首页 > 文献资料
-
激光人工皱缩对囊胚玻璃化冷冻后妊娠结局的影响
目的 探讨囊胚激光人工皱缩预处理方法(LAS)在人囊胚玻璃化冻融中的应用效果.方法 选取2014年1月1日至2015年12月31日期间的患者行解冻囊胚周期3859例.根据是否进行激光人工皱缩将其分为激光皱缩组(3176例)和未皱缩组(683例),进一步根据不同年龄分为＜36岁组和≥36岁组,主要比较指标:复苏率、临床妊娠率、种植率.结果 激光皱缩组的复苏率、临床妊娠率、种植率分别为97.32%(5453/5603)、66.81%(2118/3170)、53.55%(2912/5438);未皱缩组的复苏率、临床妊娠率、种植率分别为95.13%(1173/1233)、62.70%(427/681)、49.74%(582/1170);二组相比均有统计学差异(P＜0.05).进一步的亚组分析显示,＜36岁激光皱缩组的复苏率高于未皱缩组[97.27%(4887/5024)vs.95.33%(1040/1091)](P＜0.05).≥36岁激光皱缩组的复苏率、生化妊娠率高于对照组[97.75%(566/579)vs.93.66%(133/142)]、[65.45%(216/330)vs.50.65%(39/77)](P＜0.05).激光皱缩组和对照组的取消移植率分别为0.19% 和0.29%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 冷冻前采用激光人工皱缩技术可提高囊胚解冻后的复苏率、临床妊娠率、种植率.
-
自体精浆为保护剂在微滴精子玻璃化冷冻的应用
目的 探索微滴自体精浆作为冷冻保护剂在精子玻璃化冷冻中的应用价值.方法 选择30份精液标本每份标本3组,A组为精液原标本,B组加入等量的冷冻保护剂,C组梯度离心后沉淀中加入上层精浆.3组均分别采用"1 拉细的巴斯特管直接滴入液氮"和"2微滴直接滴入液氮"两种冷冻方法,记录各组精子浓度和活力,分析其差异程度.结果 B组冷冻前后较A、C组冷冻前后精子浓度和活力均低,差异有统计学意义,各组内冷冻前后精子浓度差异无统计学意义;C1组的精子活力较C冷冻前(P＜0.05)偏低,但较A组冷冻前(P＜0.05)、A1(P＜0.05)、A2(P＜0.05)、C2(P＜0.05)偏高,均有统计学意义.结论 采用拉细的巴斯特管,将精液梯度离心后沉淀中加入自体上层精浆混匀后,微滴直接滴入液氮冷冻精液活动精子回收率高.
-
OPS法及自制冷冻叶法玻璃化冷冻小鼠MⅡ期卵母细胞的研究
目的:以小鼠为研究模型,建立优化的玻璃化冷冻卵母细胞方法以及研究超排卵对卵母细胞质量的影响,为人类卵母细胞玻璃化冷冻技术的改善提供基础研究依据.方法: 建立小鼠超排卵周期模型,比较ops(open pulled straw,开放式拉细麦管)和(自制)冷冻叶两种玻璃化冷冻方法冷冻小鼠MⅡ期卵母细胞的复苏率及体外受精率.结果:超排卵周期组中(自制)冷冻叶法玻璃化冷冻卵母细胞复苏率为66.5%,高于OPS法的冷冻复苏率(45.2%),2者比较差异有统计学意义(P<0.05).(自制)冷冻叶法玻璃化冷冻卵母细胞冷冻后体外受精率为47.4%,高于OPS法的冷冻后体外受精率(32.9%),2者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:(自制)冷冻叶玻璃化法冷冻是小鼠MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻的较优方法.
关键词： 控制性超排卵(COH) 卵母细胞 玻璃化冷冻 -
激光人工皱缩在囊胚玻璃化冷冻中的应用
目的:探讨激光人工皱缩对囊胚冻融后移植效果的影响.方法:回顾分析新疆佳音医院生殖医学中心270例囊胚培养成功并进行玻璃化冷冻后移植患者的临床资料,根据是否进行激光人工皱缩将其分为对照组与人工皱缩组,比较两组囊胚复苏后的复苏率、临床妊娠率、着床率和流产率.结果:两组患者的流产率差异不显著(P＞0.05),复苏率、临床妊娠率和着床率差异显著(P＜0.05).结论:采用激光人工皱缩技术能够提高囊胚的复苏率以及移植后着床率和妊娠率.
-
玻璃化冷冻技术在辅助生殖中的应用
目的:探讨玻璃化冷冻技术在人类辅助生殖技术中的有效性.方法:对进行IVF治疗的不育症患者通过超促排卵后,在肌注HCG 36 h后进行取卵,并进行体外受精,将D3移植后的剩余胚胎进行玻璃化冷冻保存,若患者新鲜周期妊娠失败,则将其解冻并移植.结果:在2011年4月至2012年3月,共解冻经玻璃化冷冻的胚胎560枚,存活531枚,存活率为94.8％；将存活的531枚胚胎移植给243例患者,共计有76例患者成功妊娠,其植入率为19.4％,妊娠率为31.3％.结论:玻璃化冷冻技术在人类辅助生殖技术中是一项有效的、实用的IVF衍生技术.
-
玻璃化冷冻胚胎-解冻移植周期中囊胚和卵裂期胚胎的妊娠结果分析
目的 通过回顾性研究,分析囊胚和卵裂期胚胎玻璃化冷冻解冻移植周期的妊娠结果影响.方法 以2016年1月-2017年10月新疆医科大学第一附属医院生殖助孕中心作为研究阶段开展回顾性分析,选择需玻璃化冷冻解冻患者,根据选择囊胚和卵裂期胚胎分为卵裂组、囊胚组,进行囊胚培养、玻璃化冷冻、胚胎的玻璃化解冻、囊胚培养,对比妊娠结局.结果 两组年龄、不孕时间、移植周期数、HCG内膜厚度、平均移植胚胎数差异不显著,无统计学意义,P>0.05.两组患者的复苏率、多胎率、流产率、异位妊娠率比较无显著差异(P>0.05);囊胚组的妊娠率55.24％(58/105)、种植率50.79％(96/189)均要优于卵裂组的妊娠率31.25％(120/384)、种植率23.36％(75/321),P<0.05,具有统计学意义.结论 玻璃化冷冻解冻是一种效果明显的冷冻方法,对于囊胚和卵裂期胚胎有良好的复苏效果,但是囊胚冷冻移植的临床效果更加明显.
-
卵母细胞玻璃化冷冻复苏后成功妊娠一例
目的 报道卵母细胞冷冻复苏后成功妊娠一例.方法 采用玻璃化冷冻技术冷冻卵母细胞2枚,解冻后行单精子卵胞浆内显微注射(ICSI),获得Ⅰ级和Ⅱ级细胞胚各一枚,B超监测下移植.结果 患者胚胎移植后14 d,血HCG783.5 mU/mL,显示已成功妊娠.结论 卵母细胞玻璃化冷冻保存复苏后可获得妊娠,可作为辅助生殖患者新的技术选择.
-
玻璃化冷冻对体外受精-胚胎移植出生子代胎盘印记基因Snrpn表达的影响
目的 探讨玻璃化冷冻技术对出生子代胎盘组织印记基因Snrpn表达的影响.方法 收集2015年3月1日—2017年10月31日期间在泉州市妇幼保健院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕患者分娩后的胎盘组织,按移植胚胎是否冻融分为新鲜周期组和玻璃化冷冻组;收集同期正常妊娠妇女分娩后的胎盘组织作为对照组.运用Real-time RT-PCR和Western blotting分别检测胎盘组织中印记基因Snrpn表达水平.结果 与正常对照组相比,新鲜周期组和玻璃化冷冻组胎盘组织Snrpn mRNA水平和SNRPN蛋白质水平均表达升高,差异有统计学意义(mRNA:P均<0.001;蛋白质:P=0.008,P=0.005),但新鲜周期组和玻璃化冷冻组组间差异均无统计学意义(P=0.212,P=0.286).结论 IVF一定程度上影响了胎盘组织Snrpn基因的表达,而玻璃化冷冻技术本身可能并不加重或减轻这种影响.
-
复苏周期中单/双囊胚移植患者的临床结局比较
目的:探讨复苏周期单囊胚和双囊胚移植对患者妊娠结局的影响.方法:回顾性分析行囊胚冷冻-复苏患者2 021例,其中单囊胚复苏移植组(A组)326例,双囊胚复苏移植组(B组)1 695例.比较单／双囊胚复苏移植对患者临床结局的影响及新生儿情况分析.结果:A组胚胎着床率、临床妊娠率、早产率、多胎率、低体质量儿率分别显著低于B组(P＜0.05);A组早期流产率、新生儿体质量、身长以及Apgar评分均显著高于B组(P＜0.05).结论:单囊胚移植能够明显降低多胎率及产科风险.
-
玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响
目的:比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响.方法:回顾性分析590个复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率等各项指标.结果:玻璃化冷冻组的平均移植胚胎数(2.2±0.5枚)显著少于程序化组(2.5±0.6枚)(P＜0.05),复苏率(94.4％)、完整胚胎率(73.7％)、临床妊娠率(50.8％)和种植率(30.2％)显著高于程序化组(77.2％、44.3％、36.2％、21.1％)(P＜0.05),而流产率和周期取消率组间均无统计学差异(16.6％ vs 27.7％,1.3％ vs 2.3％)(P＞0.05).程序化冷冻胚胎的种植率在完整胚胎(13.5％)和非完整胚胎(16.0％)组间无统计学差异(P＞0.05)；玻璃化冷冻完整胚胎组的种植率(30.4％)显著高于非完整胚胎组(20.1％)(P＜0.05)；而2种冷冻方法的流产率完整胚胎组(35.7％,15.1％)均显著高于非完整胚胎组(8.7％,2.9％)(P＜0.05).在玻璃化冷冻中,卵裂期胚胎组的各项指标与囊胚期组相比均无统计学差异(P＞0.05).结论:玻璃化冷冻法适用于人类胚胎的保存,对卵裂期和囊胚期胚胎有同样理想的保存效果和临床结局,玻璃化冷冻中,胚胎完整性对胚胎种植率起着重要的作用.
-
3种不同超促排卵方案对冻融胚胎移植结局的影响
目的:探讨不同超促排卵方案全部胚胎冷冻后行冻融胚胎移植(FET)的临床妊娠结局.方法:回顾性分析360例患者全胚胎冷冻后复苏移植周期的临床结局.按促排卵方案分为3组,A 组:GnRH-a长方案组(n=131),B组:GnRH-a短方案(n=110),C组:CC+hMG组(n=119),按年龄段(＜35岁,≥35岁)分别比较3组的促排卵效果及妊娠结局,并且以基础FSH(bFSH)=10 IU/L为界,把C组患者分为bFSH＜10 IU/L和bFSH≥10 IU/L 2个亚组,比较其促排卵效果及妊娠结局.结果:C组获卵数、Gn使用总量、Gn用药天数显著低于A和B组(P＜0.05),受精率和优质胚胎率高于A和B组(P＜0.05);不同年龄段中C组与A和B组的临床妊娠结局均无统计学差异.3组的临床妊娠率分别为42.5％、35.6％、38.9％,胚胎种植率分别为23.9％、21.9％、17.2％,组间无统计学差异(P＞0.05).C组中bFSH≥10 IU/L亚组与bFSH＜10 IU/L亚组的促排卵效果及妊娠结局无显著差异(P＞0.05).结论:CC+hMG方案在全部胚胎冷冻后行FET的患者中能取得与GnRH-α长、短方案相似的临床效果,同时Gn的用量大大低于长、短方案组,降低了药物对卵巢过度刺激造成的并发症,减轻了患者的经济和心理负担.
关键词： 克罗米芬(CC) 玻璃化冷冻 冻融胚胎移植(FET) -
玻璃化冷冻法冻融经植入前遗传学诊断后囊胚的应用初探
目的:探讨玻璃化冷冻技术冻融经卵裂球活检后囊胚的可行性.方法:将活检后剩余的可移植囊胚用玻璃化冷冻保存,并在冷冻前人工皱缩囊胚腔,在需要移植时予以解冻囊胚进行移植.结果:24例共进行24个活检周期,活检了159个胚胎,活检后胚胎囊胚形成率60.38％(96/159).有17个周期共移植26枚新鲜可用囊胚,成功种植13个(50.0％),11例获得临床妊娠(64.71％),7个周期因无可移植胚胎或卵巢过度刺激等因素而取消移植.10例患者(10个周期)有30个可移植囊胚进行了玻璃化冷冻保存,其中6例患者因未成功生育要求解冻其囊胚进行移植.共解冻8枚囊胚,全部存活并移植,5例获单胎妊娠；2例已分娩正常婴儿,3例继续妊娠中.结论:玻璃化冷冻技术结合人工皱缩囊胚腔能冷冻保存经卵裂球活检后的囊胚.
关键词： 植入前遗传学诊断(PGD) 玻璃化冷冻 囊胚 人工皱缩囊胚腔 -
透明带薄化法激光辅助孵化对慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎临床结局的影响
目的:探讨透明带薄化法激光辅助孵化技术对慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎临床结局的影响.方法:回顾性分析复苏后至少有1个胚胎是完整存活的564例卵裂期冻融胚胎移植周期,根据胚胎移植前是否行激光辅助孵化,分为辅助孵化组(研究组)与非辅助孵化组(对照组),分别观察透明带薄化法激光辅助孵化技术对慢速冷冻胚胎及玻璃化冷冻胚胎的临床妊娠率、种植率及流产率的影响.结果:胚胎经慢速冷冻后,研究组胚胎种植率(19.5％)显著高于对照组(13.5％),差异有统计学意义(P＜0.05),而临床妊娠率及流产率(37.9％ vs 28.5％、15.5％ vs 10.8％)无显著差异；胚胎经玻璃化冷冻后,研究组和对照组胚胎的临床妊娠率(38.0％ vs 35.6％)、种植率(17.3％ vs 15.9％)及流产率(7.6％ vs 19.2％)相比较均无统计学差异；研究组中来源于2种冷冻方法的卵裂期胚胎的临床妊娠率(37.9％ vs 38.0％)和种植率(19.5％ vs 17.3％)无统计学差异(P＞0.05).结论:透明带薄化法激光辅助孵化能够提高慢速冷冻的卵裂期胚胎的种植能力,且不会增加其流产风险,但并不能提高玻璃化冷冻的卵裂期胚胎的种植能力.
关键词： 激光辅助孵化(AH) 透明带薄化 慢速冷冻 玻璃化冷冻 卵裂期胚胎 -
细胞松弛素B预处理人卯行玻璃化冻融后纺锤体与染色体变化的研究
目的:探讨细胞松弛素B(cytochalasin B,CCB)预处理对改善人卵玻璃化冷冻的效果.方法:收集常规IVF-ET或ICSI-ET周期中成熟卵母细胞71枚,随机分成4组行玻璃化冷冻.A组(17枚)、B组(20枚)、C组(17枚)分别用CCB预处理20 min、30 min、40 min后行玻璃化冷冻,D组(17枚)不用CCB处理直接玻璃化冷冻.冻存3周后融冻卵母细胞,复苏的卵母细胞行荧光染色固定,在共聚焦显微镜下观察各组卵母细胞纺锤体及染色体形态结构.结果:A、B、C、D各组间的复苏率(70.59%、64.71%、50.00%和64.71%)无统计学差异(P>0.05),4组间的纺锤体及染色体正常形态率(27.27%,30.00%,45.46%及33.33%)亦无统计学差异(P>0.05).结论:冷冻使成熟卵母细胞纺锤体及染色体的正常形态结构受到一定程度的破坏,CCB并不能保护卵母细胞纺锤体及染色体在冻融过程中的损伤.
关键词： 细胞松弛素B(CCB) 玻璃化冷冻 纺锤体 染色体 -
人类未成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究
目的:探讨玻璃化冷冻未成熟卵母细胞的有效性.方法:根据有无颗粒细胞将实施玻璃化冷冻的GV期卵母细胞分为含颗粒细胞(非裸卵)组和不含颗粒细胞(裸卵)组;将部分GV期卵母细胞体外培养至M Ⅱ期卵母细胞实施玻璃化冷冻,比较非冷冻IVM组与M Ⅱ卵玻璃化冷冻组间、裸卵组与非裸卵组间的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:非裸卵组的成熟率大于裸卵组(P＜0.05),而存活率、受精率、2-细胞形成率、＞2-细胞形成率之间均无统计学差异(P＞0.05).另外,非冷冻IVM组与GV玻化组间成熟率、受精率、卵裂率均存在显著性差异(P＜0.05):非冷冻IVM组与M Ⅱ期卵玻化组间成熟率、受精率、卵裂率间均存在统计学差异(P＜0.05);GV玻化组与M Ⅱ玻化组间存活率、成熟率、受精率、卵裂率间均无统计学差异(P＞0.05).结论:玻璃化冷冻未成熟卵母细胞需要保留颗粒细胞,同时初步构建了人GV期卵的玻璃化冷冻联合IVM技术的雏形.
-
冻融体外受精-胚胎移植周期人未成熟卵母细胞的体外成熟及纺锤体结局
目的:探讨冻融的不同状态人未成熟卵母细胞体外成熟后纺锤体状态与受精率的关系.方法:随机收集本中心108个体外受精-胚胎移植周期(IVF)中183枚不同状态废气的成熟卵母细胞,分为:卵丘-卵母细胞复合物组,48枚;裸卵组,135枚,其中第一次减数分裂中期(MI)65枚,生发泡期(GV)70枚.玻璃化冷冻保存,经解冻、体外培养成熟后,应用Polscope成像系统观察纺锤体,然后行卵胞浆内单精子显微注射受精,记录各指标情况.结果:①卵丘-卵母细胞复合物组与裸卵组的存活率、体外成熟率、纺锤体出现率、受精率比较,均无统计学差异(P＞0.05);②GV组的存活率显著高于MI组(P＜0.05),而前者的体外成熟率显著低于后者(P＜0.05);③各组体外成熟后有纺锤体出现的卵母细胞受精率均显著高于无纺锤体组(P＜0.05,P＜0.01).结论:冻融IVF周期不同状态的人未成熟卵母细胞都有一定发育潜能;有纺锤体出现的冻融人未成熟卵母细胞质量较高.
关键词： 玻璃化冷冻 未成熟卵母细胞 体外培养 Polscope成像系统 纺锤体 -
卵子冷冻研究进展
在辅助生殖技术(ART)中卵子冷冻具有重要作用,经历了几十年的发展后取得了较大的进步.冷冻方法上新兴的玻璃化冷冻逐步取代传统的程序化慢速冷冻.冷冻保护剂联合应用及辅助类物质的添加在减少细胞毒性的同时提高了冷冻效果.冷冻载体中目前比较推崇CryoTop.虽然冷冻未成熟卵比成熟卵具有理论优势,但由于受体外成熟培养(IVM)技术等的制约,使得冷冻结果不尽人意,成熟卵的冷冻仍是目前主流.随着新的冷冻方法的不断尝试将推动卵子标准冷冻方案的建立.
-
玻璃化冷冻对乳鼠卵巢Dnmt1和Grb10的影响研究
目的 探索玻璃化冷冻对乳鼠卵巢Dnmt1和Grb10mRNA和蛋白表达的影响.方法 26只出生10d的C57BL/6雌性小鼠,每只乳鼠双侧卵巢均分成新鲜组和玻璃化冷冻组.免疫组织化学法检测Dnmt1蛋白在玻璃化冻融前、后卵巢组织卵泡中的表达变化;通过qRT-PCR检测Dnmt1和Grb10 mRNA在玻璃化冻融前、后卵巢组织中的表达变化;通过Western blotting方法检测Dnmt1和Grb10蛋白在玻璃化冻融前后卵巢组织中的表达变化.结果 Dnmt1在玻璃化冻融前、后的乳鼠卵巢组织各级卵泡的颗粒细胞及卵母细胞胞核表达.与新鲜组相比,玻璃化冷冻组卵巢内Dnmt1蛋白和mRNA表达水平均显著下调(P＜0.05);Grb10蛋白和mRNA表达水平均显著上调(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻复苏过程导致卵巢内Dnmt1表达降低,使印记基因Grb10过表达,可能使配子糖代谢性表观遗传信息紊乱的的风险增加.
-
两种冷冻方法对人类卵巢组织卵泡形态和组织增殖活性的影响
目的:探讨玻璃化冷冻和慢速冷冻何者更适于冻存人卵巢组织.方法:将10例因卵巢良性囊肿剔除术获取的人卵巢皮质组织切成薄片后随机分配到新鲜卵巢组(A组)、玻璃化冷冻组(B组)和慢速冷冻组(C组),通过光学显微镜和透射电子显微镜观察比较卵泡形态变化,免疫组织化学检测组织细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化.结果:A、B、C组中形态正常的原始卵泡比例分别占71.4％、70.1％、52.3％；形态正常的初级卵泡比例分别占76.0％、43.5％、31.8％;C组中形态正常的原始卵泡比例和初级卵泡比例均明显低于A、B组(P＜0.05)；B组形态正常的原始卵泡比例和初级卵泡比例与A组相比无统计学差异(P＞0.05).A、B组中形态正常的原始卵泡超微结构无明显改变,但B组中初级卵泡和C组中原始卵泡和初级卵泡的超微结构存在一定程度的改变.PCNA阳性表达主要见于卵母细胞、颗粒细胞和卵巢组织间质细胞,3组中均有PCNA表达,且表达无统计学差异.结论:玻璃化冷冻较慢速冷冻对人卵巢组织影响小,是一种较适宜的人卵巢组织冷冻保存方法.
-
人黄体期卵母细胞的体外成熟及玻璃化冷冻的实验研究
目的:探讨未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)技术联合玻璃化冷冻保存黄体期卵母细胞对某些女性肿瘤患者的生育能力的保存情况.方法:采集因妇科肿瘤等行卵巢切除手术过程中穿刺获取的256枚未成熟卵母细胞,按取卵时患者的月经周期分为卵泡期组(143枚)与黄体期组(113枚),每组再随即分为新鲜对照组及玻璃化冷冻组.分别进行IVM后行新鲜卵胞质内单精子注射(ICSI)授精和玻璃化冻融卵ICSI授精,比较各组间IVM后MⅡ卵率、受精率、卵裂率、优质胚胎率.结果:①卵泡期与黄体期卵母细胞的IVM率差异无统计学意义；而组间复苏存活率(68.0％ vs 48.1％)有统计学差异(P＜0.05)；卵泡期与黄体期卵母细胞新鲜组间受精率、卵裂率、优质胚胎率无统计学差异,冷冻组间差异亦无统计学意义.②与新鲜组相比,玻璃化冷冻使卵泡期与黄体期卵母细胞的受精率均降低(P＜0.01).结论:黄体期未成熟卵母细胞可以体外成熟并有继续发育为优质胚胎的能力；玻璃化冷冻使卵母细胞受精率、卵裂率下降.IVM和冻融后体外授精是某些女性肿瘤患者保存生育能力的一种有临床应用前景的方式.
