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加味佛手散对大鼠子宫内膜异位症的治疗用及免疫学机制研究
目的:考察加味佛手散对大鼠子宫内膜异位症的治疗作用及其在免疫学方面的机制.方法:自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,灌胃加味佛手散28 d后,用游标卡尺检测移植物体积,电子天平称量脾脏质量,免疫组化法检测移植物中白介素(IL)-8的表达,ELISA法检测血清及腹腔液中肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达,Western blot法检测异位组织中核转录因子-κB亚基p65( NF-κB p65)及NF-κB抑制蛋白IκBα的表达.结果:加味佛手散0.045,0.09,0.18 g· kg-1能明显减小大鼠子宫内膜异位组织的体积,加味佛手散0.18g·kg-1能显著增加脾脏指数,加味佛手散0.09,0.18 g· kg-1能够降低IL-8在异位组织中的表达,显著降低血液及腹腔液中TNF-α含量,并能降低异位组织中NF-κB p65含量及增加IκBα的含量.结论:加味佛手散可显著抑制大鼠子宫内膜异位症移植物生长,其作用机制可能与改善机体免疫环境有关.
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平冲降逆方对裸鼠人子宫膜异位症模型凋亡及TNF-α、IL-8表达的影响
目的 观察平冲降逆方对裸鼠人子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)模型种植灶凋亡、TNF-α、IL-8表达的影响.方法 将48只BALB/c-nu雌性裸鼠,随机分为两组:EMs源性模型组和非EMs源性模型组,每组24只.EMs源性模型组采用EMs患者的子宫内膜种植模型鼠;非EMs源性模型组采用非EMs患者的子宫内膜种植模型鼠.两组再分别随机分为中药组、阳性药物组和阴性对照组,每组8只.分别给予平冲降逆方、米非司酮及等量生理盐水灌胃给药4周.观察模型鼠种植灶组织学形态及超微结构、细胞凋亡、TNF-α、IL-8表达.结果 EMs及非EMs模型鼠的中药组均见病灶缩小、周围血管生成少于同源阴性对照组,光镜、电镜下可见内膜组织退变,有凋亡现象发生,免疫组化结果示凋亡率明显高于同源阴性对照组,而TNF-α、IL-8表达量明显低于同源阴性对照组(P＜0.05).结论 平冲降逆方可明显抑制裸鼠异位内膜的生长,这种作用可能是通过诱导细胞凋亡、降低TNF-α、IL-8表达而实现的.
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清肠泡腾栓对溃疡性结肠炎模型大鼠细胞因子的影响
目的 探讨中药清肠泡腾栓治疗溃疡性结肠炎的免疫学疗效机制. 方法 实验分设正常对照组、模型对照组、空白泡腾栓组、清肠泡腾栓组、清肠栓组、柳氮磺胺吡啶栓组共6个组,ELISA法检测血清、结肠上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-13(IL-13);免疫组化、原位杂交检测白细胞介素8(IL-8)mRNA阳性表达. 结果 模型对照组血清TNF-α较正常对照组升高(P＜0.05),结肠黏膜IL-8 mRNA阳性表达明显增强(P＜0.01);清肠泡腾栓明显降低结肠上清TNF-α含量以及IL-8 mRNA阳性表达,与模型对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01);清肠泡腾栓对IL-13的调控作用不明显,与模型对照组比较差异无显著性意义(P＞0.05). 结论 清肠泡腾栓通过抑制促炎细胞因子而对溃疡性结肠炎产生治疗作用.
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Graves病患者131I治疗前后血清IL-8水平的变化及相关研究
通过测定Graves病(GD)患者131I治疗前后血清IL-8水平及FT3/IL-8和FT4/IL-8比值的变化,并分析比较治疗前后血清IL-8与TRAb及甲状腺功能变化,探求IL-8与GD发生、发展机制的关系及可否将其作为判断GD治疗疗效及预后的指标.共检测138份血样,其中,40名为正常对照,98例为GD患者.采用放射免疫法(RIA)检测血清TT3、TT4、FT3、FT4、TRAb及IL-8含量,采用免疫放射定量分析法(IRMA)对hTSH进行检测.结果显示:① GD初发组治疗前,血清IL-8水平明显高于对照组(P＜0.01);治疗后3个月、6个月血清IL-8检测值明显降低(P＜0.01),治疗后18个月,血清IL-8接近正常水平;② GD复发组血清IL-8水平明显高于对照组和缓解组(P＜0.01);③ GD患者血清FT3/IL-8和FT4/IL-8比值较对照组明显增高,治疗后3个月下降至对照组水平;④ GD患者血清IL-8水平与TRAb呈正相关.结论:① GD患者的免疫功能恢复滞后于其本身的甲状腺功能;② FT3 /IL-8和FT4 /IL-8比值较IL-8单一指标更符合甲状腺的功能状况;③ IL-8可能在GD的发病中起重要作用,可作为GD患者131I治疗后观察疗效、判断预后及了解免疫功能恢复状况的有效指标.
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肝硬化患者血清TNF-α和IL-8变化及其临床意义
为研究肝硬化患者血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-8(IL-8)变化与肝功能Child-pugh分级的关系及临床意义,本文对46例肝硬化患者按Child-pugh肝功能分级标准分为A、B、C三组,并设正常对照组30名,采用放射免疫分析法(RIA)分别测定他们的血清TNF-α、IL-8值,同时测定血清总胆红素(TBiL)、谷丙转氨酶(ALT) 、白蛋白(ALB) 、透明质酸(HA) 、层粘蛋白(LN)和III型前胶原(PCIII).结果显示,肝硬化患者TNF-α、IL-8值较正常组明显升高(P＜0.01),且A、B、C三组TNF-α、IL-8水平依次递增,各组间比较差异显著(P＜0.01或P＜0.05).以上数据表明,肝硬化患者血清TNF-α及IL-8水平是反映肝功能损害程度及病情预测的重要指标.
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神经外科手术后颅内感染早期脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-α水平变化的意义
目的 通过研究神经外科手术后颅内感染患者脑脊液中的IL-6、IL-8和TNF-α的水平变化,探讨其在术后颅内感染中的诊断价值.方法 选取我院神经外科手术后颅内感染患者46例,非颅内感染患者34例,所有病例均于手术后1～7天内和7～ 14天取脑脊液进行IL-6、IL-8和TNF-α的检测,并进行统计分析.结果 神经外科手术后颅内感染组患者1～7天内的脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-α的含量显著高于非感染组患者,差异有统计学意义(P＜0.05)；颅内感染患者7 ～14天的脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-a的含量虽高于非感染组患者,但差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 结合临床症状和有效的检查脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-α水平,可明显提高神经外科术后颅内感染早期的诊断价值和准确性,值得临床推广.
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前列腺炎合并前列腺增生患者前列腺液中IL-8、COX-2及MMP-9表达水平及意义
目的 探讨前列腺炎(CP)合并前列腺增生(BPH)患者前列腺液中IL-8、COX-2及MMP-9表达水平及意义.方法选取2014年04月至2016年03月于我院行前列腺手术120例患者,52例单纯BPH为对照组,68例CP合并BPH为观察组,观察比较两组患者一般资料,检测患者前列腺液中IL-8、COX-2、MMP-9水平及WBC计数及对各因素进行Spearman分析和Logsitic多元回归性分析.结果 观察组患者在年龄、平均病程、IPSS、前列腺体积等均显著高于对照组(P<0.05),观察组患者前列腺液中IL-8、COX-2、MMP-9水平及WBC计数显著高于对照组(P<0.05).经Spearman相关性分析显示,前列腺液中IL-8与COX-2、MMP-9、EPWBC均呈显著正相关(r=0.987、0.951、0.187,P<0.05),同时COX-2与MMP-9呈显著正相关(r=0.571,P<0.05),而MMP-9与EPWBC呈显著正相关(r=0.857,P<0.05).Logisitic多元回归分析显示EPWBC、IL-8、COX-2、MMP-9是BHP合并CP的独立影响因子或预测因子.结论 BHP合并CP患者前列腺液中IL-8、COX-2及MMP-9表达水平较单纯BPH显著升高,有利于BPH和BPH合并CP患者的诊断和鉴别.
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外周血TNF-α、IL-8水平表达变化与类风湿患者病情进展关系的探讨
类风湿关节炎(RA)是多种因子参与的免疫相关疾病,机体在外来抗原诱导下免疫状态出现异常,继发的自身免疫反应阶段.局部免疫复合物的沉积和直接损伤对疾病起放大效应.已有的研究发现,TNF-α在早期阶段出现高表达,进一步激活包括IL-8在内的多种细胞因子的表达,后者与局部关节软骨的血管形成和免疫复合物损伤相关,疾病的不同时期肯定上述两指标的改变,两者联合检测对判断疾病的进展以及治疗的评估意义.材料与方法1 研究对象选择2009年6月至2011年12月本院住院患者,均经相关检查确诊为类风湿关节炎(RA)患者,男25例,女35例,年龄34 ～ 56岁,平均年龄45.0±3.2岁;病程4～9年,根据病程分为活动期组30例,稳定期组30例.对照组选择健康人群30名,男13名,女17名,年龄32 ～ 59岁,平均年龄51.0±2.7岁,无心、肝、肾、内分泌及代谢性疾病.
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IL-8对肺癌NCI-H157细胞增殖和迁移的影响
目的 研究IL-8对肺癌细胞增殖和迁移的影响,初步探讨IL-8调控肺癌细胞的分子机制.方法 体外培养肺癌NCI-H157细胞,用不同浓度的IL-8刺激肺癌细胞,分别用MTT法检测IL-8对肺癌细胞的增殖作用;划痕损伤实验和Transwdl小室两种方法检测肺癌细胞的迁移能力;Western blot检测Rac1和Cdc 42蛋白的表达变化.结果 IL-8促进NCI-H157细胞增殖,但随浓度增加,细胞增殖活性差异无统计学意义;细胞划痕损伤和Transwell实验均表明IL-8可诱导NCI-H157细胞迁移,且具有浓度依赖性;Western blot结果显示,随着IL-8浓度增加,Rac1和Cdc 42的表达水平逐渐升高,以Cdc42变化为显著.结论 IL-8可促进肺癌细胞增殖和迁移,可能与Rac1和Cdc42表达有关.
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大鼠主动脉血管内皮细胞受刺激后IL-8的产生
为了研究内毒素及炎症因子对血管内皮细胞分泌IL-8的影响,分别用内毒素、IL-1、TNFα刺激体外培养的Wister大鼠主动脉内皮细胞,并用放射免疫分析检测IL-8的含量.经内毒素、IL-1、TNFα刺激后,内皮细胞体外培养液内IL-8的分泌量分别为:3.1±0.6, 6.8±1.2, 5.8±1.6;空白对照为0.6±0.3,单位为ng/mL.内毒素、IL-1、TNFα能促进内皮细胞分泌IL-8,内皮细胞在机体炎症过程中起重要作用.
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过敏原引起的人皮肤晚期反应样本中白细胞介素6和8 mRNA的表达
采用原位杂交技术,测定白细胞介素-6(IL6)和白细胞介素-8(IL-8)mRNA在变应原诱导的皮肤晚期反应标本中的表达.14例标本中,两种细胞因子表达的阳性率分别为12/14和13/14.与相应对照比较,变应原攻击标本中表达上述细胞因子mRNA的阳性细胞数明显增加(P＜0.01).
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髓过氧化物酶、CD11b和IL-8在哮喘大鼠模型中表达增加
目的观察哮喘模型大鼠中性粒细胞(PMN)CD11b、IL-8和髓过氧化物酶(MPO)的表达,探讨PMN在哮喘中的作用及其可能的机制.方法复制哮喘大鼠模型,随机分成哮喘组和对照组,分离纯化血PMN;免疫组化法检测MPO表达,ELISA法测定IL-8蛋白,流式细胞术测定血PMN CD11b表达,支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞计数.结果哮喘组肺组织和血PMN中MPO、CD11b及血PMN和BALF中IL-8的水平显著高于对照组(P＜0.01).哮喘组BALF中PMN和嗜酸性粒细胞计数显著高于对照组(P＜0.01).结论BALF中PMN数量增加及血中PMN和肺组织中CD11b、IL-8和MPO在哮喘时表达增加,他们可能参与了哮喘的炎症过程.
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microRNA与炎症因子之间调控的研究进展
microRNA是一类非编码单链RNA,通过裂解互补的mRNA或抑制mRNA翻译在转录后水平调控基因的表达.研究表明,microRNA不仅可以调节IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达,并且反过来也可以被这些炎症因子调控,形成复杂的信号通路网,发挥重要的生物学作用.本文总结了近年来microRNA与IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子相互作用的研究进展,以及它们对免疫、炎症反应和癌症等疾病的影响,以期能为相关疾病的研究、诊断、治疗提供新思路.
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G-CSF在恶性淋巴瘤患者体内诱导ENA-78和IL-8的作用研究
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可以刺激化疗诱导的中性粒细胞减少症患者恢复中性粒细胞计数,并在体外刺激其产生上皮来源的嗜中性粒细胞趋化蛋白-78(ENA-78)和白细胞介素8(IL-8)等趋化因子.本研究旨在探讨G-CSF在体内是否也有类似作用.研究对象为10例接受化疗及G-CSF治疗的淋巴瘤患者,分别在以下时间段采集外周血:化疗前,标记为Time Point (TP1);接受G-CSF治疗前的中性粒细胞减少阶段,标记为TP2;接受G-CSF治疗后的中性粒细胞恢复阶段,标记为TP3.采用实时定量PCR检测中性粒细胞内ENA-78和IL-8的mRNA含量,流式细胞术检测其吞噬功能及产生的活性氧(ROS).结果表明,在TP2阶段,ENA-78 mRNA表达升高者5例,IL-8 mRNA表达升高者8例;在TP3阶段,ENA-78 mRNA表达升高者3例,降低者6例,IL-8 mRNA表达降低者7例.结论:中性粒细胞内ENA-78和IL-8的表达升高在化疗后中性粒细胞减少的患者体内较常见,而G-CSF干预对其升高无明显作用.
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骨髓间充质干细胞与K562细胞共培养对IL-8表达的影响
为了探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)与白血病细胞共培养后对血管生成因子IL-8表达的影响,本研究建立了MSC和K562细胞的共培养体系,包括直接接触和MSC条件培养液,应用RT-PCR方法检测MSC和K562细胞IL-8 mRNA的表达.结果显示,与MSC直接接触和经MSC条件培养液作用后,K562细胞IL-8的表达均明显高于K562细胞单独培养组(p＜0.01).与K562细胞共培养的MSC,其IL-8的表达亦明显高于单独培养的MSC(p＜0.01).结论:MSC与K562细胞通过直接接触和某些细胞因子相互作用可促进血管生成因子IL-8的表达.
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急性移植物抗宿主病病人血清IL-2、IL-8、IL-10及TNF-α水平变化的研究
为了探讨细胞因子IL-2、TNF-α、IL-10、IL-8在异基因造血干细胞移植后aGVHD发病中的作用,观察33例Allo-HSCT患者aGVHD的发病情况. aGVHD的诊断主要依据临床表现,部分病例还依据皮肤、肠粘膜活检的病理学变化.移植前后定期采集患者血清,采用放射免疫法检测细胞因子IL-2、TNF-α、IL-10、IL-8的浓度的变化.结果发现,异基因造血干细胞移植后33例患者均获得造血功能重建,13例发生aGVHD ,其中8例Ⅰ度aGVHD,5例Ⅱ-Ⅳ度aGVHD.IL-2、TNF-α水平在aGVHD阳性组明显高于aGVHD阴性组,而IL-10的水平在aGVHD阳性组明显低于aGVHD阴性组,IL-8水平的变化无统计学意义.结论: 细胞因子IL-2、TNF-α在临床aGVHD的发病中起重要的正向调节作用,定期检测患者血清的IL-2、TNF-α水平有助于预测aGVHD的发生.
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创伤弧菌溶细胞素融合蛋白对人Caco-2细胞IL-8基因表达和IL-8分泌的影响
目的 研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)对人肠上皮细胞(human intestinalepithelial cell,Caco-2)IL-8基因表达的影响.方法 IPTG诱导、表达、纯化、复性及Western blot鉴定rVvhA表达和纯化情况;CCK-8法检测rVvhA对Caco-2的细胞毒性作用;RT-PCR检测rVvhA诱导Caco-2细胞IL-8基因的表达情况;ELISA检测Caco-2细胞培养上清IL-8的分泌情况.结果 Ni~(2+)-NTA亲和层析柱对rVvhA进行纯化后纯度可达95%以上;CCK-8结果显示rVvhA活性蛋白显著降低了Caco-2细胞的存活率,有效浓度为1.5 HU/ml(P<0.05);RT-PCR结果显示,0.6 HU/ml rVvhA30 minllp可诱导Caco-2细胞IL-8 mRNA基因表达上调;ELISA结果显示,Caco-2细胞经rVvhA作用后,培养液上清中IL-8多肽的表达时相在4 h.RT-PCR与ELISA结果皆显示,IL-8基因的转录及IL-8表达皆具有时间-剂量依赖性.结论 rVvhA在转录水平上能诱导人Caco-2细胞IL-8 mRNA表达,促进IL-8的合成,在创伤弧菌引起的过度炎症反应和败血症的发生、发展中可能具有重要意义.
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PDTC对PV-杀白细胞素(PVL)诱导THP-1巨噬细胞NF-κB活化及炎性因子表达的影响
目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对PV-杀白细胞素(panton-valentine Ieucocidin,PVL)诱导THP-1巨噬细胞NF-κB及炎性因子表达的影响.方法 实验分3组,PBS对照组、rPVL刺激组和PDTC处理组,在加入rPVL刺激前60 min,给予100 μmol/L PDTC预处理THP-1巨噬细胞.采用免疫组化检测NF-κB的移位,Western blot检测细胞胞质IκB蛋白和胞核NF-κB蛋白表达,ELISA法检测细胞上清IL-8和IL-6蛋白的表达,RT-PCR法检测IL-8和IL-6 mRNA水平表达.结果 PDTC处理组NF-κB阳性细胞明显减少,核蛋白表达降低,胞质IκB蛋白降解减少；IL-8和IL-6mRNA表达明显下调,蛋白分泌量分别由12.96 ng/ml和6.55 ng/ml降低到6.78 ng/ml和3.88ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PDTC可能通过抑制NF-κB的活性,从而降低II-8和IL-6的表达,对PVL引起的炎性损伤具有一定的保护作用.
关键词： 杀白细胞素 二硫代氨基甲酸吡咯烷 核因子κB IL-8 IL-6 -
雌激素与IL-6、IL-8在卵巢癌细胞中的调节作用
目的 探讨雌激素与IL-6、IL-8在卵巢癌细胞中的交互调节作用及作用机制.方法 选择兼有雌激素受体(estrogen receptor,ER)及IL-6、IL-8受体表达的卵巢癌细胞系CAOV-3和OVCAR-3作为研究模型,分别探讨17B-雌二醇(estradiol,E2)对IL-6、IL-8及其受体表达的作用以及IL-6、IL-8对EB表达及ER转录活性的作用.结果 一方面E2不仅可经NF-κB途径促进卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌,而且还对二者受体的表达具有一定的调节作用.E2诱导的促IL-6、IL-8分泌作用可被其受体阻断剂他莫昔芬(tamoxifen,Txf)完全阻断.另一方面在无雌激素的条件下,IL-6、IL-8能上调卵巢癌细胞Erα表达及下调ERB表达,且还能分别通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和Src活化增强卵巢癌细胞ER的转录活性,该作用可被Txf完全封闭.结论 雌激素与IL-6、IL-8两种细胞因子在卵巢癌细胞中交互调节,由此通过产生的放大信号通路促进卵巢癌的生长和发展.
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肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3和炎症因子IL-17、IL-8相关性及临床诊断研究
目的 研究肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3与炎症因子IL-17、IL-8的相关性及其在肝癌临床诊断中的应用价值.方法 收集原发性肝细胞癌患者的血清标本,以同期健康体检人员外周血标本作为正常对照.采用ELISA法检测肝癌组和正常对照组血清中sB7-H3、IL-8、IL-17的水平;运用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)统计学分析比较三者对肝癌的诊断效能,logistic回归获得sB7-H3、IL-8、IL-17三者联合诊断的模型预测肝癌.结果 原发性肝癌患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8的含量均明显高于正常对照组.sB7-H3与IL-17呈正相关,但与IL-8不相关.IL-8与IL-17之间呈负相关.ROC分析sB7-H3、IL-17和IL-8预测肝癌的AUC值分别为0.832、0.657和0.953,对诊断肝癌三者差异均有统计学意义.通过Logistic逐步回归得出的回归模型预测肝癌的曲线下面积(area under the curve,AUC)值、敏感度、特异度分别为0.960、91.30%和94.29%均较单独诊断时高.结论 原发性肝细胞癌患者外周血中sB7-H3与IL-17呈正相关,sB7-H3、IL-17和IL-8联合回归模型在肝癌的早期诊断中具有潜在的应用价值.
