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淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞凋亡模型Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响
目的 观察淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响.方法 取61只健康无眼疾1月龄雄性新西兰大耳白兔,随机取1只雄兔泪腺,培养泪腺上皮细胞,取第3代泪腺上皮细胞用于实验.60只雄兔随机分成淫羊藿总黄酮10.0倍组、5.0倍组、2.5倍组和空白对照组,通过MTT法确定后续干预细胞的含药血浆的浓度.将所培养第3代泪腺上皮细胞随机分为淫羊藿总黄酮治疗组、含雄激素培养对照组和空白组(DMEM/F12低糖培养基中分别加入含淫羊藿总黄酮血浆、10-6 mol·L-1丙酸睾酮和空白血浆).干预48h后各组均加入H2O2继续培养60 min诱导细胞凋亡,采用RT-PCR法检测各组细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8 mRNA的表达.结果 MTT实验显示应选取淫羊藿总黄酮2.5倍组作为干预细胞含药血浆的浓度.淫羊藿总黄酮10.0倍组、5.0倍组、2.5倍组和空白对照组兔血浆中朝藿定A浓度分别为120.5 μg·L-1、65.7 μg·L-1、21.9 μg· L-1、0μg·L-1,淫羊藿苷浓度分别为130.8 μg·L-1、45.3 μg·L-1、18.9μg·L-1、0μg·L-1.淫羊藿总黄酮治疗组、含雄激素培养对照组、空白组的Caspase-3 mRNA相对含量分别为0.35±0.07、0.68±0.18、1.00±0.19,Caspase-8 mRNA相对含量分别为0.27±0.21、0.72±0.10、1.00±0.15.空白组Caspase-3、Caspase-8mRNA的表达均高于含雄激素培养组,空白组和含雄激素培养组均高于淫羊藿总黄酮治疗组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 淫羊藿总黄酮能够下调雄兔干眼泪腺上皮细胞Capase-3、Capase-8 mRNA的表达,这可能是其治疗干眼的关键机制之一.
