许钟麟两个新应用的洁净技术

"就世界空气洁净技术领域学术专著而言,自1965年美国Austin等的<洁净室的设计与运行>,1981年日本空气清净协会的<空气清净手册>等专著问世后,虽年年有不少论文发表于国际国内会议及期刊上,但像许钟麟<空气洁净技术原理>这样的学术专著,则未曾有过,这是中国人的骄傲."

藻毒素对fos、jun基因表达及细胞周期的影响

目的研究藻毒素对c-fos、c-jun表达及细胞周期的影响,探讨其可能的致癌机制.方法将经色谱柱纯化的微囊藻毒素样品加入到SHE细胞培养体系中,用免疫组化方法分别于第1、3、6 h观察细胞c-fos 和c-jun蛋白表达,并用流式细胞仪分别检测细胞在第6、12、24 h不同时相的周期改变情况.结果微囊藻毒素可以诱导c-fos和c-jun持续高表达,6 h后增高至5～6倍,具有明显的剂量反应关系;同时,藻毒素尚能介导G0/G1期细胞进入分裂状态,S、G2/M期细胞比例明显增加,24 h后有44.9%细胞进入S期.结论诱导细胞c-jun和c-fos异常表达并引起细胞过度增殖是微囊藻毒素可能的促癌机制之一.

c-Fos,c-Jun与Bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨c-Fos,c-Jun,Bcl-2在胃癌中的表达与胃癌的发生、发展及生物学行为的关系.方法:应用免疫组织化学SABC法,检测54例胃癌及癌旁组织中c-Fos,c-Jun,Bcl-2蛋白的表达,结果采用SPSS统计软件包及χ2检验分析.结果:胃癌组织中c-Fos,c-Jun,Bcl-2的表达显著高于癌旁组织(68.5% vs 27.8%,χ2=17.95,P＜0.01;63.0% vs 24.1%,χ2=16.61,P＜0.01;64.8% vs 25.9%,χ2=16.48,P＜0.01).c-Fos,c-Jun的表达在胃癌不同组织学分级间有显著性差异(P=0.018;P=0.032),在淋巴结转移、TNM分期间无显著性差异;Bcl-2的表达在胃癌不同组织学分级、淋巴结转移、TNM分期间有显著性差异(P=0.035;P=0.032;P=0,009).胃癌及癌旁组织中Bcl-2与c-Fos、c-Jun (r=0.336,0.688,P＜0.05;r=0.318,0.512,P＜0.05)及c-Fos与c-Jun(r=0.719,0.586,P＜0.001)之间的表达呈正相关.结论:c-Fos,c-Jun,Bcl-2的表达与胃癌的发生、发展以及组织学分级密切相关.

肺癌合并多发血栓患者抗凝治疗1例

Case presentationThe patient,a 60-year-old male,was admitted to the Chinese PLA General Hospital on Jun 1,2009,because of"cough,dyspnea and left chest pain for 2 months".He was diagnosed as poorly differentiated adenocarcinoma of left lung,with pleural and mediastinal lymph nodes,and bony metastasis.Chemotherapy was administered through retained peripherally inserted central catheters(PICC)at left brachiocephalic artery.On June 22,2009,the patient developed left upper limb edema.Ultrasoundexamination displayed venous thrombosis from ulnar vein to subclavian vein.

有丝分裂蛋白激酶及其上游调节信号在人肝癌组织中的表达

目的探讨有丝分裂原蛋白激酶(MAPK)通路在调控细胞的增殖和凋亡过程中所起到的作用.方法手术切除16份肝癌及癌旁组织标本,Western印迹检测ERK1、ERK2、JNK1、p38和MEK1、MEK2的蛋白含量.结果在本组的16例患者中,每例患者肝癌组织中的ERK1、ERK2、JNK1、p38蛋白表达显著高于癌旁组织,ERK1积分光密度值(Integral optic density IOD)在肝癌和癌旁组织中分别为300±98和98±48,差异有显著意义(P＜0.01).ERK2的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为587±83和232±96,差异有显著意义(P＜0.01);p38的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为270±85和107±88,差异有显著意义(P＜0.01);肝癌组织中的JNK1蛋白表达显著低于癌旁组织;JNK1的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为111±93和292±109,差异有显著意义(P＜0.01);MEK1、MEK2蛋白表达显著高于癌旁组织,MEK1的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为1418±244和806±90,差异有显著意义(P＜0.01),MEK2的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为1041±122和468±40,差异有显著意义(P＜0.05).结论在肝癌组织中细胞分裂增殖的信号传导通路ERK1、ERK2、MEK1、MEK2激酶处于高表达,JNK1激酶在肝癌组织中处于低表达,它们的失衡导致肝癌细胞生长失控和无限增殖的重要原因之一.JNK1和p38在肝癌组织中可能存在不同的激活途径.

孕激素对成骨细胞增殖和分化的影响

目的观察孕酮和左炔诺孕酮对正常妇女成骨细胞和成骨肉瘤MG-63细胞增殖和分化的影响.方法采用四甲基偶氮唑蓝法,检测应用不同浓度孕酮及左炔诺孕酮刺激上述两种成骨细胞增殖的情况;并采用半定量RT-PCR及免疫组化法,测定c-fos、c-jun基因及其蛋白和骨钙素mRNA表达.结果以浓度为0 mol/L 的孕酮和左炔诺孕酮为对照,10-10、 10-8、10-6 mol/L孕酮分别增加人成骨细胞及MG-63细胞增殖达9.8%、23.0%、32.8%及7.8% 、15.6%、21.8%;10-10 、 10-8、10-6 mol/L 左炔诺孕酮分别增加人成骨细胞及MG-63细胞增殖达12.5%、21.9% 、32.8%及9.6%、14.4%、23.0%;孕酮及左炔诺孕酮促进两种成骨细胞c-fos、c-jun基因及其蛋白的表达,表达呈剂量依赖性;10-10 、10-8、10-6 mol/L孕酮和左炔诺孕酮增加人成骨细胞骨钙素mRNA表达分别为12.2%、23.7% 、45.5%及18.6%、32.1%、60.3%;孕酮和左炔诺孕酮对MG-63细胞骨钙素mRNA的表达无影响.结论孕酮和左炔诺孕酮可刺激成骨细胞增殖,增加c-fos、c-jun基因及其蛋白的表达,促进骨钙素mRNA的表达.

胃管状腺癌组织中Fos和Jun蛋白表达及临床意义

目的:检测Fos和Jun在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌的发生、发展及生物学行为的关系.方法:应用免疫组织化学SABC法检测54例胃癌及癌旁组织中Fos和Jun基因蛋白的表达.数据采用SPSS统计软件包及χ2检验分析.结果:c-Fos和c-Jun在胃癌及癌旁组织中的阳性表达率分别为68.5%、27.8%和63.0%、24.1%;c-Fos和c-Jun的表达在胃癌不同组织学分级间差异有统计学意义(χ2分别为8.101和6.742;P分别为0.018和0.032),在淋巴结转移和TNM分期间差异无统计学意义(χ2分别为1.534、1.342和0.055、0.499;P分别为0.219、0.266和0.832、0.492);胃癌及癌旁组织中c-Fos与c-Jun之间的表达呈正相关.结论:c-Fos和c-Jun基因蛋白表达变化发生在肿瘤细胞形态变化之前,可作为胃癌早期诊断的分子病理学指标.

预处理对缺血再灌注心肌细胞即刻早期基因c-fos、c-jun表达的调控

为探讨即刻早期基因在预处理中的作用机制,将培养心肌细胞分别经短暂缺血及佛波酯、去甲肾上腺素、腺苷预处理,行模拟缺血再灌注,采用Northern杂交技术对心肌细胞c-fos、c-jun mRNA含量进行检测.结果发现,缺血预处理组c-fos、c-jun mRNA明显上升,其他药物预处理组c-fos、c-jun基因均有不同程度的表达增强,H7能明显抑制预处理对c-fos、c-jun mRNA的诱导.表明预处理可能通过激活PKC,进而诱导c-fos、c-jun基因的转录表达增强,PKC可能在缺血预处理中起着关键的作用.

双膦酸盐对NFATc1及相关因子p-NF-κB、p-c-Jun在破骨细胞分化过程中的影响

目的 研究双膦酸盐(ALN)对破骨细胞(OC)分化过程中关键因子NFATc1及其信号分子p-NF-κB、p-c-Jun的影响.方法 采用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养OC,细胞培养于培养皿,分A组(对照组)、B组(ALN组).培养第2d采用Western blotting检测NFATc1、p-NF-κB、p-c-Jun基因表达变化情况,培养第4d采用免疫荧光方法检测NFATc1表达,培养第7d检测各组OC生成及数目.采用牙本质磨片接种RAW264.7细胞,分组及处理方法同上述培养皿培养过程,第9d检测骨吸收功能.结果 两组细胞均有TRAP阳性多核OC生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但A组TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于B组.免疫荧光检测NFATc1表达A组高于B组;Westernblotting检测NFATc1、p-NF-κB、p-c-Jun表达B组较A组低,两组有显著性差异(p＜0.01).结论 双膦酸盐通过下调p-NF-κB、p-c-Jun的表达,终抑制NFATc1的表达,从而抑制OC生成和骨吸收功能.

重复持续性+Gz暴露对大鼠肝组织的损伤及机制研究

目的 探讨不同正加速度(+Gz)对大鼠肝脏组织的损伤作用及其可能的机制.方法 健康成年雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组及+2Gz、+6Gz、+10Gz组(n=6).对照组固定于离心机转臂上,俯卧位,头向轴心,5min;+2Gz组、+6Gz组、+10Gz组固定方法同对照组,+Gz增长率1G/s,峰值时间3min,间隔30min,重复5次.+Gz暴露结束后30min处死大鼠,HE染色观察肝组织形态学变化,荧光实时定量PCR检测肝组织c-jun基因mRNA的表达,Western blotting检测肝组织p-c-Jun、c-Jun、p-JNK及JNK蛋白的表达,并测定血清天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平.结果 与对照组及+2Gz组比较,+6Gz组、+10Gz组血清ALT和AST水平明显升高,且+10Gz组明显高于+6Gz组(P＜0.05).与对照组及+2Gz组比较,+6Gz组、+10Gz组c-Jun mRNA及c-Jun、p-c-Jun、p-JNK蛋白表达明显升高,且+10Gz组明显高于+6Gz组(P＜0.05).与对照组比较,其他各组JNK蛋白表达无变化(P＞0.0S).HE染色显示,+6Gz、+10Gz组肝细胞排列紊乱,形态不规则,细胞间隙不清晰,空泡样改变,且+10Gz组较+6Gz组更为显著.结论 重复持续性+Gz可导致肝脏细胞损伤,肝组织中c-Jun/p-c-Jun以及p-JNK表达增强,JNK/c-Jun信号通路可能在其中起重要作用.

基于MS2衣壳蛋白系统的活细胞内Jun mRNA定位初探

目的 检测细胞中Jun mRNA在活细胞内的定位.方法 设计引物,构建融合MS2茎环结构串联重复的Jun表达载体(pcDNA3.1-Jun-MS2-48X).转染细胞后,绿色荧光蛋白(GFP)-MS2融合蛋白可与MS2茎环串联重复结构结合,通过荧光显微镜观察GFP的细胞定位,能够间接确定Jun mRNA在细胞内的定位.结果 成功构建了pcDNA3.1-Jun-MS2-48X表达载体,经荧光显微镜观察,能够看到明显的绿色荧光,并且在细胞内聚集.结论 实现了在细胞内实时观察Jun mRNA,为在单细胞水平上Jun mRNA的定位提供了新的技术方法.

高+Gx环境对猴咬肌肌细胞c-jun表达影响的研究

目的 观察高+Gx环境对猴咬肌组织病理学及c-jun表达的影响. 方法以9只雄性猕猴为对象,按受试猴暴露的+Gx环境及持续时间随机分4组,对照组为+1 Gx/300 s;实验组为3组,分别为+15 Gx/200 s、+18 Gx/165 s、+21 Gx/140 s.采用病理学和免疫组织化学方法,观察模拟高正加速度环境下猴咬肌肌细胞组织及c-jun表达的变化. 结果组织病理学观察:对照组猴咬肌肌细胞无明显变化;实验组肌细胞结构趋紊乱,偶见少量间质出血.免疫组织化学观察:对照组咬肌肌细胞c-jun呈阴性或弱阳性表达,主要位于肌细胞核,胞质着色不明显;实验组咬肌细胞核c-jun着色明显,呈强阳性表达,不同高+Gx暴露组之间无明显差别. 结论高于+15 Gx的模拟环境可引起猴咬肌肌细胞c-jun表达增强.

"患者的信任支撑我一路前行"——访宜昌市中心人民医院院长杨俊

1983年毕业于武汉医学院的杨俊,放弃了留武汉上北京的机会,满怀一颗对家乡百姓的赤子之心来到宜昌市中心人民医院.从一名默默无闻的内科医生到当地知名的心血管病专家,再到统领全局的医院院长,这一干就是26年.作为渝东鄂西大的一家三级甲等医院的领航人,从杨俊身上感受更深的是他的谦逊和睿智.他说: "宜昌市中心人民医院能够有今天的发展成就,靠的是几代中心医院人的共同努力,我一定要把前辈留下的精神财富继承发扬好."

Xenobiotic effects in cancer related pathways-high throughput screening and proof of concept in animal models

百草枯致大鼠急性肺损伤时肺组织c-Jun氨基末端激酶和c-Jun的变化

目的 探讨百草枯(paraquat,PQ)致大鼠急性肺损伤时肺组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)和c-Jun的变化.方法 将46只大鼠随机分为对照组(10只)、PQ组、PQ+锌原卟啉(ZnPP)组和PQ+氯血红素(Hm)组(每组各12只).PQ组大鼠腹腔注入PQ(25 mg/ks)制造PQ中毒模型;对照组大鼠腹腔注入等量生理盐水;PQ+ZnPP组大鼠在注入PQ前10min注入ZnPP(10mg/kg,10ms/ml);PQ+Hm组大鼠在注入PQ前10min注入Hm(10mg/kg,10mg/ml).不同处理后3 d,取肺组织常规HE染色和取血测定血浆中丙二醛(MDA)含量;检测肺组织中CO含量;反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织血红素氧合酶.1(HO-1)mRNA的表达;Western免疫印迹分析肺组织JNK和c-Jan磷酸化的情况.结果 PQ组、PQ+ZnPP组和PQ+Hm组血浆中MDA含量、肺组织中CO含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),与PQ+ZnPP组比较,PQ+Hm组MDA含量降低,而肺组织中CO含量明显升高,差异均有统计学意义(P0＜.01). PQ组、PQ+ZnPP组和PQ+Hm组的肺组织HO-1mRNA表达、JNK(55.24±9.34、38.15±10.71、128.55±19.43)及c-Jun(23.16±4.85、15.49±3.13、44.89±10.37)磷酸化相对水平较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01),PQ+Hm组肺组织的HO-1mRNA表达明显高于PQ组,PQ+Hm组JNK及c-Jun磷酸化水平高于PQ组和PQ+ZnPP组,而PQ+ZnPP组JNK及c-Jun磷酸化水平与PQ组相比又有所降低,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 在PQ致大鼠急性肺损伤时,内源性CO产生增加.肺组织中JNK和c-Jan的磷酸化水平明显升高.

缺氧/复氧对培养的大鼠海马神经元Fos、Jun表达和神经元凋亡的影响

目的:观察缺氧/复氧对体外培养的海马神经元Fos和Jun 表达和神经元凋亡的影响.方法: 取培养12 d的海马神经元,置于2 000 cm3的恒温(36℃)密闭容器内,连续充以无氧气体(90%N2、10%CO2), 在缺氧条件下继续培养 2、4 h 后取出,置含10% CO2和空气的培养箱内复氧培养24 h和72 h.于不同时间取出, 观察神经元存活数, 分别用抗Fos和抗Jun抗血清进行免疫组织化学染色,计数Fos 和Jun表达阳性神经元百分率,并用原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别观察和测定缺氧/复氧对体外培养海马神经元凋亡的影响.结果:缺氧/复氧后Fos和Jun表达阳性神经元百分率和凋亡神经元百分率均显著增加.结论:缺氧/复氧后即早反应基因fos 在神经元中的持续表达可引起神经元凋亡, 原癌基因jun的表达与神经元凋亡的发生有关.

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和Jun基因表达的影响

目的: 观察低氧预处理对缺氧/复氧后大鼠海马神经元Jun表达的影响. 方法:取培养12d 的两组(对照组和低氧预处理组)神经元, 同时置于缺氧环境(0.90L/LN2+0.10L/LCO2)中培养4 h 后取出,置含0.10L/LCO2 和空气的培养箱内复氧培养24 h和72 h,于不同时间取出,观察神经元存活数,并用抗Jun抗血清进行免疫组织化学染色,观察Jun表达阳性和阴性神经元数目,计算Jun表达神经元所占百分率.结果:经低氧预处理的海马神经元缺氧-复氧后Jun表达阳性神经元百分率较对照组明显减少,神经元存活数明显高于对照组.结论:低氧预处理可使海马培养神经元对缺氧产生耐受,减少缺氧-复氧后神经元Jun的表达.提高神经元存活数.

机械通气对大鼠肺组织早期生长因子-1、C-jun和白介素-1β表达的影响

目的探讨机械通气对大鼠肺组织早期生长因子-1(Egr-1)、C-jun和白介素-1β表达的影响.方法清洁级雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(A组)和机械通气30、60、90、120 min组(B、C、D、E组),每组8只.腹腔注射3%戊巴比妥35 mg/kg麻醉后,行气管切开置管,B～E组采用小动物呼吸机行机械通气,潮气量42ml/kg,呼吸频率40次/min,吸呼比为1:2.吸入氧浓度为21%,A组气管切开置管不做机械通气.分别以RT-PCR、免疫组化和HE染色方法测定肺组织Egr-1、C-jun和IL-1β的mRNA和蛋白表达,并观察肺组织病理学变化,同时行动脉血气分析.结果与A组比较,C组Egr-1、C-jun的mRNA和蛋白表达增加,D、E组Egr-1、C-jun、IL-1β的mRNA和蛋白表达均增加(P＜0.05).与B、C组比较,D、E组上述三种mRNA及蛋白表达均增加(P＜0.05或0.01),且E组上述三种蛋白表达高于D组(P＜0.05).光镜下A、B组肺泡结构未见异常,C组肺泡腔内略有渗出、血管周围有少量炎症细胞;D、E组上述病理改变加重且E组更严重.结论机械通气60 min可诱发肺组织Egr-1、IL-1β和C-jun表达上调,且随通气时间的延长、肺病理性损伤的加重,其表达量也在增加.

直流电刺激对鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元凋亡相关基因表达的影响

背景:周围神经损伤能致脊髓神经元的凋亡,严重影响神经修复后功能的恢复.电刺激能有效促进神经的再生,但对神经元凋亡的影响研究较少.目的:观察直流电场对鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元bcl-2,bcl-X/L,bax及c-jun表达的作用,探讨电刺激对预防细胞凋亡的机制.设计:采用随机对照实验研究.地点和对象:实验在上海同济大学附属铁路医院骨科完成,对象为雄性SD大鼠30只,6周龄,体质量180～220 g.干预:将雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组15只大鼠.用10g/L硫喷妥钠(5 mg/100g)腹腔麻醉后,在大鼠右侧臀肌间隙显露坐骨神经,距梨状肌下缘0.5 cm处将坐骨神经切断,近端以5-0尼龙线作双重结扎,远端切除1 cm后埋入股二头肌中,关闭切口.沿棘突后方正中切口,在T1o～L3右侧椎板及棘突间钝性剥离骶棘肌,切除椎板,将电刺激器阳性盘状电极板置入T10椎板下硬膜囊之腹侧,阴性盘状电极板置入L3椎板上硬膜囊背侧,对照组置入无输出电流的刺激器,分批于术后1,4,7,14,28 d取材.实验操作由同一组人员完成.主要观察指标:脊髓bcl-2,bcl-X/L,bax及c-jun的阳性运动神经元数.结果:坐骨神经切断后4,7,14 d,电刺激组脊髓运动神经元bcl-2阳性数分别为(28.67±1.53),(34.67±1.53),(41.33±1.53)个;bcl-X/L阳性数分别为(23.00±4.36),(32.67±2.52),(44.33±2.08)个,均高于对照组相应阳性数(19.67±1.53),(25.67±2.08),(33.67±1.53);(15.33±0.58),(36.33±2.52),(33.00±4.36).坐骨神经切断后4,7,14,28d,电刺激脊髓运动神经元bax阳性数均低于对照组,坐骨神经切断后7,14,28 d,电刺激脊髓运动神经元c-jun阳性数均少于对照组.结论:直流电刺激对鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元bcl-2,bcl-X/L,bax及c-jun的表达具有调节作用.

大鼠脑挫裂伤后c-jun和c-fos基因快速反应的特点

背景:目前关于c-jun和c-fos基因表达的重要性已逐渐被人们认识,而关于脑挫伤后两种基因表达的特点报道较少.目的:探讨脑挫裂伤后c-jun和c-fos基因表达的特点.设计:随机对照实验研究.地点和材料:实验地点:原张家口医学院实验中心电镜室,成年Wistar大鼠45只,体质量200～310 g.干预:将45只大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,正常组不做任何处理,假手术组开颅窗不进行打击,模型组大鼠以自由落体法复制脑挫伤模型,伤后30min,1,2,4,8,24,72 h杀死大鼠取脑组织,石蜡切片,用PV6000免疫组织化学染色.主要观察指标:c-jun和c-fos基因蛋白表达的异同点.结果:正常对照组和假手术组c-fos无阳性表达,而c-jun呈弱阳性.模型组c-fos阳性神经元分布在伤灶周围区皮质1.0～2.0 mm和同侧海马;c-jun阳性神经元在伤侧皮质和海马广泛分布,相邻脑片c-jun阳性细胞着色深,尤其在海马中c-jun阳性细胞密集而核深,72 h c-fos基本上已无表达,而c-jun仍有较明显的阳性神经元.结论:脑挫伤后,同侧脑组织c-jun基因表达较c-fos更强烈、更广泛和表达时间更长.