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再生障碍性贫血中色氨酸和犬尿氨酸的检测方法及意义
目的:建立检测再生障碍性贫(aplastic anemia,简称再障)血清中色氨酸(Trp)及其代谢产物犬尿氨酸(Kvn)水平的方法,探讨其与疾病之间的关系.方法:应用反向高效液相色谱法检测,以荧光检测器检测Trp,以紫外检测器检测Kyn的血清水平.结果:再障患者血清Trp浓度明显低于正常对照,Kyn浓度明显高于正常对照(P<0.05):再障动物模型结果与患者血清结果相同.结论:再障中吸哚胺-2,3-双加氧酶的活性较正常明显增高,促进色氨酸向犬尿氨酸转化,造成细胞内的"色氨酸饥饿状态"从而抑制T细胞的活化和增殖,可能是机体的一种自我保护机制.
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蛋白质的免疫及抗疲劳作用
蛋白质是一类重要的营养素,它是由氨基酸构成的.组成人体蛋白质的基本氨基酸有20种,其中有9种是人体自身不能合成、必须从食物中摄入的必需氨基酸,它们是:异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸.蛋白质在营养学中的重要地位众所周知,它的存在与生命的各种活动紧密联系,例如参与机体构成、参与机体的代谢过程等.随着现代社会工作和生活的压力增大,人们对拥有强健体魄和充沛精力的愿望更加强烈,蛋白质在免疫与抗疲劳方面的作用日益受到人们的重视.
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黑米:滋肾补胃益气血
黑米因外皮乌黑而得名,又称补血糯米、贡米、黑珍珠,是一种具有诸多保健功效的珍贵稻米.黑米含有淀粉、蛋白质、脂肪、多种维生素,又含钙、磷、镁、铁、锌、钼、硒等多种矿物质和微量元素.黑米所含蛋白质不但比普通大米高37%,而且其中氨基酸的含量亦比白米高25.4%,人体所需的赖氨酸、精氨酸、氮氨酸、色氨酸等,黑米中也都具有,营养价值很高.
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超声引导下腹横肌平面麻醉对无张力疝修补术患者血清犬尿喹啉酸和色氨酸水平的影响
目的:研究超声引导下腹横肌平面麻醉(TAPB)对无张力疝修补术患者血清犬尿喹啉酸(KYNA)和色氨酸(TRP)水平的影响.方法:选择2014年1月至2017年1月本院收治的100例单侧腹股沟斜疝患者.按随机数字表法分为观察组和对照组,每组50例.对照组实施全身麻醉,观察组在对照组的基础上行双侧超声引导下TAPB.比较两组术后疼痛视觉模拟量表(VAS)评分,血清KYNA、TRP、干扰素(IFN)-γ和白介素(IL)-6水平及不良反应发生率.结果:观察组静息状态和咳嗽时的VAS评分及血清KYNA、IFN-γ、IL-6水平均显著低于对照组,TRP水平显著高于对照组(均P＜0.05).两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:超声引导下TAPB能够减轻无张力疝修补术患者术后疼痛,且对患者术后血清KYNA、TRP水平影响小,安全性好.
关键词： 超声引导下腹横肌平面麻醉 无张力疝修补术 犬尿喹啉酸 色氨酸 -
hUC-MSCs治疗对免疫性血小板减少症患儿的免疫功能、色氨酸代谢通路以及相关基因表达的影响
目的:研究hUC-MSCs治疗对免疫性血小板减少症患儿的免疫功能、色氨酸代谢通路以及相关基因表达的影响.方法:选取58例免疫性血小板减少症患儿随机分为hUC-MSCs组和常规组,hUC-MSCs组接受糖皮质激素+丙种球蛋白+hUC-MSCs治疗,常规组接受糖皮质激素+丙种球蛋白治疗,比较两组血小板含量、免疫功能、色氨酸代谢情况以及T-bet、GATA-3的表达量.结果:hUC-MSCs组血小板含量均高于常规组,差异具有统计学意义(P＜0.05);hUC-MSCs组血清IFN-γ、IL-2含量低于对照组,血清IL-4、IL-10含量以及外周血Treg细胞比例高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);hUC-MSCs组血清中Trp浓度以及Trp/Kyn比值低于常规组、Kyn浓度高于常规组,外周血单个核细胞中IDO的表达量高于常规组、TTS的表达量低于常规组,差异具有统计学意义(P＜0.05);hUC-MSCs组外周血单个核细胞中T-bet的mRNA含量低于常规组、GATA-3的mRNA含量高于常规组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:hUC-MSCs治疗能够增加血小板含量、调节Th1/Th2平衡和色氨酸代谢,是治疗免疫性血小板减少症的理想方法.
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高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用
目的 建立一种高效液相色谱-紫外检测法同时测定血清中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)浓度的方法.方法 色谱柱采用Agilent Hypersil ODS(125.0 mm×4.0 mm, 5 μm),流动相为15 mmol/L乙酸钠缓冲液(pH 4.0)和乙腈95∶5(V/V),流速为0.8 ml/min,柱温25 ℃,紫外检测λKyn＝360 nm,λTrp＝278 nm.结果 Kyn和Trp的保留时间分别为3.3 min和5.2 min,线性范围分别为0.083～21.000 μmol/L和2.650～678.000 μmol/L,检测限分别为0.028 μmol/L和0.053 μmol/L,日内和日间相对标准偏差分别低于5%和10%,回收率分别为91.99%～113.89%和95.81%～118.82%.结论 该方法简便、快速、特异,适合于临床检测.
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犬尿氨酸的检测及其临床意义
犬尿氨酸是色氨酸的代谢产物之一,是一种具有多种特殊生理作用的生物活性分子,其代谢状态与人体生理机能密切相关.若疾病导致犬尿氨酸代谢失调,则体内犬尿氨酸含量发生变化,使各种病理过程加剧.体内犬尿氨酸含量可反映机体的犬尿氨酸的代谢状态,对其进行测定可为相关疾病的诊断治疗、病情监测及发生机制的研究提供依据.近年来,临床和基础研究中对犬尿氨酸的分析主要采用高效液相色谱法.
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芳香族氨基酸的检测进展
芳香族氨基酸包括苯丙氨酸(phe)、酪氨酸(tyr)、色氨酸(trp).其中苯丙氨酸、色氨酸是人体必需氨基酸,在生命活动中起着极为重要的作用.芳香族氨基酸及其代谢产物儿茶酚胺、高香草酸、5-羟色胺、犬尿氨酸等物质与肝、肾、免疫、神经精神疾病、癌症等密切相关,因此快速准确测定这些小分子物质对疾病的基础研究与临床诊断十分重要.高效液相色谱法、毛细管电泳技术、质谱联用准确度高、干扰因素少,因此在临床研究工作中,是进行复杂生物样品分析的主要手段.本文就芳香族氨基酸的测定方法的实验室研究进展作一简要综述.
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脂肪肝的食疗保健
脂肪肝分轻度、中度和重度,轻度脂肪肝是治疗脂肪肝的佳时期,如果能在饮食上调整得好,就能控制病情发展,起到很好的治疗作用.合理控制每日能量的摄入量,对治疗脂肪肝十分重要.1.应供给优质蛋白质摄入量蛋白质中富含必需氨基酸(如赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、胱氨酸、色氨酸等),有抗脂肪肝作用,蛋白质还可提供胆碱、蛋氨酸等抗脂肪肝因子,使脂肪变成脂蛋白,继而运出肝脏.
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生物样本中喹啉酸含量测定方法的研究进展
喹啉酸是人体内由色氨酸衍变来的代谢物,是NMDA受体的竞争性激动剂,在感染和炎症时其浓度可以升高到对中枢神经元产生毒性的水平.因此,脑内喹啉酸浓度变化可能参与了神经系统多种疾病的病理过程.脑组织中无喹啉酸的生物转化机制,而由对丙磺酸敏感的载体系统转运出脑组织.因此,过量合成的喹啉酸容易在脑室内累积,并产生毒性作用.
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HPLC法同时测定人血清中犬尿氨酸和色氨酸的浓度
目的:建立同时测定人血清中的犬尿氨酸和色氨酸浓度的方法.方法:血清样品用24％高氯酸以10∶1进行蛋白沉淀处理,取上清液进样分析.采用高效液相色谱-紫外/荧光检测器法分别检测犬尿氨酸和色氨酸浓度,色谱柱为Accurasil-C18,流动相为乙酸钠-乙腈溶液(24.8 mmol· L-乙酸钠,用乙酸调pH值至约4.0) =90∶10,流速1.0 mL· min-1,紫外检测波长为360 nm,荧光检测激发波长为285 nm、发射波长为365 nm.结果:犬尿氨酸、色氨酸血药浓度分别在0.16～20.89 (r=0.9999)、0.24～61.58μmnol·L- 1(r=0.9996)范围线性关系良好；高、中、低3种浓度的方法回收率分别为91.33％～101.82％、91.49％～104.37％;日内及日间RSD均＜6％.结论:本方法稳定、可行,可为临床疾病的诊断和药物治疗提供实验室依据.
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K+、Na+酶法与离子选择电极法的比较
血清K+、Na+是具有重要意义的常规检测项目,国内多采用离子选择电极法.1988年以来,Berry和kimuruga先后报道血清K+的丙酮酸激酶和色氨酸酶动力学分析法和血清Na+的β-半乳糖苷酸动力分析法[1,2],认为酶法测定结果可靠,稳定性好,并易于在全自动分析仪上完成,因而有逐步推广的趋势.近年我科开展了紫外酶法测K+、Na+,并用于常规工作,为进一步了解上述方法的可行性及特点,我们与离子选择电极法进行了对比分析,现报道如下.
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液相色谱-电喷雾串联质谱法分析大肠癌患者尿液色氨酸及其代谢产物
目的：通过液相色谱-电喷雾串联质谱（LC-ESI-MS/MS）测定尿液色氨酸及其代谢产物浓度，探讨大肠癌患者体内色氨酸代谢变化及其与机体免疫之间的关系。方法通过 LC-ESI-MS/MS法测定大肠癌患者和健康者（对照组）尿液色氨酸代谢物浓度，并通过犬尿氨酸/色氨酸比值来评估代谢过程中的酶活性。结果大肠癌患者尿液犬尿氨酸、3-羟基犬尿氨酸（HK）、羟基氨茴酰酸（HAA）、吲哚-3-乳酸（ILA）、吲哚-3-丙酸（IPA）、邻氨基苯甲酸（AA）浓度显著升高（P＜0．05，P＜0．01）；而大肠癌患者尿液犬尿烯酸浓度较对照组显著下降（P＜0．05）；大肠癌患者犬尿氨酸/色氨酸比值较对照组显著提高（P＜0．01）。结论大肠癌患者尿液色氨酸代谢发生紊乱，色氨酸代谢物检测或可为大肠癌发病机制、预测和防治研究奠定基础。
关键词： 结直肠肿瘤 色氨酸 液相色谱-电喷雾串联质谱 代谢组学 -
色氨酸免疫吸附在神经系统自身免疫性疾病中的应用
目的 观察色氨酸免疫吸附在治疗神经系统自身免疫性疾病中的作用和不良反应.方法 选择2007年4月至2010年2月该院住院的神经系统自身免疫性疾病患者14例,在药物治疗的基础上进行免疫吸附治疗,观察治疗效果.结果 所有患者经免疫吸附治疗后临床症状均有改善,肌力提高1~2级,5例患者恢复正常肌力.IgG、IgA、IgM均较治疗前明显降低(P＜0.05),54例次免疫吸附治疗中共发生低血压3例次,口周麻木1例次,经对症处理后均缓解.结论 色氨酸免疫吸附治疗神经系统自身免疫性疾病安全、有效,治疗后免疫球蛋白水平显著下降.
关键词： 色氨酸 免疫吸附 神经系统自身免疫性疾病 -
慢性乙型肝炎及乙型肝炎性肝硬化患者色氨酸代谢变化及其相关性分析
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)和乙型肝炎性肝硬化(HBC)患者色氨酸(Trp)代谢变化及相关性.方法 选取2015年10月至2016年1月在重庆医科大学附属第一医院住院的CHB 81例和HBC 40例患者为研究对象,40例健康者为对照.采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)对各组受试者血浆中Trp及代谢产物犬尿氨酸(Kyn)、5-羟色胺(5-HT)水平进行测定,实时荧光定量PCR检测HBV-DNA病毒复制数,分析3组间血清学指标差异,采用Pearson相关分析和Logistic回归分析筛选危险因素.结果 与对照组比较,CHB组、HBC组受试者血浆中Trp和5-HT水平明显降低(P<0.01);HBC组受试者血浆中Kyn/Trp明显高于其他两组(P<0.01).HBC组Kyn/Trp与A/G呈负相关(r=-0.686,P<0.01),CHB组Kyn/Trp与Log DNA呈正相关(r=0.784,P<0.01).Logistic回归分析显示Kyn/Trp为CHB和HBC的危险因素.结论 检测血浆中Trp及其代谢产物可作为辅助指标评估乙型肝炎进展情况.
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小鼠IDO基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定
目的 构建携带小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行研究其免疫学效应.方法 酶切含有小鼠全长IDOcDNA的PCOUS-2质粒,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度.RT-PCR和荧光显微镜鉴定和检测重组腺病毒转染AD-293细胞后IDO的表达,同时进行野生型腺病毒的检测.结果 经酶切及测序证实IDO基因重组腺病毒载体构建成功,RT-PCR检测到转染后AD-293细胞内IDO的表达,且无野生型腺病毒的产生.结论 成功构建了含小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,为探讨IDO的生物学功能奠定了基础.
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β3-肾上腺素能受体基因突变与儿童单纯性肥胖关系分析
儿童肥胖是我国儿童青少年期重要健康问题之一。研究表明，过量喂养可以导致人类肥胖。但是实验性增加热量摄入时，仍有一部分人并不发生超重［1］，显然遗传基因在决定个体肥胖易感性方面起重要作用。 产生肥胖的直接原因是能量储存大于消耗，而脂肪组织是机体能量储存和释放热量的重要所场，因此参与调节脂肪组织分解、并产生热量的β3-肾上腺素能受体(β3-adr)基因的突变与肥胖关系的研究也备受关注［2，3］。近年来国外有研究发现β3-adr基因序列的第190位上的T→C突变，导致氨基酸多肽序列64号位上的色氨酸被精氨酸取代(Trp64Arg)，这一突变正好位于受体的第一个细胞内功能区，而该区对维持受体在细胞表面的运动和受体与G蛋白偶联均起到至关重要的作用［4］，故该突变可能与肥胖的发生有关。在我国尚未见该基因突变与儿童单纯性肥胖关系的报道
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色氨酸代谢在再生障碍性贫血中的实验研究
目的 探讨色氨酸代谢参与再生障碍性贫血(Aplastic Anemja,AA)的免疫系统异常活化的发病机制.方法 建立免疫介导骨髓衰竭模型,用反向高效液相色谱法检测色氨酸(Trp)和其代谢产物犬尿氨酸(Kyn)的血清水平,以及Trp的限速酶--吲哚胺双加氧酶(IDO)活性,用RT-PCR方法检测骨髓单个核细胞IDOmRNA的表达水平,探讨色氨酸在疾病进程中的异常表现.结果 模型小鼠Trp浓度明显低于正常小鼠(P＜0.05),模型小鼠IDO活性明显高于正常小鼠(P＜0.05),模型小鼠的单个核细胞IDOmRNA表达水平较正常小鼠高(P＜0.05).结论 免疫介导骨髓衰竭模型小鼠的色氨酸限速酶IDO的表达水平和活性均较正常小鼠高,免疫系统的异常活化导致必需氨基酸色氨酸的不足.
关键词： 获得性再生障碍性贫血 吲哚胺双加氧酶 色氨酸 -
吲哚胺 2,3-双加氧酶与淋巴瘤关系的研究进展
淋巴瘤是一组常见的淋巴造血系统肿瘤,免疫耐受在其发生发展中具有重要的作用. 吲哚胺 2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是细胞内色氨酸分解的限速酶,肿瘤微环境中,IDO活性增高,导致区域色氨酸耗竭,代谢产物犬尿氨酸蓄积,抑制效应T细胞和自然杀伤(natural killer,NK)细胞增殖和功能,激活调节性T(regulatory T,Treg)细胞,产生免疫逃逸,从而促进淋巴瘤的发生与发展. 本文阐述了IDO的生物学特性、与免疫逃逸关系,并对 IDO 在淋巴瘤的预后及治疗中的作用进行了综述.
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小分子IDO-1抑制剂研究进展
肿瘤与宿主免疫系统之间的相互作用复杂而多变.科学家们正试图阐明两者之间的作用机制,希望借此改善肿瘤治疗现状.相应的,肿瘤免疫疗法成为制药工业的热门研究领域.作为众多肿瘤免疫周期调节因子中的一员,吲哚胺-2,3-双加氧酶1 (Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO-1)备受关注.本文从生理功能、肿瘤组织异常表现、在研药物研究进展等方面对IDO-1进行综述.
