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毒死蜱引起胎鼠胆碱酯酶抑制和母鼠脑损伤
毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)是一种目前为常用的新型有机磷杀虫剂.由于CPF易于降解,哺乳动物毒性反应阈值相对较高,阈下剂量不会引起迟发性神经病反应,通常认为较为安全,且未对其在环境中积累引起慢性中毒现象作足够重视.近年大量研究表明,生产生活中广泛使用已使环境中低浓度CPF污染成为普遍现象,妊娠期胎儿已普遍暴露于低浓度农药污染中[1-2].近年的研究表明,CPF对胚胎发育期间的脑神经系统有众多超敏毒性作用点[3-7],可能影响胚胎脑发育,造成永久性神经功能损伤.本研究采用5mg/(kg·d)暴露剂量处理SD大鼠,此剂量下实验动物不出现明显全身急性中毒症状.实验通过对妊娠各个时期的母鼠脑组织染色观察,胚胎形态和体重检测,以及胚胎不同成分胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)活力测定等方法,研究在妊娠的不同时期,CPF对胚胎鼠和妊娠鼠神经系统的毒性影响.
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超顺磁性纳米四氧化三铁对孕前期和孕中期小鼠生殖及胚胎发育的影响
目的 探讨超顺磁性纳米四氧化三铁对孕前期和孕中期小鼠生殖及胚胎发育的影响.方法 选取48只健康成年雌性ICR小鼠,按体重随机分为4组(孕前期对照组、孕前期染毒组、孕中期对照组和孕中期染毒组),分别在孕前期、孕中期经尾静脉注射方式染毒,均于孕18 d处死孕鼠剖取卵巢和胎鼠,测定胎鼠发育指标(胎鼠体重、体长、尾长、外观畸形率、内脏畸形率、骨骼畸形率、胎盘重及HE切片)和孕鼠生育力指标(孕鼠体重、子宫重、卵巢重及HE切片、活胎率、死胎率、吸收胎率).结果 孕前期建模组:孕鼠生育指标两组对比差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,染毒组胎仔体长显著降低(P＜0.05),胎盘重及吸收胎率显著增加(P＜0.05),其余发育指标差异无统计学意义(P＞0.05);孕中期建模组:孕鼠生育指标两组对比差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,染毒组胎盘重量显著降低(P＜0.05),其余发育指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 超顺磁性纳米四氧化三铁对孕前期和孕中期染毒小鼠的生育力无显著影响,对胚胎发育有一定的毒性作用.
关键词： 超顺磁性纳米四氧化三铁 孕鼠 生殖 胚胎 毒性 -
1-1O 邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯的遗传毒性
目的 研究增塑剂邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)的致畸性和遗传毒性.方法 小鼠致畸试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和Ames试验.结果 小鼠致畸试验表明,DEHP影响孕鼠体重的增长,使早期吸收胎率明显增加(8.93%～91.50%).胎鼠生长发育迟缓,骨骼和内脏畸形率升高(33.33%～42.85%,P＜0.01).Ames试验结果为阴性;DEHP大、中剂量组的微核率分别为6.50%、4.12%,比阴性对照组1.10%有明显增高(P
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1-31 植物降脂油对大鼠的致畸性
目的了解植物降脂油对大鼠的致畸性,为其安全性评价提供依据.方法采用传统致畸试验方法将植物降脂油设200、1 000、5 000 mg/kg 3个剂量组及菜籽色拉油阴性对照组,每组12～15只受孕的SD大鼠.探讨受试物对孕鼠体重、胎鼠发育及内脏、骨骼和外观畸形等的影响.结果植物降脂油3个剂量组的孕鼠体重及活胎平均体重和身长均值与阴性对照组比较,差异无显著性,200及1 000 mg/kg的活胎率分别为94.2%和96.0%,均显著低于阴性对照组(P＜0.01,P＜0.05),吸收胎率分别为2.5%和2.6%,均明显高于阴性对照组(P＜0.01),但5 000 mg/kg的活胎率、死胎率及吸收胎率与阴性对照组比较,差异无显著性(P＞0.05).胎鼠内脏、骨骼及外观畸形检查均未见畸形.结论植物降脂油对孕鼠体重、胎鼠体重及身长无明显影响,中、低剂量组对胎鼠的存活有一定的影响,但无剂量-反应关系.结果表明植物降脂油对大鼠未见母体毒性及致畸性.
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1-30 甲基汞的行为致畸效应
目的探讨胚胎期甲基汞暴露对大鼠仔代的行为致畸效应.方法 3月龄Wistar雌性大鼠受孕后随机分为4组,采用甲基汞(0.00、0.01、0.05、2.00mg@kg-1@d-1)于妊娠6～9 d灌胃染毒.28只孕鼠妊娠19 d时进行传统致畸试验.24只孕鼠自然分娩,观察201只仔鼠出生后的早期神经行为发育;79只仔鼠出生7周时进行迷宫测试;32只仔鼠出生10周时进行自动化操作行为测试.分娩5周的24只母鼠及出生10周的24只仔鼠进行脑组织检查.结果胚胎期甲基汞暴露对大鼠的母体毒性十分微弱;但低剂量就对胎仔体重及尾长发育有抑制作用(P＜0.01).3个暴露组仔鼠的早期神经行为发育明显滞后(P＜0.05或P＜0.01);迷宫测试与操作行为测试中,各暴露组仔鼠的成绩均降低(P＜0.05或P＜0.01).各暴露组母鼠及仔鼠脑组织单胺类神经递质含量均显著增高(P＜0.05或P＜0.01).所有结果呈现出剂量-反应关系.结论甲基汞在不引起可观察到的母体毒性的低剂量下,即可表现出一定的胚胎毒性,影响出生仔鼠神经系统的发育,导致神经行为功能的明显异常.
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3-13 谷神薏米茶对大鼠的致畸作用
目的薏米营养丰富,谷神薏米茶是以薏米为主要原料,附加几种中药精制而成.经功能学检测具有调节免疫功能的作用.为观察其是否引起母体毒性和胚胎毒性反应,我们对该产品进行了传统的致畸试验.方法将该茶按要求浸泡后,于70℃浓缩至所需浓度.选用Wistar大白鼠,体重180～240 g,按传统方法进行交配.将获得的60只受精鼠随机分成5组,每组12只,设3个剂量组,剂量分别为10、2.5、0.625g/kg.阴性对照组给予蒸馏水.各组动物均按体重1%灌胃.阳性对照组腹腔注射环磷酰胺,剂量为6.5 mg/kg.投与受试物时间为妊娠第7～16天,定期观察,称重,记录,第20天处死孕鼠,按程序要求检查各项指标.结果在受孕率无明显差异的情况下,各剂量组的孕鼠在给药其间均未见异常,体重增长良好,胎鼠的外观、内脏和骨骼发育各项指标与阴性对照组比较,差异均无显著性.结论谷神薏米茶对孕鼠无母体毒性,无胚胎毒性和致畸作用.
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甲醛致胎鼠肝微核率及染色体畸变的研究
目的 探讨甲醛致胎鼠肝微核率与染色体畸变.方法 随机将妊娠小鼠(孕13天)分为5组:腹腔注射甲醛(0.00、0.20、2.00、20.00mg/kg)染毒组、环磷酰胺(30mg/kg)阳性对照组,实验至妊娠第14天即染毒后18小时脱颈椎处死孕鼠,剥离两侧子宫,每侧各取一胎鼠,断头放出外周血,取胎肝,采用胎肝微核试验和胎肝染色体畸变试验,检测胎肝血微核率和染色体畸变率.结果 2.00、20.00 mg/kg甲醛染毒组胎肝微核率及胎肝染色体畸变率与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.01);染色体畸变主要表现为染色体断裂、多倍体等畸形.结论 甲醛可致胎鼠肝微核率与染色体畸变.
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孕鼠补充二十二碳六烯酸对仔鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I mRNA表达的影响
目的 研究孕鼠补充二十二碳六稀酸(DHA)对仔鼠脂肪代谢及肉碱棕榈酰转移酶-I(CPT-I)mRNA水平的影响.方法 成年SD雌鼠随机分成A、B、C三组,待其妊娠后A组给予基础饲料、B组补充低剂量的DHA(1g/kg bw),C组补充高剂量的DHA(2g/kg bw).所有雄性仔鼠出生后均由A组母鼠哺乳,断乳后给予基础饲料喂饲至出生后第8周.每组8只,动态观察仔鼠的体重、体脂含量、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)7L CPT-I mRNA水平.结果 三组仔鼠的出生体重差异无显著性(P>0.05);仔鼠出生后的第8周时,C组的体重显著低于A组(P<0.05),B、C组的体脂含量、TG水平显著低于A组(P<0.05).而C组HDL-C水平显著高于A组(P<0.05),但三组TC水平差异无显著性(P>0.05).动态观察表明,肝脏CPT-I mRNA水平持续性出现B、C高于A组,C组高于B组.结论 孕期补充DHA可能通过持续性上调仔鼠肝脏CPT-I基因表达来增强脂肪酸的氧化,降低血脂水平,但孕期摄入过量的DHA可能对子代产生不利影响.
关键词： 孕鼠 二十二碳六稀酸 肉碱棕榈酰转移酶-I -
二巯基丁二酸与钙、维生素C联合作用对铅暴露孕鼠子代神经发育的影响
目的 探讨二巯基丁二酸(DMsA)与营养素(钙、维生素C)联合治疗铅中毒孕鼠其子代神经发育的影响.方法 实验组雌鼠经饮水染铅(0.1%的醋酸铅)4周后,随机分为:单纯染铅组、DMSA组(50mg/kgbw)、DMSA与钙、维生素C联合组[联合组,DMsA50mg/kg bw、钙400mg/kg bw(以碳酸钙计)、维生素C 100mg/kgbw].各组小鼠按雌雄比为2:1合笼,治疗从妊娠第4天开始,隔日1次,至分娩后停止.检测母鼠血铅、仔鼠肝铅、骨铅、血红蛋白,并观察仔鼠平面翻正、断崖回避和空中翻正达标情况.结果 DMsA组和联合组母鼠血铅水平低于单纯染铅组(P＜0.05);DMSA组仔鼠血红蛋白低,与空白对照组比较差异有显著性(P＜0.05).DMSA组仔鼠肝铅、骨铅含量高,与单纯染铅组、联合组比较差异有显著性(P＜0.05).DMSA组仔鼠平面翻正、断崖回避和空中翻正达标日龄迟于单纯染铅组(P＜0.05);联合组仔鼠平面翻正、空中翻正迭标日龄迟于单纯染铅组(P＜0.05).结论 采用DMSA治疗铅中毒孕鼠,能降低其血铅水平,但是会增加仔鼠体内铅的含量,可导致仔鼠早期神经行为发育的延缓.
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铅对孕鼠及其胎鼠肝微粒体药酶活性的影响
铅是一种不可降解的环境污染物质,在环境中可长期蓄积,可通过食物链、土壤、水和空气进入人体.近年来环境污染日益严重,人类铅摄入量及铅负荷不断升高,众多的研究表明,铅对人体的影响是全身性的,对神经、血液、消化、泌尿、生殖、心血管、免疫等系统均有毒性作用[1],本文拟观察孕鼠接触不同剂量铅对孕鼠、胎鼠肝药酶活性的变化,以进一步研究铅对孕妇及胎儿肝药物代谢功能的影响.
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大剂量维生素A对HOX C4基因表达的影响
摄入维生素A过多可在人体内蓄积而引起中毒.妊娠早期大剂量维生素A进入人体,可通过胎盘屏障作用于胎盘或胎儿,使胎儿的生长发育延缓或使畸胎率明显增加.动物实验表明,大剂量维生素A可使孕鼠流产.为此,我们研究了大剂量维生素A对HOX C4(3.5)基因表达的影响.
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孕鼠肝内胆汁淤积症致胎鼠心肌细胞凋亡
妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是妊娠期特有的并发症,临床表现为妊娠中、晚期出现皮肤瘙痒和/或黄疸;孕妇血液中胆汁酸水平明显增加;并可经胎盘转运至胎儿,致胎儿脐静脉血和羊水中胆汁酸浓度也异常增高.大量临床研究显示,ICP孕妇血液中胆汁酸水平愈高,胎儿窘迫发生率亦愈高[1].药理学和毒理学基础研究表明,胆汁酸对动物组织和细胞具有明显的毒性作用,可以引起细胞凋亡和/或死亡.本研究应用雌、孕激素建立ICP孕鼠模型,探讨ICP时胎鼠心肌细胞凋亡及凋亡调控基因BCI2-和BAX的表达.
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孕鼠被动吸烟对子代学习记忆功能及海马神经生长因子含量的影响
目的探讨孕鼠被动吸烟对子代学习记忆功能的影响及其机制.方法采用反映学习记忆功能的水迷宫法测试大鼠神经行为的改变,IRMA法测定大鼠海马神经生长因子的含量变化. 结果孕期被动吸烟使仔鼠学习记忆能力下降,海马神经生长因子含量明显降低.结论孕期被动吸烟降低仔鼠学习记忆功能与海马神经生长因子代谢的失调有关.
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孕鼠感染弓形虫对子代的影响
目的观察孕期感染弓形虫对子代鼠发育、寿命和免疫功能的影响. 方法以不同剂量RH株弓形虫腹腔感染孕中期鼠(d10),分娩后观察记录子鼠发育过程中体长、体重、寿命;给予实验目的要求的干预措施,观察智力发育情况及免疫功能变化. 结果弓形虫轻感组、重感组、对照组孕鼠分娩子鼠体长差异无显著性,体重、寿命、智力发育有差别;重感组子鼠寿命明显短于对照组和轻感组.轻感组子鼠智力干预前后差异有显著性,子鼠智力可以通过干预措施达到正常或得到改善,其他组无明显变化;受到再攻击感染时,重感染组子鼠感染率显著高于轻感组和对照组,且与IgG含量成反比.孕期弓形虫重度感染使子鼠抗感染能力下降,但血清特异性抗体IgG能起到一定的保护作用. 结论孕期感染弓形虫出生子鼠体重、智力、免疫功能降低,寿命缩短,与感染剂量大小有关.对体长无明显影响.
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孕中期弓形虫感染对孕鼠血清孕酮及雌三醇含量的影响
目的 探讨孕中期弓形虫感染对孕鼠血清孕酮(progesterone)及雌三醇(estriol)含量的影响.方法 孕中期BALB/c孕鼠随机分为染虫组和健康对照组,染虫组经腹腔无菌接种纯化的RH强毒株弓形虫速殖子,健康对照组注射等量0.01 mol/L PBS.分别于妊娠第10、12、14、16、18 d,摘孕鼠眼球取血,经放射免疫法测定血清孕酮和雌三醇含量. 结果 在孕第10、12、14 d,孕鼠血清孕酮和雌三醇含量染虫组与对照组比较差异无统计学意义( P >0.05);在孕第16、18 d,两组比较差异有统计学意义( P <0.01). 结论 孕中期弓形虫感染可引起孕鼠血清孕酮和雌三醇含量下降,这可能是弓形虫感染致胚胎发育迟缓、胎盘组织炎性病变及滋养层细胞凋亡增加的结果 ,也可能是胚胎发育迟缓、滋养层细胞凋亡增加的原因.
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杂色曲霉素对新生乳鼠致癌作用的实验研究
我们采用单次杂色曲霉素灌喂新生乳鼠,以观察其诱发肺癌的作用.一、材料与方法1.实验动物:清洁级健康BALB/c孕鼠18只,由河北医科大学实验动物学部提供,动物合格证号为DK0410-101.每只孕鼠分笼喂养,待新生乳鼠出生后即进行灌喂处理,每窝乳鼠随机分为实验组与对照组,实验组灌喂杂色曲霉素,对照组给予等量生理盐水.
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重组小鼠γ-干扰素对弓形虫感染孕鼠及鼠胚的影响
目的 研究重组小鼠γ-干扰素(rmu-IFN-γ)对妊娠期感染弓形虫的孕鼠蜕膜T淋巴细胞亚群及鼠胚感染率的影响.方法 将60只孕鼠被随机分为4组:空白组、感染组、rmu-IFN-γ小剂量治疗组(A组)和大剂量治疗组(B组).采用弓形虫急性感染妊娠第6～10 d孕鼠,不同剂量rmu-IFN-γ腹腔给药,感染后72 h取孕鼠蜕膜组织,流式细胞术检测各组T淋巴细胞亚群的水平;每组随机取5只孕鼠统计各组鼠胚的数目,SABC免疫组化法检查鼠胚中的弓形虫抗原阳性率.结果 孕鼠感染弓形虫后蜕膜CD4+、CD4+/CD8+降低(P＜0.05),A组和B组两种剂量的rmu-IFN-γ干预后均能提高CD4+、CD4+/CD8+水平(P＜0.05);A组和B组中鼠胚的垂直传播率均低于感染组.结论 孕鼠感染弓形虫后蜕膜局部细胞免疫受到抑制,注射适量的rmu-IFN-γ可以逆转CD4+/CD8+比值,提高机体的细胞免疫水平,降低鼠胚的垂直传播率,对孕鼠及鼠胚具有一定的保护作用.
关键词： 弓形虫 重组小鼠γ- 干扰素 孕鼠 鼠胚 T淋巴细胞亚群 -
孕鼠葡萄糖摄入量对胎盘胰岛素样生长因子表达的影响
目的：通过孕期中给予孕鼠不同的葡萄糖摄入量，研究其胎盘中胰岛素样生长因子（IGF）表达情况，同时观察胎鼠结局。方法选取成功交配的雌性KM小鼠48只，随机分为3组：对照组（8只）、实验A组（20只）和实验B组（20只）。孕期中三组均给予正常喂养，A组每天另给予5%葡萄糖溶液1 ml灌胃，B组另给予10%葡萄糖溶液1 ml灌胃。所有孕鼠均在第19天时进行剖宫产，使用Western blot和RT-PCR方法对胎盘组织的IGF-1、IGF-2及IGF-1R进行检测，同时对胎鼠数量和畸形、死胎、存活胎情况进行观察，并对存活胎胎鼠体重和血糖水平进行检测。结果（1）Western blot和RT-PCR检测结果显示，实验A组和实验B组孕鼠胎盘组织中IGF-1、IGF-2及IGF-1R的表达水平均高于对照组，其中实验B组中的表达水平高（P＜0.05）；（2）实验A组和实验B组的胎鼠体重和血糖水平均高于对照组，其中实验B组水平高（P＜0.05）；（3）三组中胎鼠发育均较正常，胎鼠数量和畸形、死胎情况未发现有明显增多（P＞0.05）。结论孕鼠葡萄糖摄入量增多会诱导胎盘组织IGF-1、IGF-2及IGF-1R表达水平增加，促进胎鼠对葡萄糖的吸收利用及胎儿体重的增加。
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模拟移动电话电磁辐射对小鼠围着床期子宫内膜降钙素的影响
目的：探讨在不同时间，不同强度935 MHz 模拟移动电话电磁辐射下，子宫内膜降钙素变化。方法将受精后雌鼠分别暴露于935 MHz 的连续性电磁辐射（低150μW/cm2、中570μW/cm2、高1400μW/cm2三个强度）装置中，分别辐照4 h/d和2 h/d，连续3 d，于着床期（受精后4 d）处死小鼠，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测子宫内膜降钙素 mRNA 的表达。结果570μW/cm2、4 h/d，1400μW/cm2、4 h/d辐射组与对照组相比降钙素表达均降低，有显著性差异（P＜0.01）；同时570μW/cm2辐射组及1400μW/cm2辐射组内，4 h/d组降钙素表达低于2 h/d辐射组，有显著性差异（P＜0.01）。结论935 MHz模拟移动电话电磁辐射可通过降低子宫内膜降钙素mRNA表达，导致子宫内膜容受性发生改变，降低滋养层细胞的侵入性，阻碍胎盘的形成，进而影响胚胎着床过程，并且存在一定的剂量-反应关系及累积效应。
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被动吸烟致宫内生长受限胎鼠脑组织细胞凋亡相关基因的表达
孕鼠被动吸烟可致胎鼠宫内生长受限并影响其脑的发育[1].我们应用快速竞争性逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测被动吸烟致宫内生长受限胎鼠脑细胞凋亡相关基因Bax mRNA及bcl-2 mRNA的相对表达量,从而探讨细胞凋亡在宫内生长受限胎鼠发病中的作用.
