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乳腺癌耐药蛋白在急性髓性白血病中的表达和临床意义
目的 探讨急性髓性白血病(AML)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达与临床耐药的关系.方法 应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以MCF7乳腺癌细胞株、HL60白血病细胞株分别作为BCRP及MDR1 mRNA 表达的参照标准,以β肌动蛋白(β-actin)为内对照,检测了54例AML患者BCRP mRNA的表达,其中8例患者测定MDR1 mRNA的表达,初步探讨BCRP表达在AML中的临床意义.结果 AML中BCRP mRNA表达水平差异较大, BCRP表达由低到高依次为对照组、完全缓解组、初治敏感组和临床耐药组.其中临床耐药组BCRP阳性率显著高于对照组及完全缓解组,差异有统计学意义(P＜0.01及P＜0.05),BCRP表达与MDR1 表达无相关性(P＞0.05).结论 BCRP在AML中表达水平差异较大,与MDR1的表达无关,可能是AML患者临床耐药的一个独立的重要原因,是预后的不利因素.
关键词： 急性髓性白血病 乳腺癌耐药蛋白 P-糖蛋白 半定量反转录-聚合酶链反应 预后 -
糖尿病对乳腺癌耐药蛋白表达和功能的组织特异性损伤作用
首先从在体水平研究糖尿病能否导致大鼠皮层、海马、肝、肠黏膜和肾中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的功能和表达发生改变以及胰岛素治疗能否逆转糖尿病引起的这种改变；进一步通过体外Caco-2和HepG-2细胞模型研究糖尿病血清中是否存在异常成分影响BCRP的功能和表达.通过单次给予链脲菌素(65 mg/kg,ip)诱导糖尿病模型,三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)/BCRP的表达分别由QT-PCR和Western blot实验测定,体外通过测定Caco-2和HepG-2细胞中哌唑嗪的摄取研究BCRP的功能改变.在体QT-PCR分析结果表明:5周和8周糖尿病大鼠的皮层、肝和肠黏膜中,ABCG2的表达均显著降低,而在海马和肾中其表达却显著增加.Western blot实验结果在大部分组织中与QT-PCR结果相一致.离体实验结果表明在Caco-2和HepG-2细胞中,高胰岛素和高血糖均可以抑制BCRP的功能.由此证明糖尿病对ABCG2/BCRP的表达和功能具有组织特异性的损伤作用,并且在大鼠肝和肠黏膜中,BCRP功能的改变可能是由高血糖水平引起的.
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三苯氧胺逆转过表达BCRP的JAR/VP16细胞对VP16的耐药性
目的 探讨三苯氧胺(TAM)对过表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的JAR/VP16细胞的逆转耐药作用.方法 在人绒癌细胞株JAR和对VP16耐药的JAR/VP16细胞株中以MTT法比较单药VP16组、TAM组及两药联合组的药物毒性,并运用流式细胞术以hochest 33342和PI双染观察两株细胞在加与不加TAM时的胞内荧光值强度.以RT-PCR和Western blot方法在mRNA水平和蛋白水平观察TAM、VP16及两药联用时BCRP表达水平.结果 JAR/VP16细胞株与JAR细胞相比,BCRP的表达量上调;TAM能显著增加VP16的抗肿瘤作用,与VP16单药组相比,联合用药组的细胞抑制率增加(P＜0.05);TAM可下调BCRP的表达.结论 BCRP的过表达可能导致了JAR/VP16细胞对VP16的耐药,而TAM可通过下调BCRP的表达及抑制BCRP的功能,从而逆转这种耐药.
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P-gp、MRP1、BCRP在晚期NSCLC中的表达及意义
[目的]探讨P-gp、MRP1、BCRP在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,及其与NSCLC患者临床病理特征及化疗效果的关系.[方法]采用免疫组化SP法检测32例晚期NSCLC患者治疗前肿瘤标本中P-gp、MRP1、BCRP的表达.所有患者接受以铂类为主的化疗方案2个周期,分析P-gp、MRP1、BCRP表达情况与患者临床病理特征及化疗效果的关系.[结果]NSCLC肿瘤中P-gp、MRP1和BCRP阳性表达率分别为46.88%、75.00%和46.88%.腺癌中P-gp表达高于鳞癌;MRP1的表达与年龄有关,60岁以上的患者显示了更高的MRP1表达率.BCRP的表达与化疗效果相关,但P-gp和MRP1的表达与疗效无显著性相关.[结论]BCRP可以作为判断晚期NSCLC患者化疗效果的预测因子.
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BCRP及MDRl在非霍奇金淋巴瘤接受化疗患者的表达及临床意义
目的 探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达及临床意义.方法 采用RT.PCR法检测66例NHL患者新鲜淋巴组织标本BCRP及MDRl的表达.结果 66例NHL患者BCRP阳性率45.5%,MDRI阳性率59.1%,BCRP+MDRI+、BCRWMDR1、BCRP"MDR1+、BCRF MDR1四组化疗效果差异有统计学意义(p<0.05).结论 BCRP及MDR1表达率高,是化疗敏感性差的重要原因.
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非霍奇金淋巴瘤患者乳腺癌耐药蛋白的表达及其与药物敏感性的关系
目的 探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达及其与药物敏感性的关系.方法 采用RT-PCR法检测比例NHL和5例慢性淋巴结炎患者新鲜淋巴组织标本中BCRP及多药耐药基因(MDR1)的表达水平;并对所有患者进行随访.结果 5例慢性淋巴结炎患者BCRP和MDR1表达均阴性;66例NHL患者BCRP阳性率45.5%,MDR1阳性率59.1%;T细胞淋巴瘤患者BCRP阳性率高于B细胞淋巴瘤者,NHL Ⅲ～Ⅳ期患者BCRP阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期者(均P<0.05);BCRP阳性患者的复发率高于阴性者,而缓解率和5年生存率均低于阴性者(均P<0.05);BCRP和MDR1阳性、BCRP阳性和MDR1阴性、BCRP阴性和MDR1阳性、BCRP和MDR1阴性患者的化疗疗效均不同(均P<0.05).结论 本组NHL患者BCRP和MDR1表达率较高,可能为化疗敏感性差的重要原因.
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肿瘤微环境影响乳腺癌耐药蛋白转录调控的研究进展
乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein， BCRP）是ABC转运蛋白超家族G亚家族重要成员之一。该基因（Gene ID：9429）于1998年由Doyle等[1]应用mRNA指纹技术在人乳腺癌细胞株MCF-7/AdrVp细胞中首次克隆，又名ABCG2蛋白。BCRP能够将进入乳腺癌细胞内的多种化疗药泵出细胞外，如5-FU、阿霉素、托泊替康、甲氨蝶呤、喜树碱及多柔比星等，从而使细胞产生耐药性，在乳腺癌多药耐药方面有着不可忽视的地位。因此，研究其转录调控机制对逆转乳腺癌的多药耐药，提高化疗疗效具有十分重要的意义。目前，对于BCRP的调控方面研究甚少。研究表明，BCRP启动子的两个调节因素缺氧和雌激素受体（estrogen receptor， ER）[2-3]在控制BCRP表达方面发挥作用；另外，BCRP的转录调控还受到肿瘤微环境及多种转录因子、细胞因子和生长因子等的共同协调。
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乳腺癌多药耐药机制研究进展
乳腺癌癌细胞表现多药耐药性(muhidrug resistance，MDR)往往是导致临床化疗失败的主要原因之一。MDR有两种不同的表型，一种是对第一次化疗就产生耐药，称天然性耐药(natural resistance)或称内源性耐药(intrinsic resis-tance)；另一种是在化疗过程中产生耐药，故称获得性耐药(aquired resistance)。MDR的特点是一旦对某种化疗药物产生耐药，对其他结构上无关、作用靶点和机制不同的抗癌药物产生交叉耐药。目前研究认为，肿瘤产生MDR的分子机制主要有四个方面。(1)跨膜药泵基因的扩增或过表达。这类药泵以P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)P-gp/mdrl重要。近发现的一些分子如多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-related protein，MRP)、肺耐药相关蛋白(the lung-resistance protein，LRP)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein，BCRP)〔1〕也具有药泵功能，初都不表达P-gp又具有MDR表型的肿瘤细胞发现。这些分子与P-gp同属于ATP结合膜蛋白多基因家族[ATP-binding cassette(ABC)transporterfamily]〔1〕。需要注意的是它们的底物谱有明显不同。(2)细胞内一些蛋白酶的变化引起细胞解毒功能增强，如广泛分布的谷胱甘肽-S-转移酶π亚型(glutathioneStransferase-π，GST-π)过表达或活性增加。解毒功能的还有二氢叶酸还原酶、争光霉素水解酶、金属硫因(metallothioneine)等。(3)核酶DNA拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ，TOPOⅡ)含量减少或性质改变，则可使许多以TOPOⅡ为靶点的抗肿瘤药物耐药。(4)其他因素，如一些癌基因的激活表达，蛋白激酶C活性增强等。
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齐多夫定在人胎盘中转运机制的研究进展
齐多夫定是阻断艾滋病母婴传播的一线用药,临床上疗效显著.该药虽暂无相关致畸报道,但其妊娠期用药的安全性仍存在争议.有研究表明齐多夫定可以透过胎盘,对胎儿潜在的毒性与胎儿曝露量呈正相关.目前已有文献报道胎盘中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、有机阴离子转运体4(OAT4)及核苷转运体2(ENT2)转运蛋白可能参与齐多夫定的转运,但具体转运机制尚未完全明确.本文将对齐多夫定在人类胎盘中的转运机制的研究进展进行综述,以期为评价齐多夫定在妊娠期的安全应用提供参考.
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焦磷酸测序分析ABCG2基因多态性方法的建立
目的:建立ABCG2 34G＞A和421C＞A单核苷酸多态性位点的焦磷酸测序方法.方法:抽取志愿者静脉血入EDTA抗凝管,常规苯酚/氯仿法制备全血gDNA,生物素标记引物对扩增多态位点目的片段,制备生物素标记单链模板,与测序引物退火结合后行焦磷酸测序.分析结果经毛细管电泳测序验证,并进行重复性检验.结果:本文建立了针对ABCG2 34G＞A和421C＞A多态性位点的焦磷酸测序方法,经毛细管电泳测序验证和重复性验证,结果准确可靠.ABCG2 34G和34A等位基因频率分别为79.5％和20.5％;421C和421A等位基因频率分别为72.7％和27.8％,均符合Hardy -Weinberg平衡.结论:本文建立的焦磷酸测序方法可准确、高通量、快速检测ABCG2 34G＞A和421C＞A单核苷酸多态性,并且特别适宜大样本量的临床及科研批量检测需要.
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黄芩素对BCRP介导的人乳腺癌MCF-7/MX细胞多药耐药的逆转作用
目的 探讨黄芩素对乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)介导的人乳腺癌MCF-7/MX细胞多药耐药(multidrug resistance,MDR)的逆转作用及可能机制.方法 MTT法检测黄芩素对MCF-7/MX细胞的增殖抑制及耐药逆转作用;Western blot法检测黄芩素对MCF-7/MX细胞BCRP、p38 MAPK、p-p38 MAPK、核因子NF-κB p65蛋白表达的影响.结果 MCF-7/MX细胞对米托蒽醌、顺铂和氟尿嘧啶的耐药倍数分别为70.45、6.68、21.47.2.5、5μmol·L-1的黄芩素可增强MCF-7/MX细胞对上述化疗药的敏感性,下调BCRP表达,降低NF-κB p65蛋白表达和p38蛋白的磷酸化水平.结论 黄芩素可有效逆转BCRP介导的MCF-7/MX细胞的MDR,此作用可能与抑制p38 MAPK信号通路和NF-κB信号通路有关.
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瓦他拉尼对乳腺癌耐药蛋白介导的肿瘤多药耐药的逆转研究
目的：观察新型激酶抑制剂类抗癌药瓦他拉尼( vata-lanib)逆转肿瘤细胞多药耐药( MDR)的效果,研究其对乳腺癌耐药蛋白( BCRP)、P-糖蛋白( P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的作用,探讨其作用机制。方法应用 MTS 法或SRB法检测瓦他拉尼对耐药细胞与敏感细胞的细胞毒性和逆转 MDR 的效果；分别以罗丹明( Rh-123)、米托蒽醌( MX)、阿霉素( ADR)为P-gp、BCRP、MRP1的荧光底物,应用流式细胞术检测该药对P-gp、BCRP、MRP1外排功能的影响；应用Western blot检测该药对耐药细胞中BCRP蛋白表达水平的影响,并研究其对细胞增殖相关信号分子的影响；应用qRT-PCR检测其对耐药细胞中BCRP基因表达水平的影响；通过超速离心法制备BCRP转运蛋白的粗膜,检测瓦他拉尼对BCRP的ATPase活性的影响。结果无毒剂量的瓦他拉尼(5μmol·L-1)可有效逆转BCRP高表达的肿瘤细胞株HEK293/ABCG2对MX、ADR和托泊替康( TOPT)的耐药,而对P-gp高表达的肿瘤细胞株K562/A02和MRP1高表达的肿瘤细胞株HEK293/ABCC1的耐药无逆转作用。该药能够下调耐药肿瘤细胞的BCRP基因和蛋白的表达水平,并具有时间和剂量依赖效应,但对BCRP外排MX的功能无明显抑制作用。该药可以激活BCRP的ATPase活性,但并不改变BCRP 的构象,对耐药和敏感细胞中AKT 和ERK 的表达及其磷酸化水平也均无明显影响。结论摇瓦他拉尼可有效、特异地逆转BCRP 介导的肿瘤MDR,其机制可能是通过下调耐药肿瘤细胞中BCRP 基因和蛋白的表达来达到逆转 MDR 的效果。
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降低细胞膜角蛋白8和乳腺癌耐药蛋白的表达逆转耐药性
目的 研究细胞膜角蛋白8(CK8)和乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistant protein,BCRP)作为多靶点治疗逆转耐药的可行性.方法 共转染特异的CK8-siRNAs和BCRP-siRNAs至人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/MX,用Western blot方法检测siRNAs对CK8和BCRP蛋白表达的抑制,荧光染色用激光共聚焦显微镜观察细胞膜表面CK8表达量的变化,并用Sulforhodamine B的方法检测转染前后细胞对多种化疗药敏感性的变化.结果 MCF-7/MX细胞导入CK8-siRNAs和BCRP-siRNAs后,CK8和BCRP的表达水平均明显降低,且细胞表面CK8染色也明显降低,同时对米托蒽醌等化疗药的敏感性明显提高,耐药表型明显逆转.结论 CK8和BCRP在MCF-7/MX耐药细胞中共同高表达且在乳腺癌多药耐药表型的形成中起重要作用,共同抑制CK8和BCRP的表达可以有效逆转乳腺癌的多药耐药,为治疗肿瘤多药耐药提供了一条新的思路.
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BCRP在浸润性乳腺癌中的表达及其与上皮间质转化相关蛋白的相关性
目的：：探讨乳腺癌耐药蛋白( BCRP)在浸润性乳腺癌组织中的表达情况及其与上皮间质转化相关蛋白的相关性。方法：采用免疫组织化学方法检测80例浸润性乳腺癌组织、40例癌旁组织、40例乳腺纤维腺瘤组织中BCRP蛋白的表达情况,分析其与临床病理参数的关系,进一步研究BCRP蛋白与上皮性钙黏蛋白、神经性钙黏蛋白的相关性。结果：BCRP蛋白在浸润性乳腺癌中的阳性表达率为57.5%。 BCRP蛋白阳性表达率在组织学分级、淋巴结转移和TNM分期间差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。 BCRP与HER-2、神经性钙黏蛋白表达均呈正相关关系(P<0.01),与上皮性钙黏蛋白呈负相关关系(P<0.01)。结论：在浸润性乳腺癌中,BCRP蛋白可能与乳腺癌的发生、发展密切有关,同时与上皮间质转化存在一定的相关性。
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干细胞标志物乳腺癌耐药蛋白在舌癌淋巴道转移裸鼠模型中的表达及其意义
目的:探讨干细胞标志物乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在舌癌永生化细胞系细胞淋巴道转移裸鼠模型中的表达及其意义.方法:收集裸鼠舌癌淋巴道转移模型中的完整淋巴结进行原代细胞培养、分离、纯化舌癌细胞,并进行连续传代培养建立舌癌永生化细胞系Tca8113-Ml.通过裸鼠爪垫注射Tca8113-Ml细胞建立淋巴结转移实验组,并设爪垫注射0.9%氯化钠注射液为对照组;4周后收集2组完整的淋巴结,采用免疫组织化学染色法检测淋巴结组织中BCRP的表达情况.结果:免疫组织化学染色显示,在爪垫注射癌细胞4周后收集的淋巴结中,BCRP在实验组中阳性率为27%～35%;在对照组中无表达.结论:癌干细胞是癌转移与复发的"种子"细胞,观察舌癌淋巴结转移灶干细胞标志物的表达情况,可为进一步研究癌干细胞与癌转移以及癌耐药的相关性提供理论依据.
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乳腺癌耐药蛋白在人体正常和肿瘤组织中的表达
目的研究乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体正常和肿瘤组织中的表达及其意义. 方法采用半定量RT-PCR检测BCRP在人体正常组织和乳腺癌、胃癌组织中的表达水平. 结果研究发现BCRP mRNA在胎盘和肝脏组织中表达较高,在结肠、小肠、胃、乳腺和肾脏组织中表达较低,在胰腺、脾脏、外周血白细胞和卵巢组织中检测不到.20例乳腺癌中有5例(25%)BCRP阳性表达,而20例胃癌中BCRP均未表达.结论乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体的一些正常组织和乳腺癌中具有表达,其作用可能与该组织的外排功能有关.
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关于乳腺癌耐药蛋白BCRP/ABCG2的研究进展
乳腺癌耐药蛋白是体内重要的跨膜半转运蛋白,是一种依赖ATP酶的半结合转运体,主要负责将内、外源性物质排至细胞外.乳腺癌耐药蛋白在体内分布广泛,胎盘、干细胞、血脑屏障、小肠及肾小管等重要组织中均有表达,是介导肿瘤细胞耐药的重要蛋白,是影响肿瘤药物临床用药个体差异的重要因素之一.本文就乳腺癌耐药蛋白的生理结构、组织分布及对体内药物代谢过程的影响等方面的研究进展作一综述.
关键词： 乳腺癌耐药蛋白 BCRP/ABCG2 体内药物代谢过程 结合转运体 -
不同分子亚型乳腺癌组织中BCRP、MRP1和MDR1的表达及其临床意义
目的 根据乳腺癌组织中ER、PR、Her-2和Ki-67的水平对乳腺癌进行分子分型,观察不同分子亚型中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和多药耐药蛋白1(MDR1/P-gp)的表达,探讨这3种多药耐药蛋白在不同分子亚型乳腺癌中的表达及临床意义.方法 用免疫组织化学方法检测79例乳腺癌组织中ER、PR、Her-2、Ki-67、BCRP、MRP1和MDR1分子的表达水平,分析3种多药耐药蛋白与乳腺癌分子亚型及ER、Her-2、Ki-67分子表达间的关系.结果 乳腺癌组织中BCRP、MRP1和MDR1阳性表达率分别为77.2%、38.0%、7.6%.MRP1在luminal A型高表达(68.4%)(P<0.05);BCRP和MDR1在luminal A型、luminal B型、Her-2过表达型和三阴性型乳腺癌的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).BCRP和MRP1的表达呈正相关(r=0.301,P<0.05),BCRP和MDR1、MRP1和MDR1的表达无相关性.MRP1与ER的表达呈正相关(r=0.290,P<0.05),与Her-2、Ki-67的表达无相关性;BCRP和MDR1分别与ER、Her-2、Ki-67的表达均无相关性.结论BCRP、MRP1和MDR1在乳腺癌组织中具有不同程度的表达,MRP1可作为预测乳腺癌尤其是luminal A型乳腺癌内源性耐药的指标.
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乳腺浸润性导管癌中BCRP、HIF-1α、HER-2的表达及其相关性与临床意义
目的 探讨乳腺浸润性导管癌组织中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、人类表皮生长因子受体-2(HER-2)的表达及临床意义.方法 应用ElivisionTM plus免疫组织化学法检测75例乳腺浸润性导管癌组织及15例癌旁正常组织中BCRP、HIF-1α、HER-2蛋白的表达情况.结果 (1)75例乳腺浸润性导管癌中BCRP、HIF-1α、HER-2阳性表达分别为41.3%(31/75)、61.3%(46/75)和26.7% (20/75);除了BCRP在癌旁正常组织中有一定程度的表达外13.3%(2/15),HIF-1α、HER-2未见表达.(2)BCRP与HIF-1α之间(r=0.205,P=0.011),HIF-1α与HER-2之间(r=0.349,P=0.000)有相关性;BCRP与HER-2之间(r= 0.155,P=0.059)无相关性.(3)BCRP表达与年龄、TNM分期、肿瘤大小、腋淋巴结转移状况及激素受体状况均无关;HIF-1α、HER-2的表达与TNM分期及腋淋巴结转移状况有关,而与年龄、肿瘤大小及激素受体表达状况无关.结论 BCRP与乳腺浸润性导管癌原发多药耐药(MDR)的发生有关,HIF-1α可能参与了BCRP基因的调节机制,HER-2在某种程度上也可能参与了MDR,化疗前对它们进行联合检测可为化疗药物的选择及预后判断提供参考.
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乳腺癌耐药蛋白的表达及其与核转录因子snail相关性的临床研究
目的:探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达,分析其与核转录因子snail的相关性及BCRP介导肿瘤耐药的分子机制.方法:应用免疫组化方法检测87例乳腺癌组织和35例癌旁组织中BCRP和snail的表达情况,分析其与乳腺癌临床病理因素的关系及BCRP与snail的相关性.结果:BCRP和snail在乳腺癌组织中的阳性率分别32.18％和85.06％,BCRP与年龄、肿瘤大小及TNM分期无关,与组织学分级、ER表达和淋巴结转移相关；snail与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、ER表达无关,而与TMN分期、淋巴结转移正相关；相关分析显示BCRP与snail表达的存在密切相关性(x2=35.267,P＜0.01,r=0.643).结论:BCRP参与了乳腺癌的进展；snail是乳腺癌上皮-间质转换(EMT)过程中的一个重要调节因素,促进了EMT的发生,介导了BCRP介导的多药耐药.
