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体外受精-胚胎移植中非优质胚胎的冷冻价值
目的 探讨体外受精-胚胎移植中非优质胚胎冷冻的临床价值. 方法 回顾性分析392例冷冻胚胎移植周期.根据冻存前胚胎质量将其分为优质组和非优质组,比较不同年龄段两组的妊娠率、种植率和流产率. 结果 ＜35岁组,优质胚胎组妊娠率、种植率显著高于非优质胚胎组(P＜0.05),两者流产率无显著差异(P＞0.05).≥35岁组,两组妊娠率、种植率、流产率无显著差异(P＞0.05). 结论 选择性非优质胚胎冷冻,有助于提高体外受精-胚胎移植的累积妊娠率,改善临床治疗结局,避免胚胎浪费.
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D3非优质胚胎的冷冻价值及其临床结局分析
目的 分析冻融胚胎移植(FET)周期中非优质胚胎的临床结局,探讨非优质胚胎冷冻与移植的价值. 方法 回顾性分析202个优质胚胎及144个非优质胚胎移植周期的妊娠率、种植率的差异及影响因素,以及非优质胚胎解冻后继续培养的情况. 结果 与优质胚胎组相比,非优质胚胎组患者年龄[(32.08±4.39)岁vs.(30.48±4.23)岁]、胚胎解冻后培养胚胎未生长比例(26.54％ vs.15.52％)显著升高,而形成囊胚的比例(0.62％ vs.4.10％)、胚胎种植率(13.66％vs.30.28％)及临床妊娠率(26.67％ vs.51.55％)均显著下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);135个非优质胚胎FET周期共移植胚胎322枚,5B胚胎组解冻后胚胎存活率显著高于4B组(100％ vs.91.87％) (P＜0.05);与4B胚胎组相比,5B胚胎组未生长胚胎的比例较低(22.86％ vs.32.53％),但无统计学差异(P＞0.05). 结论 年龄是胚胎质量及妊娠结局的重要因素;非优质胚胎中部分胚胎具有继续发育的潜能,对于优质胚胎较少或没有剩余的患者,可考虑冷冻/移植非优质胚胎,其中5B胚胎可能更有价值.
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玻璃化技术冷冻人类囊胚和单胚胎移植
玻璃化冷冻技术简化了胚胎冷冻程序,提高了各个阶段胚胎的冷冻保存效果,尤其是对程序化冷冻效果差的囊胚的冷冻保存,是具有前景的胚胎冷冻方法.囊胚移植和单胚胎移植被认为是提高种植率、降低多胎妊娠率的有效方法.本文就玻璃化冷冻的影响因素和囊胚玻璃化冷冻进展综述如下.
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妇科肿瘤与生育力保护及保存
15％～20％的妇科肿瘤患者处于育龄期,这些患者中有很多仍有生育要求.然而妇科肿瘤治疗中的手术切除、放疗及化疗等均可对生育力产生严重损害,生育力下降或丧失将严重影响肿瘤幸存者的生活质量.因此如何在保证肿瘤治疗效果的前提下尽可能保护患者的生育力已成为肿瘤治疗中的重要议题.近十年,妇科肿瘤患者生育力保护研究取得了长足进展,保留生育力手术、药物和辅助生殖技术的不断改进和应用,其有效性和安全性也逐步得到临床证据的支持.现就妇科肿瘤中各种生育力保护和保存方法进行概述.
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冷冻胚胎保存时限的中国专家共识
胚胎冷冻保存技术是辅助生殖技术的重要衍生技术,它有助于提高单个取卵周期的胚胎利用率和累积妊娠率,降低患者的治疗费用及卵巢过度刺激综合征的发生率,并在生育力保存中发挥重要作用.然而,随着体外受精-胚胎移植周期数的不断增长,冷冻保存胚胎的数量也随之显著增加,其中不少冷冻胚胎长期保存不用(如无主胚胎、欠费胚胎),给各生殖医学中心造成了负担并占用大量社会医疗资源,同时也带来了一系列伦理问题.中华医学会生殖医学分会伦理学组针对胚胎的属性、胚胎冷冻保存安全性和冷冻保存相关处置等问题反复讨论,修订并形成了有关冷冻胚胎保存时限的十条共识,以利于规范我国胚胎冷冻技术的应用及管理.
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德国人工辅助受精呈现出较高的成功率
本文对首次接受辅助生殖处理的患者进行了为期10年的定性研究,用以衡量体外受精的成功率.这项研究包括所有体外受精、胞质内精子显微注射法和胚胎冷冻,并密切关注所有患者直到分娩活婴或进入不连续治疗.1998～ 2007年共治疗3 011名妇女,有2 068名婴儿出生.
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部分卵裂球损伤对冻融后胚胎发育潜能的影响
目的 了解部分卵裂球损伤对冻融后优质胚胎发育能力的影响,为解冻周期移植胚胎的挑选提供依据.方法 对502例解冻移植周期进行回顾性分析.所有移植胚胎分为两类,胚胎冻融后所有卵裂球均无损伤,卵裂球数＞6,碎片＜10%(A型);冻融后胚胎有1～2个卵裂球损伤,但仍有至少6个完整无损伤卵裂球,碎片＜10%(B型).无损伤组移植的所有胚胎均为A型(n=294周期),部分损伤组移植胚胎中至少包含1个B型胚胎(n=208周期).比较2组临床妊娠率和着床率.结果 无损伤组临床妊娠率为36.73%(108/294),着床率19.42%(153/788),部分损伤组为38.46%(80/208)和19.43%(110/566),2组临床妊娠率和着床率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).而且含1枚B型胚胎组(163周期)和2枚B型胚胎组(42周期)的临床妊娠率和着床率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 少量卵裂球损伤的冻融后优质胚胎,其发育潜能与无损伤优质胚胎相同.
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低等级囊胚与不同质量分裂胚冻融后妊娠结局的比较
目的 比较冻胚移植周期低等级囊胚与不同质量分裂胚冻融移植后的妊娠结局,探讨不同时期和质量的胚胎的发育潜能,为临床冻融周期移植胚胎的选择策略提供参考.方法 回顾性分析2015年1月至2016年6月冻胚移植周期患者临床资料,将同一新鲜周期中既有第三天冷冻分裂胚又在第五天仅有低等级囊胚冷冻者纳入研究.其中冷冻的分裂胚按照形态学评分标准分为顶级冷冻分裂胚和次级冷冻分裂胚.患者自愿选择分裂胚或第5天囊胚解冻,移植2枚胚胎.移植胚胎均为低等级囊胚者243周期,移植胚胎均为顶级分裂胚者156周期,移植胚胎均为次级分裂胚者114周期.比较三组胚胎的临床妊娠率、种植率、早期流产率和多胎率,进行统计学分析.结果 顶级分裂胚与低等级囊胚的临床妊娠率和种植率相似(64.20%vs.64.74%,44.03%vs.46.79%),显著高于次级分裂胚(49.12%,35.48%);顶级分裂胚的早期流产率显著低于低等级囊胚和次级分裂胚(3.96%vs.8.33%,7.14%);多胎率方面,顶级分裂胚高(44.55%),其次为低等级囊胚(37.18%)和次级分裂胚(32.46%),但流产率和多胎率的差异无统计学意义.结论 冻胚移植周期中,顶级分裂胚与低等级囊胚相比,具有更好的妊娠结局,次级分裂胚的临床结局较差.当患者冷冻的囊胚只有低等级,而同时有分裂胚冷冻时,首选顶级分裂胚进行解冻和移植,其次为囊胚,后为次级分裂胚.
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卵巢组织冷冻移植在肿瘤生殖学中的应用前景及存在问题
随着年轻肿瘤患者发病率和治愈率的提高，患者保存生殖能力的要求越来越迫切。卵巢组织冷冻移植作为女性生殖力保存的一种方法，具有生育力储备大、不受生理周期影响、适用于青春期前的年轻女性患者以及无法进行促排卵治疗的肿瘤患者等优于卵子冷冻和胚胎冷冻的独特优势，在肿瘤生殖学中具有重要的应用前景。但是，目前卵巢冷冻移植在技术和应用上还存在一些客观问题，本文综述了卵巢组织冷冻移中的冷冻复苏、存活检测、肿瘤残留检测、体外培养诱导卵泡发育、体内移植及受精发育等众多技术环节，论述了每一环节的具体技术方法、进展以及影响成败的关键因素和存在的问题。本文为广大医务和科研工作者全面了解卵巢组织冷冻移植在肿瘤生殖学中的应用和进展提供了理论参考。
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细胞松弛素B对体外成熟卵母细胞冻融后超微结构的影响
卵母细胞冷冻是保存女性生育力的一个重要手段,不仅可以避免胚胎冷冻引起的法律、宗教、伦理等问题,还可为女性儿童保存生育能力,有广泛的应用前景.尽管卵母细胞冷冻技术近年来取得了较大的突破,但至今仍未能像胚胎及精子冷冻一样在辅助生殖领域普及,其原因主要是由于冻融后的卵母细胞受精率、卵裂率较低,胚胎发育潜力低下.
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卵丘细胞对成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存及临床妊娠结局的影响
随着体外受精-胚胎移植等辅助生殖技术的发展,低温保存技术的作用越来越重要.由于卵母细胞本身所特有的一些生物学特性,使其冷冻效果尚不能像胚胎冷冻一样大规模地用于临床.影响卵母细胞冻存的因素很多,卵丘细胞的存在能否有效改善卵母细胞冷冻保存效果,各研究结果存在较大差异[1-3].本研究回顾性分析保留卵丘细胞对成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存、胚胎发育及临床妊娠结局的影响,现将结果报道如下.
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冻融胚胎移植子宫内膜的准备
人类胚胎冷冻广泛应用于国内外体外受精(IVF)中心,不仅可以减少多胎妊娠和严重的卵巢过度刺激综合征的发生,还可以明显地提高累积妊娠率[1] .我院进行172个冻融胚胎移植周期的治疗,获得59例妊娠.现就不同的子宫内膜准备方案进行回顾性分析.
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女性癌症患者生育力保存方法的研究综述
罹患癌症的女性接受放疗和化疗会导致生育力下降.生殖医学与冷冻生物学的发展为这一群体的生育力保存提供了可能.通过卵巢皮质组织冷冻与移植、胚胎或卵母细胞冷冻、未成熟卵母细胞体外成熟、原始卵泡与窦前卵泡的体外培养等技术,女性癌症患者有机会延续生育力并产下子代,而干细胞在生育力保存中的作用仍处于研究阶段,尚未用于临床.
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小鼠胚胎冷冻技术的研究进展
传统胚胎冷冻技术如OPS、冷冻环、冷冻帽、冷冻膜等,在胚胎复苏率和囊胚形成率、技术可行性、温度适用范围、冰冻和解冻速率等方面各具有其特定优缺点,在实际推广和应用中存在一定局限性.本文就新型微滴式玻璃化(Modified droplet vitrification,MDV)胚胎冷冻技术和高重量渗透摩尔浓度玻璃化(High osmolality vitrification,HOV)两种新型胚胎冷冻保存技术进行概述,并阐明胚胎冷冻保存及复苏发育过程中所受温度、饮食中植物雌激素、N-乙酰半胱苷酸等参数的影响.
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天津市2001年医药卫生科研进展
一、实验医学医用实验动物学:为促进我国实验动物学和细胞生物学相关研究领域的发展,天津市卫生防病中心,以我国普通实验无菌条件、普通级小鼠品系为条件,率先在国内系统地完成了实验小鼠超排卵、卵采集、小鼠初期胚的快速冷冻复苏及胚胎移植等技术研究,并以四品系小鼠为研究对象,进行了实验小鼠胚胎冷冻种子库技术研究,为实验小鼠胚胎库的建立奠定了基础;体外受精技术的研究,为精子冷冻种子库的建立奠定了基础.
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胚胎冷冻技术应用于抗菌肽转基因小鼠的保种传代
目的 研究胚胎冷冻在抗菌肽转基因FVB小鼠保种传代中的应用.方法 对6～8周正常雌性FVB小鼠进行超排分别与雄性杂合子抗菌肽转基因FVB小鼠交配,收集 2-cell胚胎,进行胚胎冷冻.1周后进行胚胎复苏移植,通过PCR方法对仔代鉴定.结果 冻存胚胎140枚,复苏获得存活胚胎98枚,移植85枚,产仔38只,获得阳性后代12只.结论 通过胚胎冷冻技术保种及复苏移植技术可对抗菌肽转基因小鼠进行传代.
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绿色荧光蛋白转基因小鼠模型的建立及胚胎冷冻保种
目的 建立绿色荧光蛋白转基因小鼠模型,并采取胚胎冷冻的方法进行保种.方法 通过原核显微注射法,把线性化、纯化后的外源基因pEGFP注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠.经鉴定对有表达的转基因鼠进行胚胎冷冻保种.结果 移植注射胚胎385枚给30只假孕小鼠共出生了306只后代鼠,经PCR和southern blot检测得到5只阳性小鼠.F2代转基因鼠胚胎冷冻240枚胚胎.结论 通过显微注射法使外源基因pEGFP在小鼠基因组中得到整合,建立了转pEGFP的转基因小鼠模型.
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C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎冷冻保种技术研究
目的 建立C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎的冷冻保种技术.方法 通过直接收集体内发育的2-细胞胚或者通过体外受精方法获得2-细胞胚,采用玻璃化冷冻法冷冻、复苏、移植,后代经PCR检测.结果 体内发育至2细胞期胚胎90枚,解冻后的平均复苏率是67.78％,移植产仔率是21.31％,后代的阳性率是23.08％；体外受精的2细胞期胚胎203枚,解冻复苏60枚,平均复苏率是63.33％,移植产仔率是15.78％,后代的阳性率是33.33％.结论 两种胚胎冷冻途径均获得了C57-ras癌症转基因动物模型阳性小鼠,建立了该模型动物的低温保存方法.
关键词： C57-ras转基因小鼠 体外受精 胚胎冷冻 2细胞期胚胎 -
C57BL/6J 小鼠冻融IVF原核胚用于Cas9显微注射探讨
目的 探讨小鼠体外受精(IVF)冻融后用于Cas9注射的可行性.方法 新鲜C57BL/6J小鼠卵子IVF后采用冻存管法(EFS20/40)冷冻原核胚(单细胞胚)和2 细胞胚胎,次日复苏后培养.比较冻融原核胚和2 细胞胚胎的回收率及成活率.选取部分冻融原核胚与新鲜原核胚同时进行Cas9和稀释液胞质注射并培养至2细胞,分别比较注射后的存活率及2细胞发育率.结果 冻融后的B6小鼠原核胚的回收率为92.5%、成活率为92.8%,2细胞胚的回收率为90.5%、成活率95.8%,两组数据差异无显著性(P > 0.05).新鲜原核胚Cas9注射后的存活率为92.7%,空白组注射组为97.5%,冻融原核胚Cas9注射后的存活率为82.6%,空白组为92%,冻融组Cas9注射与各组差异有显著性(P < 0.05),其它各组差异无显著性(P > 0.05).注射后的2 细胞胚发育率差异无显著性(P > 0.05).结论 冻融原核胚可用于Cas9显微注射.
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FVB小鼠超排卵及胚胎冷冻技术的研究
目的 为制备FVB转基因小鼠及保种繁殖提供佳超排周龄及胚胎冷冻方法.方法 对4～6周、6～8周、8～10周FVB小鼠进行超数排卵效果的比较及采用体外培养受精卵至2-cell法和输卵管吹卵法两种不同方法 收集2-cell受精卵进行胚胎冷冻.结果 4～6周雌鼠经超排后回收的受精卵(24.6个)明显高于6～8周龄、8～10周龄的FVB雌鼠(14.5个、16.2个),差异有显著性;两种方法 回收的2-cell受精卵经冷冻保存后,Ⅱ组受精卵解冻后2-cell形态正常的胚数(106个)高于Ⅰ组解冻后2-cell形态正常的胚数(90个),但两者无显著性差异.结论 本研究将为制备FVB转基因小鼠及转基因动物的种系保存和繁殖提供了基础.
