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复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响
目的 探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响.方法 体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3蛋白表达.结果 复方苦参注射液对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为0.84 g/ml.经流式细胞仪检测表明,复方苦参注射液能使ACC-2细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01).复方苦参注射液能增强ACC-2细胞Caspases-3蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性.结论 复方苦参注射液能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Caspases-3蛋白表达,诱导ACC-2细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖.
关键词： 复方苦参注射液 ACC-2细胞 增殖 凋亡 Caspases-3 -
丹参酮ⅡA对复苏后大鼠脑NMDAR1表达的影响及保护作用
目的 探讨丹参酮ⅡA对大鼠心肺复苏后脑NMDAR1蛋白表达的影响及对脑组织的保护作用.方法 将78只SD雄性大鼠随机(随机数字法)分为3组:A组(假手术组,n=6),B组(对照组,n=36),C组(丹参酮ⅡA干预组,n=36),通过制备窒息致大鼠心脏骤停动物模型,C组复苏即刻予以丹参酮ⅡA 15 mg/kg静脉推注,B组予以等量生理盐水静脉推注,在自主循环恢复后(ROSC)1、6、12、24、48、72 h断头取脑,应用免疫组织化学染色法检测脑组织NMDAR1和Caspases-3的表达,干湿质量法测脑组织含水量.实验结果组间比较采用单因素方差分析.结果 ①B组在ROSC后1h脑NMDAR1蛋白表达明显增高,6h达到高峰,12 h逐渐降低,24 h仍高于正常,在48 h表达低于正常,72 h更低,与A组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);C组1、6、12 h NMDAR1蛋白的表达与同时间点B组比明显降低(P＜0.01),但24、48、72 h NMDAR1蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05).②B组Caspases-3蛋白表达在ROSC后呈上升趋势,48 h达高峰,后逐渐降低,但72 h仍高于正常,与A组比较差异具有统计学意义(P＜0.01);C组在1、6、12、24 h明显低于B组(P＜0.01),48 h、72 h表达仍低于B组(P＜0.05).③B组大鼠脑组织含水量在ROSC后1h就开始升高,24 h达高峰,48 h逐渐降低,但72 h 仍高于正常,与A组比较差异具有统计学意义(P ＜0.01或P＜0.05);与B组比较,C组含水量明显降低(P＜0.01).结论 丹参酮ⅡA对大鼠心肺复苏后早期NMDAR1的表达有下调作用,能明显减少复苏后脑Caspases-3的表达及脑水肿.
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凝血酶大鼠脑内注射对细胞凋亡的影响及其机制的实验研究
目的 探讨凝血酶(Thrombin,TM)脑内注射对周围组织Caspase-3蛋白表达和细胞凋亡的影响.方法 TM、TM+组织蛋白酶G(Cathepsin G,CATG)、TM+Caspase-3抑制剂(DEVD-fmk)脑内立体定向注射制作动物模型,应用Western-blot技术检测Caspase-3蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 TM脑内注射后6 hCaspase-3蛋白开始增加,与对照组比较差异具有显著性(P＜0.01),注射后24 h达高峰(P＜0.01),然后逐渐下降,96 h时恢复至正常水平;TM脑内注射后24 h凋亡细胞数目开始增加,与对照组比较差异具有显著性(P＜0.05),48 h达高峰(P＜0.01),然后逐渐下降.TM+DEVD-fmk脑内注射后凋亡细胞数目与对照组比较差异无显著性(P＞0.05).TM+CATG脑内注射后Caspase-3蛋白表达和凋亡细胞数目与对照组比较差异均无显著性(P＞0.05).结论 TM通过蛋白酶激活受体-1(protease activated receptor-1,PAR-1)激活Caspase-3,诱导细胞凋亡.
关键词： 凝血酶 Caspases-3 凋亡 蛋白酶激活受体-1 -
VP16损害大鼠卵巢组织结构和内分泌功能的实验研究
目的:探讨抗肿瘤药依托泊苷(VP16)对大鼠卵巢组织结构和内分泌功能的影响.方法:选用40只3～4月龄雌性SD大鼠,随机将其分为空白对照组,VP16低、中、高剂量组.用药后比较4组大鼠卵巢、子宫湿重和卵巢组织结构的变化,采用放射免疫方法测定4组大鼠促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)水平,并用免疫组织化学方法观察VP16不同刺量组对半胱天冬酶-3(caspases-3)在卵巢颗粒细胞中表达的影响.结果:与空白对照组相比:光镜下可见VP16高,中剂量组对卵巢组织破坏程度较大,卵泡数明显减少,且血清FSH升高,E2下降,caspases-3蛋白均强表达,差异有统计学意义;VP16低剂量组对卵巢组织破坏程度较小,卵泡数有所减少,且FSH升高、E2下降不显著,caspases-3蛋白呈弱表达,差异无统计学意义.结论:VP16对大鼠卵巢的损害程度与药物剂量成正相关,对卵巢组织的损伤可能与caspases-3凋亡途径有关.
关键词： VP16 大鼠 卵巢功能早衰 Caspases-3 -
神经再生素对PC12细胞Caspases-3的影响
目的:探讨神经再生素抑制PC12细胞凋亡的作用机制.方法:采用流式细胞仪和RT-PCR,观察神经再生素对无血清状态下PC12细胞Caspases-3活力及Bax、Caspases-3 mRNA的影响.结果:与对照组相比,神经再生素可抑制无血清培养的PC12 细胞Caspases-3活力,并可使Bax、Caspases-3 mRNA的表达减少.结论:神经再生素可以通过抑制Caspases-3基因表达和活化,而发挥其抗凋亡作用.
关键词： 神经再生素 PC12细胞 凋亡 Caspases-3 -
地塞米松诱导原代培养的成骨样细胞凋亡的分子细胞学研究
目的:通过干扰体外培养的成骨样细胞,探索糖皮质激素所致成骨样细胞凋亡的分子细胞机制. 方法:地塞米松诱导原代培养并传代的小鼠成骨样细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生存能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,比色法检测半胱天冬酶Caspase-3的活性以及EMSA检测核因子Kappa B(NF-κB)活性. 结果:地塞米松使成骨样细胞存活数量下降,Caspase-3活性升高,NF-κB活性下降. 结论:地塞米松对原代未转化的成骨细胞有诱导凋亡的作用,并且是Caspase-3依赖性的,但NF-κB似乎不参与该过程.
关键词： 地塞米松 成骨样细胞 Caspases-3 肿瘤坏死因子α -
EPO对糖尿病大鼠视网膜caspases-3、NF-κB和TNF-α表达的影响
目的 研究促红细胞生成素(EPO)对糖尿病(DM)大鼠视网膜组织caspases-3、TNF-α和NF-κB表达的影响,探讨糖尿病视网膜病变(DR)的发病机制.方法 采用链脲佐菌素诱导DM,成模后,随机分为DM未治疗组和EPO治疗组,再设亚组.应用SABC法检测EPO对大鼠视网膜组织中caspases-3、NF-κB和TNF-α表达的影响.结果 在正常大鼠和DM 1个月组,三者均无阳性表达或只呈弱阳性表达,3个月组视网膜中可见阳性表达,多位于神经节细胞层,6个月组可见表达向其他层次扩展.EPO治疗组三者的表达均较同期DM未治疗组下降,3个月和6个月组的表达差异有统计学意义(P＜0 05).结论 早期糖尿病视网膜caspases-3、NF-κB和TNF-α的表达上调,三者可能均参与了早期DR的发生,上述结果将为EPO治疗视网膜疾病提供理论基础.
关键词： 糖尿病视网膜病变 细胞凋亡 Caspases-3 NF-κB TNF-α -
四藤方对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察四藤方中中药及联合应用对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响.方法 体外培养胃癌SGC-7901细胞,不同浓度中药作用后,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡;Caspase-3活性检测试剂盒检测SGC-7901细胞Caspase-3的活性.结果 与对照组比较,四藤方中菝葜、红藤、藤梨根均能抑制SGC-7901细胞增殖.菝葜、红藤、藤梨根联用可增强对SGC-7901细胞增殖和凋亡的作用,同时提高SGC-7901细胞Caspase-3活性(P＜0.01).结论 菝葜、红藤、藤梨根三药联合使用可增强对人胃癌SGC-7901的抗癌作用,并可能与活化Caspase-3介导细胞凋亡相关.
关键词： 胃癌 中医药 四藤方 细胞凋亡 Caspases-3 -
大肠杆菌感染时U937细胞凋亡与半胱氨酸蛋白酶-3及c-myc的关系
目的 探讨大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)感染时人巨噬细胞系U937细胞凋亡与半胱氨酸蛋白酶-3(caspaseS-3)及c-myc的关系.方法 当U937:E.coli分别为0,1:20,1:40及1:80时用AnnexinVFITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测caspases-3和c-myc的表达.结果 当U937:E.coli分剐为0,1:20,1:40及1:80时,细胞凋亡率分别为(3.05%±0.88%)、(33.34%±4.27%)、(37.67%±5.20%)和(50.18%±4.32%).caspases-3 mRNA和c-mycmRNA随着E.coli浓度增加而表达上调,与细胞凋亡程度基本一致.结论 E.coli可诱导U937细胞凋亡,其机制可能与凋亡调控基因caspases-3和c-myc上调有关.说明多基因调控参与其中.
关键词： 大肠杆菌 U937 细胞凋亡 c-myc Caspases-3 -
PTEN及Caspase-3可能参与卵巢癌铂类耐药的机制
目的 探讨(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosometen,PTEN) PTEN(第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因)及(半胱氨酸蛋白酶-3) Caspase-3在卵巢癌细胞系A2780,A2780CP(顺铂耐药卵巢癌细胞系)中在顺铂诱导的细胞凋亡过程中的调控作用.方法 细胞用10mol/L的顺铂处理24 h,通过Western印迹对PTEN的蛋白水平进行定量分析,观察顺铂处理过的A2780细胞及A2780-CP细胞中PTEN蛋白水平的变化.用Caspase-3抑制剂处理A2780细胞,观察Caspase-3抑制剂是否可恢复PTEN蛋白的水平,来研究PTEN的降解机制.结果 PTEN蛋白水平在A2780细胞显著下降;在顺铂处理过的A2780-CP细胞中PTEN蛋白水平没有变化.相对于于载体处理的细胞(P＜0.05).在A2780细胞中,伴随着PTEN蛋白水平的降低,有AKT(分子蛋白激酶B)磷酸化水平(pAKT)水平升高.在A2780细胞,使用caspase-3抑制剂可恢复PTEN蛋白的水平.结论 在顺铂处理的卵巢癌A2780细胞中,促凋亡基因PTEN的蛋白的水平的降低和存活因子PAKT水平的升高,能进一步增加A2780细胞的的耐药性.
关键词： 顺铂 Caspases-3 癌症 细胞凋亡 PTEN -
腺病毒介导的hTERTC27在体内外对小鼠胶质瘤的抑制作用
目的:探讨人端粒酶逆转录酶C-末端27kD多肽(hTERTC27)对小鼠胶质瘤的抑制作用及其可能的机制.方法:体外实验用PT-PCR法检测hTERTC27的cDNA水平,Western杂交鉴定hTERTC27蛋白的表达,hoechst法检测细胞的凋亡,CCK8法检测hTERTC27对GL261细胞的抑制率,及加入Caspsase-3的抑制剂Zdevd-FMK后hTERTC27对GL261细胞抑制率的变化.体内实验建立小鼠胶质瘤模型,原位分别注射AdC27-EGFP、AdC27-EGFP+ Zdevd-FMK和Ad-EGFP,观察小鼠的存活时间.结果:体外实验表明,hTERTC27能明显地抑制肿瘤细胞的生长,促进肿瘤的凋亡;而当加入Caspsase-3的抑制剂后,hTERTC27的抑制作用被明显阻断.体内实验显示,AdC27-EGFP小鼠组的生存时间为(40.38±11.30)d,高于AdC27-EGFP+ Zdevd-FMK组的(27.25±6.41)d和Ad-EGFP组的(25.38±6.79)d(P ＜0.05).结论:hTERTC27能在体内和体外明显地抑制小鼠胶质瘤的生长,其机制可能与Caspases-3凋亡途径有关.
关键词： hTERTC27 Caspases-3 胶质瘤 基因治疗 细胞凋亡
