LFA-1 and Mac-1, two β2 integrin members constitutively expressed on neutrophils, mediate leukocyte recruitment cascade by binding to the same ligand of ICAM-1The slow rolling and firm adhesion of leukocytes rely on LFA-1 while the cell crawling is dependent on Mac-1We hypothesized that their distinct roles are likely attributed to the differences in the binding kinetics or in the diverse responses of outside-in and inside-out signalingIn this study, we compared the ICAM-1 binding features between soluble or membrane-expressed LFA-1 and Mac-1 with different affinity conformation using optical trap techniqueOur data indicated that the affinity up-regulation from wide type (WT) to high affinity (HA) is off-rate dependent for LFA-1 but on-rate dependent for Mac-1The structural bases of this new finding were found to be consistent with our previous simulationsThese results furthered our understanding in their function differences under shear flow.

LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移

为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达.利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化.结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少.结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用.

CD54和LFA-1的相互作用在6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的JurkatT细胞的黏附性增强中的作用

目的研究CD54和LFA-1的相互作用在6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat 细胞(AS)的黏附性增强中的作用. 方法用细胞凝集试验确证AS细胞间黏附的增强,用细胞与细胞间黏附分子-1-人IgG的Fc片段(ICAM-1-Fc)的黏附试验和阻断性抗CD11a抗体的阻断试验研究CD54-LFA-1的作用,用单克隆抗体MEM-148检测AS细胞LFA-1亲和力的变化,用单克隆抗体NKI-L16检测AS细胞LFA-1亲合力的变化,用鬼笔环肽染色细胞骨架,用Jurkat-Raji细胞间的作用作模型研究6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制对T和B细胞间黏附的影响,用Con A结合试验检测细胞中蛋白质N-糖基化的变化. 结果 (1)AS细胞间的黏附性增强主要与CD54及CD11a表达的增强相关,也与LFA-1亲和力的增高相关;(2)AS细胞的细胞骨架发生重排;(3)AS细胞与Raji细胞间的黏附也增强;(4)Con A与AS细胞的结合增强. 结论 CD54和LFA-1的相互作用在AS Jurkat T细胞的黏附性增强中起重要作用.细胞骨架重排也可能起作用.AS细胞的蛋白质发生了N-糖基化修饰.

人乳腺癌组织中ICAM-1、LFA-1和VEGFR-3的表达与癌淋巴转移关系的研究

目的 观察不同时期,不同转移阶段的人乳腺癌组织中细胞间黏附分子(ICAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)的表达,探讨ICAM-1和LFA-1对乳腺癌淋巴道转移的影响,为乳腺癌淋巴道转移的分子机制提供理论依据.方法 根据不同病变阶段的手术患者切除的乳腺癌标本进行HE染色和免疫组化染色,观察ICAM-1、LFA-1在乳腺癌组织和ICAM-1、LFA-1、VEGFR-3在癌旁组织淋巴管内皮的表达情况.结果 随着临床分期的增高和淋巴结转移的发生,ICAM-1和LFA-1在乳腺癌癌细胞和癌巢中的表达阳性率逐渐增高,同时ICAM-1、LFA-1和VEGFR-3在癌旁组织淋巴管内皮细胞的表达阳性率也逐渐增高,具有正相关性,并且ICAM-1和LFA-1在癌旁组织淋巴管内皮细胞的表达之间具有正相关性(P＜0.01).同时发现无论是在乳腺癌癌细胞、癌巢还是在癌旁组织淋巴管内皮细胞,ICAM-1和LFA-1表达的高低都与癌的分化程度、性别、年龄不具有相关性,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ICAM-1和LFA-1与乳腺癌的淋巴道转移有关,并且通过两者的协同作用促进了乳腺癌的淋巴道转移.两者在癌组织及癌旁组织淋巴管内皮细胞表达的高低,可以作为数据指标对乳腺癌淋巴道转移的预防和治疗起到一定的指导作用.随着肿瘤的进展,乳腺癌癌旁组织中的淋巴管数量随之增加,可能与乳腺癌的淋巴道转移有关.VEGFR-3在淋巴管内皮细胞的表达具有较高的特异性,可以作为淋巴管内皮细胞的特异性标志物来标志淋巴管.

类风湿关节炎患者基因组DNA甲基化水平的初步研究

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者基因组DNA甲基化水平及影响基因组DNA甲基化水平的因素;并分析其与CD4+T细胞表面LFA-1表达水平的联系,探讨基因组DNA甲基化水平变化与RA发病的关系.方法 测定21例RA患者和20名正常对照的血浆Hcy、s-腺苷蛋氨酸(SAM)和s-腺苷同型半胱氨酸(SAH)的水平,CD4+T细胞表面LFA-1的表达水平,以及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677位的多态性.结果 ①RA组与对照组相比,SAM明显降低,SAH明显升高,其差异有统计学意义;提示RA患者基因组DNA甲基化水平明显降低;②SAM与Hcy呈负相关,SAH与Hcy呈负相关,相关系数分别为-0.932、0.924,P＜0.01;③RA组CD4+T细胞表面LFA-1表达较对照组增高,与Hcy呈正相关(r=0.557,P＜0.01),与SAM呈负相关(r=-0.651,P＜0.01);④MTHFR基因677位C→T的突变不仅导致Hcy水平升高,同时使基因组DNA甲基化水平降低,使CD4+T细胞表面LFA-1表达增多.结论 ①RA患者普遍有基因组DNA甲基化水平降低;②基因组DNA低甲基化可能与MTHFR基因的突变和高Hcy血症有关;③基因组DNA低甲基化可能通过影响RA患者的某些基因的表达异常参与疾病的发生发展.

犬颈动脉血管再狭窄造模前后全血Mac-1表达的动态变化

背景:越来越多的研究提示炎症启动了新内膜的形成,终导致再狭窄.目的:观察球囊扩张法建立犬颈动脉再狭窄动物模型后外周血单核细胞表面Mac-1(CD18,CD11b)、LFA-1(CD11a/CD18)阳性表达的动态变化.设计、时间及地点:对比观察动物实验,于2004-09/2005-04在苏州大学免疫实验室完成.材料:成年健康杂种犬10条,体质量15-17 kg,由苏州大学医学院实验动物中心提供.方法:在数字减影血管造影下用球囊扩张法建立犬颈动脉再狭窄的动物模型,术前,术后2 h,4 h,12 h,24 h,48 h,72h,1周分别抽墩周围静脉血,使用流式细胞仪检测单核细胞表面的Mac-1和LFA-1的阳性表达水平.术后8周取扩张颈动脉及对侧正常动脉作病理学检查.主要观察指标:OMac-1和LFA-1的阳性表达水平.②扩张颈动脉病理学检查.结果:实验动物术后8周行血管造影榆台,狭窄率为(65.00±15.47)%;病理学检查显示内膜明显增厚;单核细胞表面Mac-1在各时间段的表达,经方差分析差异有显著性意义(F=1.553,P=0.152).术后12 h左右开始升高,48～72 h左右达到高峰,与术前比较.差异均有显著性意义(P<0.05).术后1周时已接近术前基线水平(P>0.05).单核细胞表面LEA-1在各时间段的表达,经方差分析差别无显著性意义(F=1.553,P>0.05).结论:血管损伤可以上调单核细胞表面Mac-1的表达,提示其町能参与了血管成形术后内膜增生过程中的急性系统炎症反应.

热性惊厥患儿血浆和外周血单个核细胞表面ICAM-1/LFA-1的表达水平

目的 探讨细胞间黏附因子-1(ICAM-1)及其配体淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)对热性惊厥(FS)患儿的神经免疫调节作用.方法 2004-11-2006-12将武汉市儿童医院60例FS患儿分为单纯性Fs(SFS)组30例和复杂性FS(CFS)组30例;对照组30例,为年龄和性别相匹配的同期体检健康儿童.采用双抗夹心ELISA法检测血浆可溶性ICAM-1/LFA-1水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)表面ICAM-1/LFA-1的表达水平.结果 SFS组和CFS组患儿血浆ICAM-1水平分别为(21.54±11.09)ng/mL和(24.34±6.86)ng/mL,均明显低于对照组(29.73±12.39)ng/mL儿童(P＜0.05);3组血浆LFA-1水平从高到低依次为CFS组(12.30±8.04)ng/mL、SFS组(12.09±8.83)ng/mL和对照组(9.51±8.07)ng/mL,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).SFS组的PBMC表面ICAM-1表达水平为(29.96±12.31)%,明显高于CFS组(22.50±8.19)%及对照组(14.21±11.31)%儿童(P＜0.05),CFS组的PBMC表面ICAM-1表达水平明显高于对照组儿童(P＜0.05);而LFA-1在PBMC表面的表达水平则不同,3组比较,SFS组高为(50.89±21.36)%,CFS组低为(34.35±11.45)%,对照组为(41.39±16.30)%,组间比较差异有统计学意义.结论 ICAM-1/LFA-1作为早期应激状态下的协同刺激信号免疫因子,参与白细胞黏附及其黏附级联反应,使大脑神经元在对热应激不适应基础上呈过度兴奋状态,诱导惊厥的发生.且CFS的神经免疫病理过程要比SFS相对复杂,抑制FS的ICAM-1/LFA-1黏附活动可能为其防治开辟新的途径.

影响树突细胞功能的因素及其调控机制

树突细胞( Dendritic cells,DCs)尽管数量不足外周血单核细胞的1％,但表面具有丰富的抗原递呈分子(MHC I和MHCⅡ)、协同刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40、CD44、等)和粘附因子(ICAM-1、ICAM-2、ICAM-3、LFA-1、LFA-3等),是已知强的专职抗原递呈细胞( APC).DCs自身具有免疫刺激能力,是目前发现的唯一能激活未致敏的初始型T细胞的APC.

rhG-CSF动员对供者CD4+T细胞免疫表型和功能影响

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员对供者CD4+T细胞表面分子淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)、细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)、L-选择素(LAM-1)和人整合素-4(VLA-4)的表达及其介导的CD4+T细胞功能的影响,探讨外周血干细胞移植过程中CD4+T细胞免疫耐受机制.方法:使用三色荧光标记检测动员前及动员后第5天供者外周血LFA-1、ICAM-1、LAM-1和VLA-4的表达率,ELISA方法检测动员前后CD4+T细胞分泌IFN-γ和IL-4能力,免疫磁性分选法分离纯化CD4+T细胞,检测动员前后CD4+T细胞对基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的迁移能力和对ICAM-1的黏附能力.结果:动员前后CD4+T细胞LFA-1 (CD1 1a)和VLA-4(CD49d)表达率差异无统计学意义(P＞0.01),动员前后CD4+T细胞LAM-1( CD62L)和ICAM-1 (CD54)的表达率差异均有统计学意义,动员前显著高于动员后(P＜0.01)；动员前后CD4+T淋巴细胞向SDF-1α的迁移率差异无统计学意义(P＞0.01)；动员后CD4+T细胞对ICAM-1的黏附率降低(P＜0.01)；动员后IL-4和IFN-γ两个细胞因子在外周血血清的浓度均降低(P＜0.01).结论:rhG-CSF动员不影响CD4+T细胞LFA-1和VLA-4表达及CD4+T细胞迁移,但影响CD4+T细胞ICAM-1和LAM-1表达以及CD4+T细胞通过LFA-1对ICAM-1的黏附能力影响,并可能影响CD4+T细胞分泌细胞因子IL-4及IFN-γ的功能.

乙型肝炎患者血清sICAM-1、TGF-β1水平及其与疾病相关性分析

细胞间可溶性黏附分子-1(sICAM-1)是淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)的配体,两者结合可参与效应细胞-靶细胞间的相互作用和炎症反应.转化生长因子TGF-β是一族功能相似的活性多肽,具有多种生物活性功能,调节细胞分化、增殖、迁移、基质合成与降解,其中TGF-β1为重要.

大鼠皮肤移植后ICAM-1和LFA-1与排异反应的关系

目的探讨细胞粘附分子和皮肤移植后排异反应之间的关系.方法用HE及免疫组化方法观察20例大鼠Ⅲ度烫伤异体-自体皮肤混合移植和15例同种大鼠大张异体皮肤移植组织在移植后4～5,7,14,21和28d时细胞粘附分子ICAM-1和LFA-1的表达情况. 结果大鼠Ⅲ度烫伤后异体-自体皮肤混合移植组织中LFA-1+淋巴细胞和ICAM-1+细胞的表达均低于同种大张异体皮肤移植组织,与排异程度相一致,分别在移植后7和14d时差异显著(P＜0.05).结论 ICAM-1/LFA-1不是主要促使皮肤混合移植排异反应中T细胞活化的共刺激信号,但ICAM-1+细胞和LFA-1+淋巴细胞在介导同种大张异体皮移植排异反应中起主要作用.

ICAM-1/LFA-1的表达和胃癌TNM分期关系的研究

为研究ICAM-1、LFA-1在正常胃粘膜中及胃癌中的表达,并评价其表达与胃癌TNM分期的关系,对正常胃粘膜组织20例,胃癌组织75例按TNM分期分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,标本SABC免疫组化染色后,对阳性结果进行了分析.结果显示,正常胃粘膜组中ICAM-1表达率高于胃癌组(P＜0.05),LFA-1表达率两组间差别无显著性(P＞0.05);ICAM-1表达率Ⅰ组为71.4%(15/21),Ⅱ组为40.9%(9/22),Ⅲ组为17.6%(3/22),Ⅳ组为10%(1/10),Ⅰ组与Ⅱ组间、Ⅱ组与Ⅲ组间比较均有显著性差异(P＜0.05).

肿瘤坏死因子-α干预对热性惊厥患儿外周血单个核细胞ICAM-1和LFA-1表达的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对热性惊厥(FS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及配体淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)表达的影响.方法 16例FS患儿随机分为FS对照组和TNF-α干预组.TNF-α干预组采用1.0 ng/Ml的TNF-α进行干预.对照组16例,为年龄和性别相匹配的同期体检健康儿童.进行外周血PBMC培养.流式细胞仪检测PBMC表面ICAM-1和LFA-1的表达.结果 FS对照组在体外培养的PBMC表面ICAM-1和LFA-1表达水平分别为(20±9)%和(43±16)%,明显高于正常对照组[(14±7)%,(30±16)%](P＜0.05);TNF-α干预组的PBMC表面ICAM-1表达水平[(27±11)%]明显高于FS对照组(P＜0.05),LFA-1表达[(52±21)%]较FS对照组有增高趋势,但差异无统计学意义.结论 炎症介质TNF-α刺激可使FS患儿的LFA-1和ICAM-1表达上调.

关于阻断共刺激通路诱导移植免疫耐受的实验动物研究进展

应用能够使T细胞活化的协同刺激分子的相应单克隆抗体或重组基因表达产物阻断某些共刺激信号通路如CD28/B7、CD154/CD40、LFA-1/ICAM、ICOSL/ICOSL等可以抑制T细胞活化、分化以及产生效应细胞.这些共刺激信号通路彼此独立但又可能存在潜在的协同效应.本文综述在有关诱导受体对供体移植物特异性的免疫耐受以此延长移植物存活时间的实验动物研究,以期深入探讨免疫耐受机制以及某些处理因素对结果的影响,从而为此类实验的进一步开展甚至临床应用提供理论依据和实验支持.

脑梗死急性期白细胞CD11a,CD18 和LFA-1表达与梗死体积的关系

目的: 探讨脑梗死患者急性期白细胞CD11a, CD18和LFA-1的表达及其免疫阳性细胞数与梗死灶体积的关系. 方法: 流式细胞技术测定30例脑梗死患者急性期(发病72 h内)和28例健康人多型核细胞(PMN)、单核细胞(MN)和淋巴细胞(LC) CD11a,CD18 和CD11a / CD18 (LFA-1)的表达,用阳性细胞百分率表示(%),并计算外周血中PMN,MN和LC CD11a,CD18,LFA-1免疫阳性细胞数. 结果: 脑梗死患者急性期PMN,MN和LC CD11a,CD18,LFA-1表达阳性百分率明显高于健康对照组(P<0.05), 在大( 大于 10 cm3 )、中( 5 cm3～10 cm3 )、小 ( 小于 5 cm3)3型不同梗死灶体积的脑梗死患者中,各型之间表达细胞百分率均无显著性差异( P>0.05 ). 外周血PMN表达 CD11a,CD18和LFA-1的阳性细胞数在3型梗死灶之间及与正常对照组之间均存在显著性差异( P<0.05), 表达阳性细胞数与梗死灶体积的大小有显著相关( r1 = 0.396, P<0.05; r2 = 0.987, P<0.01; r3 = 0.794, P<0.01). MN和LC CD11a,CD18,LFA-1表达阳性细胞数在3型梗死灶的患者中均无显著性差异( P>0.05),而与正常对照组之间均有显著性差异( P<0.05). 结论: 脑梗死急性期PMN, MN和LC CD11a,CD18,LFA-1表达上调,外周血中PMN CD11a,CD18和LFA-1表达免疫阳性细胞数增多且与梗死灶体积有关.

急性髓性白血病细胞LFA-1和Mac-1的表达

目的探讨淋巴细胞相关抗原-1(LFA-1)(CD11a)和巨噬细胞-1(Mac-1)(CD11b)在急性髓性白血病(AML)细胞淤滞及向组织浸润中的作用及表达,并分析其与临床表现之间的关系.方法采用流式细胞仪检测51例初诊AML患者骨髓白血病细胞膜表面CD11a和CD11b的表达,并与AML患者的FAB亚型、临床表现、实验室指标及治疗缓解率进行相关分析.结果AML细胞上表达的CD11a[(36.476±22.641)%]和CD11b[(26.955±12.328)%]明显高于正常骨髓单个核细胞CD11a[(19.625±12.328)%]和CD11b[(15.513±6.296)%];在AML患者的不同FAB亚型中,CD11a和CD11b的表达没有明显差异,但是在M3中CD11a表达有减低趋势,而在M4和M5中CD11b表达有增高的趋势;相关分析显示,CD11a和CD11b的表达与AML患者的白细胞计数呈明显正相关;阳性细胞≥20%作为CD11a阳性,阳性细胞≥30%作为CD11b阳性,CD11a和CD11b阳性患者的白细胞计数和浸润发生率高于阴性患者,而缓解率低于阴性患者.结论 LFA-1和Mac-1在AML患者的白细胞淤滞及向组织浸润中起了一定作用.二者在AML的高表达与患者的白细胞增高和髓外浸润以及缓解率降低有关.因此,LFA-1和Mac-1在AML患者的高表达可能是AML患者预后较差的因素之一.

LFA-1与ICAM-1在急性髓性高白细胞白血病中的表达

目的研究高白细胞急性髓性白血病(AML)患者白血病细胞与内皮细胞的黏附状况以及LFA-1和ICAM-1在高白细胞AML中的表达,探讨AML患者高白细胞的发生机制.方法观察高白细胞AML患者白血病细胞与内皮细胞的黏附作用;检测高白细胞AML骨髓单个核细胞(BMMNC)培养上清对正常白细胞与内皮细胞黏附的影响;流式细胞仪检测高白细胞AML患者BMMNC表面LFA-1的表达以及高白细胞AML患者BMMNC培养上清作用24 h后内皮细胞ICAM-1的表达.结果与非高白细胞AML组相比,高白细胞AML患者白血病细胞与内皮细胞的黏附率明显增加;BMMNC表面LFA-1的表达显著增加;BMMNC培养上清作用后内皮细胞ICAM-1的表达明显增高及与正常白细胞黏附明显增加.结论高白细胞AML细胞分泌较多的LFA-1,同时刺激内皮细胞分泌ICAM-1增加,促使白血病细胞与内皮细胞的黏附增加,增高的LFA-1与ICAM-1共同作用可能在高白细胞白血病的发生中起一定作用.