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HPLC法测定黄芪中游离黄酮苷元的含量
目的 建立黄芪中槲皮素和山萘酚含量的测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法测定不同来源黄芪中槲皮素和山萘酚含量.结果 不同来源样品中2种黄酮苷元的定量分析结果分别为槲皮素平均回收率97.88%,RSD=1.07%;山萘酚平均回收率为99.83%,RSD=1.10%.结论 黄芪中含有中槲皮素和山萘酚,其含量随产地而变化.
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金钱草质量标准的研究
金钱草为<中国药典>2000年版收载的品种,其来源为报春花科植物过路黄Lysimachia christinae Hance的干燥全草.现行质量标准中仅规定了药材横切面的显微鉴别及杂质检查,不能有效控制药材质量,为此,本研究对薄层色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物等进行了研究,并采用高效液相色谱法[1,2]测定酸水解后黄酮苷元槲皮素、山柰素的含量,结果表明,本方法灵敏,准确,重现性好,为金钱草的质量控制提供了依据.
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鸡肝散黄酮类成分的水解条件
鸡肝散又称四方蒿Elsholtzia blanda Benth.,为唇形科香薷属植物多年生草本植物.性味苦辛、凉,具有清热解毒、消炎止痛的功效,民间常用于治疗感冒、痢疾、肝炎等病症[1].哈尼族用于治疗眼疾及呼吸道感染,疗效甚佳.鸡肝散主要活性成分为挥发油和黄酮类[2,3],其中黄酮类成分具有良好的抗心律失常和心肌缺血的作用[4,5].为合理开发利用其资源,作者采用正交试验法对药材中黄酮类成分的水解条件进行考察,并测定了鸡肝散3种主要黄酮苷元的含量,以期为该药材质量控制提供科学依据.
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天胡荽药材质量标准研究
目的:建立天胡荽的质量控制标准,考察不同产地来源的药材质量.方法:以黄酮苷元槲皮素和山柰素为指标成分,采用薄层色谱法对天胡荽药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法,以Shim-pack VP-ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相,检测波长为370 nm进行定量测定.结果:薄层色谱斑点清晰,专属性强;槲皮素和山奈素的进样量分别在0.1290～1.613,0.128 7～1.609 μg范围内呈良好的线性关系,相关系数均为0.9997.加样回收率槲皮素为101.17%,RSD为1.61%;山奈素为98.64%,RSD为1.56%.结论:该方法能准确可靠地进行定性、定量检测,可有效控制天胡荽的质量.
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高效液相色谱法测定齿叶白鹃梅叶中3种黄酮苷元的含量
目的：建立齿叶白鹃梅叶中芹菜素、槲皮素和木犀草素3种黄酮苷元的含量测定方法。方法：采用酸水解法进行水解，对影响酸水解的主要因素酸浓度、水解温度和水解时间进行考察；采用高效液相色谱进行含量测定，色谱柱为Promosil C18色谱柱（4．6 mm ×250 mm，5μm），流动相为乙腈－2％冰乙酸（V∶V＝20∶80），柱温25℃，进样量10μl，流速1．0 ml／min，检测波长267 nm。结果：酸水解条件为：盐酸－甲醇浓度为4．0 mol／L，水解温度为80℃，水解时间为5 h；含量测定中木犀草素、槲皮素和芹菜素的进样量分别在0．82～8．20、0．8696～8．6960和0．7776～7．7760μg范围内具有良好的线性关系；平均加样回收率分别为95．8％、97．1％、99．6％。含量测定方法的精密度、稳定性、重复性也均符合有关规定。结论：本研究建立的水解方法和含量测定方法准确、可靠，可用于齿叶白鹃梅叶的质量控制。
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RP-HPLC法对元宝枫果翅中3种黄酮苷元的研究
目的研究元宝枫果翅活性与其有效成分的相关性.方法利用反相高效液相色谱法测定不同季节元宝枫果翅中槲皮素、山柰酚和异鼠李素含量.结果不同季节样品中3种黄酮苷元的定量分析结果分别为槲皮素平均回收率99.8%,RSD=0.72%;山柰酚平均回收率为100.8%,RSD=1.09%;异鼠李素平均回收率为102.4%,RSD=1.61%.结论元宝枫果翅中含有中槲皮素、山柰酚和异鼠李素,其含量随季节变化.
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红绒毛羊蹄甲中的黄酮类成分
目的 研究红绒毛羊蹄甲Bauhinia aurea的化学成分.方法 应用各种色谱技术进行分离纯化,用MS和NMR分析确定化合物结构.结果 90%乙醇提取,从醋酸乙酯萃取物的不同部位分离得到11个化合物,其中3个为黄酮苷元,8个为黄酮苷,分别鉴定为白杨素(I)、木犀草素(Ⅱ)、芹菜素(Ⅲ)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(IV)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(V)、3,5,7-三羟基色原酮-3-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅵ)、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)、山柰素-3,7-二氧-α-L-双鼠李糖苷(Ⅷ)、槲皮素-3,7-二氧-α-L-双鼠李糖苷(Ⅸ)、槲皮素-3-O-(6"-没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(X)、槲皮素-3-O-(6"-没食子酰基)-β-D-半乳糖苷(XI).结论 化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ、X和Ⅺ均为首次从羊蹄甲属植物中发现.
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B环不同羟基取代影响黄酮苷元透膜能力的分子动力学模拟研究
目的 利用分子动力学模拟方法研究黄酮苷元B环不同羟基取代对透膜能力的影响规律,并考察理论方法与实验结果的相关性.方法 利用GROMACS程序包,通过附加加速度的分子动力学模拟方法得到5种黄酮苷元在双层脂质膜9个不同位置的轨迹,分析分子透膜过程中的能垒、方向性、氢键、相互作用等参数.结果 分子动力学模拟数据与文献报道人结肠腺癌Caco-2细胞实验数据具有良好的相关性(r=-0.7862),分子透过磷脂酰胆碱(DPPC)膜的能垒越小,越有利于药物分子透过生物膜.黄酮苷元透膜难易受静电的影响大于范德华作用的影响,分子在膜内形成氢键能力越强,滞留时间就越长.2′位取代可以增加分子各羟基形成氢键的能力,3′或5′位存在羟基时,与极性层适当的静电排斥作用有利于分子透过极性层.结论 B环不同位置取代对黄酮苷元透膜过程中的氢键形成能力、方向、静电相互作用和能垒都有明显的影响,理论模拟的能垒可以作为预测黄酮类化合物透膜吸收的一个重要指标.
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HPLC法测定蒲黄炭中槲皮素、异鼠李素和山柰素
蒲黄为香蒲科植物水烛香蒲Typha angustilolia L.、东方香蒲T.orientalis Presl或同属植物的干燥花粉.具有止血、化瘀、通淋等作用.蒲黄的用药记载始于《神农本草经》,经炮制后用药首载于《日华子本草》,《中国药典》2005年版仅对蒲黄生品作了定量限定[1].本课题组通过药效学实验筛选发现蒲黄炭的总黄酮是其止血的主要活性部位.因此本实验采用HPLC法对蒲黄炭酸水解后的3种黄酮苷元槲皮素、异鼠李素、山柰素进行了测定[2,3].
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银杏叶提取物咀嚼片的制备及质量标准研究
银杏叶提取物(EGb)是从银杏叶中提取的具有独特药理活性的混合物,药理研究结果显示,EGb中含有黄酮类、萜类内酯、聚异戊烯醇类、有机酸、烷基酚和烷基酚酸、甾体化合物、氨基酸和微量元素在内的100多种化学成分.银杏叶中的黄酮含量较高,为2.5%～5.91%,所含黄酮种类超过35种之多,其中黄酮苷17种、双黄酮6种、黄酮苷元7种和桂皮酰衍生物5种.代表银杏叶药效的主要是黄酮苷,苷元主要有山奈酚、槲皮素、异鼠李素.
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浙江不同产地山核桃叶主要黄酮苷元含量的比较研究
目的:测定和比较浙江不同产地山核桃叶中的主要黄酮苷元含量,为寻找黄酮苷元含量较高的山核桃叶提供了方向,将有利于山核桃叶的进一步开发利用.方法:采用反相高效液相色谱法(HPLC),以相应化合物大吸收波长为检测波长,对不同产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素的含量进行测定,并比较各个产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量的差异.结果:白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素浓度分别在0.002 5 ～0.025、0.002 5 ～0.025、0.025 ～0.600和0.012 5～0.250 mg/mL范围内具有良好的线性关系.白杨素和球松素查尔酮以淳安县威坪镇汪川村山核桃叶高,而小豆蔻明和球松素以浙江中医药大学滨江校区山核桃叶高,临安市湍口镇凉溪村山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素均低.结论:浙江不同产地山核桃叶中主要黄酮苷元白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量具有较大的差异,根据需要选择不同产地的山核桃叶进行开发利用.
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不同季节元宝枫叶中的三种黄酮苷元的含量测定
目的:利用反相高效液相色谱法测定不同季节元宝枫中槲皮素、山柰酚和异鼠李素含量,为元宝枫药用质量标准的建立奠定基础.方法:采用DiamonsilTM(钻石)-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-水(含1%冰醋酸)(60:40);流速1.0 mL·min-1;检测波长360 nm.结果:通过对样品的分析,证明其中含有槲皮素、山柰酚和异鼠李素三种黄酮苷元.并对不同季节样品的测定得到了满意的结果.槲皮素平均回收率100.4%,RSD=1.61%(n=5);山柰酚平均回收率为102.5%,RSD=1.77%(n=5);异鼠李素平均回收率为102.3%,RSD=1.63%(n=5).其中含有的山柰酚和异鼠李素为首次报道.结论:所建立的方法简便、准确、可靠,可作为元宝枫药用质量控制方法.
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聚酰胺树脂纯化富集沉香叶中主要黄酮苷元的工艺
目的 利用单因素试验法优选沉香叶中4种主要的黄酮苷元成分的提取工艺.方法 采用单因素实验设计,以沉香叶中主要的黄酮苷元成分芫花素、芹菜素、羟基芫花素和木犀草素为对照成分,利用高效液相色谱法测定4种主要黄酮苷元的含量.结果 60 ～ 100目聚酰胺树脂为纯化沉香叶4种主要黄酮苷元的优聚酰胺树脂类型,佳工艺为,上样流速2BV.h-1(柱体积Bed Column,简称BV),上样液浓度0.09mg·mL-1,大上样量为100BV(178.4mg),佳洗脱剂为30％乙醇除杂,50％乙醇洗脱,洗脱体积为24BV,50％乙醇洗脱段4种黄酮苷元平均纯度为51.37％,达到中药有效部位要求,4种主要黄酮苷元成分总提取率高达84％.结论 为后期合理提取纯化富集沉香叶中黄酮苷元类成分的药用资源提供了工艺参考.
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不同产地银杏叶提取物总黄酮醇苷、萜类内酯含量比较
银杏叶中医常称白果叶,具有益心敛肺、化湿止泻之功效,自上世纪60年代,国内外对银杏的化学成分,药理活性及临床应用研究表明:银杏药用价值大部分是叶.目前开发的银杏叶制品主要有三类:植物药制剂、功能性食品及保健化妆品.我国银杏资源丰富,银杏叶的开发具有广阔的前景.银杏叶化学成分复杂,迄今为止,已从银杏叶中分离出大量的极性和非极性化合物,其中主要为黄酮类化合物、萜类内酯,此外还有有机碱、烷基酚和烷基酚酸、甾体化合物及微量元素等.通过对不同产地银杏叶提取物进行检测,发现传统工艺提取的总黄酮醇苷含量较低,黄酮苷元比的面积大部分不符合要求,内酯含量有个别情况达不到要求.
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HPLC-DAD法测定蒺藜茎叶3种酸水解黄酮苷元的含量
目的:对酸水解后黄酮类三大苷元质量控制进行研究,建立水解充分完全,操作简单易行的质量控制方法.方法:采用HPLC-DAD法,色谱柱:Thermo Syncronis C1s(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:为乙腈-0.2％磷酸水溶液,流速:1.0 mL· min-1,柱温:40℃,进样量:20 μL,槲皮素、山奈酚及异鼠李素检测波长:370 nm.结果:槲皮素、山奈酚、异鼠李素3个黄酮苷元分别在1.76-44.00,0.81-10.16,0.55-13.75 μg/mL范围内呈线性良好;回归方程分别为Y=74906X-64345(R2=0.9999),Y=74324X-40391(R2=0.9993),Y=69020X-30737(R2=0.9996).结论:通过提取分离工艺中不同部分的样品进行测定发现,经大孔树脂柱(D101)分离后96％的黄酮类化合物主要集中在30％乙醇部分.
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RP-HPLC法测定不同产地黄芩中5种黄酮苷元成分的含量
目的:建立测定不同产地黄芩中5种黄酮苷元成分含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法.色谱柱为AgilentExtend-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为276 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃.结果:去甲汉黄芩素、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A的进样量分别在0.018 0～0.108 0、0.378 0～2.268 0、0.094 5～0.567 0、0.022 5～0.135 0、0.035 4～0.212 4 μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 9、0.999 5、0.999 6、0.999 5、0.999 5);精密度、重复性、稳定性试验的RSD＜3％;加样回收率分别为98.72％ (RSD=2.5％,n=6)、101.80％ (RSD=2.0％,n=6)、99.25％(RSD=2.3％,n=6)、98.71％ (RSD=1.5％,n=6)、99.05％ (RSD=1.2％,n=6).结论:该方法操作简便、快速,结果准确,可用于黄芩中黄酮苷元成分的含量测定.
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HPLC法测定络石藤中黄酮苷元成分
目的:建立以高效液相色谱法测定络石藤中黄酮苷元成分的方法.方法:色谱柱为Dikma Inertsil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸(pH2.5,梯度洗脱),检测波长为350 nm,流速为0.8 mL·min-1,柱温为32℃,进样量为10μL.结果:络石藤中黄酮类化合物多以木犀草素和芹菜素的结合形式存在,水解前后木犀草素的含量分剐为0.009 7%和0.033 2%,芹菜素的含量分别为0.012 4%和0.070 9%.木犀草素的加样回收率为98.4%～102.0%,RSD为2.84%～3.42%;芹菜素的加样回收率为97.2%～101.6%,RSD为1.82%～3.98%.结论:本试验对络石藤中的黄酮苷元成分进行了初步的定性、定量研究,可为络石藤的质量研究提供科学依据.
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多指标-正交试验优化沙棘叶和沙棘籽中黄酮的提取工艺
目的:优化沙棘叶和沙棘籽中黄酮的提取工艺.方法:以6种黄酮苷元即儿茶素、芦丁、杨梅素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素的提取率总和为指标,以乙醇体积分数、提取时间、提取次数、料液比为考察因素,采用L9(34)表设计正交试验,分别优化沙棘叶和沙棘籽中黄酮的提取工艺,并进行验证试验.结果:沙棘叶中黄酮的优提取工艺为乙醇体积分数70%、提取3次、每次提取2.0 h、料液比1:16;沙棘籽中黄酮的优提取工艺为乙醇体积分数50%、提取3次、每次提取1.5 h、料液比1:24;验证试验中,沙棘叶和沙棘籽中6种黄酮苷元的提取率总和分别为56.4、15.4 mg/g(RSD分别为1.4%、3.4%,n=3).结论:优化后的提取工艺方法简便、稳定、可行,可用于沙棘叶和沙棘籽中黄酮成分的提取.
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镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠免疫功能的影响
目的:探讨藏药镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠细胞和体液免疫功能的影响.方法:将60只昆明种小鼠随机分为6组:正常组、模型组、盐酸左旋咪唑组(25 mg/kg)及黄酮苷元高、中、低剂量组(336,168,84 mg/kg),每组10只.高、中、低剂量组分别灌胃给予不同剂量的黄酮苷元,正常组和模型组灌服等体积5％吐温-80溶液,共10天.第8天开始注射环磷酰胺制备免疫抑制小鼠模型,除正常组腹腔注射生理盐水外,其他各组分别腹腔注射环磷酰胺,共3天.采用ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验、NK细胞活性的测定、血清溶血素的测定方法观察镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠免疫功能的影响.结果:与模型组比较,镰形棘豆黄酮苷元各剂量组能明显提高免疫抑制小鼠的淋巴细胞转化能力(P＜0.05)、NK细胞活性百分率(P＜0.05)和血清半数溶血值(HC50)(P＜0.05).结论:镰形棘豆黄酮苷元能够提高环磷酰胺造成的免疫抑制小鼠的免疫功能.
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镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠非特异免疫功能的影响
目的:探讨藏药镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠非特异性免疫功能的影响.方法:将60只昆明种小鼠随机分为6组:正常组,模型组,镰形棘豆黄酮苷元高、中、低剂量组(336、168、84 mg/kg)和盐酸左旋咪唑组(25 mg/kg),每组1 0只.镰形棘豆黄酮苷元高、中、低剂量组分别灌胃给予不同剂量的黄酮苷元,正常组和模型组灌服等体积5％吐温-80溶液,共10天.第8天开始,以注射环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型,除正常组腹腔注射生理盐水外,其他各组分别腹腔注射环磷酰胺,共3天.采用巨噬细胞碳粒廓清实验、巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、免疫抑制小鼠器官指数的测定方法,观察镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠非特异性免疫功能的影响.结果:与模型组比较,镰形棘豆黄酮苷元各剂量组能有效提高免疫抑制小鼠的吞噬百分率、廓清指数(K)和吞噬系数(α),差异有统计学意义(P＜0.05),增加免疫器官脾脏和胸腺的器官指教,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:镰形棘豆黄酮苷元能够增强环磷酰胺所致免疫功能抑制小鼠非特异性免疫功能.
