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实时荧光定量RT-PCR检测食管癌Survivin mRNA的表达
目的建立实时荧光定量RT-PCR方法检测Survivin mRNA的表达.方法用Trizol方法提取食管癌组织总RNA后,将其逆转录为cDNA ,建立实时荧光定量RT-PCR 方法,检测人食管癌 Survivin mRNA的表达.结果 Survivin mRNA在癌组织中高度表达,与正常食管粘膜有显著性差异.结论所建立的实时荧光定量RT-PCR方法用于检测检测人食管癌Survivin mRNA的表达,是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法.
关键词： 食管癌 实时荧光定量RT-PCR Survivin mRNA -
重症急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡及其调控机制的研究
目的 初步探讨重症急性胰腺炎(SAP)外周血中性粒细胞的凋亡及凋亡抑制蛋白survivin在SAP中性粒细胞凋亡延迟调控中的作用.方法 48只SD大鼠随机分为急性坏死性胰腺炎(ANP)组和假手术(SO)组.采用胰胆管逆行注射4%牛磺胆酸钠(1 ml/kg体重)制模,制模后24、48、72 h分别处死动物.取胰腺组织评估病理变化;TUNEL荧光标记法检测外周血中性粒细胞的凋亡;RT-PCR检测外周血中性粒细胞survivin mRNA的表达.结果 ANP组胰腺病理评分较(SO)组明显升高(P ＜ 0.05).ANP组中性粒细胞凋亡率较SO组明显降低,随时间延长更明显(P ＜ 0.05).ANP组中性粒细胞survivin mRNA水平均较SO组明显升高,且随时间延长更明显(P ＜ 0.05).ANP组中性粒细胞凋亡率分别与胰腺病理评分和survivin mRNA水平呈负相关(r = 0.97,r = 0.99, P ＜ 0.05).结论 ANP时外周血中性粒细胞凋亡明显延迟,survivin mRNA高表达,表明survivin在调控SAP外周血中性粒细胞凋亡延迟机制中可能具有重要作用.
关键词： 胰腺炎 急性坏死性 中性白细胞 细胞凋亡 Survivin mRNA -
纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值
目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中Survivin mRNA的检测在肺癌诊断中的意义.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本Survivin mRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较.结果肺癌手术切除标本癌组织Survivin mRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05 ),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2＝0.20,P＞0.05);纤支镜活检肺癌组织标本Survivin mRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30, χ2值为22.18, P<0.05);肺癌患者癌组织Survivin mRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05).肺癌患者痰标本Survivin mRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰Survivin mRNA检测的敏感性(P均<0.05).手术标本、纤支镜活检标本及痰标本Survivin mRNA的检测诊断肺癌的特异性分别为86.7%、88.9%及84.6%.结论纤支镜活检病变组织标本中Survivin mRNA有可能成为肺癌诊断的分子标志物之一.痰中Survivin mRNA的检测有可能为肺癌无创诊断提供一个新的辅助方法.
关键词： 肺肿瘤 支气管镜检查 痰 活组织检查 Survivin mRNA -
Survivin反义寡核苷酸联合顺铂诱导肺癌细胞凋亡的研究
Survivin属于凋亡抑制蛋白(IAP)基因家族中的新成员,在多数肿瘤组织中高表达,但不表达于终末分化组织[1].该基因在肺癌组织的表达率达72%[2],且具有抗细胞凋亡和促进细胞增殖的双重作用.我们前期的研究已证实[3]:Survivin反义寡核苷酸(ASODN)能有效抑制肺癌细胞株NCI-H446 Survivin mRNA和蛋白的表达,并诱导凋亡,抑制细胞生长.顺铂是目前治疗肺癌常用的一线化疗药,但因严重毒副作用和耐药性的产生限制了它的应用.如何提高顺铂抗癌效果、减少耐药和毒副作用是改善肺癌预后的关键之一.本研究合成Survivin ASODN,转染人肺癌细胞株NCIH446,并与顺铂联用,观察其抗癌效果,为肺癌治疗提供新的理论基础和实验依据.
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病理性瘢痕组织中微血管密度的测定及与survivin mRNA的表达关系
目的 测定病理性瘢痕组织中CD105标记的微血管密度(microvesiel density,MVD)和survivin mRNA的表达,探讨病理性瘢痕组织中癌基因在血管形成中的作用.方法 采用多相寡核苷酸探针原位杂交技术和免疫组织化学染色技术(SP法),分别检测survivin mRNA、CD105蛋白在40例病理性瘢痕、20例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达,并计数CD105标记的MVD.结果 CD105-MVD、survivin mRNA在病理性瘢痕较非病理性瘢痕和正常皮肤的表达差异皆具有统计学意义(P<0.05).病理性瘢痕组中survivin mRNA表达与CD105-MVD表达有相关性(P<0.05).结论 病理性瘢痕组织中,凋亡抑制基因survivin表达上调可能参与了其血管形成过程.
关键词： 病理性瘢痕 Survivin mRNA CD105 微血管密度 -
汉黄芩素对胶质瘤U251细胞Survivin mRNA及Caspase-3mRNA表达的影响研究
目的 探讨汉黄芩素对胶质瘤U251细胞Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA表达的影响.方法 192株人胶质瘤U251细胞株分别用汉黄芩素(96株)、替莫唑胺(TMZ)(48株)处理,留取48株作为空白对照组,半定量RT-PCR法检测Survivin mRNA与Caspase-3 mRNA表达强度,并在3组之间进行对比分析.结果 空白对照组Survivin mRNA表达强度为(0.773±0.176) μM,显著高于汉黄芩素组的(0.382±0.087) μM及TMZ组的(0.408±0.092) μM (P ＜ 0.05);Caspase-3 mRNA表达强度为(0.097±0.043) μM,显著低于汉黄芩素组的(0.454±0.213) μM及TMZ组的(0.432±0.187) μM(P ＜ 0.05),汉黄芩组与TMZ组之间比较差异无统计学意义(P ＞ 0.05).结论 汉黄芩素可通过下调Survivin mRNA的表达并上调Caspase-3 mRNA的表达起到有效诱导人胶质瘤U251细胞凋亡的作用.
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凋亡抑制蛋白XIAP和survivin在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值
目的 探讨胸腔积液中X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP) mRNA和surviving mRNA的检测在判断良恶性胸水诊断中的价值.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain raction,RT-PCR)法检测40例癌性胸腔积液标本、24例结核性胸膜炎和8例心力衰竭患者胸腔积液标本的XIAP mRNA和survivin mRNA表达,并与传统肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)比较.结果 40例恶性胸水CEA的检出率为80％ (32/40);癌性胸腔积液标本XIAP mRNA和survivin mRNA的阳性率分别为75％(30/40)和82.5％(33/40).胸水XIAP mRNA检测联合胸水CEA诊断肺癌的敏感性为90％(36/40),胸水survivin mRNA检测联合胸水CEA诊断肺癌的敏感性为80.1％(33/40),高于单独胸腔积液CEA检测的敏感性(P＜0.01).胸水CEA,XIAP mRNA和survivin mRNA的检测诊断肺癌的特异性分别为100％(32/32),59.4％(19/32)和93.8％(30/32),24例结核性胸膜炎患者及8例心力衰竭患者胸腔积液标本XIAP mRNA和survivin mRNA阳性率分别40.6％(13/32)和6.3％(2/32).结论 胸水中XIAP mRNA和survivin mRNA的检测可作为良恶性胸水诊断的一个新的辅助方法,进而为鉴别良恶性肿瘤提供依据.
关键词： XIAP mRNA Survivin mRNA 胸腔积液 肺肿瘤 RT-PCR -
非小细胞肺癌患者外周血Survivin mRNA的表达及临床意义
目的 通过对非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血生存素(Survivin)mRNA的检测;探讨其对NSCLC诊断的临床价值和意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测55例非小细胞肺癌患者、60例对照组的外周血Survivin mRNA的表达情况.结果 Survivin mRNA在NSCLC组的阳性率显著高于对照组(P<0.01).阳性表达率与临床TNM分期有统计学意义(P<0.01),与性别、年龄、病理组织类型无统计学意义(P>0.05).结论 外周血Survivin可作为早期辅助诊断NSCLC及微转移的一个有价值的肿瘤标志物.
关键词： Survivin mRNA 外周血 RT-PCR 非小细胞肺癌 -
角花胡颓子提取物对荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡的影响
目的:探讨角花胡颓子提取物(JHT)的抑瘤机制,为其开发应用提供实验依据.方法:计算抑瘤率,电镜观察肿瘤细胞超微结构.原位杂交法检测Survivin mRNA表达.结果:GFW抑瘤率为39.02％,透射电镜观察到JHT作用下的肿瘤细胞凋亡的形态学改变,可见凋亡细胞及典型凋亡小体形成.JHT抑制肿瘤细胞Survivin 表达,与模型组比较,差异有统计学意义.结论:角花胡颓子提取物具有抑瘤作用,可诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin mRNA表达相关.
关键词： 角花胡颓子提取物 凋亡 Survivin mRNA -
桂枝茯苓丸对荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡的影响
目的:探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制,为桂枝茯苓丸(GFW)开发应用提供实验依据.方法:计算抑瘤率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,电镜观察肿瘤细胞超微结构.原位杂交法检测Survivin mRNA表达.结果:GFW抑瘤率为38.93%,流式细胞仪检测GFW组凋亡率17.79%,与模型组比较,差异有统计学意义.GFW组镜下可见瘤细胞以凋亡变化为主.内膜结构完好,核膜清晰,细胞核固缩,染色质团块状散布核内或边集核膜下,并可见凋亡小体.GFW下调肿瘤细胞Survivin mRNA表达,与模型组比较,差异有统计学意义.结论:GFW诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin mRNA表达密切相关.
关键词： 桂枝茯芩丸 凋亡 Survivin mRNA -
Survivin mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及其意义
目的探讨Survivin mRNA在卵巢癌发生发展中的作用.方法本文应用原位杂交的方法检测60例上皮性卵巢癌中凋亡抑制蛋白Survivin mRNA的表达.结果卵巢上皮性癌OD值显著高于正常卵巢组织(P＜0.01);卵巢上皮性癌OD值显著高于良性卵巢肿瘤(P＜0.01);卵巢上皮性癌OD值显著高于卵巢上皮性交界性肿瘤(P＜0.05);卵巢上皮性交界性肿瘤OD值显著高于正常卵巢组织(P＜0.05);卵巢上皮性交界性肿瘤OD值显著高于良性卵巢肿瘤(P＜0.05).良性卵巢肿瘤与正常卵巢组织相比,无显著差异.Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌与Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌相比,OD值升高,P＜0.05,差别有显著意义.随分化程度的逐渐降低OD值升高.Survivin mRNA在卵巢癌各组织类型中其差别无显著意义.结论 Survivin mRNA在卵巢上皮性癌中及卵巢交界性上皮肿瘤中过度表达,晚期癌中的表达高于早期癌组织.推测Survivin参与肿瘤的发生、发展,与肿瘤的预后不良、复发密切相关,是一个具有潜在价值的肿瘤标志物.
关键词： 肿瘤学 卵巢癌 Survivin mRNA 表达 临床表现 -
Survivin mRNA、Caspase-3mRNA在舌鳞癌中的表达及相关性
目的:检测舌鳞癌组织中凋亡抑制基因Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA的表达,探讨其在舌鳞状细胞癌中的意义及相关性.方法:应用原位杂交方法检测10例正常舌黏膜、45例舌鳞状细胞癌标本中Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA的表达情况.采用SPSS13.0软件包进行x2检验及Fisher精确概率法检验,指标间关系采用Spearman等级相关分析.结果:舌鳞癌标本中Survivin mRNA阳性表达率为55.6%,正常对照组全部为阴性,两组差异显著(P＜0.01);舌鳞癌标本中Caspase-3 mRNA阳性表达率为42.2%,明显低于正常对照组的80.0%(P＜0.05);Survivin mRNA高表达及Caspase-3 mRNA低表达与舌鳞癌组织学分级、颈淋巴结转移相关(P＜0.05);与TNM分期密切相关(P＜0.01);经Spearman等级相关分析,两者之间呈显著负相关,r=-0.412,P=0.00,.结论:在舌鳞癌中,Survivin mRNA参与了抑制Caspase-3 mRNA的表达,且这种抑制作用与肿瘤的发生、发展相关.
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外周血Survivin mRNA表达与胃癌的关系
目的 探讨外周血中Survivin mRNA表达与胃癌的关系.方法 以GAPDH作内参照,应用实时定量RT- PCR技术检测55例胃癌化疗前及病情进展后患者外周血中Survivin mRNA表达水平.结果 化疗前Survivin mRNA表达水平为0.6012±0.0496,疾病进展后Survivin mRNA表达水平为0.7190±0.0961 (P＜0.05).回归分析发现,Survivin mRNA的表达水平及分期是影响胃癌预后的独立因素.结论 外周血Survivin mRNA可以作为胃癌早期诊断,判断胃癌复发或转移及预后的客观指标之一.
关键词： 胃肿瘤 外周血 Survivin mRNA 预后 -
血中survivin mRNA表达水平的定量检测及其对食管癌预后的评估
目的 探讨食管癌患者外周血中细胞凋亡抑制蛋白survivin mRNA定量检测对预后评估的价值.方法 取36例食管癌患者在手术前、手术刚结束时和手术后第3 d的外周血;将实时荧光RT-PCR绝对定量和相对定量技术舍理结合,创建新的标准曲线,用于检测外周血survivin mRNA的表达水平;22例胸部良性肿瘤患者的同期系列血样为对照组.结果 survivin mR-NA阳性表达的平均值(拷贝数/μg 总RNA)在3个取样时间点依次分别为:12 219(95%CI,7 826～16 612),6 595(95%CI,2 461～10 729)和15 018(95%CI,7 407～22 628).术后一年的随访结果显示,当术后第3 d survivin mRNA的表达水平大于9000拷贝/μg总RNA时,患者的复发风险显著性增高(P=0.033).结论 术后第3 d外周血中survivin mRNA的表达水平可作为一个新的判断指标用于食管癌患者预后的评估.
关键词： 食管癌 Survivin mRNA RT-PCR 外周血 预后 -
膀胱移行细胞癌尿Survivin mRNA检测的临床意义
目的:探讨膀胱移行细胞癌患者尿Survivin mRNA检测的临床意义.方法:48例膀胱移行细胞癌患者同时行尿Survivin mRNA和尿脱落细胞检查,比较其敏感性和特异性.结果:48例患者尿Survivin mRNA检查,阳性45例;尿脱落细胞检查,阳性14例.尿Survivin检查的敏感性高于脱落细胞学(P＜0.01).结论:尿Survivin mRNA检测敏感性和特异性高,对诊断膀胱肿瘤的价值优于尿脱落细胞检查.
关键词： 膀胱癌 Survivin mRNA 尿脱落细胞 -
肠癌患者外周血Survivin mRNA、CEA联合检测的临床研究
目的:通过检测肠癌患者外周血生存素(Survivin)mRNA、与癌胚抗原(CEA)的表达,观察Survivin mRNA联合CEA对肠癌早期诊断、早期发现微转移的临床价值和意义.方法:采集50例大肠癌患者、对照组50 例,包括30例大肠良性疾病(肠息肉、肠腺瘤肠、肠炎)患者,20例健康者外周血,采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR) 检测Survivin mRNA表达情况;采用电化学发光免疫分析法(Electro-Chemiluminescence Immunoassay,ECLI)检测CEA表达情况,分析它们与临床病理因素之间的关系.结果:Survivin mRNA、CEA肠癌组的阳性率分别为62%(34/55)和52%(27/55);与对照组有显著性差异(P<0.01).阳性表达率与临床Duke's分期有关(P<0.01),与性别、年龄、病理组织类型无关(P>0.05).Survivin mRNA和CEA联合检测高于任一单一指标,灵敏性与准确性差异有统计学意义(P<0.05),特异性差异无统计学意义(P>0.05).结论:检测外周血Survivin mRNA表达,可作为早期辅助诊断大肠癌及微转移的一个有价值的肿瘤标志物.联合CEA检测显著提高了检出率及特异性.
关键词： Survivin mRNA CEA RT-PCR 大肠癌 -
支气管灌洗液Survivin基因检测在肺癌诊断中的价值
目的 探讨支气管灌洗液(BLF)标本Survivin m RNA检测在肺癌尤其是周围型肺癌诊断中的可行性及应用价值.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,分别检测124例肺癌、103例支气管肺部良性疾病患者BLF标本Survivin mRNA表达情况,并与BLF标本细胞病理学等结果相比较.结果 BLF标本Survivin mRNA表达阳性率肺癌患者45.2％(56/124),显著高于支气管肺部良性疾病患者18.4％(19/103),差异有统计学意义(x2=18.150,P=0.000).BLF标本Survivin mRNA相对表达量与肺癌病理类型、分化程度均相关(均P ＜0.05)；而与肺癌患者的性别、年龄、抽烟史、肿瘤的部位、大小、淋巴结转移、远处转移、临床分期及中心型肺癌患者BLF方式之间均无明显相关(均P＞0.05).BLF标本检测Survivin mRNA诊断肺癌的敏感性、特异性分别为45.2％(56/124)和81.6％(84/103),诊断周围型肺癌的敏感性、特异性分别为35.9％(14/39)和85.4％(88/103).BLF标本检测Survivin mRNA表达联合细胞病理学检查阳性率为57.5％(65/113),显著高于单独检测Survivin mRNA阳性率43.4％(49/113)或细胞病理学阳性率23.9％(27/113),差异均有统计学意义(x2=4.531,26.472,P=0.033,0.000).结论 BLF标本Survivin mRNA可能成为肺癌诊断有价值的肿瘤标志物之一,为肺癌尤其是周围型肺癌早期诊断提供帮助,BLF标本获取方式不影响Survivin mRNA表达检测结果.
关键词： 肺癌 支气管灌洗液 Survivin mRNA -
白细胞介素24对大鼠脑胶质瘤细胞Survivin表达的影响
目的探讨白细胞介素24(IL-24)基因对荷瘤大鼠脑胶质瘤细胞Survivin表达的影响.方法 48只SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组24只,分别接种IL-24/C6细胞(转染IL-24基因的C6鼠脑胶质瘤细胞)和C6鼠脑胶质瘤细胞.接种21 d后,采用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测两组大鼠脑肿瘤组织中Survivin mRNA和蛋白的表达,采用流式细胞学检测肿瘤细胞凋亡率.结果 RT-PCR检测显示:实验组大鼠脑肿瘤组织中Survivin mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.01).Western blot及免疫组化法检测显示:实验组大鼠脑肿瘤组织中Survivin的蛋白水平明显低于对照组(P<0.01).流式细胞学结果显示:实验组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01).结论 IL-24可抑制大鼠胶质瘤中Survivin mRNA和蛋白的表达,促进细胞凋亡,抑制肿瘤生长.
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应用定量PCR方法动态检测膀胱癌患者尿脱落细胞中survivin mRNA的表达及其临床意义
背景与目的:膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,目前临床上缺乏理想的早期诊断方法.本研究通过检测膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)患者手术前后尿脱落细胞中survivin mRNA的表达,探讨其在BTCC患者早期诊断和术后监测肿瘤复发中的意义.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)法检测10例健康志愿者、15例膀胱炎患者和30例初发BTCC患者术前及术后1周、1个月、6个月定期随访至15个月尿脱落细胞中survivin mRNA的表达情况.结果:30例BTCC患者术前尿脱落细胞中survivin mRNA的相对拷贝数为96.01±42.33,明显高于正常对照组及膀胱炎组(P＜0.05).术后1周(25.30±1.51)较术前显著下降(P＜0.05);术后1个月(13.20±1.49)、术后6个月(13.90±1.36)与正常对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);随访至15个月,3例复发患者复发时的相对拷贝数为97.83±27.47,与术后6个月相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:尿脱落细胞中survivin mRNA的表达作为诊断膀胱移行细胞癌的指标敏感性高,术后动态随访survivin mRNA表达变化可监测复发.
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外周血 Survivin mRNA 与宫颈鳞癌预后的关系
目的：探讨外周血Survivin mRNA在宫颈鳞癌预后中的预测价值。方法应用RT－PCR检测52例宫颈鳞癌患者外周血Survivin mRNA，结合临床病理及随访资料，统计分析其对患者术后生存的影响，同时取15例健康体检女性作为对照组。结果52例宫颈鳞癌患者外周血Survivin mRNA的表达38例（73.08％），对照组均阴性表达。 Survivin mRNA均与分期（P＝0.002）、肿瘤侵犯深度（P＝0.048）、肿瘤大小（P＝0.030）、组织分级（P＝0.037）和是否伴有淋巴结转移（ P＝0.008）明显相关。宫颈鳞癌患者中，Survivin mRNA表达者无瘤生存时间（ DFS）和总生存时间（ OS）均较Survivin mRNA不表达者短（ P＜0.05）。单因素分析显示，分期晚、肿瘤大径≥4 cm、淋巴结发生转移和Survivin mRNA均与患者预后有关（P＜0.05）；多因素分析表明，淋巴结转移（P＝0.031）和Survivin mRNA（P＝0.000）是DFS的影响因素，临床分期（P＝0.013）和Survivin mRNA（P＝0.009）是OS的影响因素。结论外周血Survivin mRNA可为临床预测宫颈癌根治术预后提供一个新的重要的肿瘤标志物，对预后评估起到积极的作用。
关键词： 宫颈癌 外周血 Survivin mRNA 复发 预后
