雌二醇对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响

目的观察雌二醇(estradiol, E2)对培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系细胞增殖的影响. 方法将E2作用于体外培养的人舌鳞癌细胞,采用四唑盐(MTT)比色试验及3H-TdR掺入试验,测定MTT反应A490 nm值和3H-TdR掺入量,并用流式细胞仪测定细胞周期. 结果不同浓度的E2 (10-8～10-6 mol·L-1)可明显增加人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的增殖,MTT的A490 nm值变化率分别为(107.5±2.6)%,(113.1±3.1)%和(120.0±3.7)% (P<0.01),cpm值的变化率分别为(108.2±4.0)%, (116.7±4.2)%和(124.8±3.2)% (P<0.01),并存在着剂量效应. 10-6 mol·L-1的β-E2能使人舌鳞癌细胞进入S期和G2期的细胞比例从16.3%和7.2%上升到21.1%和16.6%,而使处于G1期的细胞比例从76.5%下降到62.3%(P<0.01),从而细胞的DNA合成增加,促进其增殖. E2对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的促增殖作用可被Tamoxifen阻断. 结论 E2在体外能明显促进培养的人舌鳞癌细胞的增殖.

肺鳞癌与人乳头瘤病毒及p53表达的关系

目的探讨肺鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)感染与p53蛋白表达的关系并分析作用机制. 方法收集84例肺鳞癌和18例支气管粘膜慢性炎症标本,采用地高辛标记的HPV-DNA探针,用原位杂交法检测组织中的HPV-DNA存在情况,并用免疫组化SABC法检测肺鳞癌组织中p53及HPVE6,E7蛋白的表达,将二者进行对照观察. 结果①HPV原位杂交阳性信号位于细胞核内,肺鳞癌HPV检出率为49%,对照组慢性炎为6%,差异显著. ②肺鳞癌组织中存在HPVE6,E7蛋白表达,免疫组化方法与原位杂交方法结果相符. ③84例肺鳞癌中30例检出p53蛋白表达,其中17例HPV阳性,13例HPV阴性,HPV阳性组与阴性组差异不显著. 结论肺鳞癌与HPV感染关系密切,肺鳞癌组织中也存在p53基因表达,p53蛋白积聚与HPV感染无明显相关性.

伴有淋巴结转移的胸段食管鳞癌(Th1～4 NIMO)患者155例的多因素生存分析

目的:探讨不同浸润深度及转移淋巴结数目对伴有淋巴结转移的胸段食管(N1)患者的预后影响,揭示同一病理分期下不同预后的病理基础及探讨合理的术后辅助治疗方案.方法:应用Cox模型及Kaplan-Meier生存曲线等对患者的术后临床病理及随访资料进行多因素分析.结果:155例患者,其中T1N1者2例,T2N1者46例,T3N1者103例,T4N1者4例.淋巴结转移数目小于4枚患者的(n=113)1,3,5 a生存率与大于4枚者(n=42)有统计学差异(P<0.05),患者的年龄、肿瘤部位等因素与术后生存无关(P>0.05).扩大的淋巴结清扫方式及目前不规范的术后辅助治疗未显现明显的生存获益.结论:转移淋巴结数目是影响患者预后及生存的重要因素.术后辅助治疗及扩人的淋巴结清扫方式对生存的改善则需要进一步多中心随机对照研究证实.

MALDI-TOF质谱技术筛选Ⅰ期肺鳞癌血清肿瘤标记物

目的:MALDI-TOF-MS技术筛选肺鳞癌特异性肿瘤标记物,以提高肺鳞癌早期诊断水平.方法:采集19例Ⅰ期肺鳞癌患者和19例年龄、性别、吸烟量等与之匹配的健康对照者血清,应用MALDI-TOF-MS技术结合MB-WCX蛋白芯片和AutoflexⅡ-C质谱分析仪检测各血清标本,经计算机软件数据处理以筛选肺鳞癌血清差异蛋白质波峰.结果:与正常人比较发现肺鳞癌显著异常表达的潜在标记物3个,Mr分别为3261.69,3192.07和2556.92(P<0.01),并据此建立了肺鳞癌分子诊断模型.另采集22例肺鳞癌和19例健康者血清盲检验证该诊断模型具有95.5%的敏感性和94.7%的特异性.结论:MALDI-TOF质谱技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,不仅能直接筛选出肺鳞癌患者血清中相对特异的潜在肿瘤标记物,而且可能具有较好的临床应用前景,同时为临床寻找新的肺鳞癌血清肿瘤标记物提供理论依据.

皮肤鳞状细胞癌组织和细胞系中Ptch-1及Gli-1表达的检测

目的:探讨Hedgehog信号传导通路中Pteh-1和Gli-1在鳞状细胞癌皮损和细胞系中的表达及意义.方法:采用免疫组化技术分别检测鳞状细胞癌皮损和细胞系A431,HSQ-89,HSC-2和Tca中Pteh-1和Gb-1的蛋白水平表达与分布.结果:Pteh-1及Gli-1在正常皮肤,鳞状细胞癌皮损,细胞系A431,HSQ-89以及HSC-2细胞中均有阳性表达,主要分布在鳞状细胞癌细胞胞膜及胞质中.结论:鳞状细胞癌皮损和细胞系中Pteh-1及Gli-1的阳性表达可能通过激活Hedgehog信号传导通路有助于鳞状细胞癌的形成和发展.

P21基因多态性与华北食管癌的相关性

目的:探讨P21基因外显子的3'非翻译区(UTR)第20碱基对的单核苷酸多态性对食管鳞状细胞癌(ESCC)发生及淋巴结转移的影响.方法:选择202例ESCC患者和265例健康对照个体,采集静脉抗凝血5 mL,同时收集病史、个人及肿瘤家族史.以蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,分别采用PCR-片断长度分析和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测P21外显子的3'UTR第20碱基对单核苷酸多态性基因型.结果:ESCC患者的P21基因3'UTR的多态性基因型和等位基因型分布与健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05).ESCC吸烟组患者P21的T/T基因型频率(26.0%)显著高于健康吸烟组(12.0%,χ2=8.60,P=0.014).与C/C基因型相比,携带T/T基因型可增加吸烟者的ESCC发病风险(经性别和年龄校正的OR值为3.36,95% CI=1.45-7.75).而在非吸烟的患者和健康个体中,P21的基因型及等位基因型频率均差异无统计学意义(P＞0.05).有淋巴结转移组的P21的T/T基因型频率(26.4%)高于无淋巴结转移组(15.3%,χ2=6.128,P=0.013).与常见基因型C/C相比,携带T/T基因型可增加ESCC患者淋巴结转移的风险,经性别、年龄校正的OR值分别为3.11(95% CI=1.28-7.52).结论:P21 3'UTR的T/T基因型可能增加中国北方吸烟人群ESCC易感性并可能增加ESCC患者淋巴结转移的风险性.

陕西汉族人p53 codon 72基因多态性与子宫颈鳞癌易患性的关系:病例对照研究

目的: 探讨p53 72密码基因多态性与子宫颈鳞癌易患性的关系. 方法: 在陕西地区汉族妇女中,对子宫颈鳞癌患者33例,健康对照51例进行病例对照研究,用聚合酶链反应法检测p53 codon 72多态性. 结果: p53 codon 72 Arg纯合子、pro纯合子、Arg/pro杂合子在病例组分别是33%, 15%, 52%;在对照组分别是22%, 18%, 61%. p53 codon 72 Arg/Arg基因型与Pro/Pro和Arg/Pro两种基因型相比A值=1.80, 95%CI=0.37～8.97,差异无统计意义(P＞0.05). 结论: p53 codon 72 Arg纯合子可能不增加陕西地区汉族人子宫颈鳞癌易患性.

皮肤鳞状细胞癌组织中HB-EGF的表达意义

目的: 探讨肝素结合表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)在皮肤鳞状细胞癌中的作用机制.方法: 用原位杂交的方法检测正常组织、癌旁组织和鳞状细胞癌皮损组织中HB-EGF mRNA的表达.结果: 在正常皮肤组织中,HB-EGF表达于基底层(100.0%),基底上层仅有少量表达(12.5%);在癌旁组织中,HB-EGF不仅位于基底层(100.0%),且在基底上层也有表达(91.7%);在鳞状细胞癌皮损中,全层几乎无HB-EGF的表达(8.3%).结论: HB-EGF在鳞状细胞癌发病的早期阶段起关键作用,基底层中的HB-EGF对保持正常表皮形态有重要作用.

MDM2蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达意义

目的初步探讨MDM2在喉癌发生发展中的机制. 方法采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)免疫组织化学法,检测12例声带息肉,15例喉癌旁组织,11例喉不典型性增生及41例喉鳞状细胞癌组织中MDM2蛋白的表达,并研究蛋白表达与肿瘤病理分级、临床分期、临床分型、淋巴结转移的关系. MDM2蛋白阳性表达为核着色. 结果 MDM2蛋白表达阳性率在各个组分别为声带息肉0.0%,喉癌旁组织40.0%,喉不典型性增生72.7%,喉鳞状细胞癌组织39.0%. MDM2蛋白表达在声带息肉组与癌旁组织组、声带息肉组与喉不典型性增生组、声带息肉组与喉鳞状细胞癌组织组、喉不典型性增生组与喉鳞状细胞癌组织组(P<0.05)均有显著性差异. 喉鳞状细胞癌组MDM2蛋白表达与临床分期有关,与病理分级、临床分型、淋巴结转移无关. 结论 MDM2基因在喉癌发生、发展中有重要作用,其异常表达是喉癌发生中早期分子事件,检测MDM2蛋白有助于喉癌早期诊断.

热休克蛋白70在食道鳞状细胞癌中表达及其可能对凋亡的调控

目的研究热休克蛋白70(HSP70)在食道鳞状细胞癌中的表达与意义. 方法采用鼠抗人HSP70单克隆抗体及免疫组织化学SABC法. 结果在60例食道鳞状细胞癌中,HSP70表达46例(76.7%). HSP70在食道鳞状细胞癌Ⅰ级中表达强于在食道鳞状细胞癌Ⅲ级中的表达(P<0.05). 结论 HSP70在大部分食道鳞状细胞癌中有不同程度表达, HSP70可能参与食道鳞状细胞癌的凋亡调变;其表达与食道鳞状细胞癌分化有关.

食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1表达的意义

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1(Cyclin B1, Cyclin D1) mRNA和蛋白的表达及其与食管鳞癌床生物学指标的关系. 方法:应用原位杂交法、免疫组化SP法对62例食管鳞癌组织(组织学Ⅰ级15例,Ⅱ级25例,Ⅲ级22例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移42例;肿瘤浸润深度:浸润至黏膜层、黏膜下层或浅肌层7例,深肌层14例,纤维膜41例)、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织进行Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系. 结果:Cyclin B1,D1的mRNA和蛋白在正常食管黏膜组织中不表达或低表达,在癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中高表达,三者阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);食管鳞癌患者癌组织中CyclinB1,D1的mRNA和蛋白的表达与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05). Cyclin B1,D1 mRNA与蛋白正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中的表达有高度的一致性. 结论:Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的高表达可促进食管鳞癌的发生与发展,在癌前病变期的鳞状上皮不典型增生组织中即出现高表达,是食管鳞癌发生过程中的早期事件.

食管鳞癌中TGF-β及其受体调节成分Endoglin/CD105的表达

目的:研究食管鳞癌中TGF-β和Endoglin/CD105的表达及在血管生成中的作用. 方法:采用RNA酶保护性分析和免疫组织化学方法对30例食管癌高发区食管癌患者的癌组织和癌旁组织TGF-β和Endoglin/CD105 mRNA和蛋白表达水平进行检测. 结果:食管癌组织中TGF-β1和TGF-β3 mRNA较癌旁组织显著增高(P＜0.05),TGF-β2无变化. 食管癌组织中Endoglin/CD105 mRNA较癌旁组织也显著升高(P＜0.05). TGF-β3 mRNA与Endoglin/CD105 mRNA的相关分析显示有相关关系. 结论:TGF-β和Endoglin/CD105参与了食管鳞癌血管生成过程的调节, Endoglin/CD105不仅是细胞膜上TGF-β受体中调节TGF-β生物学功能的一个重要分子,而且是新生血管的重要标志. 因此调节Endoglin/CD105的功能可能成为抗血管治疗中的一个潜在的、具有较宽生物防治谱的靶点.

RNA干扰Star3基因对EC-1细胞侵袭转移和增殖能力的影响

目的:构建针对信号转导子和转录激活子3(Stat3)基因的siRNA表达载体,研究Stat3基因沉默对人食管鳞癌EC-1细胞侵袭转移及增殖的影响.方法:构建pSUPER-EG-FP-Stat3 siRNA表达载体,转染EC-1细胞,RT-PCR,WesternBlot检测Stat3的表达;Boyden-chamber体外侵袭实验检测siRNA对细胞侵袭转移能力的影响,MTT法检测siRNA对细胞增殖能力的作用.结果:酶切和测序证实pSUPER-EGFP-Stat3 siRNA表达载体构建成功;RT-PCR,Western Blot结果表明,siRNA能有效地降解EC-1细胞中Stat3基因的mRNA,下调Stat3蛋白的表达;转染siRNA后,与对照组相比,EC-1细胞侵袭转移和增殖能力明显下降.结论:成功构建针对Stat3基因的siRNA表达载体,可有效沉默Stat3基因在食管鳞癌EC-1细胞中的表达,抑制EC-1细胞的侵袭转移及增殖能力,可为食管癌的基因治疗提供理论依据.

宫颈癌患者血清DcR3及SCCA 水平及临床意义

目的：探讨血清DcR3及SCCA水平及对宫颈癌进展的判断价值。方法：选择89例宫颈鳞癌患者（Ⅰ期32例，Ⅱ期31例，Ⅲ期26例），对各期CA125、CA19-9、CEA、SCCA及CA125进行检测。结果：Ⅱ期患者CA125、CEA 较Ⅰ期均出现显著升高（ P＜0．05），Ⅲ期患者CA125、CA19-9、CEA较Ⅰ期、Ⅱ期组均出现显著升高（P＜0．05）。Ⅱ期患者SCCA、DcR3较Ⅰ期均出现显著升高（P＜0．05）。Ⅲ期患者SCCA、DcR3较Ⅰ期、Ⅱ期组均出现显著升高（P＜0．05）。SCCA 与CA125、CEA呈显著正相关（P＜0．05），与CA19-9未见显著相关性（P＜0．05），DcR3与CA125、CEA呈显著正相关（P＜0．05）。结论：宫颈癌分期的进展与DcR3及SCCA的紊乱密切相关，与常规肿瘤标志物等结合有助于判断疾病的进展。

SCC、BXTM在宫颈癌患者的临床运用及观察

目的观察并探讨宫颈癌与鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、肿瘤相关物质(BXTM)在生物学行为上的相关性及其放射治疗前后的变化规律，从而为宫颈癌的诊断提供有意义的相关肿瘤标志物检测指标，并对宫颈癌的放射治疗效果及其预后的评估提供重要的临床参考依据，在实际的临床应用中有重要的实用价值。方法对我院收治的宫颈癌患者采用不同治疗方法观察效果的临床运用，将患者分为对照组100例，观察组217例，对照组采用单纯检测SCC方法，观察组采用SCC联合BXTM检测方法。结果由分析显示，放射治疗中两者的阴性率随照射剂量的增加、肿瘤负荷的减小而增加。放射治疗后两者的水平较治疗前明显下降，复发和/或转移患者两者的水平较治疗前明显升高。血清鳞状上皮细胞癌抗原及肿瘤相关物质联合检测阳性率明显高于各个单项检测的阳性率。另外，在检测的5例宫颈腺癌患者中有4例CEA血清水平高于界值，2例SCC原Ag高于界值。结论 SCC是宫颈鳞癌较特异的一种肿瘤标记物,定期联合监测SCC与BXTM可为临床观察宫颈鳞状细胞癌患者的发展状态、淋巴结转移、放疗后的疗效以及随访监控具有临床和研究的重要参考意义。

联合应用巨嗜细胞集落刺激因子和鳞状细胞癌抗原作为卵巢成熟囊性畸胎瘤向鳞状细胞癌恶变的临床诊断标志

喉癌102例临床分析

目的 探讨喉癌的发病特点.方法 对收治的102例喉部恶性肿瘤患者,进行回顾性调查分析.结果 喉癌主要病理类型为鳞癌共95例,占93.1%;男女比例为19.5:1;发病高峰年龄为50-70岁;主要的就诊症状声嘶占81.8%,但声嘶患者3个月和6个月的就诊率仅为19%和46%;本地区喉癌患者的吸烟率为70%.结论 喉癌临床以声门型为主,声门上淋巴结转移率高.临床症状以声嘶为主,患者的早期就诊率低.

人乳头状瘤病毒检测联合阴道镜在宫颈细胞学诊断意义不明的不典型鳞状细胞(ASCUS)妇女诊断中的价值研究

1988年的美国国际癌症协会提出了TBS分类法,从而出现了性质未定的意义不明的不典型鳞状细胞(atypical squamous cell of undetermined significance,ASCUS)的概念.根据宫颈细胞学TBS方法分类在美国每年约有2000万妇女被诊断为AS-CUS,它有特定的诊断标准:细胞异常较反应性改变更明显,但尚未达到鳞状上皮内病变(squamou8 intra-epithelial lesion,SIL)的程度,可以是增生活跃的良性改变或潜在的恶性改变,不能对其进行明确分类而被命名.

100例宫颈不典型鳞状细胞阴道镜检查结果分析

随着宫颈超薄细胞学涂片技术的大量应用,发现越来越多的宫颈不典型细胞的患者,而对她们的处理一直困扰着临床医生,我们总结了100例宫颈不典型鳞状细胞患者的阴道镜检查结果,以期为今后的工作提供依据.

喉癌颈淋巴结转移的侧颈部淋巴结清扫术40例

目的探讨颈侧清扫可否应用于颈部淋巴结转移的喉癌的颈部治疗.方法对63例下咽癌颈清扫标本的转移性淋巴结在颈部的分布进行了回顾性分析.结果颌下淋巴结转移占2.5%.N0,N1,N2a和N2b-N3的颈后三角淋巴结转移率分别为12.5%,11.1%,25%和40%.病理证实仅有颌下淋巴结转移或上中颈深淋巴结转移,而无下颈深淋巴结转移时,颈后三角淋巴结转移率为5. 6%,有下颈深淋巴结转移时,颈后三角淋巴结转移率为40%.结论对于N0和N1的喉癌患者可行颈侧清扫,对N2和N3的喉癌患者应行根治性清扫.行颈侧清扫时,行下颈深淋巴结冰冻,根据结果决定是否行颈后三角的清扫.