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HPLC同时测定灯盏细辛注射液中6种主要成分的含量
目的:建立HPLC同时测定灯盏细辛注射液中绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花乙素、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸含量的方法.方法:Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长327 nm,流速1.0 mL·min-1,进样量20 μL.结果:绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花乙素、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸的线性范围分别为0.079～5.065(r=0.999 9),0.080～ 5.120(r=0.999 9),0.074～4.750(r=0.999 9),0.391～ 25.050(r=0.999 9),0.038～2.423(r=0.999 9),0.487～7.792 mg·L-1(r=0.999 8),加样回收率分别为96.72％(RSD 1.76％),96.64％(RSD 1.69％),101.81％(RSD 1.81％),98.16％(RSD 2.22％),99.02％(RSD 2.57％),97.02％(RSD 1.52％).结论:方法简便、快捷,准确、重复性好,可为灯盏细辛注射液提供质量控制依据.
关键词： 灯盏细辛注射液 绿原酸 咖啡酸 1 3-O-二咖啡酰奎宁酸 灯盏花乙素 3 5-二-O-咖啡酰奎宁酸 4 -
HPLC同时测定灯盏细辛提取物中3种有效成分的含量
目的:建立同时测定灯盏细辛提取物中野黄芩苷,3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,大连依利特C18色谱柱(4.6mm x 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸(22:78),检测波长330 nm,流速1 mL· min-1,柱温35℃.结果:野黄芩苷,3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸分别在0.032 7～1.3080 μg(r=0.9999),0.048 2 ～1.928 0μg(r =0.999 9),0.058 3～2.332 0 μg(r =0.999 8)呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.74％(RSD=1.9％),100.23 ％(RSD=1.4％),99.33 ％(RSD=1.3％).结论:本法简便、快捷,结果准确、重复性好,可用于灯盏细辛提取物中3种有效成分的含量测定.
关键词： 灯盏细辛提取物 野黄芩苷 3 5-二-O-咖啡酰奎宁酸 4-二-O-咖啡酰奎宁酸 含量测定 -
HPLC同时测定灯盏细辛提取物中3种有效成分的含量
目的:建立同时测定灯盏细辛提取物中野黄芩苷,3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,大连依利特C18色谱柱(4.6mm x 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸(22:78),检测波长330 nm,流速1 mL· min-1,柱温35℃.结果:野黄芩苷,3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸分别在0.032 7～1.3080 μg(r=0.9999),0.048 2 ～1.928 0μg(r =0.999 9),0.058 3～2.332 0 μg(r =0.999 8)呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.74％(RSD=1.9％),100.23 ％(RSD=1.4％),99.33 ％(RSD=1.3％).结论:本法简便、快捷,结果准确、重复性好,可用于灯盏细辛提取物中3种有效成分的含量测定.
关键词： 灯盏细辛提取物 野黄芩苷 3 5-二-O-咖啡酰奎宁酸 4-二-O-咖啡酰奎宁酸 含量测定 -
瓜蒌饮片中总糖及还原糖的含量测定
目的:建立瓜蒌饮片中总糖及还原糖的含量测定方法,并进行测定和比较.方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定还原糖的含量.结果:全国15个省市的18批市售瓜蒌饮片中,总糖的含量介于16.17％ ～32.65％,还原糖含量介于3.29％～13.29％.结论:建立的瓜蒌饮片中总糖和还原糖的测定方法简便、准确；优质瓜蒌饮片中的总糖含量＞25％,还原糖含量＞9％;总糖和还原糖含量的高低可以诠释瓜蒌“糖味浓者为佳”的传统观点.
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首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱
目的:建立首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,为其质量控制提供科学依据.方法:采用HPLC方法,测定了不同厂家的15批首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,色谱条件:Waters XBridgeTM shield RP18 C18色谱柱,流动相乙腈-0.1％乙酸水溶液,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长271 nm,进样量15μL.结果:建立了首乌藤配方颗粒的指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”计算处理,通过HPLC指纹图谱分析,确定了首乌藤配方颗粒8个共有峰,并确认6个特征峰,分别为没食子酸,原儿茶酸,儿茶素,2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,大黄素,大黄素甲醚.对照指纹图谱色谱峰丰富,分离度高,匹配确定了主要特征峰,15批首乌藤配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均＞0.86,相似度高,可实现首乌藤配方颗粒化学成分全面和整体的评价,能较好控制首乌藤配方颗粒的质量.结论:该方法简单、准确、重复性好,可以为首乌藤配方颗粒质量控制和评价提供参考.
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野菊不同部位绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定
目的:检测湖南衡阳产野菊不同部位(叶、花、花蕾、嫩茎及老茎)中绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量.方法:以80％的乙醇为溶剂,用超声法提取野菊不同部位中的绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸.采用高效液相色谱法检测绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量,以0.05％磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长327 nm.结果:绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的质量浓度在10～100 mg·L-1(r =0.996,r =0.992)与蜂面积呈良好的线性关系(n=5),平均回收率(n=6)分别为98.5％,99.7％.野菊叶、花、花蕾、嫩茎及老茎中绿原酸的含量分别为1.08％,0.44％,0.39％,0.58％及0.52％；3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量分别为1.66％,1.01％,0.82％,0.93％,0.64％,其中野菊叶中绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量高.结论:野菊不同部位均含有绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸,但它们的含量存在明显差异.
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沼生忍冬藤化学成分及3种成分的含量测定
目的:研究沼生忍冬藤的化学成分并建立HPLC同时测定沼生忍冬不同药用部位中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的方法.方法:采用硅胶、反相硅胶、大孔树脂和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶等多种色谱技术进行分离纯化,并通过理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构.采用HPLC-UV法测定含量,色谱条件:Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ～ 13 min,12％ A;13 ～ 25 min,12％ ～ 22％A;25 ～ 45 min,22％ A),流速1.0 mL·min-1,检测波长327 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:从沼生忍冬藤中分离得到10个化合物,分别鉴定为:3,7-二甲基槲皮素(1),3,3'-二甲基槲皮素(2),槲皮素(3),乌苏酸(4),马钱子苷(5),绿原酸(6),槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷(7),3,4-二咖啡酰奎宁酸(8),3,5-二咖啡酰奎宁酸(9)和4,5-二咖啡酰奎宁酸(10).6,9和10三种成分均能达到基线分离,且线性关系良好,平均加样回收率分别为100.15％,99.68％和99.52％.沼生忍冬中3种成分的含量为花高(3.99％,1.77％,2.33％),叶次之(2.62％,1.73％,0.90％),藤低(0.74％,0.25％,0.15％).结论:化合物1,2和7为首次从忍冬属植物中分离得到,其余化合物均为首次从该植物中分离得到;含量测定方法准确,简便,分离效果好,可用于沼生忍冬中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的测定.
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沼生忍冬藤化学成分及3种成分的含量测定
目的:研究沼生忍冬藤的化学成分并建立HPLC同时测定沼生忍冬不同药用部位中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的方法.方法:采用硅胶、反相硅胶、大孔树脂和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶等多种色谱技术进行分离纯化,并通过理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构.采用HPLC-UV法测定含量,色谱条件:Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ～ 13 min,12％ A;13 ～ 25 min,12％ ～ 22％A;25 ～ 45 min,22％ A),流速1.0 mL·min-1,检测波长327 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:从沼生忍冬藤中分离得到10个化合物,分别鉴定为:3,7-二甲基槲皮素(1),3,3'-二甲基槲皮素(2),槲皮素(3),乌苏酸(4),马钱子苷(5),绿原酸(6),槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷(7),3,4-二咖啡酰奎宁酸(8),3,5-二咖啡酰奎宁酸(9)和4,5-二咖啡酰奎宁酸(10).6,9和10三种成分均能达到基线分离,且线性关系良好,平均加样回收率分别为100.15％,99.68％和99.52％.沼生忍冬中3种成分的含量为花高(3.99％,1.77％,2.33％),叶次之(2.62％,1.73％,0.90％),藤低(0.74％,0.25％,0.15％).结论:化合物1,2和7为首次从忍冬属植物中分离得到,其余化合物均为首次从该植物中分离得到;含量测定方法准确,简便,分离效果好,可用于沼生忍冬中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的测定.
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3,5-二硝基水杨酸法联合苯酚-浓硫酸法测定不同产地黄精中多糖含量
目的:建立一种操作简便,可排除黄精药材本身所含单糖干扰的多糖含量测定方法,建立合理客观地评价黄精药材的质量.方法:联合3,5-二硝基水杨酸法和苯酚-浓硫酸法,通过紫外分光光度法分别测定黄精原药材中还原糖和总糖的含量,取两者之差即为药材中多糖的含量,并从重复性、精密度、稳定性以及加样回收率等方面进行了方法学考察.结果:本方法具有良好的适用性,不同产地的黄精药材多糖含量测定结果表明云南产黄精药材中多糖含量较高.结论:本实验样品处理简单、方法的重复性、精密度、稳定性及加样回收率均符合要求,可用于评价黄精生药材的质量.
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西藏红雪茶多糖含量测定
目的:研究西藏红雪茶多糖含量测定的方法.方法:采用苯酚-硫酸法测定总糖含量,3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定还原糖含量,两者的差值即为多糖含量.结果:总糖标准曲线方程为OD =0.051 4C- 0.0146(r=0.999 2),还原糖标准曲线方程为OD =0.022 9C-0.086(r =0.999 9),两者分别在2.5 ～12.5,8～40 mg·L-1有良好的线性关系.测得LC,LCA,LCP多糖含量分别为63.6％,82.6％,57.6％.结论:该方法操作快速、简便、灵敏、准确、重复性好.
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HPLC波长切换法同时测定牡丹皮中6个成分的含量
目的:建立高效液相色谱波长切换法对牡丹皮中6个成分(没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、丹皮酚、苯甲酰芍药苷)进行分析.方法:采用Phenomsil ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1％磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长为267nm(0～20 min没食子酸)、258nm(20～30min氧化芍药苷)、230nm(30 ～50min,芍药苷)、274nm(50～80 min 1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、丹皮酚)、230nm(80～90min苯甲酰芍药苷),柱温30℃.结果:牡丹皮中6个成分没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、丹皮酚、苯甲酰芍药苷进样量分别在0.109 4～1.094 μg(r =0.9995),0.034 86～0.348 6μg(r=0.9995),0.212 4～2.124μg(r=0.9991),0.214 5～2.145μg(r =0.9996),0.323 5～3.235μg(r=0.9994),0.075 84～0.758 4μg(r =0.9993)与峰面积呈良好线性关系；平均回收率(n=6)分别为98.7％,98.8％,99.7％,98.3％,98.9％,99.2％.结论:该方法准确可靠、重复性好,可用于牡丹皮的质量控制.
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石草鞋化学成分分离鉴定
目的:研究石草鞋乙醇提取物的化学成分,对石草鞋全草进行分离鉴定.方法:取石草鞋全草,用90％乙醇回流提取,经低压浓缩后得石草鞋浸膏.将上述浸膏加水超声溶解后依次用石油醚、二氯甲烷和正丁醇萃取.将所得正丁醇部分萃取物过硅胶色谱柱,以石油醚-丙酮-甲醇(80∶20∶0 ～0∶20∶80)系统梯度洗脱,经过结晶、重结晶、离心分离、过硅胶和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)纯化.将二氯甲烷萃取物以石油醚-丙酮-甲醇(50∶50∶0)系统梯度洗脱,合并相同组分,再经过离心分离、硅胶和葡聚糖Sephadex LH-20等反复分离、纯化.根据ESI-MS,1H-NMR和13C-NMR等波谱数据分析鉴定结构.结果:从石草鞋乙醇提取物正丁醇部分中鉴定了7化合物,二氯甲烷部分中鉴定了8化合物.分别鉴定为对羟基苯甲醛(1),3,5-二甲氧基4-羟基苯甲酸(2),苯甲酸(3),桂皮酸(4),丹皮酚(5),槲皮素(6),6,7-二羟基香豆素(7),阿魏酸(8),对羟基苯甲酸(9),2,3-二羟基苯甲酸(10),3,4-二羟基苯甲酸(11),齐墩果酸(12),金丝桃苷(13),没食子酸(14),β-谷甾醇(15).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到.
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湖北麦冬地下部分化学成分
目的:研究百合科山麦冬属植物湖北麦冬Liriope spicata var.prolifera地下部分的化学成分,进一步丰富该植物的化学信息并为其开发和利用提供理论指导.方法:采用60％乙醇对湖北麦冬地下部分进行提取,综合利用大孔吸附树脂,正、反向硅胶,小孔树脂(MCI)及葡聚糖凝胶等柱色谱法对提取物进行分离和纯化,并根据化合物的理化性质及谱学数据鉴定其结构.结果:从湖北麦冬地下部分共分离并鉴定了12个化合物,其中包括4个黄酮类成分(化合物1～4),4个酚类及苯甲酸类衍生物(化合物5～8),2个酰胺类生物碱(化合物9,10)及2个其他类成分(化合物11,12).分别鉴定为2',4,4'-三羟基查耳酮(1),木犀草素(2),槲皮苷(3),3,5-dihydroxy-7-methoxy-6-methyl-3-(4-hydroxybenzyl) chroman-4-one (4),2,6-二甲氧基-4-硝基苯酚(5),烯丙基焦儿茶酚(6),3,4-dihydroxyallylbenzene 4-O-[α-L-rhamnopyranosyl(1→6)]-β-D-glucopyranoside(7),丁香酸(8),E-阿魏酰酪胺(9),反式对羟基桂皮酸(10),(1S,4S,5R,6R,7S,10S)-1,4,6-trihydroxyeudesmane-6-O-β-D-glucopyranoside(11)和5-羟甲基糠醛(12).结论:其中化合物1～3,5～8及化合物10～12均为首次从山麦冬属植物中分离得到,化合物4和9为首次从该植物中分离得到.
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培元通脑胶囊质量标准研究
目的:建立培元通脑胶囊的质量标准.方法:采用薄层色谱法对培元通脑胶囊中何首乌、肉桂、赤芍及肉苁蓉进行定性鉴别；HPLC测定何首乌中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量.色谱条件:Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(15:85),流速1.0 mL·min-1.结果:TLC的斑点清晰、分离度较好,阴性无干扰；2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷在0.0645～0.805 9μg线性关系良好,平均回收率为99.4％,RSD 2.2％(n=6).结论:所建标准可用于培元通脑胶囊的质量控制.
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鸡眼睛正丁醇部位化学成分
目的:了解鸡眼睛Euscaphis japonica正丁醇萃取部位的化学成分.方法:采用MCI柱色谱、C18反相硅胶柱色谱、半制备高效液相色谱等进行化合物的分离和纯化,根据化合物理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果:从鸡眼睛乙醇提取物正丁醇部位分离得到7个化合物,分别鉴定为corchoionoside C(1)、鞣花酸(2)、junipetrioloside A(3)、3,3’-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷(4)、3,3’-二甲氧基鞣花酸4’-O-α-D-阿拉伯糖苷(5)、3,3’-二甲氧基鞣花酸4’-O-β-D-木糖苷(6)和3,3’-二甲氧基鞣花酸(7).结论:以上化合物均为首次从该属植物中分离得到.
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白芍饮片炒制前后物质基础的变化规律分析
目的:基于HPLC特征图谱和主要成分的含量测定探讨白芍炒制前后饮片物质基础的变化规律.方法:采用RP-HPLC,选择ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(0～5 min,5％～9％A;5 ～25 min,9％～17％A;25～30 min,17％ ～22％ A;30～35 min,22％A;35～50 min,22％ ～40％A;50～60 min,40％ A),流速1.0mL·min-1,柱温30 ℃,进样量10μL,检测波长254 nm,建立白芍及炒白芍饮片特征图谱表征方法;同时对没食子酸等6种成分进行定量分析(检测波长230 nm).以乙腈-0.05％磷酸水溶液(18:82)为流动相等度洗脱,同时测定1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖与苯甲酸的含量.结果:白芍与炒白芍饮片特征图谱中均标示出12个特征峰,并归属了其中8个特征峰.白芍炒制后单萜苷类成分芍药苷与芍药内酯苷质量分数分别降低了6％和7％,鞣质类成分含量显著增加,没食子酸和1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖、苯甲酸的质量分数分别增加了28％,26％,53％,其余成分的含量均无明显变化.结论:白芍炒制前后特征图谱及主要成分含量均有一定差异,本文所建立的特征图谱及含量测定方法为白芍和炒白芍饮片质量评价标准的制定提供了参考,为进一步完善二者的质量评价体系奠定了基础.
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首乌藤药材质量标准的研究
目的:建立首乌藤药材的质量标准.方法:采用TLC法对首乌藤药材进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量.结果:在TLC色谱中首乌藤斑点清晰;2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.0309～1.54μg范围呈良好的线性关系,r=0.99965:平均回收率为95.5%,RSD=3.2%.结论:所建立的方法可准确地进行定性、定量检测,可用于首乌藤药材的质量控制.
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安眠补脑糖浆中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定
目的:建立安眠补脑糖浆中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法.方法:HPLC法,流动相:乙睛-水(21∶79);检测波长:320 nm.结果:2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围为(25.70～179.90)μg,平均回收率为97.5%,RSD为1.6%.结论:方法简便可靠,可有效地控制安眠补脑糖浆的质量.
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斑秃生发颗粒质量标准的研究
目的:建立斑秃生发颗粒的质量标准.方法:用HPLC法对斑秃生发颗粒中主要成分2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D葡萄糖苷进行含量测定,流动相为乙腈-3%冰乙酸水(12:88),检测波长320nm.同时对制剂中的主要药味黄芪、何首乌、当归、羌活进行薄层鉴别.结果:平均加样回收率为99.33%,RSD=1.74%(n=6).薄层图谱斑点清晰,阴形对照无干扰.结论:本方法可靠准确、重现性好,可有效控制制剂的质量.
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UPLC-MS/MS分析瓜蒌子中3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇在大鼠体内的组织分布情况
目的:探讨瓜蒌子的有效成分3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇口服给药后在大鼠体内的组织分布情况.方法:取健康SD雄性大鼠,灌胃给药后分别于时间点0.5,1,3,6h取大鼠的胃、心、肝、脾、肺、肾组织,将组织匀浆及预处理.采用ZORBAX C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5 μm),流动相含0.1％甲酸的10 mmol·L-1乙酸铵溶液(A)-甲醇(B)梯度洗脱(0～0.01 min,50％ A;0.01 ～1.0 min,50％ ～ 2％A;1.0～4.0 min,2％A;4.0～4.1 min,2％～50％A;4.1～5.0 min,50％A),流速0.5 mL～min-1,进样量10 μL,选择电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行正离子模式检测,用于定量分析二级碎片离子分别为m/z 684.7 ～ 527.6(3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇)和m/z 472.4 ～ 436.4(特非那定).结果:大鼠灌胃给药3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇后,在肺组织中0.5h时药物质量分数达峰值,在心、肝、脾、肾中1.0h时药物质量分数达峰值,而胃中在3.0h时药物质量分数达峰值.胃和肺中药物分布较大,在胃中3.0h时药物质量分数达大值(405.8±114.8) ng·g-1;药物在肺中的分布速度快,0.5h时即可达到峰值(338.8 ±85.5) ng·g-1,在心、肝、脾和肾脏的分布较低,6h时各脏器的药物质量分数已显著降低.结论:大鼠灌胃给予3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇后,能分布到各脏器组织,其中在胃和肺分布的浓度较高,且在3h后仍能保持较高水平,而在心、肝、脾、肾分布浓度相对较低,这可能与该成分本身性质和作用特点有关.
