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IDO在不同宫颈病变组织中的表达及意义
目的：研究吲哚胺2，3-二氧酶在不同宫颈病变组织中表达情况。方法：采用免疫组化染色检测35例正常宫颈组织、36例CIN宫颈组织、34例宫颈癌Ⅰ期宫颈组织、35例宫颈癌Ⅱ期-Ⅳ期宫颈组织中IDO表达。结果：正常宫颈组织中IDO表达呈阴性，在宫颈上皮内瘤变中IDO表达逐渐增高，宫颈癌时IDO表达高，各组IDO表达情况相比较，差异有统计学意义（x2＝73．9834，P＝0．0000＜0．01）。结论：IDO可作为宫颈癌治疗的新靶点。
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吲哚胺2,3-二氧化酶和白细胞介素10在子痫前期患者胎盘组织中的表达
子痫前期是妊娠期特有的疾病,是孕产妇和围生儿死亡的主要原因,其确切机制不清,一般认为母胎免疫平衡失调和血管内皮受损是重要机制之一.近年来,国外学者发现,吲哚胺2,3-二氧化酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)在维持母胎界面免疫平衡方面起重要作用,在IDO抑制物存在的条件下对胎儿的异体识别可导致补体活化、炎症及胎儿丢失<'[1]>.白细胞介素10(IL-10)对.IDO的表达有抑制作用.本研究采用免疫组化方法检测IDO和IL-10在正常孕妇和子痫前期孕妇胎盘组织中的表达,以探讨新的免疫耐受相关机制.
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IDO-siRNA对胃癌细胞株MGC803中IDO与IL-6水平的影响
目的：本实验以吲哚胺2，3双加氧酶（IDO）为切入点，对比分析IDO-siRNA干扰前后胃癌细胞株MGC803中IDO及IL-6表达水平变化，研究IDO在胃癌及抑郁中发生、发展的作用，探讨胃癌促发抑郁的可能分子机制。方法采用siRNA干扰技术转染胃癌细胞株MGC803，免疫细胞化学法及RT-PCR法观察IDO蛋白及基因水平的变化，ELISA法检测转染siRNA前后胃癌细胞株上清液中IL-6表达水平，研究IDO对胃癌细胞株以及抑郁相关细胞因子的影响。结果胃癌细胞MGC803经转染IDO-siRNA后IDO的表达经免疫细胞化学及RT-PCR法的检测均明显下降（P﹤0.05）；转染IDO-siRNA 24 h后胃癌细胞MGC803的细胞上清液中IL-6的表达较未转染前明显降低，差异有统计学意义（P﹤0.01）。结论 IDO在胃癌细胞株MGC803中高表达；IDO-siRNA可抑制胃癌细胞株MGC803中IDO的表达；胃癌细胞株MGC803经IDO-siRNA干扰后分泌的细胞因子IL-6的表达减弱，表明IDO与IL-6的表达存在关联，IL-6可能在胃癌及抑郁的发生发展中起一定的作用。
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PD-1/PD-L1与IDO抑制剂在原发性肝细胞肝癌免疫治疗中的研究进展
原发性肝细胞癌(HCC)目前的治疗手段多样,除了根治性手术切除外,还包括新型多靶点抗肿瘤药物Sorafinib、联合化疗(如XELOX、FOLFOX4)、经动脉化疗栓塞术、射频消融、无水酒精注射等,但各种治疗手段都有其局限性,疗效不甚满意.随着对HCC病理机制的深入研究和分子生物学技术的发展,免疫检查点抑制剂已成为近年来的热门研究领域,其中,PD-1/PD-L1通路阻断剂和IDO抑制剂作为免疫检查点的代表,已成为争相研究的焦点.二者通过不同机制来阻断肿瘤细胞的免疫逃逸,终杀灭肿瘤细胞,具有抗多种类型肿瘤的潜力,有望实质性延长患者总生存期.本文结合国内外近期相关研究和临床试验报道,对PD-1/PD-L1和IDO抑制剂在HCC治疗中的研究进展作一简要综述.
关键词： 肝癌 PD-1/PD-L1 IDO 免疫检查点抑制剂 研究进展 -
吲哚胺2,3双加氧酶与妊娠免疫耐受
吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是一种免疫调节酶,是肝脏以外唯一可催化色氨酸分子中吲哚环氧化裂解、沿犬尿酸途径进行分解代谢的限速酶,介导IDO+细胞对T淋巴细胞增殖抑制效应.IDO是妊娠免疫耐受的重要机制之一,参与调节母胎免疫关系,保护胎儿免受母体T细胞攻击,IDO表达异常或者活性失调导致妊娠免疫耐受失调,与多种妊娠相关疾病的发生与发展关系密切.
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干扰素-γ与间充质干细胞在免疫抑制中的协同作用及机制研究
目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)对正常人骨髓间充质干细胞(MSC)免疫活性的影响,阐明IFN-γ与MSC在免疫抑制中的协同作用.方法 ①ELISA法检测IFN-γ(终浓度100 ng/ml)对正常人骨髓来源MSC前列腺素E2(PGE2)、肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平的影响.②RT-PCR法检测100 ng/ml IFN-γ作用下MSC内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因表达水平变化.③体外刺激正常人外周血T细胞增殖,并与正常人骨髓来源MSC共培养,检测T细胞增殖水平;在共培养体系中分别加入重组人IFN-γ(100 ng/ml)及鼠抗人IFN-γ单克隆抗体(单抗,5μg/ml),检测T细胞增殖水平变化.结果 ①MSC单独培养24 ～ 48 h可检测到PGE2、HGF、TGF-β1三种细胞因子表达;IFN-γ可促进MSC上述细胞因子的表达[实验组及对照组PGE2、HGF、TGF-β1表达水平分别为(1715.5 ±628.6) pg/ml对(1344.5±709.4) pg/ml;(4031.8±1496.8) pg/ml对(2452.4±1375.3)pg/ml;(1753.5±413.8) pg/ml对(1026.6±450.5) pg/ml,P值分别为0.001、0.011及＜0.001].②MSC单独培养48 h后,RT-PCR法未检测到IDO基因表达.与IFN-γ共培养后,IDO基因呈高水平表达.③在体外MSC可以显著抑制T细胞增殖,外源性IFN-γ不影响MSC对T细胞增殖的抑制作用[T细胞增殖抑制率分别为(40.4±10.9)％和(36.7±7.4)％,P=0.272];在反应体系中加入抗IFN-γ单抗后,MSC抑制T细胞增殖作用显著减弱[T细胞增殖抑制率分别为(40.4±10.9)％和(23.9±7.6)％,P =0.002].结论 MSC组成性表达PGE2、HGF及TGF-β1等免疫抑制性细胞因子,在一定水平IFN-γ作用下,MSC分泌上述3种细胞因子水平明显上调,IDO mRNA表达水平显著增高,MSC免疫活性增强.骨髓MSC在体外可以显著抑制T淋巴细胞增殖,IFN-γ与MSC在免疫抑制中具有协同效应.
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吲哚胺-23-双加氧酶对血液系统肿瘤治疗与预后的意义
肿瘤免疫反应作为一种保护机制,在血液系统肿瘤形成时即自发产生.然而,在临床明确诊断肿瘤之前,活化的免疫细胞和效应细胞因子的存在已经引发多种免疫抑制途径,这些途径相互协同并导致肿瘤抗原特异性T细胞的功能障碍,终使血液系统肿瘤处于耐受状态.吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)为上述免疫抑制途径的重要成员之一,IDO通过代谢色氨酸,引起反馈性调节,从而限制炎症反应和引起T细胞获得性耐受,终抑制肿瘤免疫反应.IDO免疫抑制的作用使得IDO抑制剂成为治疗多种肿瘤的重要免疫治疗方法,特别是在血液系统肿瘤中的作用为近些年的研究热点.本文就IDO及其抑制剂在血液系统肿瘤中的治疗作用和预后意义进行综述.
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小分子IDO抑制剂临床研究进展
肿瘤免疫疗法是目前肿瘤治疗领域具前景的研究方向之一,而吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)作为IDO/TDO肿瘤免疫疗法中重要的调控靶点[1]受到人们广泛关注.本文从IDO的生理功能、IDO抑制剂在肿瘤治疗中的作用机制等方面进行综述,特别介绍小分子IDO抑制剂在临床试验中的研究进展.
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食管鳞癌中IDO的表达及其与肿瘤血管形成的关系
目的:探究食管鳞癌中IDO的表达及其与肿瘤血管形成的关系.方法:收集我院食管切除患者的肿瘤组织及其癌旁组织,用免疫组织化学法和荧光定量PCR法检测样本中的IDO、VEGF的m RNA、蛋白质的表达情况,分析IDO与肿瘤血管形成之间的关联.结果:检测样本中的VEGF和IDO水平显著盛高,与患者的肿瘤侵犯深度、TNM分期、淋巴结转移、分化程度相关(P<0.05).结论:食管鳞癌中IDO的表达与肿瘤血管的形成有关.
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Foxp3,IDO在小鼠角膜移植免疫排斥反应的表达
背景:移植免疫反应是导致角膜移植术后失败的主要原因,但其具体发病机制不明确.有研究报道,Foxp3和吲哚胺2,3-二氧化酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)与移植免疫有关.目的:研究Foxp3,IDO在小鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用.方法:以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体建立角膜移植实验模型.将30只BALB/c小鼠随机分为3组,正常组6只;角膜移植组12只;地塞米松治疗组12只.角膜移植组:给予生理盐水;地塞米松治疗组:给予地塞米松注射液10 mg/kg,分别于角膜移植术后0,2,4,6,8,10 d经腹腔注射给药.用裂隙灯观察移植排斥情况,免疫组织化学检测植片γ-干扰素表达,Real-time PCR检测植片内Foxp3 mRNA,IDO mRNA的表达.结果与结论:①地塞米松治疗组发生排斥反应时间(20.667±1.033)d,较角膜移植组(14.833±1.472)d明显延迟(P<0.05);②角膜移植组术后第14天角膜植片内γ-干扰素及Foxp3 mRNA,IDO mRNA的表达较地塞米松治疗组明显增强(P<0.05);③结果提示,γ-干扰素及Foxp3,IDO在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用,降低角膜植片γ-干扰素及Foxp3,IDO表达可能有助于诱导耐受.
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过表达吲哚-2，3双加氧酶慢病毒载体的构建
背景：器官移植后的免疫排斥反应或免疫抑制药物严重不良反应使患者得不到有效治疗、治疗效果不佳。基于此背景下，结合新免疫调节研究结果，试图寻找到一种有效的生物免疫抑制方法。
目的：构建过表达吲哚胺2，3-双加氧酶(indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO)慢病毒载体。
方法：①将已构建成功的IDO基因插入慢病毒包装质粒GV308中，构建GV308-IDO重组慢病毒包装质粒。②用慢病毒包装辅助元件Psi、 cPPT、3FLAG、TetR、IRES、WRPE、TetIIP、Ubiquitin Promoter、SV40 origin及HIV的基本元件5’LTR 和3’LTR，共培养法转染80%融合的293T细胞。
结果与结论：Western blot检测经10 g/L 琼脂糖凝胶电泳可见在 Mr 48000处有一目的片段，该值与IDO蛋白大小一致。RT-PCR检测可见293T细胞中有IDO基因表达。说明IDO融合基因已经成功重组于慢病毒包装质粒内。 -
IFN-γ在沙眼衣原体呼吸道感染中免疫防御机制的探讨
目的:检测与IFN-γ作用相关的酶吲哚胺2,3二氧化酶(IDO)、诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)和NADPH氧化酶(ox)gp91在沙眼衣原体呼吸道感染中的表达及与机体防御的关系,探讨衣原体感染中IFN-γ免疫防御作用的机制.方法:用沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)通过鼻腔感染C57BL/6(H-2b)小鼠,用过氧化物酶连接的鼠抗衣原体脂多糖单抗染色HeLa 229细胞,检测衣原体在肺组织的生长;用RT-PCR检测衣原体感染后第7及14天小鼠肺组织IFN-γ、IDO、iNOS和gp91NADPH ox mRNA表达.结果:MoPn呼吸道感染后小鼠肺组织匀浆衣原体活性测定,于感染后第2天,HeLa 229细胞内可见有衣原体包涵体生长,IFU值增高,于感染后第7天IFU达高水平,以后逐渐下降,至感染后21天基本恢复到基线水平.与未感染的对照组比较,Th1细胞因子IFN-γ于感染后第7天表达显著增高,感染后14天有所降低,但仍维持较高水平;同时衣原体感染可显著诱导与IFN-γ作用相关的三种酶IDO、iNOS和gp91 NADPH ox在小鼠肺组织的表达,感染后第7及14天,IDO,iNOS及gp91 NADPH ox的表达与对照组比较均有显著差异,其中IDO和gp91 NADPH ox于感染后第7天mRNA表达增高显著(P＜0.01),14天略有下降(P＜0.05).结论:衣原体呼吸道感染诱导Th1细胞因子IFN-γ mRNA高表达,参与宿主对衣原体的清除及机体免疫防御,此作用可能与其相应的酶IDO、iNOS和gp91 NADPH ox表达增高有关.
关键词： 沙眼衣原体 IFN-γ IDO iNOS gp91 NADPH ox -
过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞改善异位移植心脏存活
目的:探讨过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)改善大鼠腹腔异位移植心脏的存活机制.方法:通过慢病毒载体GV308携带IDO基因转染大鼠骨髓间充质干细胞构建过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞.建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞处理:①利用超声心动图检测移植心脏心功能变化.②采用小动物活体成像系统评估移植心脏局部荧光强度.③再取各组受体大鼠的脾脏,采用流式细胞技术检测CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg细胞的表达情况.④取各组移植心脏,采用HE染色评估炎性细胞浸润情况.⑤利用液相芯片检测各组血清IL-1ɑ、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-18、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3因子的变化情况.结果:①给予相应细胞处理,可见过表达IDO-BMSCs处理后2 d移植心脏的EF、FS较其余各组有提高.②采用小动物活体评估可见过表达IDO-BMSCs组移植心脏局部荧光强度强.③给予干预措施后2 d可见过表达IDO-BMSCs组脾脏细胞CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD45RA、CD45RA+CD45RB表达降低,而CD274、Treg细胞的表达增高.④采用液相芯片检测各组提取血清可见在2 d时,过表达IDO-BMSCs组血清中IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-18是降低的;IL-10、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3表达量是升高的.HE染色证实过表达IDO-BMSCs组炎性细胞浸润少于其他组.结论:过表达IDO的BMSCs可以通过有效调节免疫DC、T细胞及细胞因子,从多个免疫层面改善移植心脏存活.
关键词： IDO 大鼠骨髓间充质干细胞 免疫抑制 -
补肾益气方通过上调滋养细胞IDO的表达促进母胎界面NK细胞的表型转化
目的:研究补肾益气方诱导母胎界面耐受状态的机制及吲哚胺2,3-双加氧酶( IDO)对蜕膜NK细胞表型转化的影响.方法:用免疫组织化学方法测定正常绒毛组织和复发性流产患者绒毛组织内IDO的表达.体外培养人滋养细胞HTR-8/SVneo,用流式细胞术检测含药血清对HTR-8/SVneo IDO表达的影响.用含对照大鼠血清、含药大鼠血清及含药血清联合IDO阻断剂1-甲基色氨酸(1-MT)的培养液分别处理HTR-8/SVneo后与人外周NK细胞共培养,测定其对NK细胞的调节作用.结果:正常绒毛组织中IDO的表达较流产绒毛组织明显增加.含药血清可增强HTR-8/SVneo IDO的表达.外周NK细胞与含药血清处理过的HTR-8/SVneo共培养后,NK细胞表面CD16表达减低,CD56表达增加,且CD16的改变可被1-MT抑制.结论:补肾益气方可以通过上调滋养细胞IDO的表达诱导外周NK细胞向耐受型转变.
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吲哚胺2,3双加氧酶与肿瘤免疫逃逸
吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)及其类似物IDO2作为免疫调节酶可能存肿瘤诱导机体产生免疫耐受过程中起着关键性作用.肿瘤细胞表达IDO使得其所处的微环境出现"色氨酸饥饿",抑制T细胞增殖,同时,色氨酸代谢产物对T细胞亦存在细胞毒性作用.肿瘤诱导IDO表达主要受干扰素影响,而其机制是肿瘤微环境中的CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)高表达可溶性CTLA所致.这一过程可被IDO特异性抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)所逆转,1-MT还具有增强肿瘤化疗药物疗效的作用,故其有望成为一种有效的抗肿瘤药物.
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TL1A 和 IDO 在口腔扁平苔藓患者外周血中的表达研究
目的：研究肿瘤坏死因子样配体1 A（tumor necrosis factor －like ligand 1 A，TL1 A）和吲哚胺2，3双加氧酶（indoleamine 2，3－dioxygenase，IDO）在口腔扁平苔藓（OLP）患者外周血中的表达及其是否存在相关性。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ －PCR）法检测30例 OLP 患者和30例健康人外周血单个核细胞中 TL1 A、IDO 的基因表达水平。结果在 OLP 患者中，TL1 A、IDO 的基因表达水平均高于对照组（P ＜0．05），结果经2－ΔΔCT转换后，OLP 组 TL1 A、IDO mRNA 表达水平分别是健康对照组的1．7872、2．0763倍。TL1 A、IDO mRNA 的表达水平无明显相关性（P ＞0．05）。结论TL1 A、IDO mRNA 在 OLP 的发病中起了一定作用，两者的作用机制有待于进一步研究。
关键词： TL1A IDO 口腔扁平苔藓 实时荧光定量 PCR -
IDO与卡铂诱导卵巢癌耐药的免疫学研究
目的：：通过卡铂诱导卵巢癌耐药的细胞系对免疫细胞功能影响的研究,从免疫学角度探讨耐药卵巢癌转移或复发的机制。方法：建立卵巢癌SKOV3细胞对卡铂耐药的细胞系SKOV3/CBP,ELISA法检测SKOV3和SKOV3/CBP细胞吲哚2,3双加氧酶( IDO)表达；将两组细胞分别与淋巴细胞、NK细胞及C8+T细胞培养,MTT法检测淋巴细胞的增殖能力、LDH检测NK细胞的杀伤能力及ELISPOT检测C8+T细胞的杀伤能力。结果：与SKOV3细胞株相比,耐药细胞株SKOV3/CBP内IDO表达明显增强( P<0.05),且与其共培养的淋巴细胞的增殖能力、NK细胞的杀伤能力及CD8+T细胞的杀伤能力较SKOV3组降低,差异有统计学意义( P<0.05)。结论：卡铂耐药SKOV3细胞内IDO表达增加,其可通过降低免疫细胞作用的敏感性而发生免疫逃逸促进耐药肿瘤的转移和复发, IDO可作为卵巢癌卡铂耐药治疗新的靶点。
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IDO基因转染宫颈癌细胞SiHa在体外抑制NK细胞杀伤作用的研究
目的 通过IDO基因转染,研究IDO在体外对NK细胞杀伤能力的抑制作用.方法 IDO蛋白表达和空白质粒分别稳定转染至人宫颈癌细胞SiHa,应用Western blot检测IDO在SiHa、SiHa/Mock和SiHa/IDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性.结果 IDO蛋白在SiHa/IDO细胞中表达阳性,在SiHa和NHa/Mock细胞中无表达.3组肿瘤细胞体外生长曲线无统计学差异,P＞0.05.SiHa/IDO细胞存活的百分比高于其他2组对照(SiHa和SiHa/Mock)细胞,P＜0.05.结论 DO对宫颈癌细胞体外生长速度无影响,但可抑制宫颈癌细胞SiHa对NK细胞杀伤作用的敏感性.因此,IDO不仅可以作为宫颈癌判断预后的指标,同时也可以作为宫颈癌基因治疗的潜在新靶点.
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前房相关免疫偏离形成中IDO的表达及意义
目的探讨吲哚胺 2,3-二氧化酶(IDO)在前房相关免疫偏离(ACAID)形成中的作用.方法分别将卵白蛋白(OVA)及其与完全弗氏佐剂的混合液注入BALB/c小鼠前房及后足垫内,皮内注射OVA观察迟发型超敏反应,评价ACAID的形成.分别于小鼠前房注射OVA后第3、7、10和14 d处死动物,取其脾脏,采用免疫组织化学和Western blot法检测小鼠脾脏组织中IDO的表达及其动态变化.结果正常小鼠脾脏组织中有少量IDO表达;前房注射OVA后第7、10和14 d IDO表达量明显增加(P＜0.05).免疫组织化学显示的阳性细胞数量变化与Western-blot检测的蛋白动态变化相一致.结论在ACAID形成过程中IDO表达显著性增加,提示它可能参与了ACAID的形成.
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左归丸含药血清对αvβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/FasL、IDO在人早孕绒毛膜组织中表达的影响
目的 探讨左归丸对体外人早孕绒毛膜组织αvβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/FasL和IDO基因表达的影响.方法 对体外培养的人旱孕绒毛膜组织加入2％、5％或10％的鼠左归丸含药血清培养24～72 h.同时,在组织培养中加入孕酮作为阳性对照而仅有基础培养基为空白对照.采用Q-PCR技术检测αvβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/FasL和IDO mRNA的表达.采用特异ELISA试剂盒检测定量分析αvβ3和HLA-G的蛋白表达.结 果5％含药血清处理的绒毛膜组织的αvβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/FasL、IDO基因表达均显著高于阳性对照组及空白组(P＜0.05).5％含药血清处理的绒毛膜组织的αvβ3蛋白标点及2％含药血清处理的绒毛膜组织的HLA-G蛋白表达明显高于阳性对照组及空白组(P＜0.05).结论 左归丸可能具有增加αvβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/FasL和IDO基因表达的作用,可能是该中药复方治疗不孕症分子生物学机理之一.
