首页 > 文献资料
-
基于代谢组学的茵陈蒿汤及组分配伍对大鼠酒精性肝损伤的保护作用研究
目的:利用代谢组学技术,结合临床生化检测和组织病理学,评价茵陈蒿汤及其组分配伍对长期过量摄入酒精诱导肝损伤的保护作用.方法:对Wistar大鼠进行“白酒—玉米油—吡唑”混合溶液灌胃和饲喂高脂饲料12周制备酒精性肝损伤大鼠模型,茵陈蒿汤及其组分配伍组分别于造模开始每日灌胃给予茵陈蒿汤和6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷、大黄酸配伍组合,12周末测定血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、y-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量,观察肝左叶HE和Masson染色病理组织切片,并利用UPLC-Q/TOF-MS技术采集尿液代谢轮廓数据,提取各组样品中酒精性肝损伤生物标记物信息,分析空白对照组、模型对照组、茵陈蒿汤组及茵陈蒿汤组分配伍组之间大鼠代谢轮廓及生物标记物的变化.结果:茵陈蒿汤及其组分配伍均能显著抑制酒精性肝损伤大鼠血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量的变化,减少肝脏细胞炎性浸润和肝纤维化,并使肝损伤大鼠整体代谢轮廓远离模型对照组而靠近正常对照组,使10个生物标记物趋于正常水平.结论茵陈蒿汤对大鼠酒精性肝损伤具有显著的保护作用,其3个组分6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷和大黄酸的配伍组合能够有效表达茵陈蒿汤的生物效应,是其主要有效组分,为茵陈蒿汤防治酒精性肝损伤疾病的创新药物开发奠定了基础.
-
基于代谢调控通路的京尼平苷干预阳黄证的作用靶标研究
目的:基于代谢调控通路技术对京尼平苷干预阳黄证小鼠进行研究,探究阳黄证的发病机制及京尼平苷对其干预作用的潜在效应靶标.方法:采用化学物质、中药及病理性肝损伤因素建立阳黄证动物模型,通过与临床阳黄证患者尿液的生物标记物相关联,成功建立阳黄证动物模型.在此基础上对生化指标、病理观察进行检测,基于代谢组学技术挖掘京尼平苷干预阳黄证的作用靶标.结果:与空白组相比,模型组小鼠谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、总胆汁酸含量升高,具有显著性差异(P＜0.05).碱性磷酸酶、直接胆红素、丙二醛、谷氨酰转肽酶含量升高,谷胱甘肽过氧化酶、超氧化物歧化酶含量降低;病理结果显示,模型组小鼠肝组织成片状坏死,肝细胞有水肿现象.对模型组小鼠尿液进行基于代谢调控的靶点分析,发现33个尿液生物标记物与阳黄证的发生密切相关.其中,10个生物标记物与临床阳黄证患者生物标记物变化一致,主要涉及酪氨酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、谷胱甘肽代谢、戊糖和葡萄糖醛酸酯代谢、初级胆汁酸代谢等.进一步通过Ingenuity Pathway Analysis组学数据分析平台成功预测京尼平苷干预阳黄证的5个作用靶点,即干扰素调节因子3、鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)、鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)、解偶联蛋白(UCP1)、Maf1调节剂(Maf1 regulator).结论:本研究以中医证候理论为指导,在对阳黄证形成本质考察的基础上,以中药与肝损伤化学诱导剂结合的方法建立阳黄证动物模型,与临床黄疸生物标记物相关联,发现10个生物标记物与阳黄证发生发展密切相关,京尼平苷可有效回调生物标记物,通过代谢调控通路技术分析发现京尼平苷干预阳黄证的5个潜在作用靶标.本研究为阳黄证相关动物模型建立及中药有效成分治疗作用机制研究提供方法和依据.
-
京尼平苷对SD大鼠,Wistar大鼠与ICR小鼠肝毒性的比较研究
目的:比较京尼平苷对不同种系、不同月龄大鼠,小鼠的肝毒性差异.方法:不同月龄的SD,Wistar大鼠,ICR小鼠灌胃给药3 d后,观察动物外观及体重的变化;称肝重量并计算其脏器指数;测定动物血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆红素(TBIL)的含量.结果:大鼠:280 ms/kg的京尼平苷可导致各组的肝重量增加,脏器指数增大,ALT,AST活性增高,TBIL含量增加,与各自空白对照组比较具有显著差异.小鼠:560 mg/kg的京尼平苷未表现出明显肝毒性,1 860mg/kg京尼平苷导致ALT活性增高,TBIL含量增加.结论:京尼平苷对不同月龄、不同系(SD和Wistarg系)大鼠在肝毒性上未表现出显著差异;小鼠未表现出明显肝毒性.
-
复方通络救脑促进神经细胞突触可塑性
目的:检测中药复方通络救脑及其主要成分三七总皂苷和京尼平苷对神经突触可塑性有无促进作用.方法:实验分为对照组和给药组,采取细胞活力检测法,即CCK-8检测法检测药物对稳转的过表达的瑞典型突变淀粉前体蛋白(swAPP)突变的人神经母细胞瘤(SY5Y)细胞的增殖曲线的影响；通过Western blotting检测药物对于神经细胞突触相关蛋白树突棘肌动蛋白结合蛋白(drebrin)和突触后密度蛋白-95(PSD-95)的表达的变化；用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞长出神经突起后,检测药物对于细胞突起的作用.结果:复方通络救脑及其主要组成成分京尼平苷和三七总皂苷不影响过表达的瑞典型突变淀粉样前体蛋白的神经母细胞瘤(swAPP-SY5Y)的细胞增殖曲线,且复方通络救脑中京尼平苷能够显著增加swAPP-SY5Y细胞drebrin和PSD-95的表达(P＜0.01),显著增加PC12细胞总突起数(P＜0.01)；而三七总皂苷没有相应的作用.结论:复方通络救脑能促进神经细胞的突触可塑性,初步断定起主要作用的成分是京尼平苷而不是三七总皂苷.
-
HPLC同时测定清肺抑火丸中3个苷类成分
目的:建立清肺抑火丸中3个苷类成分的含量标准.方法:采用HPLC,同时以2个检测波长对清肺抑火丸中的黄芩苷、京尼平苷、京尼平龙胆二糖苷进行定量分析.Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm)；流动相甲醇(A)-1％甲酸溶液(B)-乙腈(C)梯度洗脱,检测波长238,278 nm.结果:黄芩苷、京尼平苷、京尼平龙胆二糖苷分别在0.165～1.650,0.106 ～1.060,0.035 ～0.350 μg(r ＞0.999 7)线性关系良好,平均回收率＞96.75％,RSD＜ 2.05％.结论:该方法同时进行黄芩苷、京尼平苷、京尼平龙胆二糖苷的定量分析,可作为清肺抑火丸的质量控制标准.
-
栀子微波炮制过程中指标成分及粉末颜色变化的关联性分析
目的:研究栀子微波炮制过程中的指标成分含量变化及其与粉末颜色变化的相关性,为栀子微波炮制品的质量评价提供科学依据.方法:利用HPLC测定栀子微波炮制过程中京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷,京尼平苷,西红花苷-Ⅰ,西红花苷-Ⅱ和西红花苷-Ⅲ的含量变化,流动相乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱,流速1 mL·min-1,进样量5 μL,柱温30℃,检测波长238,440 nm.利用紫外分光度法于760 nm处测定总鞣质的含量,分析各指标成分含量变化与颜色量化参数L,a,b的相关性.结果:随着微波炮制时间的延长,温度逐渐升高,京尼平苷、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ含量逐渐降低.京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷和西红花苷-Ⅲ在初期略有升高,当温度＞ 200℃后基本处于逐渐降低的趋势;总鞣质含量先随温度升高而逐渐升高,并在5 min时达高值,之后迅速降低.京平尼苷含量与L呈正相关;西红花苷-Ⅰ含量与a,b呈正相关.结论:栀子微波炮制品粉末颜色与成分含量之间具有一定相关性,能够作为微波炮制过程中监测炮制品质量评价的依据.
-
基于表里关联的栀子饮片炮制过程中表观颜色变化与其内在成分含量的相关性分析
目的:研究焦栀子、栀子炭炮制过程中表观颜色与其主要成分环烯醚萜苷类和二萜色素类含量变化的相关性,为规范栀子饮片的炮制工艺提供实验依据.方法:采用电子眼获取栀子炮制过程饮片的色度值,分析栀子不同炒制时间点饮片颜色的变化规律,利用紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷和总二萜色素的含量变化情况,采用Pearson法对多源数据进行相关性分析.结果:栀子炮制过程中L*(明度值),a*(红绿分量值),b*(黄蓝分量值)变化趋势与总环烯醚萜苷含量呈负相关,与总二萜色素含量呈正相关.焦栀子过程饮片L*和总二萜色素含量相关性大;栀子炭过程饮片b*和总二萜色素含量相关性大.结论:颜色和色素类成分可考虑作为栀子炮制过程中的控制和监测指标.
-
栀子不同炒制饮片的红外光谱分析
目的:对栀子不同炒制饮片的红外光谱进行比较分析,建立鉴别栀子不同炒制饮片的方法.方法:采用红外光谱法和二维相关光谱技术,以京尼平苷为参照,比较栀子不同炒制饮片红外图谱,揭示其变化规律.结果:以对照品比对法指认归属了栀子不同炒制饮片的特征指纹峰;生栀子、焦栀子、栀子炭的一维图谱峰形相似;在二阶导数图谱中生栀子特征峰在1 228 cm-1处,焦栀子特征峰在1 235 cm-1处,而栀子炭特征峰在1 241 cm-1处;在二维相关红外光谱的1 300～1 800 cm-1波段,生栀子的强自动峰为1 636 cm-1,焦栀子的强自动峰为1 640 cm-1,栀子炭的强自动峰为1 740 cm-1.结论:红外光谱法结合二维相关光谱技术可用于鉴别栀子不同炒制饮片.
-
栀子不同饮片环烯醚萜苷类成分比较研究
目的:对栀子不同饮片环烯醚萜苷类成分进行比较研究.方法:HPLC同时测定2个主要成分(京尼平龙胆二糖苷,京尼平苷)含量,色谱条件为Kromasil C18柱,流动相乙腈-0.3%甲酸水(12:88),检测波长238 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃.结果:2个成分在测定范围内线性关系较好(r>0.999 4),平均回收率分别为101.8%,99.1%.栀子不同饮片中2种环烯醚萜苷类成分含量有差异.结论:所建立的方法准确、可靠,栀子不同饮片的含量变化呈现一定的规律性.
-
京尼平苷及其代谢物在大鼠体内的药代动力学研究Ⅰ
目的:研究京尼平苷及其肠道代谢物京尼平在大鼠体内的药代动力学过程.方法:灌胃给予280 mg·kg-1的京尼平苷,RP-HPLC测定血浆中京尼平苷及京尼平,应用BAPP统计模拟计算,得出相应的药代动力学参数.结果:主要药动学参数为:京尼平苷和京尼平大血药浓度(Cmax)分别为(3.23±0.37)μg·mL-1,(17.41±5.27)ng·mL-1;半衰期(t1/2)分别为(1.00±0.35)h,(4.86±2.55)h;平均滞留时间(MRT)分别为(2.39±0.18)h,(7.86±3.61)h;曲线下面积(AUCi)(11.23±2.18)h·μg·mL-1,(90.60±13.44)h·ng·mL-1.结论:二者药代动力学均符合一室模型,京尼平苷在血浆中代谢消除较快,t1/2为(1.00±0.35)h;京尼平血浆浓度较低,Cmax为(17.41±5.27)ng·mL-1.
-
京尼平苷对类风湿性关节炎大鼠血清IL-1β和TNF-α的影响
目的:研究京尼平苷对类风湿性关节炎大鼠血清IL-1β和TNF-α的影响,进一步探讨该药物的作用机制.方法:建立Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠类风湿性关节炎模型.观察京尼平苷对实验性大鼠足肿胀的抑制作用;检测血清IL-1β和TNF-α的水平.结果:与模型组比较,京尼平苷可以延缓对侧肢体足肿胀发生的时间,抑制大鼠足肿胀的程度(P＜0.01);用药后,中、高剂量给药组血清IL-1β和TNF-α水平明显低于模型组(P＜0.01).结论:京尼平苷在类风湿性关节炎大鼠中可以下调致炎因子IL-1β和TNF-α的水平,提示这可能与该药抑制实验性类风湿性关节炎病情进展密切相关.
-
京尼平苷对慢性前列腺炎大鼠的治疗作用
目的:探讨京尼平苷对慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)模型大鼠的作用.方法:采用前列腺内注射消痔灵方法复制慢性前列腺炎模型,随机分为模型组、阳性药组(前列康片组,2 g·kg~(-1))及京尼平苷高、中、低剂量组(20,10,5 mg·kg~(-1)).观察给药后各组大鼠前列腺指数、白细胞和卵磷脂小体数量、乳酸脱氢酶5与乳酸脱氢酶1的比值(LDH5/LDH1)以及前列腺病理改变,并对前列腺组织内炎细胞、成纤维细胞、腺体数量和腺腔的面积等形态学变化情况进行分析.结果:京尼平苷高、中剂量组、前列康片组与模型组比较,前列腺指数、白细胞数和LDHS/LDH1均明显下降,而卵磷脂小体数量显著上升(P＜0.01或P＜0.05);京尼平苷高剂量组及前列康片组与模型组相比,间质中炎细胞数、成纤维细胞数均显著降低,腺体数量与腺腔面积明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论:高、中剂量京尼平苷可减轻炎细胞浸润、抑制纤维组织增生和恢复前列腺分泌功能,对大鼠慢性前列腺炎具有较好的治疗作用.
-
中药栀子的研究与开发概述
综述了近10年来中药栀子的研究和综合开发利用情况.栀子黄色素在食品、医药、饲料、化妆品等行业有广泛的应用.栀子蓝色素可与其他红黄品系的色素调和产生一系列蓝绿变化的色素.中药栀子在消化系统中具明显的胆囊收缩作用和排石利胆作用,对重症急性胰腺炎大鼠具明显的降脂质过氧化物作用和增强胰腺炎时机体的免疫能力,具有保护肝脏和抑制肝癌细胞作用以及对胃机能呈抗胆碱性的抑制作用;在心血管系统中具中枢降压作用、防治动脉粥样硬化及抗血栓作用;还具有中枢镇静镇痛解热作用、抗炎和治疗软组织损伤作用等.栀子中京尼平苷制成的新型复方农业增产剂应用前景广阔.
-
京尼平苷调节胰腺β细胞增殖的细胞信号机制研究
目的：考察京尼平苷（ Gen）对胰腺β细胞增殖的影响及其细胞信号转导机制。方法将INS-1细胞（一种胰腺β细胞）用Gen处理一定时间之后，用MTT方法测定活细胞的数量，用BrdU标记的方法分析细胞增殖的情况，Western印迹分析Gen对于细胞增殖相关的Akt和FoxO1磷酸化的影响。结果 Gen处理INS-1细胞可将活细胞数量提高45％（P＜0．01），并且BrdU标记的阳性细胞数量明显增加（P＜0．01）。另外，Gen还能显著上调INS-1细胞中Akt308丝氨酸位点和叉头转录因子 FoxO1的磷酸化（P ＜0．01），而且这种作用可被 PI3K 的抑制剂LY294002阻断。结论 Gen能够促进胰腺β细胞增殖，而且这种作用可能与其激活PI3K激酶途径、增强FoxO1的磷酸化有关。
-
静脉给药热毒宁注射液大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中代谢产物的鉴定
研究热毒宁注射液在大鼠体内的代谢产物.采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电轨道阱串联质谱联用方法(UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS)对大鼠尾静脉注射热毒宁后血浆、胆汁、尿液和粪便进行分析,利用质量亏损过滤(MDF)技术进行京尼平苷、京尼平苷酸、断氧化马钱子苷、绿原酸代谢产物分析鉴定,推测出大鼠体内京尼平苷氧化、脱水、去甲氧基、水解、开环、半胱氨酸结合和苷元葡萄糖醛酸结合等14个代谢产物;京尼平苷酸脱水、开环、双键还原和半胱氨酸结合等9个代谢产物;断氧化马钱子苷水解、去甲氧基、羟基化和乙基化等6个代谢产物;绿原酸脱羧、水解、甲基化、乙酰化、半胱氨酰甘氨酸结合和谷胱甘肽结合等12个代谢产物.为进一步探讨热毒宁注射液体内过程,阐明其功效物质基础提供依据.
-
京尼平苷对关节炎大鼠的镇痛作用及机制
目的:研究京尼平苷对类风湿关节炎大鼠的镇痛作用及其可能的作用机制.方法:通过注射Ⅱ型胶原和弗氏佐剂建立胶原诱导大鼠关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,以机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdraw threshold,MWT)为痛阈指标,观察免疫后d 18～24连续腹腔注射给予京尼平苷对CIA大鼠机械痛觉的过敏作用;行为学测试结束后,取L4～5段脊髓背角组织,采用免疫荧光组织化学及Westren Blot观察脊髓背角星型胶质细胞标记物GFAP水平的变化情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测致炎细胞因子TNF-α,IL-1 β的水平.结果:与模型组相比,京尼平苷(10和100 mg·kg-1)可显著抗CIA大鼠机械痛过敏作用,同时抑制脊髓背角星型胶质细胞标记物GFAP及致炎细胞因子TNF-α,IL-1β的水平.结论:京尼平苷对CIA诱导的类风湿性关节炎大鼠有显著的镇痛作用,该作用与其抑制脊髓背角胶质细胞活化、降低致炎细胞因子水平有关.
-
京尼平苷和西红花酸保肝利胆作用的比较
目的:比较栀子果实中的2个主要有效成分京尼平苷和西红花酸的保肝利胆作用.方法:采用十二指肠给药,观察京尼平苷和西红花酸对大鼠胆汁流量的影响.采用小鼠CCl4,对乙酰氨基酚急性肝损伤模型,比较2种药物对血清丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST)及肝组织中丙二酰二醛(MDA),还原型谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响.结果:京尼平苷50和100mg@kg-1剂量于给药后0.5h均显著增加大鼠胆汁分泌,而西红花酸同样2个剂量于给药后1h对大鼠胆汁分泌却有抑制作用.京尼平苷和西红花酸均可对抗CCl4和对乙酰氨基酚肝损伤引起的MDA升高,GSH含量下降和GSH-Px活力降低.肝组织的病理变化也有明显减轻,但京尼平苷的作用明显强于西红花酸.结论:栀子利胆保肝的有效成分主要为京尼平苷.
-
栀子中4种环烯醚萜苷类成分治疗大鼠血管性痴呆的药效学研究
目的:比较栀子中4种环烯醚萜类成分抗血管性痴呆的活性.方法:血管性痴呆模型大鼠术后3d经口给予京尼平苷、京尼平苷酸、山栀子苷甲酯及京尼平溶液,剂量为15 mg·kg-1,连续给药30d,进行空间探索和定位航行实验等行为学测试和大脑病理切片观察.结果:空间探索和定位航行实验结果显示,京尼平苷、京尼平苷酸、京尼平能改善模型大鼠的学习能力和记忆能力(P ＜0.05或0.01);脑组织病理切片显示,京尼平苷、京尼平苷酸和京尼平组大鼠海马CA1区和大脑皮质内锥体层各脑区的神经元变性情况明显优于模型组大鼠.结论:京尼平、京尼平苷酸和京尼平苷可能具有抗血管性痴呆的作用,山栀子苷甲酯没有抗血管性痴呆的作用.
-
采用正负离子切换模式的LC-ESI-MS/MS法测定大鼠灌胃给药后京尼平苷的血浆浓度
建立了一种快速、专属性强的液相色谱-串联质谱方法(LC-MS/MS)测定中药栀子的主要活性成分-京尼平苷的大鼠血药浓度去评价其临床前药动学特征.京尼平苷血浆样品经沉淀蛋白后,采用Diamonsil(R) C18色谱柱进行分析,采用流动相10 mM醋酸铵-甲醇(20∶80,v/v),流速0.6 mL/min.样品测定采用“Truncated”多反应检测模式,采用正离子m/z411→411测定京尼平苷,采用负离子m/z415→295测定内标葛根素.线性浓度范围为10.0-5000 ng/mL,低定量下限为10.0 ng/mL,样品提取回收率范围为84.8％-90.5％.该确证方法成功应用于大鼠灌胃(给药剂量200 mg/kg)给予京尼平苷后的药动学研究.
-
高效毛细管电泳测定杜仲中桃叶珊瑚苷等5种指标成分的含量
目的 建立高效毛细管电泳法(HPCE)同时测定杜仲中桃叶珊瑚苷、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、哈巴苷和绿原酸含量的方法.方法 以60 mmol·L-1硼砂-20 mmol·L-1磷酸二氢钠-10％甲醇(pH 10.0)为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm×64.5 cm,有效长度56 cm)为分离通道,分离电压为20 kV,检测波长为210 nm,毛细管温度为25℃,压力进样为5 kPa×6 s.结果 5种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r＞0.9973)；加样回收率为96.63％ ～ 103.73％,结果满意.结论 该方法简单、准确,重复性较好,可用于杜仲药材或饮片的质量评价和控制.
