一.虽然历经几代人的不懈努力,胰腺癌的5年存活率仍然低于5%,手术切除率仅为15%～20%.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 |
