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汉黄芩素对胶质瘤U251细胞Survivin mRNA及Caspase-3mRNA表达的影响研究
目的 探讨汉黄芩素对胶质瘤U251细胞Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA表达的影响.方法 192株人胶质瘤U251细胞株分别用汉黄芩素(96株)、替莫唑胺(TMZ)(48株)处理,留取48株作为空白对照组,半定量RT-PCR法检测Survivin mRNA与Caspase-3 mRNA表达强度,并在3组之间进行对比分析.结果 空白对照组Survivin mRNA表达强度为(0.773±0.176) μM,显著高于汉黄芩素组的(0.382±0.087) μM及TMZ组的(0.408±0.092) μM (P ＜ 0.05);Caspase-3 mRNA表达强度为(0.097±0.043) μM,显著低于汉黄芩素组的(0.454±0.213) μM及TMZ组的(0.432±0.187) μM(P ＜ 0.05),汉黄芩组与TMZ组之间比较差异无统计学意义(P ＞ 0.05).结论 汉黄芩素可通过下调Survivin mRNA的表达并上调Caspase-3 mRNA的表达起到有效诱导人胶质瘤U251细胞凋亡的作用.
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柴黄胃溃宁对肝郁脾虚证胃溃疡模型大鼠脑组织HSP70 mRNA和Caspase-3 mRNA表达的影响
目的:探讨柴黄胃溃宁对肝郁脾虚证胃溃疡大鼠脑组织中HSP70 mRNA和Caspase-3 mRNA基因表达的影响和可能的疗效机制.方法:采用多因素复合模拟中医病因结合乙酸法建立肝郁脾虚证胃溃疡大鼠模型,用HE染色法观察大鼠胃窦部溃疡组织的病理学改变,采用RT-PCR技术检测脑组织中HSP70mRNA、Caspase-3mRNA表达水平.结果:模型组大鼠脑组织中HSP70mRNA、Caspase-3mRNA表达明显升高,柴黄胃溃宁中剂量组和法莫替丁组HSP70mRNA的表达水平升高,Caspase-3mRNA的表达水平降低,而柴黄胃溃宁高剂量组结果相反.结论:柴黄胃渍宁对肝郁脾虚证胃溃疡模型大鼠神经系统有显著的调节作用,以中剂量效果佳.
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针刺对脑缺血再灌注模型大鼠海马caspase-3 mRNA表达的影响
目的:探讨针刺对脑缺血再灌注大鼠脑组织保护作用的机制.方法:参考Bederson6级5分法进行神经功能评分和用原位杂交技术检测脑缺血再灌注24h后大鼠海马caspase-3 mRNA的表达.结果:穴位针刺组较非穴位针刺组扣模型组更显著的改善大鼠缺损的神经功能(P<0.05).穴位针刺可以下调脑缺血再灌注大鼠海马caspase-3 mRNA的表达,与模型组、非穴组相比,差异有显著性(P<0.01).结论:针刺能够改善脑缺血再灌注后大鼠神经功能损伤,其作用机制可能是通过下调caspase-3的表达,抑制凋亡实现的.
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金荞麦药酒对胶原诱导关节炎大鼠凋亡基因及基质蛋白酶的影响
目的 观察金养麦药酒对胶原诱导关节炎老年大鼠模型、血清基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、滑膜细胞相关凋亡基因caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达、脾脏淋巴细胞凋亡率及膝关节滑膜巨噬细胞密度的影响.方法 60只18月龄雌性SD大鼠,随机分成正常组、模型组、阳性对照组、高剂量金养麦组、中剂量金养麦组、低剂量金荞麦组,建立Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型.药物干预21 d后,测定大鼠左后足跖肿胀体积,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清MMP-2、MMP-9的含量,RT-PCR检测滑膜细胞凋亡相关基因caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA的表达水平,流式细胞术分析脾脏淋巴细胞凋亡率,免疫组化法检测膝关节滑膜巨噬细胞密度.结果 与正常组比较,模型组足跖肿胀体积、血清MMP-2和MMP-9的含量、膝关节滑膜巨噬细胞密度明显增加,caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA及脾脏淋巴细胞凋亡率明显下降,各给药组上述指标均得到明显改善.结论 金荞麦药酒治疗胶原诱导关节炎的机制可能与调节血清MMP-2、MMP-9和滑膜细胞相关凋亡基因caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA表达及脾脏淋巴细胞凋亡和滑膜巨噬细胞密度有关.
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脑缺血再灌注后bcl-2、caspase-3 mRNA水平表达与大脑皮质及纹状体区炎性细胞浸润
目的探讨大鼠脑缺血再灌注后bcl-2蛋白、caspase-3 mRNA的表达及炎性细胞浸润与神经细胞凋亡的关系.方法将54只Wistar大鼠随机分为二组:假手术组,缺血再灌注组.采用原位末端标记(TUNEL)、免疫组化和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌注后不同时间点神经细胞凋亡及损伤的变化与bcl-2、caspase-3 mRNA表达.结果 bcl-2表达于缺血再灌注12～24 h达高峰,再灌注2～4 d呈下降趋势,至16 d略高于假手术组;caspase-3 mRNA于缺血再灌注12～24 h达高峰,2～4 d呈降低趋势,至16 d略高于假手术组.结论脑缺血再灌注后细胞凋亡介导神经细胞损伤、坏死是一个渐进的动态演变过程.bcl-2蛋白、caspase-3 mRNA表达在抑制细胞凋亡和介导神经细胞损伤等方面起非常重要的作用.
关键词： 缺血再灌注 细胞凋亡 炎性细胞浸润 Bcl-2 Caspase-3 mRNA -
锰诱导大鼠生精细胞凋亡过程中半胱氨酸酶-3 mRNA与增殖细胞核抗原表达变化
目的:研究氯化锰对生精细胞凋亡过程半胱氨酸酶3 (caspase-3) mRNA和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨两者在生精细胞凋亡过程中的作用.方法:雄性SD大鼠随机分为空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnC12)和高剂量(30 mg/kg MnCl2)组.MnCl2组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测睾丸生精细胞凋亡,原位杂交和免疫组织化学(SABC)检测生精细胞caspase-3 mRNA和PCNA和表达.结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)均升高,caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,染锰4周PCNA阳性细胞率显著降低,染锰6周反而升高.染锰剂量相同,6周与4周组比较,生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率、PCNA阳性细胞率均显著升高.染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,PCNA阳性细胞率显著降低.各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与PCNA阳性细胞率呈负相关,而caspase-3 mRNA阳性细胞率与PCNA阳性细胞率呈负相关.结论:锰可诱导大鼠生精细胞caspase-3mRNA表达,促使生精细胞凋亡并且抑制细胞增殖,产生生殖毒性效应.
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Survivin mRNA、Caspase-3mRNA在舌鳞癌中的表达及相关性
目的:检测舌鳞癌组织中凋亡抑制基因Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA的表达,探讨其在舌鳞状细胞癌中的意义及相关性.方法:应用原位杂交方法检测10例正常舌黏膜、45例舌鳞状细胞癌标本中Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA的表达情况.采用SPSS13.0软件包进行x2检验及Fisher精确概率法检验,指标间关系采用Spearman等级相关分析.结果:舌鳞癌标本中Survivin mRNA阳性表达率为55.6%,正常对照组全部为阴性,两组差异显著(P＜0.01);舌鳞癌标本中Caspase-3 mRNA阳性表达率为42.2%,明显低于正常对照组的80.0%(P＜0.05);Survivin mRNA高表达及Caspase-3 mRNA低表达与舌鳞癌组织学分级、颈淋巴结转移相关(P＜0.05);与TNM分期密切相关(P＜0.01);经Spearman等级相关分析,两者之间呈显著负相关,r=-0.412,P=0.00,.结论:在舌鳞癌中,Survivin mRNA参与了抑制Caspase-3 mRNA的表达,且这种抑制作用与肿瘤的发生、发展相关.
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曲美他嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA表达的影响
目的 观察曲美他嗪(TMZ)对大鼠局灶性脑缺血后神经细胞Caspase-3 mBNA、Bcl-2 mRNA表达的影响.方法 成年健康Wistar大鼠45只,随机分为假手术对照组(n=5)、脑缺血再灌注组(n=20)、TMZ预处理组(n=20).应用线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注模型.采用原位杂交方法检测脑组织Caspase-3 mRNA、Bcl-2 mRNA表达的变化.结果 Bcl-2 mRNA在缺血再灌注3 h表达增强(P
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淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞凋亡模型Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响
目的 观察淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响.方法 取61只健康无眼疾1月龄雄性新西兰大耳白兔,随机取1只雄兔泪腺,培养泪腺上皮细胞,取第3代泪腺上皮细胞用于实验.60只雄兔随机分成淫羊藿总黄酮10.0倍组、5.0倍组、2.5倍组和空白对照组,通过MTT法确定后续干预细胞的含药血浆的浓度.将所培养第3代泪腺上皮细胞随机分为淫羊藿总黄酮治疗组、含雄激素培养对照组和空白组(DMEM/F12低糖培养基中分别加入含淫羊藿总黄酮血浆、10-6 mol·L-1丙酸睾酮和空白血浆).干预48h后各组均加入H2O2继续培养60 min诱导细胞凋亡,采用RT-PCR法检测各组细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8 mRNA的表达.结果 MTT实验显示应选取淫羊藿总黄酮2.5倍组作为干预细胞含药血浆的浓度.淫羊藿总黄酮10.0倍组、5.0倍组、2.5倍组和空白对照组兔血浆中朝藿定A浓度分别为120.5 μg·L-1、65.7 μg·L-1、21.9 μg· L-1、0μg·L-1,淫羊藿苷浓度分别为130.8 μg·L-1、45.3 μg·L-1、18.9μg·L-1、0μg·L-1.淫羊藿总黄酮治疗组、含雄激素培养对照组、空白组的Caspase-3 mRNA相对含量分别为0.35±0.07、0.68±0.18、1.00±0.19,Caspase-8 mRNA相对含量分别为0.27±0.21、0.72±0.10、1.00±0.15.空白组Caspase-3、Caspase-8mRNA的表达均高于含雄激素培养组,空白组和含雄激素培养组均高于淫羊藿总黄酮治疗组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 淫羊藿总黄酮能够下调雄兔干眼泪腺上皮细胞Capase-3、Capase-8 mRNA的表达,这可能是其治疗干眼的关键机制之一.
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破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3 mRNA的表达与血管平滑肌细胞的凋亡测定
目的:检测破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3 mRNA的表达及血管平滑肌细胞(VSMC)的凋亡.方法:采用透射电镜观察15例破裂颅内动脉瘤和6例正常脑血管组织中VSMC的凋亡.采用实时荧光定量RT-PCR方法检测上述2种组织中Caspase-3 mRNA的表达.结果:颅内动脉瘤组织中VSMC呈明显的细胞凋亡改变,出现染色质边聚、胞核固缩、胞浆浓缩以及凋亡小体.破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3 mRNA的ΔCt值为2.67±1.22,正常脑血管组织中为5.83±1.69,P＜0.01,即破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3 mRNA的表达是正常组织的8.94倍.结论:VSMC过度凋亡可能是颅内动脉瘤形成和破裂的重要机制;VSMC凋亡可能与Caspase-3基因表达水平的上调有关.
关键词： 破裂颅内动脉瘤 Caspase-3 mRNA 超微结构 -
肝康颗粒对Con A诱导小鼠急性免疫性肝损伤的Caspase-3mRNA表达的影响
目的:观察caspase-3基因在Con A性肝损伤小鼠肝组织中的表达、肝细胞凋亡的情况以及肝康颗粒对其影响.方法:TUNEL法肝细胞凋亡,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析肝组织Caspase-3 mRNA表达水平.结果:模型组肝组织中Caspase-3 mRNA的相对单位值高,说明在模型组动物肝组织Caspase-3 mRNA有明显表达;肝康颗粒低、中、高剂量组小鼠Caspase-3 mRNA的相对单位值均低于模型组.表示肝康颗粒对Con A诱导肝损伤小鼠抑制肝细胞凋亡作用.结论:肝康颗粒能下调或延迟肝细胞Caspase-3 mRNA的表达,影响蛋白酶级联切割过程,进而减轻或抑制Con A肝损伤小鼠肝细胞凋亡.
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茵陈蒿汤对新生大鼠高胆红素血症的治疗作用及机制研究
目的:研究茵陈蒿汤对新生大鼠高胆红素血症的治疗作用及作用机制.方法:200只7日龄SPF级SD大鼠,随机选取36只作为正常组,其余腹腔注射胆红素诱发新生大鼠高胆红素血症,剔除不合格大鼠,选择建模成功大鼠144只随机分为模型组和茵陈蒿汤低、中、高各剂量组,各36只.茵陈蒿汤低、中、高各剂量组分别给予2、4、8g/(kg·d)茵陈蒿汤灌胃,正常组和模型组灌胃等量的生理盐水,两周为1疗程.观察大鼠的一般行为变化,检测血清和脑组织中胆红素含量和神经元细胞膜Na+-K+-ATP酶活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度,TUNEL法检测脑组织细胞凋亡率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测脑组织caspase-3 mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组和茵陈蒿汤低、中、高各剂量组大鼠给药24 h和14天后血清及脑组织胆红素浓度明显升高,脑组织神经元细胞膜Na+-K+-ATP酶的活性明显降低,神经元特异性烯醇化酶含量明显升高,脑组织细胞凋亡率显著升高,差异均有统计学意义(P＜ 0.05,P＜ 0.01).给药24 h后,与模型组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠脑组织中胆红素的浓度明显降低,脑组织神经元细胞膜Na+-K+-ATP酶的活性明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).给药14天后,与模型组比较,茵陈蒿汤低、中、高各剂量组大鼠血清及脑组织胆红素浓度明显降低,脑组织神经元细胞膜Na+-K+-ATP酶的活性明显升高,神经元特异性烯醇化酶含量和脑组织细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P＜ 0.05,P＜ 0.01).与同组24 h比较,茵陈蒿汤低、中、高各剂量组给药14d后,血清及脑组织中胆红素的含量明显降低,脑组织神经元细胞膜Na+-K+-ATP酶的活性明显升高,神经元特异性烯醇化酶含量明显降低,差异均有统计学意义(P＜ 0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠caspase-3 mRNA的表达显著升高(P＜0.05).与模型组比较,茵陈蒿汤低、中、高各剂量组大鼠caspase-3 mRNA的表达显著降低(P＜ 0.05,P＜0.01).结论:茵陈蒿汤对新生大鼠高胆红素血症有明显的治疗作用,可能通过改善新生大鼠的脑组织中Na+-K+-ATP酶活力,升高血清神经元特异性烯醇化酶的表达,降低脑组织细胞凋亡率及凋亡基因caspase-3 mRNA的表达来发挥作用.
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RT-PCR检测超声辐照后人早孕绒毛组织中 Caspase-3 mRNA的表达
目的:探讨诊断性超声对早孕胚胎组织安全性问题.方法:选取健康早孕而自愿要求终止妊娠的妇女66例,随机分组,不同的超声辐照方式和不同辐照时间后12-24 h行人工流产取绒毛组织,用半定量RT-PCR方法分析绒毛组织中Caspase-3 mRNA的表达.结果:绒毛组织Caspase-3 mRNA表达,腹部超声5 min组与对照组(未行超声辐射组)相比无统计学差异(P＞0.05),而10 min组、15 min组与对照组比较有统计学意义(P＜0.05),但此两组间无统计学差异(P＞0.05);阴道超声5 min、10 min、15 min组与对照组比较均有显著的统计学意义(P＜0.01),且各组间比较也有差异(P＜0.01);同一时间组内阴道超声与腹部超声比较均有统计学差异(P＜0.05).结论:诊断性超声经腹部5 min以内可以认为是安全的,从近期的生物学效应角度看,经阴道超声在5 min时就可能存在损伤效应.
关键词： RT-PCR 诊断性超声 人绒毛组织 Caspase-3 mRNA
