首页 > 文献资料
-
山核桃叶黄酮抑制TNF-α诱导的HUVECs与THP-1的黏附作用
目的:研究从山核桃叶中提取分离出来的黄酮单体2’,6’-二羟基-4’-甲氧基查耳酮对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与人单核细胞白血病细胞(THP-1)的黏附作用.方法:采用荧光标记检测经肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激的HUVECs及THP-1之间黏附作用;采用荧光定量PCR及流式细胞技术,检测2’,6’-二羟基-4'-甲氧基查耳酮对HUVECs表面细胞黏附分子(VCAM-1)和细胞间黏附分子(ICAM-1)表达的影响.结果:2’,6'-二羟基-4’-甲氧基查耳酮能够明显减少TNF-α诱导的HUVECs与THP-1之间的黏附数量;能够抑制HUVECs表面黏附分子VCAM-1和ICAM-1的表达.结论:2’,6’-二羟基-4’-甲氧基查耳酮能够明显抑制TNF-α诱导的HUVECs与THP-1之间的黏附作用.降低HUVECs表面黏附因子VCAM-1、ICAM-1的表达可能是其抑制黏附作用的机制之一.
-
山核桃树叶中球松素查耳酮的含量测定
目的:建立用高效液相色谱法(HPLC)法测定山核桃树叶中球松素查耳酮(DHMC)含量的方法.方法:采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-水(65∶35,V/V)为流动相,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,检测波长为342 nm,对DHMC的含量进行测定.结果:DHMC进样量在0.02～0.10 μg范围内线性关系良好(r=0.999 6,n=6),精密度RSD为1.1%(n=6),重复性试验RSD为0.9%(n=6),加样回收率为101.6%(RSD=1.8%,n=6),经测定山核桃叶干品中DHMC的含量较高,达0.79%.结论:所建立的HPLC法专属性强,精密度好,结果准确.
-
浙江不同产地山核桃叶主要黄酮苷元含量的比较研究
目的:测定和比较浙江不同产地山核桃叶中的主要黄酮苷元含量,为寻找黄酮苷元含量较高的山核桃叶提供了方向,将有利于山核桃叶的进一步开发利用.方法:采用反相高效液相色谱法(HPLC),以相应化合物大吸收波长为检测波长,对不同产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素的含量进行测定,并比较各个产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量的差异.结果:白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素浓度分别在0.002 5 ～0.025、0.002 5 ～0.025、0.025 ～0.600和0.012 5～0.250 mg/mL范围内具有良好的线性关系.白杨素和球松素查尔酮以淳安县威坪镇汪川村山核桃叶高,而小豆蔻明和球松素以浙江中医药大学滨江校区山核桃叶高,临安市湍口镇凉溪村山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素均低.结论:浙江不同产地山核桃叶中主要黄酮苷元白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量具有较大的差异,根据需要选择不同产地的山核桃叶进行开发利用.
-
山核桃叶球松素制备工艺研究
目的 优化山核桃叶球松素的制备工艺,为进一步开发利用山核桃叶提供理论依据.方法 采用单因素试验,山核桃叶通过乙醇回流提取,氢氧化钠变性,聚酰胺吸附并洗脱,石油醚萃取,乙醇结晶等步骤,以球松素作为检测指标,进行RP-HPLC测定.结果 山核桃叶球松素的制备工艺为山核桃叶粉末用10倍量的95％乙醇回流提取2次,每次30 min,以体积比400∶5的比例往提取液中加入1 mol·L-1氢氧化钠溶液,静置过夜取上清,以液质比20∶1的比例与聚酰胺混合并旋蒸至干燥,先用15倍量聚酰胺体积的水洗去杂质,再用15倍量聚酰胺体积的20％乙醇溶液洗去杂质,后用15倍量聚酰胺体积的60％乙醇溶液解吸附;收集60％乙醇溶液洗脱液,浓缩至干后,获得球松素含量在20％左右的粗产物,以液质比50∶3的比例将此粗产物溶解于甲醇溶液中,加入等体积石油醚,连续萃取10次,收集石油醚产物,再将此产物用乙醇进行结晶,获得纯度＞90％的球松素.结论 该方法稳定可行,适合工业生产;氢氧化钠变性、聚酰胺纯化及结晶是制备高纯度球松素的关键步骤,为球松素大规模制备奠定了基础,也为山核桃叶的开发利用提供了理论依据.
-
山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的急性毒性研究
[目的]研究山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的急性毒性作用。[方法]KM小鼠灌胃（ig）不同浓度的山核桃叶总黄酮苷元溶液，观察并记录小鼠饮食、日常活动及死亡情况，利用改良寇氏法计算半数致死量（LD50）、大耐受量（MTD），并通过HE染色法观察小鼠肝脏、肾脏的病理切片，从而研究山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的急性毒性作用。[结果]实验过程中小鼠的饮食活动无异常，且无死亡现象发生，故无法得出山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的LD50值，实验小鼠对山核桃叶总黄酮苷元的大耐受量为1130.7 mg·kg-1（相当于人用剂量125.6 mg·kg-1），HE染色结果显示各组小鼠的肝脏、肾脏均正常，无病变现象出现。[结论]山核桃叶总黄酮苷元对实验小鼠几乎无急性毒性作用。
-
山核桃叶不同萃取物及DHMC对大鼠胸主动脉条收缩功能的影响
目的:研究山核桃叶95％醇提物不同萃取层和黄酮单体2,6'-二羟基-4'-甲氧基查耳酮(DHMC)对大鼠胸主动脉条收缩功能的影响并探讨DHMC的作用机理.方法:采用离体血管环灌流装置,观察不同受试药物对大鼠胸主动脉条收功能的影响判断其舒张血管的作用.结果:山核桃叶各萃取层对去甲肾上腺素(NE) 100 nmol/L预收缩的大鼠离体胸主动脉条的影响作用各不相同:水层和正丁醇层基本无作用,石油醚和氯仿层具有一定舒张动脉条作用且氯仿层作用较强,而乙酸乙酯层具有加强血管收缩作用;DHMC对NE和KCl预收缩的动脉条都有明显的舒张血管作用.结论:山核桃叶中同时具有收缩和舒张血管的化学成分,其中山核桃叶中含量较高的黄酮类化合物DHMC舒张血管效应明显,其作用机制可能与抑制细胞外钙内流及抑制细胞内储存钙的释放有关.
-
山核桃叶中重金属的含量测定分析
采用紫外分光光度法测定了山核桃叶中重金属的含量,分析波长为299 nm.结果表明,山核桃叶中重金属含量为17.264 μg/g,线性范围1～20 μg,平均加样回收率为99.87%.为进一步开发利用浙江山核桃叶资源提供了科学依据.
-
山核桃叶总黄酮对小鼠抗心肌缺血及心肌细胞缺氧损伤保护作用研究
目的 探究山核桃叶总黄酮对小鼠心肌缺血及心肌细胞(H9c2)缺氧损伤的保护作用及机制.方法 1.建立皮下注射盐酸异丙肾上腺素造成小鼠急性心肌缺血模型,心脏切片HE染色,并测定小鼠血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量.2.建立心肌细胞过氧化氢缺氧损伤模型,观察细胞形态,测定细胞存活率并检测细胞培养液中CK、SOD、MDA含量.结果 与模型组相比,山核桃叶总黄酮高中低剂量组的心肌组织完整,炎症因子较少,血清中CK、LDH、MDA的活性显著降低,SOD活性显著升高;山核桃叶总黄酮各剂量组均能显著提高过氧化氢损伤心肌细胞的存活率,抑制LDH的释放,减少MDA的生成,提高SOD活性.结论 山核桃叶总黄酮对小鼠心肌缺血及心肌细胞缺氧损伤具有保护作用.
-
高效液相色谱法测定山核桃叶中5个黄酮苷元含量
目的:采用反相高效液相色谱法同时测定山核桃叶中汉黄芩素、白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素的含量.方法:采用戴安Ultimate 3000系统,使用戴安Acclaim 120 C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.1％乙酸水溶液(70∶30)为流动相,流速1.0 mL· min-1,柱温为30℃,检测器为戴安Ultimate 3000 DAD,以对应化合物大吸收波长(汉黄芩素272nm、白杨素262 nm、小豆蔻明342 nm、球松素查尔酮342 nm、松属素284 nm)为检测波长,同时对山核桃叶中5个黄酮苷元进行含量测定.结果:在上述条件下,汉黄芩素、白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素浓度分别在1.27 ～25.3、2.56 ～51.2、1.29 ～25.6、5.01 ～100.2和5.06～101.2 μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为98.83％、99.27％、101.1％、98.70％和99.54％;测得山核桃叶中上述的5个化合物平均含量(n=3)分别为0.0183％、0.1142％、0.0618％、0.7934％和0.3368％.结论:本法同时测定山核桃叶中汉黄芩素、白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素5个黄酮苷元,为评价和监控山核桃叶质量及其深入研究与开发奠定了良好基础.
