川芎嗪对同基因骨髓移植小鼠骨髓中VCAM-1/VLA-4表达的影响

为了探讨同基因骨髓移植(BMT)小鼠骨髓细胞表面黏附分子VCAM-1/VLA-4(CD49d)的表达及川芎嗪对其影响,取健康BALB/c小鼠,随机分为3组:正常组(不做处理),骨髓移植对照组(简称BMT组)和骨髓移植+川芎嗪治疗组(简称川芎嗪组).BMT组和川芎嗪组分别胃饲生理盐水0.2 ml/只和川芎嗪注射液每次2 mg/只,2次/天.在BMT后第7、14、21、28天处死小鼠,采用免疫组织化学方法检测骨髓基质细胞VCAM-1蛋白表达水平,用RT-PCR检测骨髓基质细胞VCAM-1 mRNA表达水平;用流式细胞术检测骨髓有核细胞表面VLA-4的表达水平.结果发现:BMT后第7、14、21、28天川芎嗪组VCAM-1/VLA-4的表达水平、骨髓有核细胞计数均高于BMT组(P＜0.05或P＜0.01).结论:川芎嗪能提高BMT小鼠骨髓造血细胞和基质细胞黏附分子的表达,促进造血干/祖细胞的归巢,加速移植后骨髓的造血重建.

LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移

为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达.利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化.结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少.结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用.

VLA-4单克隆抗体那他珠单抗(Natalizumab)动员人CD34+造血干细胞的临床研究

VLA-4是表达于造血细胞表面的β-1整合素家族的α-4亚单位,是与CD34+细胞动员和迁移有关的黏附分子.骨髓来源的CD34+细胞VLA-4表达量显著高于外周血CD34+细胞,提示VLA-4的表达与造血干细胞动员到外周血有密切的关系.VLA-4单克隆抗体那他珠单抗(Natalizumab)被用于治疗自身免疫性疾病,如多发性硬化、Crohn病等,本研究旨在探讨Natalizumab在动员CD34+造血干细胞中的作用.

极迟抗原-4生理功能及其拮抗剂的抗炎作用和聚乙二醇修饰

经典的糖皮质激素和非甾体抗炎药物尽管疗效肯定,但长期应用会引起严重的不良反应.极迟抗原-4(Very late antigen-4,VLA-4)参与了炎症反应过程中炎症细胞的游走、浸润,其肽类拮抗剂LDV(Leu-Asp-Val)及其衍生物在实验研究中显示出了明确的抗炎效应,其拮抗剂经聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)修饰后药代学和药效学发生明显改善,抗炎活性增强,作用时间延长.本文对VLA-4的生理功能、肽类拮抗剂的活性及PEG修饰进行介绍.

补髓生血颗粒对慢性再障患者粘附分子VLA-4mRNA表达的影响

造血干/祖细胞及骨髓造血微环境中粘附分子表达异常,可能参与了再障骨髓造血功能衰竭的病理过程.研究采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞VLA-4的mRNA表达水平.结果表明,慢性再障患者VLA-4的mRNA蛋白均呈低表达状态,补髓生血颗粒能提高其表达.结论提示,慢性再障患者存在粘附功能异常,补髓生血颗粒可能通过调节骨髓基质细胞粘附分子的表达来改善慢性再障造血细胞与造血微环境的粘附功能状态.

VLA-4与急性白血病化疗耐药

WAY-160279预防大鼠心脏移植急性排斥反应

[目的]研究VLA-4(极晚抗原4)拮抗剂WAY-160279预防大鼠心脏移植急性排斥反应的效果.[方法]BN和LEW大鼠分别做供、受体,建立异位心脏移植急性排斥模型.38只受体大鼠按术后用药不同分为对照组和实验组(3组),实验组术后14 d内口服不同剂量WAY-160279,每日2次.[结果]口服WAY-160279(10 mg·kg-1)不能延长移植心脏存活时间(P=0.896),30mg·kg-1及50 mg·kg-1可明显提高移植物存活时间(P＜0.001),并在一定范围内呈剂量相关性.与对照组相比,30mg·kg-1、50mg·kg-1 WAY-160279均可明显减少移植心脏淋巴细胞浸润,减轻组织充血及水肿程度.[结论]WAY-160279可抑制大鼠心脏移植急性排斥反应,显著延长移植物存活时间,并在一定范围内呈剂量相关性.

当归多糖对小鼠造血细胞表面粘附分子表达的影响

目的:探讨当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对小鼠造血细胞表面粘附分子表达的影响,旨在为阐述APS在造血凋控和动员方面的机制提供实验依据.方法:采用外周血WBC、骨髓单个核细胞(Marraw mononuclear cell,MNC)计数,流式细胞术检测外周血和骨髓Sea-1+细胞率以及骨髓MNC和Sca-1+细胞表面CD49d(VLA-4的a链)、CD44表达情况.结果:1采用4mg/kg APS动员后小鼠外周血的WBC、Sca-1+细胞数明显高于NS组(P<0.01),而骨髓MNC和Sca-1+细胞数却明显低于NS组(P<0.01);2APS组骨髓MNC及Sca-1+细胞表面CD49d表达明显下降(P<0.05);骨髓MNC表面CD44表达阳性率下降(P<0.05),但荧光强度无明显变化;骨髓Sca-1+细胞表面CD44的表达与NS组无显著性差异.结论:APS可能通过降低造血细胞表面的某些粘附分子的表达而产生动员效果.

Fut8基因通过促进VLA-4/VCAM-1表达影响B细胞发育

目的 探讨核心岩藻糖基化修饰对VLA-4/VCAM-1表达及B细胞发育的影响.方法 通过RNA干扰技术使前B细胞(70Z/3)和基质细胞(ST2)的Fut8基因沉默,免疫沉淀和Western blot检测Fut8基因沉默效率,以细胞黏附实验和克隆形成实验分别研究Fut8基因对VLA-4/VCAM-1之间亲和力和对B细胞分化发育的影响.结果 Fut8基因沉默使VLA-4/VCAM-1之间的亲和力以及前B细胞和基质细胞之间的黏附作用降低,并使前B细胞的克隆形成能力明显下降.流式细胞仪分析结果也表明,Fut8祖B细胞向前B细胞分化过程受阻.结论 本实验揭示了Fut8基因调节VLA-4/VCAM-1之间结合能力以及前B细胞克隆形成的机理,为B细胞分化发育研究提供理论依据.

白血病干细胞及其微环境:生物学特性与靶向治疗

急性髓系白血病来源于白血病干细胞(leukemia stem cells,LSCs)亚群的不断增殖.本文综述了目前所知的影响人类LSCs生存的内部及外部因素.内部因素包括细胞周期调节因子、促存活通路(如NK-κB、Akt等)、氧化应激通路及促进细胞自我更新的特异性分子.外部因素主要由骨髓造血微环境生成,具体包括趋化因子受体(CXCR4)、黏附分子(VLA-4、CD44)及缺氧相关蛋白.本文还讨论了新的利用LSCs及其微环境特异性的治疗策略.