首页 > 文献资料
-
星点设计-效应面法优化玄参提取工艺
目的:优选玄参中哈巴苷和哈巴俄苷的提取工艺.方法:采用星点设计-效应面法,以哈巴苷与哈巴俄苷总提取率为指标,考察提取溶剂、液料比和提取时间对其的影响.结果:18%~32%乙醇,液料比20∶.1~26∶.1,提取30~48min时玄参总提取率高.结论:星点设计-效应面法优化了玄参中哈巴苷与哈巴俄苷的提取工艺,预测性良好且简便可行.
-
HPLC测定增液承气口服液中哈巴苷和哈巴俄苷含量
目的:建立增液承气口服液中哈巴苷和哈巴俄苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Eclipse XDB C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.03％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm,柱温30℃,流速1.0 mL? min-1.结果:哈巴苷和哈巴俄苷进样量分别在0.257 ～1.284 μg(r=0.999 8),0.092 ～0.460 μg(r=1.000 0)时,与峰面积值具有良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.74％( RSD 0.58％),97.15％ (RSD 1.02％).结论:样品处理简便、结果准确、重复性好,可用于增液承气口服液内在质量的控制方法.
-
四妙勇安汤中哈巴苷提取率的拆方分析
目的:考察四妙勇安汤不同拆方中哈巴苷的提取率变化,探讨其配伍规律.方法:将四妙勇安汤拆方分为8组,采用HPLC测定哈巴苷含量,色谱条件为SunFireTMC18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相0.1％磷酸水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长250 nm,柱温35℃,分析哈巴苷的提取率变化.结果:哈巴苷回归方程Y=1.22 ×106X+3 218.75(r =0.999 8),线性范围0.065 3 ～0.457μg,平均回收率96.81％ (RSD 1.83％)；哈巴苷提取率顺序为全方＞玄参＞拆方.结论:四妙勇安汤不同拆方均使哈巴苷的提取率降低,显示出全方合煎的优势,哈巴苷可能是四妙勇安汤发挥药效的有效组分之一.
-
RP-HPLC法同时测定筋骨草药材中哈巴苷和乙酰哈巴苷含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定筋骨草药材中哈巴苷和乙酰哈巴苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,Kromasil C18色谱柱(4.6 mm x 250 mm,5μm);流动相A-乙腈,B-水,梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1,检测波长202 nm.结果:哈巴苷和乙酰哈巴苷在0.44～4.40μg(r=O.999 4),0.1～10μg(r=0.999 8)范围内线性关系良好,加样回收率哈巴苷为100.93%,乙酰哈巴苷为99.81%,RSD值分别为1.93%,1.62%.结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为该药材的质量控制方法.
-
哈巴俄苷在大鼠胃肠道内容物中的稳定性及其入血成分分析
目的:研究哈巴俄苷在生物样品中的稳定性及其大鼠灌胃后的入血成分.方法:利用HPLC测定哈巴俄苷的含量,流动相0.03％磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长210 nm,计算其在各样品中的剩余率,研究哈巴俄苷在人工胃液、人工肠液、大鼠胃肠内容物及相应pH溶液中的稳定性;利用LC-MS检测大鼠灌胃给药后的血液样品,对哈巴俄苷的入血成分进行定性研究.结果:哈巴俄苷在人工肠液、大鼠小肠内容物、大鼠大肠内容物中较稳定,降解率＜10％;在稀酸液、人工胃液、大鼠胃内容物中哈巴俄苷可发生降解,但降解率＜15％;大鼠灌胃给予哈巴俄苷后的血液样品中检测到了哈巴俄苷、哈巴苷、肉桂酸.结论:哈巴俄苷在人工胃肠液、大鼠胃肠道内容物及相应pH溶液中较稳定,少部分在酸性环境可分解成肉桂酸及哈巴苷苷元的脱水产物;哈巴俄苷大鼠灌胃给药后主要以原型入血,在体内可代谢为肉桂酸及哈巴苷.
-
高效液相色谱-紫外双波长法同时测定玄参配方颗粒中3种主要成分的含量
目的：建立高效液相色谱-紫外双波长法同时测定玄参配方颗粒中3种主要成分哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸含量的方法。方法采用Ultimate AQ-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为1%冰醋酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长前13 min为210 nm,13 min后为278 nm,柱温30℃。结果哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸的线性范围分别为0.06654～0.6654μg(r＝1.0000)、0.02423～0.2423μg (r＝0.9999)、0.10028～1.0028μg(r＝0.9999),平均加样回收率(n＝6)分别为99.80%±1.22%、100.31%±1.30%、100.22%±1.24%。结论本法简单、灵敏度高、重复性好、准确可靠,可为玄参配方颗粒的质量控制以及标准研究提供参考依据。
关键词： 玄参配方颗粒 哈巴苷 哈巴俄苷 肉桂酸 高效液相色谱-紫外双波长法 -
HPLC-ELSD同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量
目的：建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量的方法,并对不同产地和批次的筋骨草药材进行测定。方法采用Dikma C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)；流动相A为水,B为乙腈,梯度洗脱(0～6 min,5%B；6～11 min,5%～15%B；11～17 min,15%B)；洗脱流速1 mL/min；柱温30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度103℃,以压缩空气为雾化气,气体流速1.6 L/min。结果乙酰哈巴苷在0.017～17.32μg、哈巴苷在0.003～1.62μg范围内呈良好线性关系,精密度和准确性良好。福建6个批号样品的乙酰哈巴苷和哈巴苷含量较高。结论乙酰哈巴苷和哈巴苷可作为监测筋骨草药材质量的指标性成分。
-
筋骨草提取物有效成分在beagle犬体内药代动力学研究
乙酰哈巴苷和哈巴苷是筋骨草提取物中含量高的2种有效成分.该文建立了LC-MS/MS法,对beagle犬口服筋骨草提取物后乙酰哈巴苷和哈巴苷的药代动力学进行研究.健康雌性Beagle犬口服不同剂量的筋骨草提取物,对不同时间点的乙酰哈巴苷和哈巴苷血药浓度进行测定,采用winonlin 6.3软件以非房室模型进行拟合.色谱条件:安捷伦ZORBAX XDB-C18柱(2.1 mm×50mm,3.5 μm)；柱温30℃；流动相(A为0.1％甲酸水溶液；B为乙腈)为0～2 min 5％ B;2.1 ～5min 95％ B;5.1～10 min 5％B.流速0.3 mL· min-1.质谱条件:电喷雾离子源；正离子模式；选择离子分别为乙酰哈巴苷(m/z 429.2→369.2)、哈巴苷(m/z 387.2→207.2)和肉桂酸(m/z149.2→103.1).干燥气流速10 L.min-1；干燥气温度300℃；毛细管电压4000V.结果表明Beagle犬口服筋骨草提取物后乙酰哈巴苷和哈巴苷存在剂量依赖性,乙酰哈巴苷和哈巴苷的达峰时间分别为1.7,1.57 h左右,远大于大鼠口服筋骨草提取物后的乙酰哈巴苷和哈巴苷的达峰时间,这可能是由于种属差异造成的.
-
HPLC同时测定玄参中5种成分的含量
目的:建立同时测定玄参药材中哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C含量的高效液相色谱方法.方法:采用Agilent SB-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.03%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1 mL·min-1;检测波长210,280,330 mm;柱温30℃.结果:哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的线性范围分别为50～400,1～40,1～20,0.5～4.5,1～60 mg·L-1;哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的回收率分别为101%(RSD 0.62%),102%(RSD 0.32%),98.8%(RSD 0.48%),99.9%(RSD 1.4%),99.2%(RSD 1.1%).结论:该方法简便快速,分离效果好,灵敏度高,重现性好,可为全面控制玄参质量提供参考.
-
HPLC梯度洗脱法同时测定金嗓散结胶囊中6种主要成分的含量
目的:建立同时测定金嗓散结胶囊中6种主要成分的HPLC梯度洗脱方法.方法:选用Venusil MP C18色谱柱;流动相:乙腈(A)和0.03%磷酸溶液(B),梯度洗脱:0~9 min 15.0%A,9~16 min 15.0%→21.0%A,16~22 min 21.0%→36.0%A,22~30 min 36.0%→55.0%A,30~37 min 55.0%→75.0%A,37~45 min 75.0%→15.0%A;流速:0.8 mL·min-1;柱温:30℃;进样量:10μL;检测波长:210 nm(苦杏仁苷、哈巴苷)、280 nm(安格洛苷C、哈巴俄苷)和208 nm(24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B).结果:苦杏仁苷、哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B分别在一定的线性范围内线性关系良好(r≥0.9992);平均回收率96.77%~100.05%,RSD值0.60%~1.55%;精密度和重复性良好;室温下金嗓散结胶囊供试品溶液在12 h内稳定.结论:该方法操作简便,结果准确,可用于金嗓散结胶囊中6种主要成分含量的同时测定.
-
夏至草的化学成分研究
目的 研究夏至草(Lagopsis supina)全草的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC等色谱方法对夏至草化学成分进行分离和纯化,结合其理化性质及MS、NMR等谱学数据鉴定化合物的结构.结果 从夏至草提取物正己烷、二氯甲烷、水萃取部位分离并鉴定了13个化合物,分别是叶绿醇(1)、胡萝卜苷(2)、8-O-乙酰哈巴苷(3)、antirrinoside(4)、筋骨草苷(5)、益母草苷A(6)、哈巴苷(7)、1-O-咖啡酰基-β-D-吡喃葡萄糖(8)、1-O-对香豆酰基-βD-葡萄糖(9)、2-hydroxy-5-(2-hydroxyethyl) phenyl-1-O-β-D-glucopyranoside(10)、methyl 2-O-β-D-glucopyranosylbenzoate(11)、腺苷(12)和蔗糖(13).结论 化合物1,3 ～13为首次从夏至草属植物中分离得到.
-
高效毛细管电泳测定杜仲中桃叶珊瑚苷等5种指标成分的含量
目的 建立高效毛细管电泳法(HPCE)同时测定杜仲中桃叶珊瑚苷、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、哈巴苷和绿原酸含量的方法.方法 以60 mmol·L-1硼砂-20 mmol·L-1磷酸二氢钠-10％甲醇(pH 10.0)为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm×64.5 cm,有效长度56 cm)为分离通道,分离电压为20 kV,检测波长为210 nm,毛细管温度为25℃,压力进样为5 kPa×6 s.结果 5种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r＞0.9973)；加样回收率为96.63％ ～ 103.73％,结果满意.结论 该方法简单、准确,重复性较好,可用于杜仲药材或饮片的质量评价和控制.
-
哈巴苷对急性脑缺血小鼠神经保护作用及线粒体保护机制的研究
目的 探讨哈巴苷对急性脑缺血小鼠的神经保护作用及线粒体保护机制.方法 采用脑中动脉阻断复制急性脑缺血模型,将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组,哈巴苷(5、10、15 mg·kg-1)组;造模后立即腹腔注射给药,考察各组小鼠神经功能评分、脑含水量、脑指数、脑缺血体积及大脑组织结构病理变化;测定脑中动脉阻断小鼠大脑缺血区细胞线粒体内Ca2+-Mg2+-ATPase的活性及缺血区caspase-3蛋白表达水平;透射电镜(TEM)下观察脑中动脉阻断小鼠大脑缺血区细胞线粒体超微结构变化.结果 与模型组比较,哈巴苷各剂量组,均能不同程度降低脑中动脉阻断小鼠神经功能评分、脑含水量、脑指数及脑缺血体积(P＜0.05,P＜0.01);哈巴苷10 mg·kg-1能明显增强Ca2 +-Mg2+-ATPase的活性(P＜0.01),明显下调脑缺血区caspase-3蛋白的表达(P＜0.01);哈巴苷各剂量能不同程度改善脑中动脉阻断小鼠大脑缺血区皮层及海马齿状回病理结构及线粒体超微结构变化,减少线粒体水肿.结论 哈巴苷对急性脑缺血小鼠具有明显的保护作用,其作用机制与保护线粒体损伤、下调细胞凋亡蛋白途径有关.
-
HPLC法测定养阴降糖胶囊中哈巴苷和哈巴俄苷的含量
目的：建立同时测定养阴降糖胶囊中哈巴苷和哈巴俄苷含量的方法。方法：色谱柱采用C18柱（4.6 mm×100 mm，5μm）；流动相为乙腈-0.03％磷酸，梯度洗脱；检测波长为210 nm；流速为1.0 ml/min。结果：哈巴苷、哈巴俄苷进样量分别在19.240～384.800 ng（r＝1.0000）、17.568～351.360 ng（r＝1.0000）范围内与峰面积线性关系良好，平均回收率分别为（98.33±1.85）％（RSD＝1.88％）、（97.43±1.13）％（RSD＝1.37％）。结论：该方法简单、准确、专属性强，可用于养阴降糖胶囊的质量控制。
-
哈巴苷与哈巴俄苷对阴虚小鼠免疫功能及血浆环化核苷酸的影响
玄参是滋阴凉血的重要药材。但是迄今未见有对其滋阴作用的药理研究。滋阴作用的物质基础尚不明确。临床报道,阴虚患者的免疫功能低下［1 ,2］，血浆cAMP升高、cAMP/cGMP的值升高［3,4］，经养阴治疗可获得明显改善［5］。为探索玄参滋阴作用的物质基础，我们考察玄参主要化学成分哈巴苷、哈巴俄苷对阴虚小鼠免疫功能以及血浆环化核苷酸的影响。
-
UPLC-MS/MS法同时测定玄麦甘桔颗粒中8种有效成分
目的 建立同时测定玄麦甘桔颗粒(玄参、麦冬、甘草、桔梗)中8种有效成分(哈巴苷、甘草苷、哈巴俄苷、桔梗皂苷D、甘草酸铵、麦冬皂苷D、麦冬黄烷酮A和麦冬黄烷酮B)的方法,并对市售不同厂家生产玄麦柑桔颗粒中上述8种有效成分进行定量分析.方法 采用超高效液色谱相串联质谱(UPLC-MS/MS)法,Phenomenex Kenetix C18柱(50 mm×2.1mm,5μm),流动相为乙腈和含0.1％甲酸的水溶液梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min;质谱采用正负离子同时监测,多反应监测模式扫描,进样量5μL.结果 玄麦柑桔颗粒中哈巴苷、甘草苷、哈巴俄苷、桔梗皂苷D、甘草酸铵、麦冬皂苷D、麦冬黄烷酮A和麦冬黄烷酮B分别在9～2 250、8～2 000、3.4～850、96～24 000、12.4～3 100、3.6～1 900、1.7～425、1.5～375 ng/mL内线性关系良好,加样回收率为97.2％～102.8％,RSD小于2.7％.8种成分在8批样品中的质量分数依次为哈巴苷32.8～107.6 μg/g,甘草苷54.8～178.0 μg/g,哈巴俄苷14.6～70.7 μg/g,桔梗皂苷D 31.2～280.0 μg/g,甘草酸铵106.4～287.9μg/g,麦冬皂苷D 0.1～0.6 μg/g,麦冬黄烷酮A 0.01～0.07 μg/g和麦冬黄烷酮B 0.03～0.17 μg/g.结论 建立的方法简单、高效、准确可靠,可用于同时测定玄麦甘桔颗粒中8种成分,为该制剂建立更全面的质量控制方法提供依据.
-
哈巴苷及哈巴俄苷对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用
目的 探讨哈巴苷及哈巴俄苷对过氧化氢(H2O2)损伤人血管内皮细胞的保护作用及其机制.方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECS),将生长良好的3代-5代细胞用于实验.实验分四组:对照组、H2O2组、哈巴苷干预组及哈巴俄苷干预组,光镜观察细胞形态.用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测细胞活力;取细胞上清液,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)含量.结果 哈巴苷及哈巴俄苷干预均使H2O2损伤的HUVECs形态趋于正常,活力增强,细胞膜损伤减轻,减少细胞LDH及MDA产生.结论 哈巴苷及哈巴俄苷能对抗H2O2引起的损伤,保护血管内皮细胞.
关键词： 哈巴苷 哈巴俄苷 过氧化氢(H2O2) 损伤 人脐静脉血管内皮细胞 -
哈巴苷制备工艺及相关研究
目的：建立环烯醚萜类成分哈巴苷的制备工艺，并对其进行结构确证、定值、均匀性及稳定性研究。方法：采用 L9（34）正交实验及不同大孔吸附树脂的筛选，硅胶柱色谱，反相柱色谱分离纯化完成哈巴苷提取、富集、纯化工艺研究。采用 UV、MS、NMR等技术手段进行结构鉴定，参照药典方法，利用 TLC法选择不同极性展开剂，不同显色系统，对哈巴苷的纯度进行考察。并利用 HPLC 法（归一化法）对哈巴苷进行定值研究。采用HPLC法，根据 F检验法的原理对哈巴苷均匀性进行考察。对哈巴苷在不同温度、湿度及不同溶剂条件下的稳定性进行考察。结果：哈巴苷制备工艺合理、稳定，可用于哈巴苷的批量制备。利用 HPLC法（归一化法）对哈巴苷进行定值研究，测得哈巴苷平均纯度为98％以上。制备的哈巴苷对照品均匀性良好。温度、湿度对哈巴苷的稳定性均有影响，且温度对哈巴苷的稳定性起了主要影响作用，湿度影响次之。结论：哈巴苷制备工艺及相关研究为玄参及含有玄参的中成药的质量控制提供了条件。
-
HPLC波长切换法同时测定复方青果颗粒中金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷、哈巴俄苷的含量
目的:建立HPLC波长切换法同时测定复方青果颗粒中的金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷和哈巴俄苷含量.方法:采用依利特C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.03％磷酸溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,波长切换法检测(0～21 min,285 nm,金丝桃苷和柚皮苷;21 ～45 min,210 nm,哈巴苷和哈巴俄苷),进样量为10 μL.结果:金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷和哈巴俄苷4个成分的线性范围分别为4.72 ～94.40 mg·L-1(r=0.9993)、7.18 ～143.60 mg· L-1(r=0.9998)、5.96～119.20 mg· L-1(r =0.9996)、4.45～89.00 mg·L-(r=0.9994);平均加样回收率及相应的RSD分别为98.96％(0.97％),99.08％(1.31％),97.77％(1.58％),99.41％(1.09％).结论:本文建立的HPLC波长切换法同时测定复方青果颗粒中的金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷和哈巴俄苷含量,样品处理方法简便,专属性强,结果准确,可作为复方青果颗粒全面可靠的质量控制方法.
-
HPLC法同时测定玄麦甘桔颗粒中6种成分
目的 建立HPLC法同时测定玄麦甘桔颗粒(玄参、麦冬、甘草、桔梗)中6种成分的含有量.方法 该药物80％甲醇提取液的分析采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1％磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长210、250、278 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃.结果 哈巴苷、芹糖甘草苷、甘草苷、哈巴俄苷、肉桂酸、甘草酸分别在2.177 ～ 43.539 μg/mL(r=0.999 6)、1.713 ～ 34.261 μg/mL(r=0.999 5)、1.946 ～38.916 μg/mL(r=0.999 6)、2.070 ～ 41.395 μg/mL(r=0.999 7)、2.06 ～41.2 μg/mL (r=0.999 6)、3.623～72.454 μg/mL(r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为96.08％(2.1％)、95.55％(2.5％)、95.04％(2.6％)、94.86％(2.7％)、95.70％(1.9％)、95.47％(1.9％).结论 该方法简便准确,可用于玄麦甘桔颗粒的质量控制.
