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PDCD5通过Wnt/β-catenin通路抑制肾细胞癌侵袭转移及其机制研究
目的 探讨肾细胞癌(RCC)患者PDCD5的表达水平及其参与调控RCC侵袭与转移的可能机制.方法 利用免疫组化检测RCC标本与癌旁组织中PDCD5的蛋白表达水平,同时分析PDCD5与疾病分期、预后的相关性;利用transwell及划痕实验检测PDCD5对肾癌细胞系A498侵袭与转移的影响;利用Western blot检测A498细胞转染PDCD5后MMP2、MMP9、E-cadherin、N-cadherin及Wnt/β-catenin通路的变化.结果 ①与癌旁组织相比,RCC标本中PDCD5明显下调(P<0.001),且与疾病分期及预后正相关;②PDCD5明显抑制了肾癌细胞系A498的转移与侵袭能力(P<0.01);③PDCD5通过抑制A498细胞系中MMP2、MMP9及N-cadherin的表达水平,增强E-cadherin的表达水平调控EMT转化,同时Wnt/β-catenin通路关键蛋白下调.结论 PDCD5通过调控Wnt/β-catenin通路影响肾细胞癌EMT转化,负性调控了RCC病人的侵袭与转移进程.
关键词： 癌 肾细胞 肿瘤侵润 上皮-间质转化 程序化细胞死亡因子5 Wnt/β-catenin通路 -
Wnt信号通路在脊髓损伤修复中作用的实验研究进展
Wnt信号通路是参与调控神经系统发育和参与脊髓损伤修复的重要信号转导系统之一,在轴突再生、神经干细胞增殖并向神经元分化,而抑制向胶质细胞分化等方面起重要作用.脊髓损伤后,损伤部位周围多种Wnt蛋白表达.Wnt家族中的一些蛋白在脊髓损伤修复中发挥着重要作用,Wnt/β-catenin信号通路的激活更是脊髓损伤后脊髓再生的必要步骤.
关键词： Wnt信号通路 脊髓损伤 神经干细胞 Wnt/β-catenin通路 综述 -
Wnt/β-catenin通路抑制剂Wnt-C59对病理性心肌肥大的治疗作用及其机制
目的 观察Wnt/β catenin通路抑制剂Wnt-C59对病理性心肌肥大的作用并探讨这一过程的分子机制.方法 (1)动物实验:对8～10周龄(18～22 g)的雄性C57B/L小鼠施行主动脉缩窄术(TAC)以诱导病理性心肌肥大.实验分4组:①对照组;②Wnt-C59组;③TAC模型组;④TAC+ Wnt-C59组.(2)细胞实验:使用0.1 μmol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激新生大鼠心肌细胞(NRVM)诱导病理性心肌细胞肥大.实验分4组:①对照组;②Wnt-C59组;③AngⅡ模型组;④AngⅡ+Wnt-C59组.观察的实验指标:TAC术后4周小鼠的心脏质量/体质量、心功能、心肌细胞横截面面积;NRVM表面积、β-catenin核转位、β-catenin下游肥大相关基因C-myc、Cyclin-D1的mRNA表达量.结果 Wnt-C59明显降低由TAC所致的心脏质量/体质量增加[TAC+ Wnt-C59:(6.02±0.48)比TAC:(7.45±1.15) mg/g,P＜0.05],改善心功能[射血分数:TAC+Wnt C59:(59.29±4.61)％比TAC:(48.60±2.72)％,P＜0.05].并减轻TAC诱导的心肌细胞横截面积增加.Wnt C59明显减轻AngⅡ诱导的心肌细胞表面积增大,β catenin入核[AngⅡ+Wnt-C59:(15.90±4.11)％比AngⅡ(25.27±6.69)％,P＜0.05]以及肥大基因C-myc、Cyclin-D1的高表达.结论 Wnt/β-catenin通路抑制剂Wnt-C59对病理性心肌细胞肥大具有保护作用,其机制可能是抑制β-catenin入核进而抑制其下游肥大基因C-myc、Cyclin-D1的转录.
关键词： 心肌肥大 Wnt/β-catenin通路 Wnt-C59 -
致心律失常性右室心肌病致病基因及机制研究进展
致心律失常性右室心肌病是一种遗传性心肌病,常致恶性室性心律失常,目前已发现多个基因位点与本病有关,尤其是桥粒蛋白编码基因;Wnt/β-catenin通路的抑制可能是导致本病的重要机制.该文拟对本病的致病基因及可能的发病机制做一综述.
关键词： 致心律失常性右室心肌病 基因 桥粒蛋白 Wnt/β-catenin通路 -
Wnt/β-catenin、RANKL/LGR4通路因子在骨质疏松性骨折端的表达
目的 探讨骨质疏松性骨折(osteoporotic fracture,OPF)骨折端Wnt/β-catenin、RANKL/LGR4通路关键因子的表达.方法 选取2016年1月至2017年7月在我院就诊的符合标准的股骨骨折患者56例,分为OPF组27例和对照组29例,伤后3～7 d行骨折手术,于骨折断面内用刮匙刮取骨组织≥200 mg,保存于液氮中.使用液氮研磨RNAiso Plus法提取骨组织总RNA,采用RT-PCR技术检测比较两组之间各因子mRNA的表达差异;使用液氮研磨加裂解液提取骨组织总蛋白,采用Western blotting技术检测比较两组之间各因子蛋白的表达差异.结果 RT-PCR、Western blotting检测OPF组对比对照组患者LRP5、β-catenin、Runx2、C-myc、LGR4因子表达均降低(P＜0.05),RANKL因子表达升高(P＜0.05).结论 OPF与Wnt/β-catenin成骨信号通路中LRP5、β-catenin、Runx2、C-myc因子成骨抑制或减弱有关,与RANKL/LGR4破骨信号通路中RANKL因子破骨增强、LGR4因子破骨抑制有关.可通过调控各因子的表达干预OPF的发生和治疗.
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RNA干扰Oct4的表达对肝癌细胞生物学行为的影响
目的 探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin在人肝癌组织及肝癌细胞系中的相互作用.方法 PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及其他相关基因在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织的表达差异.使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达,实时荧光定量PCR法检测Wnt/β-catenin基因表达.检测RNAi后细胞迁移以及克隆形成能力.结果 肝癌患者的上述组织中,Oct4和β-catenin在癌内表达高,癌旁次之,正常肝低.使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-catenin、Wnt10b表现为与Oct4表达呈正相关,TCF3表达与Oct4呈负相关.RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降.结论 Oct4在肝癌组织内高表达而在正常肝细胞中的表达极低.RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降可能与Wnt/β-catenin通路功能减弱有关.
关键词： 癌 肝细胞 RNA干扰 OCT4 Wnt/β-catenin通路 -
射线照射对人U87细胞系侵袭促进作用及其机制研究
目的 研究射线照射对人胶质母细胞瘤(U87细胞系)侵袭性的促进和可能机制.方法 U87细胞接受不同剂量的射线照射(0、2、4 Gy),使用实时细胞分析系统检测细胞侵袭性改变,明胶酶谱法检测射线照射前后U87细胞的MMP2、MMP9活性改变,细胞免疫组化观察射线照射后U87细胞内β-catenin含量及分布变化,实时荧光定量PCR测定Wnt/β-catenin通路目标基因mRNA含量.结果 射线照射后U87细胞的侵袭性明显增加(P＜0.01),在一定范围内与照射剂量相关.射线照射显著增强U87细胞的MMP2和MMP9活性(分别为P=0.031、0.004).照射后U87细胞内β-catenin含量增加(P＜0.01),且从细胞膜和黏附连接向细胞核内转运移位.Wnt/β-catenin通路相关基因FZD7、TCF1的mRNA含量显著增加(P＜0.01),且目标基因尤其是侵袭性相关基因如MMP2、MMP7、MMP9和CD44转录均有显著增加(P＜0.05).结论 射线照射对U87细胞侵袭性有促进作用,Wnt/β-catenin通路激活和侵袭性相关基因表达的增加是其可能机制.
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姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路调控胶质瘤细胞增殖和凋亡的实验研究
目的 探讨姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路对胶质瘤细胞的增殖及凋亡影响.方法 研究对象为人胶质母细胞瘤U251细胞系,实验分为空白对照组和姜黄素实验组(实验浓度分别为10 μmol/L和20 μmol/L).细胞毒性实验研究姜黄素对U251胶质瘤的细胞毒性作用.四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察增殖能力;Caspase-3活性检测及流式细胞仪(FCM)实验检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期;实时定量PCR、Western-blot和免疫荧光检测法检测细胞内的β-catenin、c-myc表达水平.荧光素酶实验检测姜黄素作用后Wnt/β-catenin通路活性改变.结果 随着姜黄素作用浓度的增加,U251胶质瘤细胞的细胞毒性增强,在姜黄素实验组中,当浓度为5、10、20、和40 μmol/L时,细胞活性分别为(88.55±2.35)％、(62.78 ±3.35)％、(35.17±2.05)％和(7.47±1.92)％(P＜0.05),并且增殖抑制作用明显增强,测得姜黄素作用24h的IC50为16.32 μmol/L,故姜黄素实验组浓度选用10 μmol/L和20 μmol/L;实验组(10μmol/L和20 μmol/L) Caspase-3的相对活性分别为(3.64±1.49)％,(5.41±0.36)％,与对照组(0.91±0.62)％相比,明显增强(P＜0.05);流式细胞术检测姜黄素作用48 h后,实验组U251细胞凋亡率分别为(14.7±2.21)％和(35.6±1.37)％,与对照组凋亡率(0.5％±0.67)％相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测姜黄素可以阻滞细胞周期于G2/M期,对照组,及姜黄素实验组(10 μmol/L和20 μμmol/L)的G2/M期分别为(7.52±3.84)％,(16.28±2.73)％,(25.47±5.61)％(P＜0.05);姜黄素作用于胶质瘤后β-catenin的mRNA水平下降,荧光定量PCR检测结果为(93.87±5.73)％,(68.83±7.67)％和(47.46±8.52)％(P＜0.05),差异具有统计学意义.Western-blot实验显示β-catenin和c-myc蛋白表达水平均下降;免疫荧光实验发现姜黄素可以抑制β-catenin进入细胞核,同时减少其复合物的形成.荧光素酶实验显示姜黄素作用胶质瘤细胞后,Wnt/β-catenin通路活性明显受到抑制(P＜0.01).结论 姜黄素可能通过下调Wnt/β-catenin通路抑制胶质瘤细胞增殖并促进凋亡.
关键词： 神经胶质瘤 姜黄素 Wnt/β-catenin通路 细胞增殖 细胞凋亡 -
模拟微重力效应对骨细胞Wnt/β-catenin通路的影响
目的 探究模拟微重力效应对骨细胞Wnt/β-catenin信号通路活性的影响,以阐明微重力导致骨质丢失的发生机制.方法 将骨细胞MLO-Y4分为两组:模拟微重力组和静置对照组.细胞旋转培养以模拟微重力效应,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞Wnt/β-catenin信号通路相关组分的基因和蛋白表达水平.结果 RT-PCR结果显示,模拟微重力组的Cyclin D1和Lef-1 mRNA水平显著低于对照组(P＜0.05),CX43和抑制剂SOST的mRNA水平显著高于对照组(P＜0.05),而两组的Wnt3a、Lrp5和β-catenin的mRNA水平无显著性差异.Western blot结果显示,模拟微重力组的β-catenin和Cyclin D1的蛋白表达水平显著低于对照组(P＜0.05),Lef-1和抑制剂SOST蛋白质的表达水平显著高于对照组(P＜0.05),而两组Wnt3a、Lrp5/6和CX43的蛋白表达水平无显著性差异.结论 模拟微重力效应下骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活性有所下降.
关键词： 模拟微重力 骨细胞 骨丢失 Wnt/β-catenin通路 -
microRNA沉默SMYD3基因对乳腺癌细胞Wnt/β-Catenin通路及c-Myc基因影响的研究
目的 研究沉默SMYD3基因后,乳腺癌细胞MDA-MB-231中Wnt/β-catenin通路和c-Myc基因的变化,探讨其可能机制.方法 构建携带绿色荧光蛋白基因的SMYD3-microRNA真核表达质粒载体,脂质体法稳定转染MDA-MB-231细胞,实时定量PCR检测SMYD3、Wnt10b、β-catenin、c-Myc mRNA的表达.结果 流式细胞检测转染效率达到95％以上,实验组SMYD3、Wnt10b、c-Myc mRNA水平低于空白对照组(P＜0.05),β-catenin水平高于空白对照组(P＜0.05)；阴性对照组与空白对照组相比无明显变化.结论 沉默SMYD3基因可直接或通过Wnt/β-catenin通路下调c-Myc基因的表达,从而减弱肿瘤细胞的生长及侵袭转移能力,为乳腺癌的临床治疗提供了新的基因靶点.
关键词： 乳腺癌 SMYD3 Wnt/β-catenin通路 c-myc -
Wnt10a/Wnt10b及其Wnt/β-catenin通路在子宫内膜癌患者中的作用机制研究
目的:观察Wnt10a/Wnt10b及其Wnt/β-catenin通路在子宫内膜癌患者中的表达及作用机制.方法:选取2015年1月-2016年7月医院收治子宫内膜癌患者102例,均经过病理确诊,设为观察组,其中95例雌激素依赖型子宫内膜癌,7例非雌激素依赖型子宫内膜癌.选取同期入院子宫内膜增生疾病诊断患者48例,设为对照组.入院后采集相关标本,制作组织芯片,采用免疫组化SP法检测两组Wnt10a/Wnt10b表达水平,采用Western-blot法检测不同组织标本关键蛋白的表达含量.结果:观察组中Wnt10a及Wnt10b阳性表达率,高于对照组(P<0.05);观察组中雌激素依赖型子宫内膜癌Wnt10a阳性率,高于非雌激素依赖型子宫内膜癌(P<0.05);观察组中雌激素依赖型子宫内膜癌Wnt10b阳性率,低于非雌激素依赖型子宫内膜癌(P<0.05);Wnt10a在观察组中呈阳性表达,组织排列无规律性,在对照组中呈阴性表达,组织排列相对整齐.Wnt10b在观察组中多呈阳性表达,组织排列缺乏规律性,对照组中呈阴性表达,组织排列相对整齐.Western-blot法结果显示,子宫内膜癌患者中,Wnt10b表达水平增加,并且β-catenin及c-myc表达均得到增加,APC表达下降.结论:Wnt10a/Wnt10b在子宫内膜癌发生、发展中发挥了重要作用,其机理与经典Wnt/β-catenin信号传导通路激活有关.
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Wnt/β-catenin通路在糖尿病肾病大鼠的表达及化瘀通络中药的干预作用
目的 探讨Wnt/β-catenin通路在糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的表达及化瘀通络中药对其的干预作用.方法 60只大鼠中选取10只为对照组,其余大鼠给予高糖高脂饲料喂养联合ip小剂量链脲佐菌素(STZ)制备DN模型.成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、化瘀通络中药组,各组ig给药,20周末检测24 h尿蛋白定量,RT-PCR法检测Wnt4、β-cateninmRNA表达,免疫组化及Western blotting法检测Wnt4、β-catenin蛋白的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量及Wnt4、β-catenin mRNA和蛋白的表达量明显升高(P＜0.01).与模型组比较,中药组及厄贝沙坦组24h尿蛋白定量及Wnt4、β-catenin mRNA和蛋白的表达量明显降低(P＜0.05、0.01).结论 化瘀通络中药可减少DN大鼠尿蛋白,且能够抑制大鼠肾脏存在的Wnt/β-catenin通路高表达,该作用可能是其减少蛋白尿排泄的主要途径之一.
关键词： 糖尿病肾病 化瘀通络中药 蛋白尿 Wnt/β-catenin通路 足细胞损伤 -
基于Wnt/β-catenin信号通路的凉血散瘀法对糖尿病溃疡大鼠模型的干预作用
目的:观察凉血散瘀中药对糖尿病溃疡大鼠的干预作用,并从Wnt/β-catenin通路角度探讨其作用机制.方法:Wistar大鼠采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法制备糖尿病模型.分别取正常对照组与糖尿病组大鼠制作溃疡模型,并分为溃疡对照(CU)组、糖尿病溃疡(DU)组、四妙勇安汤组(DU-四妙组)、愈疡灵组(DU-愈疡灵组)、四妙勇安汤+愈疡灵组(DU-四妙+愈疡灵组),每组各15只.观察造模后第3、7、14 d各组创面愈合情况和织形态结构的变化的变化,采用ELISA法、RT-PCR法检测创面组织β-catenin、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)蛋白及mRNA的表达水平.结果:DU组大鼠与CU组大鼠相比,第3、7、14 d的创面愈合率明显降低[(5.21±0.94)％vs(20.87±1.39)％,(31.70±1.21)％vs(49.99±1.58)％,(62.20±1.37)％vs(91.60±1.58)％,P<0.05];创面组织中β-catenin蛋白表达[(5.14±0.56)vs(9.04±0.65),(5.83±0.43)vs(10.08±0.35),(6.55±0.58)vs(12.77±0.30),P<0.05]及mRNA表达[(4.40±0.35)vs(6.92±0.16),(5.20±0.49)vs(7.12±0.48),(6.06±0.47)vs(9.24±0.55),P<0.05]均较低,而GSK-3β蛋白表达[(15.52±1.00)vs(7.04±0.53),(14.58±0.45)vs(6.05±0.23),(13.37±0.62)vs(4.49±0.37),P<0.05]及mRNA表达[(7.07±0.29)vs(3.55±0.32),(6.64±0.47)vs(3.00±0.28),(5.68±0.46)vs(1.98±0.19),P<0.05]则较高.与DU组大鼠相比,各治疗组大鼠各时间点的创面愈合率、创面组织中β-catenin蛋白及mRNA的表达水平均升高,而GSK-3β蛋白及mRNA的表达水平则降低,且治疗组中,以DU-四妙+愈疡灵组改善明显.结论:具有凉血散瘀作用的四妙勇安汤及愈疡灵软膏均可通过干预Wnt/β-catenint通路的表达促进DU大鼠创面愈合,两者同用的效果优于单用其中一种.
关键词： 糖尿病溃疡 四妙勇安汤 愈疡灵软膏 凉血散瘀法 Wnt/β-catenin通路 -
褐藻糖胶对多发性骨髓瘤细胞株 RPMI8226中W nt／β－catenin 通路的影响研究
目的：探讨褐藻糖胶诱导多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡过程中Wnt／β－catenin通路的变化。方法应用褐藻糖胶诱导多发性骨髓瘤细胞株RPM18226的凋亡，观察多发性骨髓瘤细胞株经10，25，50，100μg／mL浓度褐藻糖胶分别作用24，48，72 h后细胞增殖抑制率。将细胞分为3组：空白组不予药物干预，褐藻糖胶组给予25μg／mL褐藻糖胶培养， Wnt通道抑制剂（ DKK－1）组给予DKK－1培养。用AnnexinV－FITC／PI双染法检测3组RPMI822细胞凋亡率，通过Western blot方法检测3组β－catenin与c－myc蛋白表达情况。结果随褐藻糖胶浓度的增高和作用时间的延长，细胞增殖抑制率明显增高（P均＜0．05）。褐藻糖胶组细胞凋亡率明显高于空白组；褐藻糖胶组和DKK－1组β－catenin 和 c－myc 蛋白表达水平均明显低于空白组（P均＜0．05），褐藻糖胶组与 DKK－1组比较差异无统计学意义（P均＞0．05）。结论褐藻糖胶能够诱导多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226发生凋亡，与DKK－1作用相当，并且褐藻糖胶能够有效抑制多发性骨髓瘤细胞株中Wnt／β－catenin通路的活化状态，为有效治疗多发性骨髓瘤患者提供了理论依据。
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买朱尼对骨性关节炎大鼠关节软骨中 Wnt／β－catenin信号通路的调控作用研究
目的：观察维药买朱尼对骨性关节炎模型大鼠关节软骨中Wnt／β－catenin信号通路的调控作用，探讨买朱尼对软骨细胞的保护作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和买朱尼组，每组10只。模型组和买朱尼组采用改良Hulth造模法建立膝骨关节炎模型，建模第2周开始买朱尼组灌胃买朱尼10．31 mg／（kg· d），模型组和假手术组灌胃等量生理盐水，均连续4周。末次灌胃后24 h取3组大鼠膝关节软骨标本进行大体评分和组织学评分，采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测Wnt／β－catenin通路中β－cate-nin、GSK－3β和Wnt－3a的表达水平。结果模型组大鼠膝关节软骨标本大体评分、软骨组织学Mankin评分及软骨细胞中β－catenin、GSK－3β、Wnt－3a蛋白及mRNA表达水平均明显高于假手术组（P均＜0．05），而买朱尼组均明显低于模型组（P均＜0．05）。结论维药买朱尼可以减轻大鼠膝关节软骨退变的程度，其可能通过调节Wnt／β－catenin信号通路来发挥保护关节软骨细胞的作用。
关键词： 骨性关节炎 维药买朱尼 Wnt/β-catenin通路 -
Wnt/β-catenin通路相关基因参与穴位敷贴修复缺血性脑损伤机制
目的:穴位敷贴治疗脑缺血为“靳三针”特色疗法,本实验在前期研究证实穴位敷贴对脑缺血具有神经保护作用的基础上,探讨Wnt/β-catenin通路基因参与其修复缺血性脑损伤的可能机制.方法:制备安宫牛黄贴(药物组成以郁金、黄芩、栀予、冰片、麝香等为主),实验动物分为正常组、模型组、药物组及穴位敷贴(高、中、低剂量)组,制备大脑中动脉局灶性脑缺血模型(MCAO),每组分为3个亚组(脑缺血后6h、3d、7d).采用RT-qPCR检测Wnt3、Dishevelled、Caspase-3、Survivin mRNA;Western-bolt检测β-catenin、GSK-3β蛋白表达.结果:穴位敷贴治疗后,穴位敷贴中剂量组大鼠神经行为学评分明显降低(P＜0.05),大鼠缺血侧脑组织Wnt3、Dishevelled、Survivin mRNA、β-catenin蛋白表达不同程度增加,Caspase-3 mRNA、GSK-3β蛋白不断下降,与模型组相比具有统计学差异(P＜0.01或P＜0.05),以穴位敷贴中剂量组上述变化较为显著.结论:Wnt/β-catenin通路参与穴位敷贴防治缺血性脑损伤的可能机制为上调核心分子Wnt3、Dishevelled、β-catenin,激活靶基因Survivin,下调抑制因子GSK-3β、Caspase-3表达.
关键词： Wnt/β-catenin通路 基因 穴位敷贴 脑缺血 -
黄精多糖不依赖于LRP5激活信号通路调控成骨细胞分化
背景：前期研究发现，黄精多糖通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化，但是其促进骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及分子机制尚不明确。
目的：探讨黄精多糖LRP5激活Wnt信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究。
方法：培养C57BL/6小鼠骨髓骨髓间充干细胞，构建LRP5干扰载体，转染C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞，转染后在荧光倒置显微镜下计算细胞荧光转染效率及Western Blot 检测LRP5蛋白的表达。碱性磷酸酶、茜素红染色和Western Blot分析转染LRP5-siRNA病毒后小鼠骨髓间充质干细胞成骨能力的改变；RT-PCR及双荧光素酶检测黄精多糖对沉默LRP5的小鼠骨髓间充干细胞的成骨分化作用。
结果与结论：①与对照组相比，LRP5转染组细胞显著降低细胞的矿化能力(P<0.05)，明显降低Osterix、Runx2基因及LRP5蛋白的表达(P<0.05)；②黄精多糖能促进转染LRP5-siRNA病毒的小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，能显著上调β-catenin及Osterix基因的表达(P<0.05)，促使含有 TCF 结合位点的荧光素酶报告基因(TOPFlash)的高表达(P<0.05)；③结果说明，LRP5在小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化过程中有重要作用。黄精多糖不依赖于LRP5激活 Wnt/β-catenin 信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。 -
紫杉醇联合顺铂通过Wnt/β-catenin信号通路抑制鼻咽癌肿瘤干细胞增殖并促进其凋亡
背景：肿瘤干细胞具有自我更新和分化成新肿瘤的能力，会导致肿瘤放化疗不敏感，是肿瘤发生和复发的根源。
目的：探索紫杉醇联合顺铂对鼻咽癌干细胞增殖和凋亡的影响并探索其作用的信号通路。
方法：免疫磁珠的方法分离培养鼻咽癌干细胞，紫杉醇和顺铂处理细胞，Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、活化的caspase-3、Bcl-2和β-catenin及下游原癌基因c-myc的表达，用RNA干扰技术敲降β-catenin表达或者使用抑制剂XAV939抑制Wnt/β-catenin通路活性，MTT法检测细胞增殖率，流式细胞仪检测细胞凋亡。
结果与结论：①紫杉醇或顺铂均会抑制鼻咽癌干细胞的增殖，促进其凋亡，并且凋亡标志蛋白活化caspase-3表达上升，凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下降，联合用药具有协同作用，②紫杉醇或顺铂均会抑制Wnt/β-catenin通路的活性及下游靶基因c-myc的表达，抑制Wnt/β-catenin通路活性抑制鼻咽癌干细胞的增殖，促进其凋亡。③结果表明，紫杉醇和顺铂可能是通过Wnt/β-catenin信号通路调控鼻咽癌干细胞的增殖和凋亡。 -
GSK3β在病理性瘢痕中的表达和意义
目的 研究Wnt/β-catenin 通路中糖原合成酶激酶3β(GSK 3β)在病理性瘢痕中的表达情况,以确定GSK3β在病理性瘢痕中的作用.方法 利用免疫组化技术检测GSK 3β在30例瘢痕疙瘩(A组),30例增生性瘢痕(B组)及20例正常皮肤(C组)中的表达,并进行统计学分析.结果 GSK 3β在A、B组中的表达与C组比较,其差异有统计学意义(P ＜0.05),但A、B组之间的差异无统计学意义(P ＞0.05).结论 GSK 3β是病理性瘢痕形成的重要机制之一,Wnt/β-catenin通路的激活在病理性瘢痕形成中起到重要作用.
关键词： GSK3β Wnt/β-catenin通路 病理性瘢痕 -
益气活血方和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达的影响
目的:探讨补肾生髓方和益气活血方对脑缺血大鼠海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达的影响.方法:采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组.脑缺血2h,持续灌注10d,采用免疫组化Envision两步法观察缺血侧海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达.结果:与假手术组比,模型组wnt5a和LRP5蛋白表达的平均吸收光密度值显著高于假手术组(P＜0.05);与模型组比,补肾生髓方组与益气活血方组wnt5a蛋白表达的平均吸收光密度值显著高于模型组(P＜0.05),补肾生髓方组LRP5蛋白表达的平均吸收光密度值显著低于模型组(P＜0.05).结论:两种中药复方可通过增强海马CA1区wntSa蛋白表达,抑制LRP5蛋白的表达,调节wnt/β-catenin信号转导通路.
关键词： 脑缺血再灌注 补肾生髓法 益气活血法 Wnt/β-catenin通路
