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维生素E琥珀酸酯诱导人白血病细胞凋亡的发生
本研究选择两株人白血病细胞Raji(人单核细胞白血病细胞株)、Jurkat(人T淋巴细胞白血病细胞株),体外比较观察了VE和VES对细胞的生长抑制作用及其与诱发细胞凋亡的关系.检测指标及结果如下:(1)维生素E和VES诱导细胞凋亡的形态学观察.倒置显微镜下观察维生素E和VES作用72 h后的Raji细胞;制备单细胞层涂片,4℃固定、Hoechst 33258避光染色后,荧光显微镜观察.倒置显微镜下,VES组细胞透亮性下降,并见颗粒、碎片,台盼蓝染色大多为阳性.荧光显微镜下,对照培养细胞的胞核大多数大小一致、染色均匀,VES处理组细胞可见随作用剂量增加而逐渐增多的凋亡细胞核.维生素E处理组的上述改变较相同剂量VES组轻.(2)维生素E和VES对细胞的生长抑制作用.Raji.jurkat细胞分装于24孔培养板,设维生素E组(5、10、20μg/mL)、VES组(5、10、20μg/mL),空白对照组、乙醇对照组、丁二酸组,台盼蓝排除法5 d计数.维生素E和VES对Raji、Jurkat细胞的生长均具有程度不一的抑制作用,维生素E对Jurkat细胞的抑制作用较弱,而Raji细胞对维生素E和VES的反应更为敏感,20μg/mL的VES在24h的抑制率达到30%,72 h抑制率为100%,并表现出时间效应和剂量效应的关系.(3)流式细胞仪检测维生素E和VES诱导细胞凋亡.
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2-10 SiO2刺激PAM上清液对Ⅰ型肺上皮细胞的增殖效应
目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激肺巨噬细胞(PAM)上清液在Ⅰ型肺上皮细胞损伤中的作用.方法分别用体积分数为5%和10%不同剂量的SiO2刺激大鼠(SD)肺泡PAM上清液作用于貂肺上皮细胞(CCL-64),采用四唑盐(MTT)比色法测定其增殖效应.结果在0、50、100、200、500μg/m1SiO2浓度范围,5%SiO2刺激的PAM上清液引起细胞增殖,500 μg/m1剂量组(0.30±0.02)与对照组(0.26±0.04)差异有显著性,并存在剂量-效应关系(r=0.975,P<0.01).10%SiO2刺激PAM的上清液表现为细胞损伤作用,50 μg/m1剂量组(0.21±0.04)与对照组吸光度值差异有显著性.结论随着作用剂量的增加,SiO2刺激PAM分泌活性物质将加重Ⅰ型肺上皮细胞的损伤,促进矽肺纤维化的进程.
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低强度暖色激光的生物效应
根据细胞和临床水平的研究结果,我们曾提出了低强度激光血管内照射疗法的生物信息模型(BIML)和激光生物刺激作用的信息转换模型(BITML)[1-6].根据BIML,绿、蓝和紫等冷色兴奋Gs蛋白介导的生理过程;红、橙和黄等暖色兴奋Gq或Gi蛋白或受体关联蛋白酶介导的生理过程.根据BITML,在不引起损伤的前提下,一种激光的作用剂量超过一定阈值,它所启动的信使系统将转换成与其相拮抗的信使系统.现根据第二信使的生理功能,应用BIML和BITML从细胞信息生物学的角度,解释低强度暖色激光血管内照射疗法的实验和临床研究.
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中药双向作用与剂量的关系
在使用中药水煎液这一传统剂型时,经常出现中药的一药多效或双向调节作用.经研究发现,中药的一药多效或双向调节作用是由中药作用剂量决定的.同一种中药在小剂量使用时可达治疗目的,剂量加大时则出现相悖的临床效果.如柴胡在大剂量使用时能疏风退热,小剂量使用则升举阳气,其作用相悖;大黄在大剂量使用时,治疗便秘,小剂量导致便秘.这种中药的一药多效或双向调节作用是中药的普遍现象.中药配方中使用时各药剂量大小直接影响着治疗目的与临床疗效,所以加强对中药这一作用现象的研究,对加强中药开发及临床治病具有重大意义.
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基准剂量在危险度评价中的应用及发展
近年来,随着生物医学统计的进展及计算机的普及和应用,毒理学界提出了一种新的确定参考剂量的方法--基准剂量(benchmark dose,BMD)法.该方法在制定非致癌物的可接受水平时比传统方法更合理,可弥补无明显损害作用剂量(NOAEL)的不足并有代替它的趋势.国内外许多学者对BMD进行了大量研究来逐步完善此方法,以确定其在定量危险度评价中的作用.本文就近年来这方面的进展作一综述.
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丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长抑制作用研究
子宫内膜癌是女性生殖道三大恶性肿瘤之一,近年发病率在世界范围内呈上升趋势.子宫内膜癌的主要治疗方法为手术、放疗、化学药物、激素治疗.早期子宫内膜癌以手术治疗为主,晚期和复发性的子宫内膜癌以激素及化疗等姑息治疗为主.促性腺激素释放激素(GnRH)是近几年开始应用于肿瘤临床的激素类治疗药物.目前GnRH已成功用于治疗乳腺癌、卵巢癌及前列腺癌等激素依赖性肿瘤,但对子宫内膜癌的研究较少,目前已有一些临床试验性的研究,尚未有动物实验及系统的体外实验研究文献.张玉泉等[1]报道体外实验显示丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞株HEC-1A有抑制作用,但是其作用机制及体内有效抗肿瘤剂量不明.本研究将丙氨瑞林应用于HEC-1B细胞裸鼠皮下移植瘤模型的治疗,并对其作用机制及佳作用剂量进行初步探讨.
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豚鼠三氯乙烯中毒性肝损伤的作用剂量研究
目的 掌握三氯乙烯(TCE)引起中毒性肝损伤的作用剂量.方法 ①取FMMU白化豚鼠25只,随机分成5组,每组5只,分别皮内注射TCE 0、167、500、1 500、4 500 mg/kg,48 h后处死动物取血清分析丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB),取肝脏观察病理变化;②取FMMU白化豚鼠12只,随机分成2组,分别涂皮TCE 0、900 mg/kg,48 h后处死动物,处理同上.结果 与对照组(0 mg/kg)相比,皮内注射TCE 48 h后4 500 mg/kg组的ALT、AST均升高(P<0.01),TP、GLB下降(P<0.05);1 500 mg/kg组AST升高(P<0.05).4 500 mg/kg组动物均见明显的肝细胞脂肪变性,部分动物肝窦扩张,并见炎细胞浸润,肝细胞局灶性坏死;1 500 mg/kg组个别动物血管周围肝窦轻度扩张.与对照组比较,TCE 900 mg/kg 涂皮组的观察指标未见显著异常.结论 TCE皮内注射剂量低于500 mg/kg,涂皮剂量低于900 mg/kg时,都不会导致明显的肝损伤.TCE急性中毒性肝损伤病理学变化以脂肪变性为主.
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TGF-β诱导骺板肥大区软骨细胞向成骨样细胞分化
传统经典学说认为骺板肥大区软骨细胞是终末分化细胞, 不能增殖分化,在软骨内成骨过程中,它的命运是退化死亡,被骨组织所取代.有学者认为体内肥大软骨细胞能进一步分化为成骨或成骨样细胞,是否受到生长因子的作用并不清楚. 转化生长因子-β(TGF-β)是骨形成的重要局部生长因子.由于TGF-β的作用与基质、其它生长因子的存在与否密切相关,所以它的骨形成作用并不十分明确.为此,我们用鸡胚股骨无血清培养作为骨形成的模型,在排除血清中其它生长因子的影响,细胞维持相对稳定微环境的情况下,观察TGF-β对骺板肥大区软骨细胞的分化作用.结果表明TGF -β可使肥大区软骨细胞表达Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白(FN),并使碱性磷酸酶(ALP )表达增加,细胞形态呈梭形,并存在着量效和时效关系.结论:TGF-β可以诱导鸡胚股骨骺板肥大区软骨细胞向成骨样细胞分化,与TGF-β作用剂量和时间密切相关.
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转化生长因子-β1对肌腱细胞DNA及胶原合成的影响
近年来的研究表明,转化生长因子-β1(TGF-β1)在肌腱的修复中起重要作用[1,2 ].而TGF-β1对细胞增殖分化作用的调节不仅与细胞来源、实验条件及其他生长因子有密切关系,亦与分化程度、细胞基质及其作用时间和剂量等密切相关[3].笔者通过同位素掺入及RT-PCR法观察TGF-β1不同作用剂量对人胚腱细胞DNA及胶原的合成效应,