二香定痛散全方及拆方的急性毒性验/甘氨双唑钠对SD大鼠长期毒性试验/恒河猴膝关节给药rAAV2/hTNFR:Fc毒性研究

小建中汤及其拆方对芍药苷提取率的影响研究

目的：研究小建中汤及其拆方对芍药苷含量的影响。方法：采用Diamonsil RP-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-水为流动相，流速1.0 mL·min-1，检测波长230 nm。结果：小建中汤拆方前后芍药苷的含量有明显变化，其中去甘草组、去桂枝组、去饴糖组与全方组比较均有显著性差异（P<0.05）；去生姜组、去大枣组与全方组比较无显著性差异（P>0.05）。结论：甘草和桂枝有助于白芍中芍药苷的溶出；大枣、生姜对白芍中芍药苷的溶出影响不大；饴糖可能会以小团块形式包裹芍药苷，使实验中芍药苷的萃取效率降低。

酸甘生津方及其拆方对干燥综合征模型小鼠颌下腺BAFF的影响

目的 观察酸甘生津方及其拆方对干燥综合征(SS)模型小鼠颌下腺组织的病理表现及免疫组化中B细胞活化因子(BAFF)的影响.方法 将60只BALB/C小鼠随机分为全方组,养阴、活血、解毒3个拆方组及空白组,模型组共六组.除空白组外,其余五组小鼠采用同种小鼠颌下腺接种方法造模,造模2周后用免疫组化法观察各组小鼠颌下腺BAFF含量的变化,分析比较各组间表达差异.结果 组织切片总阳性率:全方组与活血组相等,与养阴组和解毒组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);SS模型小鼠颌下腺组织BAFF表达水平:各给药组均低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01).其中全方组、活血组及养阴组的BAFF表达水平均低于解毒组,差异有统计学意义(P＜0.01),但此三组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 酸甘生津方及其拆方对模型组小鼠颌下腺BAFF过度分泌有较好的抑制作用,可能通过调控BAFF表达来抑制B细胞异常活化.

补肾益髓方及其拆方对自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中BDNF/TrkB的影响

目的:观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui,BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen,BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue,HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)小鼠脑和脊髓中脑源性神经营养因子(Brain-derived Neurotrophic Factor,BDNF)与受体TrkB的影响.方法:将EAE造模小鼠于当天和第7天背部皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein,MOG)35-55抗原,并在免疫当天和第2天后腹腔注射百日咳毒素(Pertussis toxin,PTX).每日对小鼠进行不同药物的灌胃,并于造模第20和40天分别取脑和脊髓,采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)与Western Blot法检测BDNF和TrkB的表达.结果:BSYS及其拆方BS方与HTHX方均可明显上调EAE小鼠脑和脊髓BDNF和TrkB mRNA与蛋白的表达,与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).BSYS方作用优于其BS与HTHX方,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论:BSYS及其拆方促进轴突修复的作用可能与增强BD-NF/TrkB表达有关,BSYS全方更有显著趋势.

小柴胡汤拆方对慢性束缚抑郁模型大鼠脑组织神经递质的影响

目的:观察小柴胡汤及其各药对对抑郁模型大鼠脑组织单胺类神经递质的影响,探讨小柴胡汤及其各药配伍抗抑郁作用机制.方法:采用慢性束缚应激方法建立大鼠抑郁症模型,观察小柴胡汤对慢性应激抑郁模型大鼠的行为学改变,高效液相色谱法测定大鼠脑内单胺类神经递质的含量,评定小柴胡汤及各药对对抑郁动物模型的影响.结果:模型组大鼠脑内单胺类神经递质含量与正常组差异有统计学意义;全方组大鼠海马5-HT、NE、5-HIAA(5-HT的降解物)的含量明显升高;姜夏组、参草组大鼠海马NE含量显著升高;全方组、柴芩组、参草组大鼠海马5-HT含量显著提高;全方组、柴芩组、姜夏组大鼠海马5-HIAA含量极显著增高.结论:小柴胡汤治疗抑郁症有良好的疗效,各药对作用于模型大鼠脑组织神经递质的靶点有一定的偏向性.柴胡与黄芩配伍主要通过提高大鼠海马5-HT含量而发挥其抗抑郁作用;生姜与半夏配伍能显著提高大鼠海马NE含量,二者配伍虽然对抑郁大鼠海马5-HT的改变影响不显著,但能显著增加5-HT的降解物5-HIAA的含量;人参、甘草、大枣能显著提高抑郁大鼠脑内5-HT和NE含量.

乌梅丸治疗糖尿病的拆方研究

目的:以"消渴从肝论治"立论,以乌梅丸作为治疗糖尿病的基础方,从实验研究力面,探讨乌梅丸的组方规律及其在糖尿病治疗中的作用和机制.方法:取SD大鼠腹腔注射四氧嘧啶,建立类Ⅰ型糖尿病大鼠模型,然后随机分乌梅丸全方组、酸味组、苦味组、甘味组、辛味组和消渴丸组、模型组,并设空白对照组,给药2周后摘眼球取血,检测血糖、血胰岛素及血清甘油三脂和总胆固醇,并剖取胰腺组织制备病理切片以观察药物对胰岛的影响.结果:各拆方组中,苦昧组血糖值降低为明显,辛味组在一般状况的改善和血清甘油三脂和总胆固醇的降低作用方面效果为明显.而在降血糖、降血脂、改善一般状况的综合作用上,全方组优于其它各拆方组,效果佳.结论:①乌梅丸具有降血糖作用,其作用机理可能是促进胰岛β-细胞再生和功能恢复、刺激胰岛β-细胞分泌胰岛素、增加外周组织对葡萄糖的利用等多方面的综合作用而实现的.②乌梅丸对于糖尿病大鼠具有良好的改善一般状况的作用.③乌梅丸方各组分中,苦味的黄连、黄柏具有较好的降血糖作用,辛味的附子、桂枝、细辛、川椒等具有较好的降血脂和改善一般情况的作用.

益肾降浊化瘀方及其拆方对肾间质纤维化大鼠TNF-α及IL-8表达的影响

目的:观察益肾降浊化瘀方及其拆方对腺嘌呤致肾间质纤维化模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,探讨益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化的作用机制.方法:将SPF级雄性SD大鼠70只分正常组,模型组,尿毒清组,全方组,拆方1组,拆方2组,拆方3组,除正常组比较,用腺嘌呤ig法制作肾间质纤维化模型.正常组,模型组予生理盐水(10 mL·kg-1·d-1),尿毒清组(2.5 g·kg-1·d-1),全方组(20.2 g·kg-1·d1),拆方1,2,3组(11,8.2,7.9 g·kg-1·d-1).给药4周后,酶联免疫吸附法(Elisa法)检测血清TNF-α,IL-8含量,免疫组织化学法检测肾组织中TNF-α,IL-8蛋白水平.结果:与正常组比较,模型组TNF-α和IL-8在血清和肾组织中含量明显升高(P＜0.05);与模型组比较,全方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组血清和肾组织TNF-α,IL-8含量明显降低(P＜0.05),其中全方组肾组织TNF-α,IL-8蛋白表达和血清TNF-α,IL-8含量明显低于各拆方组(P＜0.05).结论:益肾降浊化瘀方全方组及其拆方1组、拆方2组、拆方3组均能下调TNF-α,IL-8的表达,其中以益肾降浊化瘀方全方组作用显著.

三七方的拆方研究

目的:探讨三七方组方的合理性,分析方中各药味对全方镇静催眠作用的影响.方法:本研究在中医理论指导下采用撤药拆方法进行拆方研究,将小鼠随机分为空白对照组、全方组(0.767 g·kg-1)、去酸枣仁组(0.517 g·kg-1)、去鸡血藤组(0.433 g·kg-1)、去三七组(0.683 g·kg-1)和去小蓟组(0.667 g·kg-1).各组连续灌胃给药1id,空白对照组予同容积的蒸馏水,第11天进行行为学测试,自主活动和与戊巴比妥钠的协同作用.结果:与空白对照组比较,全方组和去鸡血藤组均能显著降低小鼠自主活动次数(P＜0.05)；全方组能显著增加小鼠的入睡率(P＜0.05)；去鸡血藤组和去小蓟组有增加小鼠入睡率的趋势；全方组(P＜0.05)和去三七组(P＜0.01)均能明显缩短小鼠的入睡时间,去小蓟组有缩短小鼠入睡时间的趋势；全方组、去小蓟组和去三七组均能显著增加小鼠的睡眠时间(P＜0.05).结论:三七方具有确切的镇静催眠作用,组方合理.酸枣仁(制)、鸡血藤、三七和小蓟均影响着全方镇静催眠作用的发挥,是三七方不可或缺的组成部分.

美乐涂膜剂药效学研究

目的:研究美乐涂膜剂及其拆方促进皮肤愈合的作用,为临床应用提供依据.方法:高温水烫伤复制深Ⅱ度烫伤模型,观察美乐涂膜剂全方及拆方对皮肤愈合的影响；二甲苯致炎复制耳肿胀模型,观察美乐涂膜剂对耳肿胀的影响；采用大给药量法,观察急性毒性.采用多次给药法,观察皮肤刺激性.结果:美乐涂膜剂全方9.92,4.96 g·kg-1、中药组分9.88,4.94 g·kg-1组和化学药组分0.06 g·kg-1组能明显使烫伤后创面愈合率增加,全方和各拆方均能缩短烫伤皮肤愈合时间；全方5.6,2.8g·kg-1组能明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀；未见急性毒性反应；未见皮肤刺激性.结论:美乐涂膜剂具有抗炎、促进皮肤愈合作用,全方较单独中药组分、西药组分疗效稍好,临床可安全用药.

三苦滴丸抗急性心肌缺血拆方研究

目的:通过观察三苦滴丸拆方对急性心肌缺血动物模型的影响,寻找其组方三七和苦碟子的佳配比剂量.方法:将Wistar大鼠随机分为模型组、三苦滴丸2∶8(三七∶苦碟子)高剂量组、3∶7高剂量组、4∶6高剂量组、2∶8中剂量组、3∶7中剂量组、4∶6中剂量组和2∶8组低剂量、3∶7组低剂量、4∶6低剂量组给药组,连续ig给药7d,ip异丙肾上腺素20 mg· kg-1连续注射3d诱导急性心肌缺血动物模型,观察各组动物心电图S-T段变化(mV)、血清中心肌酶及心肌组织中氧自由基相关指标的变化.结果:三苦滴丸各比例组均可降低模型动物心电图ST段变化(P ＜0.05,P＜0.01,P＜0.001)和血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量(P＜0.05,P＜0.01),提高心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,减少丙二醛(MDA)含量(P＜0.05,P＜0.01),但三苦滴丸3∶7组与4∶6组各剂量其作用效果及发挥时效都不及三苦滴丸2∶8组各剂量.结论:三苦滴丸中三七与苦碟子佳比例确定为2∶8.

定喘汤及其拆方化痰平喘抗炎作用实验研究

目的:证实定喘汤及其分别去掉麻黄、白果后化痰、平喘、抗炎药理作用;方法:分别采用气管段酚红法、喷雾致喘法、炎性肿胀及TB2、6-K-PGF1aα定量的方法;结果及结论:定喘汤具有化痰、平喘、抗炎作用,能上调6-K-PGF1a,下调TXB2,分别去掉麻黄、白果后作用均有不同程度下降,二者共为君药是合理的.

乌梅丸及其拆方的镇痛作用

目的:观察乌梅丸及其拆方的镇痛作用.方法:实验动物分为对照组、模型组、全方组、寒热并用组、温热组、寒凉组、补益组、收敛组,各组给药依照拆方原则分别给予乌梅丸方13.3 g·kg-1,寒热并用方9.0 g·kg-1,温热方5.33 g·kg-1,苦寒方3.67 g·kg-1,收敛方2.67 g·kg-1,补益方1.67 g·kg-1水煎剂灌胃,空白组、模型组均给予生理盐水10 mL·kg-1.采用热板法和扭体法,观察乌梅丸及其拆方对小鼠的镇痛作用,三硝基苯磺酸/乙醇复制溃疡性结肠炎动物模型,酶联免疫法检测结肠黏膜前列腺素E2(PGE2)含量.结果:与对照组比较,乌梅丸全方组、寒热并用组和温热组药物能有效延长小鼠痛阈,降低小鼠扭体次数,降低溃疡性结肠炎大鼠结肠组织PGE2含量(P＜0.05),且3组间无差异;补益组药物也表现出部分抑制疼痛的作用,但效果要弱于全方组(P＜0.05).结论:乌梅丸方有明显的镇痛作用,温热组药物为其镇痛的主要药物,补益组药物有部分镇痛作用.

肾病合剂拆方对阿霉素肾病大鼠影响的实验研究

肾病合剂对大鼠阿霉素肾病有显著治疗作用.其中,健脾利湿拆方提高血浆蛋白、消除水肿、改善体质的作用明显,疏利少阳拆方减少尿蛋白丢失的作用突出,各拆方间在上述诸方面具协同作用.

小半夏加茯苓汤水提物特征图谱及其止吐药效物质基础的研究

目的:建立小半夏加茯苓汤的特征图谱,探索小半夏加茯苓汤止吐作用的有效物质基础.方法:采用HPLC建立小半夏加茯苓汤的特征图谱.实验分3批,每批取健康家鸽50只,均分为空白对照组、呕吐模型组、小半夏加茯苓汤(拆方、生半夏)高、中、低剂量组(0.6,0.3,0.15 g·kg-1),按分组给药,对照组和模型组给予同体积蒸馏水,每天1次,连续3d.末次药后1h用硫酸铜制作家鸽呕吐模型,以呕吐潜伏期、呕吐次数、呕吐频率为指标,观察小半夏加茯苓汤(原方)、拆方(生半夏+生姜)、生半夏水提物对模型家鸽的止吐作用.结果:HPLC测定显示小半夏加茯苓汤中姜酚含量较高,以6-姜酚为高,占23个标记特征峰总峰面积的20％左右.原方及拆方对硫酸铜所致家鸽呕吐均有不同程度抑制作用,止呕强度趋势为原方＞拆方＞生半夏.结论:小半夏加茯苓汤及拆方水提物有一定止吐的作用,结合复方中姜酚含量较高的特征图谱,提示姜酚可能是本方药止吐药效的物质基础之一.

萎胃康及其拆方对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜G,D细胞的影响

目的:探讨萎胃康及其拆方治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)的可能机制.方法:70只Wistar大鼠随机抽取12只为正常对照组(正常组),其余58只采用多重刺激6周复制大鼠CAG模型.确定造模成功的50只随机分为5组,即模型组、萎胃康全方组(全方组)、拆方Ⅰ号组(补益组)、拆方Ⅱ号组(祛邪组)、西药维霉素对照组(西药组),分别ig 0.9％生理盐水(l0mL·kg-1)、萎胃康水煎液(8 g·kg-1)、拆方Ⅰ号水煎液(5.5 g·kg-1)、拆方Ⅱ号水煎液(2.5 g·kg-1)和维霉素混悬液(0.3 g·kg-1),1次/d.给药30 d后,观察对大鼠胃黏膜组织形态及胃黏膜促胃液素细胞(G细胞)、人生长抑素细胞(D细胞)的影响.结果:全方组大鼠胃黏膜组织学接近正常组.模型组G,D细胞数分别为(24.46±3.39),(14.66±1.57)个/mm2,较正常组G,D细胞数(63.54±6.73),(38.32±3.87)个/mm2明显降低(P＜0.01).与模型组比较,各用药组大鼠胃黏膜G,D细胞数显著升高(P＜0.01)；与全方组G细胞数(56.66±5.70)个/mm2,D细胞数(34.72±4.01)个/mm2比较,补益组、祛邪组、西药组大鼠胃黏膜G,D细胞数显著降低(P＜ 0.01或P＜0.05).结论:萎胃康能改善和逆转实验性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜萎缩,其机制可能与改善胃肠激素对胃功能的调节作用有关.

连理汤对TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型结肠及外周血中炎症相关因子影响的拆方研究

目的:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察连理汤各拆方药组及其配伍对UC大鼠外周血及结肠组织中细胞因子等含量的影响.方法:将连理汤拆分成补脾益肠药(A因素)、清热燥湿药(B因素)、温中散寒药(C因素),以含和不含该因素为1,2水平,采用正交设计表L8(27)设试验1～7组和UC组,增设柳氮磺吡啶组(SASP)与正常对照组.采用Sprague Dawley大鼠,前9组按TNBS乙醇灌肠法塑造UC模型,试验1～7组分别灌胃相应的拆方浸膏混悬液,剂量依次为1.02,1.47,0.98,1.24,0.29,0.145,0.087 g·kg-1,SASP组灌服柳氮磺吡啶(0.4 g·kg-1),以UC大鼠外周血及结肠组织中细胞因子等含量作为考察指标,观察灌服连理汤拆方14d后各组对其含量的影响.结果:UC组大鼠结肠炎症环氧合酶-2(Cox-2)、白介素-1α(IL-1α)含量较正常对照组有显著升高(P＜0.01),金属蛋白酶类组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)表达也有明显增强.补脾益肠药(A)在抑制结肠Cox-2方面影响显著(P＜0.05);各因素对结肠中IL-1α含量的影响均不显著,但全方效果显著(P＜0.01);补脾益肠药和清热燥湿药配伍(即A×B交互作用)对降低结肠TNF-α含量影响显著(P＜0.05);温中散寒药(C)以及补脾益肠药和温中散寒药配伍(即A×C交互作用)对抑制UC大鼠结肠组织中TIMP-1含量有极显著影响(P＜0.01),清热燥湿药(B)以及清热燥湿药和温中散寒药配伍(即B×C交互作用)对该指标也有显著影响(P＜0.05).UC大鼠血清中IL-1α,TNF-α明显下降,拆方各因素均无显著作用;UC大鼠血清TIMP-1明显升高,温中散寒药(C)对抑制UC模型大鼠外周血中TIMP含量有显著性影响(P＜0.05).结论:补脾益肠药在连理汤的整体疗效中起主导作用,温中散寒药及其与温补药配伍也起重要作用.

逍遥散及其拆方对老年性痴呆模型小鼠学习记忆能力及抗氧化能力的影响

目的:研究逍遥散对D-半乳糖(D-gal)所致老年性痴呆(AD)模型小鼠学习记忆能力及血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、脑组织丙二醛(MDA)含量的影响,探讨逍遥散防治AD的作用及其机制.方法:采用ip D-gal复制AD小鼠模型,同时用逍遥散全方组、疏肝健脾组、疏肝养血组、健脾养血组进行对抗治疗,共42 d.41 d进行学习能力训练,42 d进行记忆能力测试.然后取血及脑组织,测定小鼠血清SOD活性及脑组织MDA含量.结果:全方组、疏肝健脾组、疏肝养血组、健脾养血组均可提高小鼠学习记忆能力,降低潜伏时间,但以全方组为明显;全方组、疏肝健脾组、疏肝养血组、健脾养血组皆可提高血清SOD活性,降低脑组织匀浆MDA含量,但亦以全方组为明显.结论:逍遥散能较好的改善AD模型小鼠行为学指标,其可能与对抗自由基氧化有关.

原子荧光光谱法检测牛黄解毒片及其拆方可溶性砷的含量

探讨牛黄解毒片配伍对有毒中药雄黄是否具有减毒作用及其可能减毒药味.方法　设立牛黄解毒片全方及其不同拆方组,分别用人工胃液或人工肠液处理,然后采用原子荧光光谱法测定并比较不同组可溶性砷的含量.结果　人工胃液或人工肠液处理后,牛黄解毒片全方组可溶性砷含量明显低于单味雄黄组(P＜0.01)；牛黄解毒片全方去甘草、黄芩、大黄组可溶性砷含量明显高于牛黄解毒片全方组(P＜0.01).结论　牛黄解毒片全方配伍对雄黄有减毒作用,并且甘草、黄芩、大黄是减毒的可能药味.

桂枝汤及其拆方对芍药苷溶出量的影响

目的:研究桂枝汤拆方前后芍药苷的含量变化.方法:采用Diamonsil RP-C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5μm),流动相乙腈-水,流速1.0 mL min-1,检测波长230 nm.结果:桂枝汤拆方前后芍药苷含量由高到低的顺序为去大枣组＞去生姜组＞全方组＞去桂枝组＞去甘草组,去甘草组、去桂枝组与全方组比较均有显著性差异；去生姜组和去大枣组与全方组比较无显著性差异(P＞0.05).结论:甘草、桂枝均有助于白芍中芍药苷的溶出,生姜和大枣对白芍中芍药苷的溶出影响不大.

四妙勇安汤中哈巴苷提取率的拆方分析

目的:考察四妙勇安汤不同拆方中哈巴苷的提取率变化,探讨其配伍规律.方法:将四妙勇安汤拆方分为8组,采用HPLC测定哈巴苷含量,色谱条件为SunFireTMC18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相0.1％磷酸水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长250 nm,柱温35℃,分析哈巴苷的提取率变化.结果:哈巴苷回归方程Y=1.22 ×106X+3 218.75(r =0.999 8),线性范围0.065 3 ～0.457μg,平均回收率96.81％ (RSD 1.83％)；哈巴苷提取率顺序为全方＞玄参＞拆方.结论:四妙勇安汤不同拆方均使哈巴苷的提取率降低,显示出全方合煎的优势,哈巴苷可能是四妙勇安汤发挥药效的有效组分之一.