首页 > 文献资料
-
芍药甘草滴丸的制备及其芍药苷、甘草苷和甘草酸的HPLC含量测定
目的:制备芍药甘草滴丸(SGDP),测定其主要成分芍药苷、甘草苷、甘草酸的含量,以及其他与质量控制相关的指标,为有效控制其质量提供重要指标和参数.方法:采用水煎煮提取,乙醇沉淀、HP-20大孔树脂纯化后,选择合适的基质和冷却剂,制备SGDP;采用HPLC-DAD法测定SGDP中芍药苷(230 nm)、甘草苷(276 nm)、甘草酸(250 nm)的含量.并按照《中华人民共和国药典》2015版的方法对其外观、重量差异、溶散时限进行检查.结果:成功制备了SGDP,HPLC法可同时测定SGDP中芍药苷、甘草苷、甘草酸铵盐的含量,分别是(32.66±0.46)mg/g、(9.23±0.23)mg/g、(17.48±0.86)mg/g;平均回收率分别是111.23％ 、96.04％ 、104.43％.外观、重量差异、溶散时限均符合药典要求.结论:SGDP的制备工艺合理可行.HPLC法灵敏、准确可靠,重复性好,可用于同时检测SGDP中芍药苷、甘草苷、甘草酸的含量,为其质量控制提供参考依据.
-
甘草的活性成分与临床应用及禁忌
甘草为豆科植物,根及根茎是其药用部位.甘草味甘,性平,归心、肺、脾、胃、经,含有多种活性成分,具有祛痰止咳、缓急止痛、抗病毒、抗菌、调和诸药等功效.为更好的发挥甘草的临床疗效,将历代医者对甘草的研究与应用作出概述,并详细的指出了甘草在临床中的应用禁忌.
-
甘草酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及Bcl-2和Bax表达的影响
目的:观察甘草酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用及B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响,探讨其可能机制.方法:50只SD大鼠随机分为假手术组,心肌缺血再灌注损伤组(模型组),甘草酸预处理低、中、高剂量组.采用结扎左冠状动脉前降支建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.假手术组穿线后不结扎;模型组于缺血前30 min腹腔注射2 mg·kg-1生理盐水;甘草酸低、中、高剂量组于缺血前30 min腹腔注射2,4,10 mg·kg-1甘草酸.光镜下观察心肌组织的病理组织学变化;检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,乳酸脱氢酶(LDH)活性,心肌肌钙蛋白-T(cTnT)水平,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,白细胞介素-6(IL-6)水平,髓过氧化物酶(MPO)活性,超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌Bcl-2和Bax的表达.结果:与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组明显减轻心肌缺血再灌注损伤;与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组显著降低CK-MB,LDH,cTnT,TNF-α,IL-6,MPO,MDA水平,显著升高SOD,GSH-Px活性(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组,中剂量组,高剂量组显著降低心肌细胞凋亡指数(P＜0.01);与模型组比较,甘草酸预处理低、中、高剂量组显著上调心肌Bcl-2表达,下调Bax表达及上调Bcl-2/Bax(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草酸预对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且能上调心肌Bcl-2表达和下调心肌Bax表达,从而抑制细胞心肌凋亡.
-
甘草酸与乌头碱配伍对神经细胞的作用
目的:研究甘草酸与乌头碱配伍对神经细胞的作用.方法:利用细胞培养技术体外培养大鼠大脑皮质神经细胞,运用MTT法测定甘草酸与乌头碱配伍对神经细胞存活率的影响,采用比色法测定甘草酸与乌头碱配伍对神经细胞内Na+,K+含量,钠-钾三磷酸腺苷酶(Na+,K+-ATPase)活力的影响.结果:1,2,4 g·L-1的甘草酸分别与2 g·L-1乌头碱配伍作用神经细胞30 min后,能不同程度拮抗乌头碱所致活细胞数降低,以及拮抗乌头碱所引起的神经细胞内Na+含量降低,K+含量和Na+,K+ A-TPase活力的升高.结论:甘草酸能降低乌头碱所致神经细胞毒性,拮抗乌头碱所引起的神经细胞内环境的紊乱,乌头碱与甘草酸以1∶2配伍为佳.
-
四逆散有效成分对内脏高敏感大鼠5-HT信号通路的多靶点协同调控
目的:研究芍药苷、辛弗林、甘草酸对内脏高敏感大鼠5-羟色胺(5-HT)信号通路的多靶点[色氨酸羟化酶1(TPH1)/5-羟色胺转运体(SE RT)/5羟色胺3受体(5-HT3R)/5-HT4 RI调控,探讨各成分间的协同交互作用,探索四逆散有效成分干预内脏高敏感状态的潜在机制.方法:SD大鼠随机分为正常组,模型组,匹维溴铵组(15 mg·kg-1),芍药苷组(50 mg·kg-1),辛弗林组(50 mg·kg-1),甘草酸组(50 mg·kg-1),芍药苷+甘草酸组(25 mg·kg-1 +25 mg·kg-1),芍药苷+辛弗林组(25 mg·kg-1+ 25 mg·kg-1),辛弗林+甘草酸组(25 mg·kg-1 +25 mg·kg-1),芍药苷+辛弗林+甘草酸组(16.7 mg·kg-1+16.7 mg·kg-1 +16.7 mg·kg-1),四逆散组(10 g·kg-1).采用复合应激法建立肠易激综合征(IBS)内脏高敏感大鼠模型;以大鼠一般状态评分和直肠扩张腹壁撤退反射(AWR)的小容量阈值评价大鼠肠道敏感性程度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠组织5-HT,TPH1,SERT,5-HT3R,5-HT4R水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠结肠组织TPH1,5-HT3R,5-HT4R mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠结肠组织TPH1,5-HT3R蛋白水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠一般状态评分和小容量阈值显著下降(P＜0.01),结肠组织5-HT,TPH1,5-HT3R水平显著升高,SERT,5-HT4R水平明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),TPH1,5-HT3R mRNA及蛋白表达显著升高,5-HT4R mRNA表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,芍药苷+辛弗林+甘草酸组结肠5-HT,TPH1,5-HT3R水平明显降低,SERT,5-HT4R水平明显升高,TPH1,5-HT3R mRNA及蛋白表达明显降低,5-HT4R mRNA表达明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);TPH1,5-HT3R,5-HT4R mRNA多靶点纠偏作用明显,小容量阈值和一般状态评分明显升高(P ＜0.05,P＜0.01),组内成分之间存在协同交互作用.结论:芍药苷+辛弗林+甘草酸组合对内脏高敏感大鼠结肠5-HT合成限速酶(TPH1)和相关受体(5-HT3R,5-HT4R)具有协同增效的调控作用,有效成分组合对5-HT通路的多靶点纠偏效应可能是四逆散改善大鼠内脏高敏感状态的重要机制.
-
炙甘草汤及有效成分配伍对猫缺血再灌心脏触发活动及心肌损伤影响
本研究在麻醉猫左冠状动脉前降支(LDH)结扎再灌的实验中使用心肌单相动作电位技术观察了炙甘草汤、甘草酸单铵盐、人参总皂甙配伍甘草酸单铵盐能显著降低心律失常,缩短触发活动时程和幅度,减少血清中磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氧酶(LDH),明显增加缺血再灌注区心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低心肌组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量.实验结果表明,炙甘草汤、甘草酸单铵盐、人参总皂甙配伍甘草酸单铵盐具有抗实验性心肌缺血再灌注触发活动和对心肌损伤有保护作用.
-
HPLC测定异黑成熟颗粒中田蓟苷和甘草酸的含量
目的:建立测定异黑成熟颗粒中2种有效成分田蓟苷和甘草酸含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-0.5％甲酸(27∶ 73)为流动相,检测波长324 nm,柱温35℃,流速1.0 mL·min-1.Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.2 mol· L-1酸铵-冰醋酸(67∶33∶1)为流动相,检测波长250 nm,柱温30℃,流速1.0 mL· min-1.结果:田蓟苷和甘草酸分别在1.14～114 μg (r=0.9999)和20.6 ～ 206 μg(r=0.999 7)线性关系良好；平均回收率分别为98.26％(RSD 2.29％),99.39％ (RSD 1.86％).结论:该方法简便可行,重复性好,可用于异黑成熟颗粒中田蓟苷和甘草酸含量测定.
-
HPLC法测定铁笛丸中甘草酸的含量
目的:建立铁笛丸中甘草酸的高效液相含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相甲醇-[0.2 mol·L-1醋酸铵:冰醋酸(33:1)](64:36);流速1 mL·min-1;柱温30℃;检测波长250 nm.结果:线性范围为0.15～0.75 μg,精密度试验RSD 2.07%,回收率99.50%,RSD 2.15%(n=6).结论:该方法快速、简便、准确、重复性较好,结果可靠,可为铁笛丸的质量评价提供有效手段.
-
3种方法制备的四逆汤中甘草苷、甘草酸含量测定
目的:对四逆汤传统法、药典收录的水提醇沉法、各单味药分提合并法制备的四逆汤中甘草苷、甘草酸含量进行比较.方法:采用HPLC测定3种不同的方法提取液中甘草苷、甘草酸的含量,C18色谱柱,流动相乙腈-0.05％磷酸水,梯度洗脱,柱温25℃,检测波长237 nm,流速1.0 mL·min -1,进样量10 μL.结果:甘草苷在传统汤剂中含量为2.57 mg·g-1,经方合剂中的含量为2.21 mg·g-1,单味配方合并液中含量为3.58 mg·g-1；甘草酸在传统汤剂中含量为1.96 mg·g-1,经方合剂中的含量为1.84 mg·g-1,单味配方合并液中含量为3.04 mg·g-1.结论:四逆汤单提合并法中甘草苷、甘草酸含量高,且各制法的四逆汤中甘草苷、甘草酸含量均有显著性差异,为四逆汤提取方法研究提供依据.
-
UPLC同时测定甘草及甘草浸膏中的甘草苷和甘草酸
目的:建立快速测定甘草及甘草浸膏中甘草酸和甘草苷含量的超高效液相色谱(UPLC)方法.方法:采用超高效液相色谱仪(UPLC),在BEH Shield RP18(2.1 mm×50 mm,1.7 μm)色谱柱上梯度洗脱分离,流动相乙腈(A),1.0％乙酸水(B),流速0.5 mL· min-1,甘草苷检测波长276 nm,甘草酸检测波长254 nm,柱温30℃.结果:甘草苷的浓度在0.01～1.0 g·L-1与峰面积线性关系良好,平均回收率为98.98％,方法精密度RSD 2.55％ (n =6),甘草酸在0.03 ～1.2 g·L-1与峰面积线性关系良好,平均回收率为99.03％,方法精密度RSD 1.73％ (n =6).结论:甘草苷和甘草酸在7 min内获得良好分离,结果准确可靠,该方法可用于甘草及其浸膏中甘草酸和甘草苷的快速测定.
-
HPLC同时测定茵山莲颗粒中5个有效成分的含量
目的:建立多波长同时测定茵山莲颗粒中绿原酸、栀子苷、野黄芩苷、甘草酸和五味子醇甲含量的HPLC法.方法:采用Wonda SilTM-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈(A)-0.4％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,86％B;5～35 min,86％ ～20％ B;35～45 min,20％B),流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,检测波长分别为325 nm(绿原酸),240 nm(栀子苷),335 nm(野黄芩苷),250 nm(甘草酸),220 nm(五味子醇甲).结果:绿原酸、栀子苷、野黄芩苷、甘草酸和五味子醇甲5个成分的线性范围分别为0.008 5～ 0.170 μg(r=0.999 5),0.046 2～0.924 μg(r =0.999 0),0.021 6～ 0.432 μg(r=0.999 2),0.019 7 ～0.394 μg(r =0.999 3),0.004 5 ～0.090 μg(r=0.999 9);平均加样回收率95.8％ ～ 98.4％.3批样品中上述5个成分的含量分别为1.105～1.134,5.139 ～5.204,2.546～2.603,2.208 ～2.231,0.352～0.361 mg·g-1.结论:该方法符合方法学验证要求,可用于茵山莲颗粒的5个指标性成分的同时测定.
-
UPLC同时检测加味逍遥提取物6种指标性成分含量
目的:建立同时测定加味逍遥提取物中6个指标性成分(栀子苷、芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、苯甲酰芍药苷、甘草酸)含量方法.方法:采用超高效液相色谱法,以UPLCTM HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),乙腈-0.05％磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,柱温30℃,体积流量0.4 mL· min-1,检测波长230 nm.结果:6个指标性成分分离度良好,均在各自线性范围内线性关系良好,R2≥0.9994;平均加样回收率为98.29％ ～ 101.67％,RSD均＜3.8％.结论:该法准确、简便、分离度良好,可作为加味逍遥提取物的质量评价方法.
-
HPLC同时测定四君子汤中4种指标性成分的含量
目的:建立同时测定四君子汤中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb,和甘草酸含量的方法.方法:采用HPLC测定,Thermo Hypersil BDS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03％甲酸梯度洗脱,流速0.9 mL.min-1,柱温30℃,检测波长202,250 nm.结果:人参皂苷Rg1在1.522 ～ 12.176 μg线性关系良好,平均回收率为100.86％,RSD2.34％,人参皂苷Re在1.368 ～ 10.944 μg线性关系良好,平均回收率为100.57％,RSD 2.95％；人参皂苷Rb1在3.198 ～15.990 μg线性关系良好,平均回收率97.88％,RSD 2.86％；甘草酸在5.036 ～40.286 μg线性关系良好,平均回收率99.25％,RSD 2.97％.结论:该方法简便、准确、实用性强,可用于四君子汤中4种指标性成分的含量测定.
-
甘菊滴丸的质量控制及稳定性考察
目的:建立甘菊滴丸的质量控制方法并考察其在加速和室温条件下的稳定性.方法:采用薄层色谱法鉴别甘菊滴丸中的主要药材甘草和羊耳菊；采用高效液相色谱法测定甘草酸的含量.结果:3批甘菊滴丸中试样品经3个月加速试验和24个月长期试验考察,各项指标均符合质量标准要求.结论:甘菊滴丸质量可控,稳定性好.
-
白蔻调中丸质量标准研究
目的:建立白蔻调中丸的质量标准.方法:采用TLC法对处方中山楂进行定性鉴别,用HPLC法测定甘草酸的含量.色谱柱:KromasiL-C18柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.2 moL·L-1醋酸胺溶液-冰醋酸(58:41:1),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:250 nm,柱温:30℃.结果:薄层斑点清晰,专属性强.甘草酸与其他成分分离完全,峰形良好.在0.041 4～2.068 0 μg范围内线性关系良好(r=0.999 7).平均加样回收率为100.90%,RSD为1.14%(n=9).结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂的质量控制方法.
-
甘草酸、甘草苷、异甘草素对醋氨酚人肝细胞损伤模型的保护作用比较
目的:建立并验证醋氨酚人肝细胞损伤模型,进一步研究甘草酸、甘草苷、异甘草素的保肝作用.方法:20 mmol·L -醋氨酚作用HL-7702正常人肝细胞3h,以四氮溴盐(MTT)为考察指标,通过阳性药物双环醇验证该细胞模型并获得量效参考值,进而研究不同质量浓度的甘草酸、甘草苷、异甘草素对人肝细胞损伤的保护作用.结果:醋氨酚人肝细胞损伤模型成功、方法可靠,甘草酸、甘草苷、异甘草素3种成分对人肝细胞醋氨酚损伤均具一定的保护作用.甘草酸的低有效浓度为0.001 6μmol· L-1,保肝的大效能为47.0％,达到大效能的浓度为0.2μmol·L-1.甘草苷的低有效浓度为0.4μmol·L -1,保肝的大效能为22.9％,达到大效能的浓度为2μmol·L -1.异甘草素的低有效浓度为0.4μmol·L -1,保肝的大效能为72.6％,达到大效能的浓度为250 μmol·L -1.结论:提供一种新的体外肝细胞损伤模型；在甘草用于保肝相关作用时,单纯以甘草酸、甘草苷作为质量评价指标是不够的.
-
温度、pH对甘草酸溶液中内毒素团聚状态的影响
目的:考察温度及pH对甘草酸溶液中内毒素团聚状态的影响.方法:采用30 kDa Millipore膜过滤不同温度及pH条件下甘草酸溶液,通过动态浊度法测定超滤液中内毒素活性浓度,HPLC检测超滤前后有效成分的变化,利用内毒素纳米粒径仪测定不同温度及pH条件下内毒素团聚状态的粒径分布.结果:温度60℃,pH 4时,内毒素团聚状态的粒径分布和去除率均大,甘草酸溶液经30 kDa Millipore膜超滤前后有效成分含量＞98％.结论:随温度的升高,甘草酸溶液中内毒素团聚状态的粒径分布变大,而随pH的增大则变小.
-
综合评分法优化清燥救肺汤的提取工艺
目的:优选清燥救肺汤的提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验设计,以苦杏仁苷、绿原酸、甘草酸含量及得膏率的综合评分为指标,经综合评分法考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数对工艺的影响.利用HPLC测定3种指标成分的含量,色谱条件为Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长程序(0 ～ 50 min,207 nm;50 ～100 min,237 nm),柱温30℃,流速1.0 mL· min-1,流动相乙腈(A)-=.1％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～30 min,5％ ～ 10％A;30 ～55 min,10％ ～20％A;55～ 80 min,20％ ～ 35％A).结果:清燥救肺汤的佳提取工艺为加8倍量70％乙醇提取2次,每次2h.结论:优选的提取工艺稳定、合理、可行,有效成分提取效率高.
-
UPLC研究不同配伍对白虎汤中甘草酸含量的影响
目的:建立UPLC测定白虎汤中甘草酸含量的分析方法,研究配伍对汤剂中甘草酸含量的影响.方法:采用L8(2)正交设计,以UPLC测定白虎汤中甘草酸的含量.结果:配伍降低了白虎汤复方药液中甘草酸的含量,知母和粳米对甘草酸含量的影响存在显著性(P＜0.05),石膏增加了甘草酸含量,但影响不显著,两两交互作用对甘草酸含量的影响不显著.结论:知母和粳米降低了复方药液中甘草酸的含量.
-
甘草酸的免疫调节作用研究进展
作为甘草的重要活性成分,甘草酸具有抗病毒、抗炎、抗过敏、抗变态反应、抗肿瘤及免疫调节等作用.其中免疫调节作用备受关注.甘草酸通过双重调节细胞免疫及体液免疫来发挥作用.甘草酸是一种有效的生物应答修饰剂,其免疫调节作用表现在对免疫活性细胞、细胞因子、补体等多方面.甘草酸能够增强辅助性T淋巴细胞的增殖能力和活性,促进淋巴细胞产生IL-2,IFN-γ,IL-1等细胞因子,抑制IL-4,IL-10,IL-8等的生成,同时具有抗补体活性,可选择性抑制补体系统的激活途径.甘草酸因具有免疫调节作用而在临床上得到广泛应用.在银屑病、慢性持发性荨麻疹、支气管哮喘、慢性肝病、艾滋病及肿瘤等疾病中作为主要的药物取得了良好的治疗效果.本文结合国内外研究进展对甘草酸的免疫调节作用做简要阐述.
