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生殖器都柏林念珠菌分离与PCR-RFLP鉴定
都柏林念珠菌是1995年采用现代分子生物学方法鉴定的念珠菌属的一个新种.近年来,都柏林念珠菌等非白念珠菌引起的深部感染比例逐渐增长,对氟康唑很容易产生不可逆的耐药性.因此都柏林念珠菌的分离与鉴定引起了国内外学者的高度重视.目前,45℃温度试验筛查都柏林念珠菌操作简便,已得到国内外学术界的广泛认可和采用.都柏林念珠菌DNA经限制性内切酶消化后,可产生独特的RFLP图谱,但单纯RFLP图谱结果模糊.为此,用PCR方法对核糖体DNA内部转录间隔区的编码基因进行核酸扩增,然后分析限制性酶酶切图谱,鉴定都柏林念珠菌,并对都柏林念珠菌在天津的流行情况作了分析.
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应用PCR-反向斑点杂交法快速检测和鉴定常见医学真菌
近年来,机会性真菌感染呈不断上升趋势,这主要归因于器官移植、骨髓移植的广泛开展;艾滋病患者的大量增多及皮质类固醇激素、免疫抑制剂和广谱抗生素的应用等;另外不同真菌菌种对抗真菌药物具有不同的天然耐药性,这就不仅要求实验室快速检出感染的病原菌,而且还应准确鉴定到种,才能使临床采取有效措施控制感染.目前,真菌的分离培养鉴定仍是主要诊断方法,但存在耗时长且不敏感等问题.为建立快速、敏感、特异的检测与鉴定方法,我们用真菌通用引物扩增广范围医学真菌的细胞色素P450羊毛固醇-14α-去甲基化酶(L1A1)基因的1个片段(约350bp).通用引物以生物素标记,结合种特异性探针进行反向斑点杂交,可鉴定临床常见的8种真菌,其中包括近年来新发现的都柏林念珠菌.
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都柏林念珠菌和白念珠菌的分子生物学鉴定
近年来分子生物学技术的大量应用为真菌的鉴定提供了快速、可靠的鉴定方法,我们对分离自阴道念珠菌病患者的325株白念珠菌进行了研究,试图从表型和基因型分型角度了解都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率.
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云南HIV感染者口腔都柏林念珠菌的分离
近年来,由于临床免疫抑制剂、广谱抗生素、皮质类固醇激素的大量使用,以及艾滋病患者的增多,念珠菌感染呈明显上升趋势,且感染的菌种存在着变迁,不断有新的菌种被发现.都柏林念珠菌(Candida dubliniensis)就是1995年从白色念珠菌(Candida albicans)菌种中分离出来的独立菌种 [1].自该菌种被确定以来,研究者们已经从健康人群、临床标本中分离到此菌种 [2-3],国外已有从HIV感染者和AIDS患者中分离到此菌种的报道 [4].但国内对此方面研究相对滞后,HIV感染人群至今未见有都柏林念珠菌分离的报道.我们对来源于云南地区HIV感染者口腔念珠菌进行了研究,结果 从中分离出都柏林念珠菌.现报告如下.
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都柏林念珠菌的表型和基因型特征
都柏林念珠菌(CD)是近命名的新菌种.由于CD与白念珠菌(CA)具有许多共同特征,长期以来一直被认为是白念珠菌的突变株.本文综述了可资鉴别CD和CA的表型和基因型特征.
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都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱差异性分析
目的建立快速分子指纹图谱分析法,应用于都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱差异性分析.方法以野生株噬菌体M13微卫星特异核心序列为单一引物,分别进行都柏林念珠菌和白念珠菌基因组DNA的聚合酶链反应(PCR)扩增,并将产生的分子指纹图谱分别应用琼脂糖凝胶电泳和微流DNA芯片分析.结果17株都柏林念珠菌和白念珠菌基因组DNA的扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,见都柏林念珠菌和白念珠菌各有5条固定阳性条带出现,两者之间阳性条带大小差异有统计学意义.微流DNA芯片显示都柏林念珠菌固定出现阳性条带大小依次为960、1177、1297、1495、1797 bp;白念珠菌固定出现阳性条带大小依次为653、1323、1531、2021、2875 bp.结论都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱存在显著差别,可应用于两者的快速鉴别,尤其是微流DNA芯片法简便、快速、重复性好,更适合于大规模分子流行病学监测.
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临床标本中都柏林念珠菌的鉴定
C.dubliniensis(都柏林念珠菌)是Sullivan1995年才命名的新的致病性念珠菌,该菌与C.albicans(白色念珠菌)的表型特征极为相似,致使大部分微生物实验室长期以来误将其鉴定为白色念珠菌。都柏林念珠菌主要引起艾滋病患者的口腔感染,也有从痰、血液、分泌物、粪便等标本中分离的报道[1]。为了解都柏林念珠菌的分布情况,我们对以往从临床标本中分离的112株白色念珠菌进行了重新鉴定,结果如下。1材料与方法1.1标本来源112株白色念珠菌来自痰、咽拭子等呼吸道标本84份,阴道分泌物11份,尿液6份,血液4份,粪便7份。
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都柏林念珠菌与白念珠菌鉴别研究进展
综述都柏林念珠菌与白念珠菌的鉴别方法.表型比较的方法相对简便易行,可以从芽管、菌落形态及厚壁孢子、产色、荧光、温度、酶活性、碳源同化、红外光谱等多个方面进行鉴别;分子生物学方法可靠性强,包括DNA指纹图、聚合酶链反应、限制性片段长度多态、随机扩增多态DNA、核糖体DNA测序等.
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019在staib琼脂和咖啡酸-枸橼酸铁琼脂上区分都柏林念珠菌和白念珠菌
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外阴阴道念珠菌病的菌种及药敏分析
近年来,外阴、阴道念珠菌病不但发病率明显增加,而且耐药现象也日趋普遍.为了解该病临床分离株菌种及对常用抗真菌药物敏感性,为临床用药提供依据.本文对1128例念珠菌病的临床株进行了菌种分离和药敏检测,同时对临床分离的白色念珠菌进行研究,从中分离出26株都柏林念珠菌,现将结果报道如下.
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阴道都柏林念珠菌的分离和体外药敏试验
目的:了解都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率及对常用抗真菌药物的敏感性.方法:通过45℃生长试验,区分都柏林念珠菌和白念珠菌,用微量稀释法测定都柏林念珠菌对氟康唑等6种药物的MIC.结果:都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率为13.74%,25株都柏林念珠菌的MIC范围:氟康唑0.25~64μg/mL,伊曲康唑0.06~8μg/mL,5-氟胞嘧啶0.25~64μg/mL,酮康唑0.06~8μg/mL,咪康唑0.015~4μg/mL,特比萘芬0.06~8μg/mL.结论:都柏林念珠菌在阴道念珠菌病有较高的临床分离率,多数都柏林念珠菌对常用抗真菌药物敏感,部分都柏林念珠菌可产生剂量依赖敏感或耐药.
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都柏林念珠菌分子生物学鉴定研究进展
都柏林念珠菌(candida dubliniensis)是近年来主要从人类免疫缺陷病毒感染者和艾滋病患者口腔中分离出来的一种新的念珠菌,表型与白念珠菌相似,单凭表型和生化特征常常不能做出正确的判断,近年来随着分子生物学的发展为菌种间鉴定提供了广阔的空间.分子生物学方法仍然是鉴定菌种的金标准.
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都柏林念珠菌和白念珠菌的致病性比较研究进展
都柏林念珠菌是一种新近分离鉴定的条件致病念珠菌,以往曾被误认为是白念珠菌,但实际上是一个独立的菌种,由于该菌常引起免疫缺陷者的感染,所以近年来颇受关注.本文就近年对该菌在致病性方面的研究及与白念珠菌致病性的比较进行了综述.
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黄连等6种中草药对都柏林念珠菌抗菌活性的比较研究
目的 比较黄连、知母、七叶一枝花、黄芩、大黄、五倍子对都柏林念珠菌的体外抗菌活性.方法 采用出芽实验法、肉汤微量稀释法和传统的琼脂扩散法.结果 都柏林念珠菌对黄连、知母、七叶一枝花、黄芩敏感,抑菌圈直径在23~28mm之间,MIC分别是:0.06~0.125,0.06~0.125,0.125~0.25,0.25~0.5昏/ml.黄连、知母、黄芩、大黄抑制出芽效果更好.结论 黄连、知母、黄芩对都柏林念珠菌具有较好的抑菌效果,且抑制都柏林念珠菌出芽效果也较好.
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念珠菌与口腔扁平苔藓关系的临床研究
目的:阐明口腔扁平苔藓(Oral lichen planus,OLP)与白色念珠菌(candida albicans,CA)关系同时,明确其与非白念致病性念珠菌关系.方法:选取40例糜烂型及非糜烂型OLP患者及20例健康志愿者.采用含漱液浓缩培养法,并结合应用芽管试验、厚膜孢子形成试验及温度试验常规培养等方法分离、鉴定各组中致病念珠菌菌种.结果:糜烂型OLP组念珠菌培养阳性率(60%)显著高于非糜烂型OLP组(25%)和对照组(15%)的念珠菌阳性培养率(p<0.01).糜烂型OLP组念珠菌阳性培养菌落数显著高于对照组及非糜烂型OLP组念珠菌阳性培养菌落数.糜烂型OLP中CA分离率(64%),显著低于非糜烂型OLP组(88%)(p<0.05)和对照组(100%)(p<0.01)中CA分离率.糜烂型OLP中都柏林念珠菌(Candida dubliniensis,CD)分离率(14.1%)高于非糜烂型OLP组中CD分离率(4%)(p<0.05).其他非白念致病念珠菌的分离率也以糜烂型OLP组(21.9%)为高,显著高于非糜烂型OLP组(8%)(p<0.05).结论:糜烂型OLP所伴念珠菌感染主要为CA.糜烂型OLP所伴念珠菌感染的念珠菌菌种复杂,非白念致病菌念珠菌尤其是CD起着重要作用.
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都柏林念珠菌的特征和鉴定
都柏林念珠菌是念珠菌属的一个新菌种,其表型在许多方面与白色念珠菌相同,但其基因型则明显不同。都柏林念珠菌主要从HIV感染者和AIDS患者的口腔内分离出来。本文介绍了都柏林念珠菌的生物型特征、致病性、流行情况以及与白色念珠菌的鉴别。
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都柏林念珠菌和白念珠菌粘附能力的比较研究
目的:比较研究都柏林念珠菌(candida dubliniensis,CD)和白念珠菌(candida albicans,CA)的粘附能力,及4%小苏打液和0.2%洗泌汰对CD和CA粘附力的影响.方法:检测糜烂型口腔扁平苔藓(oral lichen planue ,OLP),非糜烂型OLP和健康对照组3种不同来源颊粘膜上皮细胞(buccal epithelial cells,BEC),经0.2%洗泌汰和4%小苏打液体外处理前后,BEC上粘附孢子数.结果:(1)处理前,3种不同来源BEC上,粘附CD孢子数显著高于粘附CA的孢子数;(2)糜烂型OLP和非糜烂型OLP来源的BEC上,粘附的孢子数显著高于健康对照组;(3)3种不同来源BEC经0.2%洗泌汰和4%小苏打液处理后,其上粘附的孢子数显著减少.结论:(1)CD对BEC粘附力比CA强;(2)4%小苏打液能降低CD和CA对BEC的粘附,4%小苏打液和0.2%洗泌汰在降低念珠菌对BEC的粘附上,具有相近的作用.
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口腔念珠菌的分离及鉴定
念珠菌这个词起源于拉丁语"Candid",意为白色的.念珠菌是具有二相性的真菌,孢子相是无致病性的,而当菌群失调或机体的抵抗力降低时,念珠菌就会产生具有侵入性以及致病力的假菌丝[1].念珠菌作为内源性的共生菌,它的致病过程受很多因素影响,这不同于致病微生物以自身的毒力作为唯一的关键因素在致病过程中起作用.念珠菌是机会致病菌,因此无论是浅表真菌感染还是系统真菌感染都与机体生理状态有关[2].念珠菌种有很多成员,临床常见的致病念珠菌包括白色念珠菌,光滑念珠菌,都柏林念珠菌,吉利蒙念珠菌,葡萄牙念珠菌,近平滑念珠菌,乳酒念珠菌,克柔念珠菌,热带念珠菌[3].
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临床都柏林念珠菌的分离鉴定、药敏及毒力测定
目的:从临床分离的白色念珠菌中分离鉴定都柏林念珠菌,了解该菌的感染分布、毒力及耐药情况,为今后对都柏林念珠菌的防治提供依据.方法:采用温度试验、CHROMagar培养基显色试验、蛋白酶试验及药敏试验等方法对都柏林念珠菌进行分离鉴定.结果:从初分离的332株白色念珠菌中有13株(3.92%)后确定为都柏林念珠菌,其中从263份痰及咽拭标本分离9株(3.8%),18份尿液标本分离出1株(5.5%),25份粪标本分离出2株(8%).13株都柏林念珠菌蛋白酶均阳性(100%),药物敏感试验对5种常用抗真菌药物均敏感.结论:温度试验是对都柏林念珠菌初筛的简单实用方法,采用上述几种方法较容易对白色念珠菌与都柏林念珠菌进行鉴别.研究结果表明:以往大多实验室均把都柏林念珠菌被误鉴定为白色念珠菌,都柏林念株菌的毒力较白色念珠菌强,因此对都柏林念株菌及时分离和鉴定对患者的临床诊断和治疗具有重要意义.