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程序化冷冻与玻璃化冷冻卵裂期胚胎移植的母婴结局对照分析
目的 探讨分析程序化冷冻与玻璃化冷冻卵裂期胚胎复苏周期移植的母婴结局. 方法对102例程序化冷冻复苏周期及109例玻璃化冷冻复苏周期进行回顾性分析,比较两组的临床结局及新生儿情况. 结果 两组患者的一般情况相似;程序化冷冻组和玻璃化冷冻组的胚胎复苏率分别为89.7％和99.6％ (P＜0.05),两组的临床妊娠率、着床率、活产率分别为56.6％、38.1％、79.2％和54.1％、33.3％、71.2％,差异无统计学意义(P＞0.05);两组新生儿的孕周、出生体重、出生缺陷率无显著性差异(P＞0.05),玻璃化冷冻组早产率(19.2％)有高于程序化冷冻组早产率(12.3％)的趋势,但无显著性差异(P＞0.05). 结论 玻璃化冷冻显著提高胚胎复苏率,能提高胚胎利用率,程序化冷冻组与玻璃化冷冻组相比拥有相似甚至更好的母婴结局,玻璃化冷冻在成为常规工作之前还需加强对其母婴结局的后续研究及子代的长期随访.
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两种冷冻方法冻融人卵巢组织异种移植后血管生成素-2表达变化的比较
目的 通过检测血管生成素-2(Ang-2)的表达,探讨两种冷冻方法对人卵巢组织的冻融及异种移植后的效果.方法 共收集16例人卵巢组织标本,每例分成2份,其中1份应用程序化冷冻方法进行冷冻,另1份应用玻璃化冷冻方法进行冷冻.解冻后分别移植到去卵巢的雌性裸鼠颈部皮下.32只SCID裸鼠随机分为两组:A组16只,移植以程序化方法冷冻复苏的人卵巢组织;B组16只,移植以玻璃化方法冷冻复苏的人卵巢组织.解冻后及移植6周后观察两组卵巢组织中始基卵泡的存活及颗粒细胞Ang-2的表达情况.结果 解冻后,A组Ang-2的阳性率明显高于B组(P＜0.05),始基卵泡正常率两组相比差别不明显(P＞0.05).移植后,始基卵泡正常率及Ang-2的阳性率两组相比均无明显差别(P＞0.05).解冻后和移植后相比,两组的Ang-2阳性率及A组的始基卵泡正常率差别均不明显(P＞0.05),B组移植后始基卵泡正常率明显低于解冻后(P＜0.05).结论 与玻璃化冷冻相比,程序化冷冻对人卵巢组织始基卵泡颗粒细胞Ang-2的表达影响更小.将解冻后的人卵巢组织进行异种移植不影响Ang-2的表达.
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小鼠卵母细胞程序化和玻璃化冷冻效果的比较
目的 本实验通过建立小鼠的实验模型,比较程序化和OPS玻璃化冷冻效果,探讨卵子冷冻的具体方法 ,为卵子冷冻技术应用于临床提供实验依据.方法 通过促排卵获取小鼠MII期卵母细胞,随机分组,观察不同冷冻方法 、高浓度的冷冻保护液,对卵子的成活及进一步发育潜能的影响;不同的IVF前培养时间对冻融卵子的受精及继续发育的影响.结果 (1)OPS玻璃化冷冻组与程序化冷冻组的存活率、受精率、卵裂率及6-8cell胚形成率均无显著差异.(2)玻璃化冷冻组与暴露组的卵母细胞存活率分别为35.3%,100%,有显著性差异(P＜0.05).暴露组与对照组比较的受精率、卵裂率,无显著性差异(P＞0.05).而暴露组与对照组的6-8cell的胚形成率分别为41%,63%,两组比较,有显著差异(P＜0.05).(3)无论OPS玻璃化冷冻法还是程序化冷冻法,冻融后的培养2 h组和培养1 h组的,受精率、卵裂率,两组比较,均有显著性差异(P＜0.05).结论 本实验证实,OPS玻璃化冷冻法至少可以达到程序化冷冻法同样的效果,而OPS玻璃化冷冻法有好于程序化冷冻法的趋势.加之,其简便、省时、经济等优点,因而,更有发展前景.
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两种冷冻方法对人卵巢组织冻存效果的分析
目的:比较程序化冷冻与玻璃化冷冻人卵巢组织的冻存效果.方法:收集19例人卵巢组织标本,每例分成2份,1份应用程序化方法冷冻,另1份应用玻璃化方法冷冻,复苏后分别移植到去卵巢的雌性裸鼠颈部皮下.38只重症联合免疫缺陷(SCID)裸鼠(移植宿主)随机分为2组:A组19只,移植程序化冷冻复苏的人卵巢组织;B组19只,移植玻璃化冷冻复苏的人卵巢组织.以去除移植宿主双侧卵巢日为D0,移植人卵巢组织日为D21,整个实验过程中,每日通过阴道脱落细胞学检查观察移植宿主动情周期变化,分别于D0、D21、D42、D63取裸鼠静脉血,酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清AMH浓度.结果:切除卵巢后移植宿主动情周期消失,D63共有14只裸鼠恢复动情周期,2组间差异无统计学意义(A组8只,B组6只,P＞0.05),但A组恢复时间显著少于B组[(16.38±1.60)d vs.(18.33±1.21)d,P＜0.05].2组间AMH水平在D0、D21、D42、D63差异均无统计学意义(P＞0.05),但A组、B组D21 AMH水平均显著低于D0,差异有统计学意义(P＜0.05).恢复动情周期移植宿主的AMH水平在D42和D63逐渐回升但未恢复至D0水平,未恢复动情周期移植宿主的AMH水平在D42和D63均未回升但仍低于D0.结论:程序化冷冻和玻璃化冷冻均能有效保存卵巢组织.在冷冻的卵巢组织经解冻-移植后宿主恢复动情周期方面,程序化冷冻要优先于玻璃化冷冻,但仍需进一步研究.
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人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究
目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.
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人多能干细胞的冷冻与保存
背景:人多能干细胞的出现与发展是近年来生物医学研究领域的重大突破.但其在基础/临床研究中的广泛应用还有诸多限制,建立安全有效标准化的冷冻保存方案是人多能干细胞广泛应用面临的重大挑战.目的:回顾人多能干细胞冷冻领域的研究进展,探索造成冷冻损伤的原因和机制及改进方式,致力于促进新的更有效的冷冻方案形成.方法:以“人多能干细胞、人胚胎干细胞、人诱导多能干细胞、玻璃化、程序化冷冻、慢冻法、冷冻保存”为中文检索词,以“human pluripotent stem cells,human embryonic stem cell,humanintroduced pluripotent stem cell,vitrification,programmed cryopreservation,slow-freezing,cryopreservation”为英文检索词,应用计算机检索中国知网全文数据库、万方全文数据库、维普(VlP)期刊全文数据库、PubMed数据库有关人多能干细胞冷冻保存技术的文献,排除与研究目的无关及重复文献,保留58篇文献进一步总结分析.结果与结论:了解人多能干细胞冷冻过程中造成冷冻损伤的原因和机制,是寻找高效的冻存方案的关键.需要更清晰的了解冷冻过程中损伤的原理,改进和创新低温生物技术来避免各种冷冻损伤的发生并致力于探讨可重复的,高效的,符合GMP要求的,能大规模冻人多能干细胞的方案.
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影响冻融胚胎存活的相关因素分析
目的:探讨年龄、受精方式、胚胎冷冻方法及胚胎冻存时间对冻融胚胎存活的影响.方法:回顾分析冻融胚胎移植(FET) 1255个周期,根据年龄、受精方式、胚胎冷冻方法及胚胎冻存时间进行分组,比较各组的冻融胚胎存活率、完全存活率及临床妊娠率.结果:玻璃化冷冻组冻融胚胎存活率、完全胚胎存活率及临床妊娠率分别为93.4％、95.9％、48.8％,程序化冷冻组冻融胚胎存活率、完全胚胎存活率及临床妊娠率分别为81.2％、54.9％、30.1％,两组差异有统计学意义(P＜0.05);年龄、受精方式、胚胎冻存时间对冻融胚胎存活率及完全胚胎存活率无明显影响(P＞0.05).结论:玻璃化冷冻胚胎技术比程序化冷冻胚胎技术能获得更高的冻融胚胎存活率、完全胚胎存活率及临床妊娠率,3年内的冻融胚胎可不考虑冻存时间对胚胎存活的影响.
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不同冷冻方案对人早期胚胎发育潜能的影响
目的:比较开放式、封闭式玻璃化冷冻技术及程序化慢速冷冻法对辅助生殖技术人早期胚胎冷冻复苏的效果.方法:回顾性分析622例胚胎冷冻复苏资料,将体外受精-胚胎移植(ⅣF-ET)患者第3天需要冷冻的胚胎,分别采用开放式、封闭式麦管玻璃化法及程序化慢速冷冻法冷冻,比较3组胚胎复苏率、空泡出现率、胚胎完整率、植入率、临床妊娠率、周期取消率、胚胎丢失率及流产率.结果:开放式冻存组共复苏280个周期、627个胚胎,胚胎复苏率、胚胎完整率、植入率和临床妊娠率分别为97.13％、94.89％、28.90％、52.61％,与程序化冷冻组(复苏165个周期、477个胚胎)胚胎复苏率(73.79％)、胚胎完整率(70.02％)、植入率(16.75％)和临床妊娠率(35.44％)相比差异有统计学意义(P＜0.05),与封闭式冻存组(复苏177个周期、400个胚胎)相比差异均无统计学意义(P＞0.05),3种冷冻组空泡出现率、周期取消率、胚胎丢失率及流产率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:两种玻璃化冷冻法能获得同样的冷冻效率,且均优于程序化冷冻法；封闭式麦管玻璃化法能更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,是冻存人早期胚胎较为理想的方法.
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人卵巢组织冷冻及异种移植对始基卵泡凋亡的影响
目的:通过检测始基卵泡凋亡率的改变来探讨2种冷冻方法对人卵巢组织的冻融及异种移植后的效果.方法:共收集16例人卵巢组织标本,每例分成2份,其中1份应用程序化冷冻方法进行冷冻,另一份应用玻璃化冷冻方法进行冷冻.解冻后分别移植到去卵巢的雌性SCID裸鼠颈部皮下.32只裸鼠随机分为2组,程序化冷冻组移植以程序化方法冷冻复苏的人卵巢组织;玻璃化冷冻组移植以玻璃化方法冷冻复苏的人卵巢组织.解冻后及移植6周后观察2组卵巢组织中始基卵泡的形态学改变及凋亡情况.结果:解冻后,程序化冷冻组始基卵泡凋亡率明显低于玻璃化冷冻组,始基卵泡正常率2组相比无明显差别.移植后,始基卵泡正常率及凋亡率2组相比均无明显差别.无论是程序化冷冻组还是玻璃化冷冻组,解冻后和移植后相比,始基卵泡正常率及凋亡率均无明显差别.结论:与玻璃化冷冻相比,程序化冷冻更有利于人卵巢组织始基卵泡的存活.将解冻后的人卵巢组织进行异种移植不影响始基卵泡的凋亡.
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人类卵子改良程序化冷冻和玻璃化冷冻比较研究
程序化冷冻曾广泛应用于辅助生殖临床，但因需依赖程序化冷冻仪，操作过程耗时较长等原因，目前正逐渐被玻璃化冷冻所取代。一般认为，相比于常规程序化冷冻，玻璃化冷冻操作简便，具有更稳定的冷冻复苏效率。相比卵裂期胚胎和囊胚，卵母细胞体积较大、含水比例高、细胞膜的渗透性低，冷冻过程中的冰晶形成更易对卵子产生损伤[1]。同时，卵母细胞纺锤体对温度改变敏感，冷冻过程可影响染色体的重排。迄今为止，无论是常规程序化冷冻，还是玻璃化冷冻，卵母细胞的冷冻复苏率仍然明显低于胚胎的同项指标，其受精胚胎移植后的着床率和新生儿出生率更是十分低下。探索改善卵子冷冻复苏技术仍然是辅助生殖工作者的一项重要任务，故此，本中心通过改良冷冻保护剂，尝试开展了改良程序化冷冻法进行卵子冷冻复苏工作，比较其与玻璃化冷冻法对卵母细胞复苏率、受精率、卵裂率及囊胚形成率的差异，分析其对卵子潜能发展的影响。
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4702例两种方法冷冻卵裂期胚胎移植的临床结局分析
目的 分析比较玻璃化冷冻与程序化冷冻卵裂期第3d(D3)胚胎解冻周期移植的临床妊娠及出生结局.方法 对我院生殖中心2008年10月至2013年7月2901例玻璃化孵冻周期及1801例程序化解冻周期进行回顾性研究,比较两组的临床妊娠结局和新生儿出生情况.结果 玻璃化冷冻组的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率(分别为97.41％、47.64％、30.99％)均显著高于程序化冷冻组的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率(52.23％、32.56％、17.40％),差异均有统计学意义(P＜0.001);玻璃化冷冻组新生儿的早产率(15.02％)、低出生体重儿发生率(20.85％)、出生缺陷率(1.11％)均高于程序化冷冻组的早产率(14.12％)、低出生体重儿发生率(17.45％)、出生缺陷率(o.60％)的趋势,但统计学上均无显著性差异(P＞0.05).结论 玻璃化冷冻可明显提高胚胎复苏率和改善临床妊娠结局,但并没有改善新生儿出生结局,与程序化冷冻相比具有相似甚至有可能更差的新生儿出生结局.
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两种冷冻方法对牛卵巢组织窦前卵泡活性的影响
目的：探讨两种冷冻方法对牛卵巢组织窦前卵泡活性的影响。方法：取新鲜的牛卵巢组织随机分为新鲜对照组、程序化冷冻组和玻璃化冷冻组，分别加入Liberase DH酶消化，然后挑取窦前卵泡并分类计数，用calcein AM以及ethidium homodimer对窦前卵泡进行荧光染色，鉴定窦前卵泡的活性。结果：3组各级卵泡的数量及分布差异无统计学意义（ P＝0．765）；与新鲜对照组（91％）相比，程序化冷冻组和玻璃化冷冻组窦前卵泡中未受损卵泡所占比例（80％和78％）略有降低（ P＝0．012）。3组中所占比例占优势的始基卵泡中未受损卵泡率差异无统计学意义（P＝0．079）；与新鲜对照组相比，两冷冻组初级卵泡中未受损卵泡率有所降低（P＜0．05），但两冷冻组间差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论：程序化冷冻法和玻璃化冷冻法均能较好地保存卵巢组织窦前卵泡的活性。
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冷冻方法与复苏后卵裂球损伤胚胎移植周期的临床结局关系
目的 探讨玻璃化冷冻法和程序化冷冻法与复苏后卵裂球损伤胚胎的移植周期临床结局的关系.方法 回顾性分析257个玻璃化冷冻周期和152个程序化冷冻周期,均解冻2枚胚胎并移植,根据移植胚胎卵裂球损伤情况分为完全存活组(A组)、1枚胚胎卵裂球损伤组(B组)、2枚胚胎卵裂球均损伤组(C组),比较两种冷冻方法复苏后胚胎完全存活率,以及卵裂球损伤胚胎移植周期的妊娠率、种植率、早期流产率等指标.结果 在均解冻并移植2枚胚胎的情况下,玻璃化冷冻法组复苏后胚胎完全存活率显著高于程序化冷冻法组(78.79％ vs40.46％,P＜0.01),但在移植有1枚胚胎卵裂球损伤组妊娠率(47.61％ vs 54.39％,P＞0.05)、种植率(29.36％vs 38.60％,P＞0.05)、早期流产率(20.00％ vs 16.13％,P＞0.05)比较差异无统计学意义；移植有2枚胚胎卵裂球均损伤组妊娠率(30.43％ vs 33.87％,P＞0.05)、种植率(19.56％ vs 23.39％,P＞0.05)、早期流产率(28.57％ vs 9.52％,P＞0.05)比较差异无统计学意义.结论 玻璃化冷冻法与程序化冷冻法相比,能显著提高胚胎复苏的完全存活率,但对复苏后有卵裂球损伤胚胎的移植周期临床结局没有影响.
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玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用
目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8％和82.9％,复苏胚胎完整率分别为96.8％和63.1％,胚胎种植率分别为32.0％和18.1％,临床妊娠率分别为53.9％和33.1％,两组数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.
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不同胚胎冷冻保存时间和方法对FET周期临床结局的影响
目的:比较分析玻璃化和程序化冷冻卵裂期和囊胚期胚胎保存后复苏效果及临床结局.方法:根据不同冷冻保存时间将胚胎冻融周期分为4组,分别为1~6个月组、7~12个月组、13~24个月组和≥25个月组,比较四组的复苏率、临床妊娠率和流产率.根据不同冷冻保存方法分为玻璃化冷冻组和程序化冷冻组.结果:4组胚胎复苏存活率(98.1%、99.0%、96.8%和95.7%)、临床妊娠率(54.4%、55.4%、49.6%和51.5%)和流产率(10.7%、8.9%、9.45和11.15)相比较,差异均无统计学意义(P>0.05).玻璃化冷冻组胚胎复苏率和临床妊娠率均显著高于程序化冷冻组(P<0.05).结论:胚胎冷冻保存时间不影响解冻后胚胎质量.玻璃化冷冻胚胎方法复苏效果优于程序化冷冻法.囊胚期冻融胚胎可获得较高的临床妊娠率.
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不同胚胎冷冻方法对人类早期胚胎解冻后的复苏效果及临床结局的影响
目的 比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对人类早期胚胎解冻后复苏效果及临床结局的影响.方法 辅助生殖技术获取的剩余可利用人类胚胎2 884枚,其中采用玻璃化冷冻复苏666个周期,解冻胚胎1 516枚、复苏1 383枚、移植胚胎1 375枚;程序化冷冻复苏506个周期,解冻胚胎1 368枚、复苏1 090枚、移植1 077枚.比较两种方法的复苏效果及临床结局.结果 玻璃化冷冻组胚胎复苏率、胚胎完整率分别为92.02％、92.11％,高于程序化冷冻组的79.68％、69.63％(P＜0.05);两组种植率、临床妊娠率、周期取消率、多胎妊娠率、早期流产率、新生儿胎龄、早产率、新生儿出生体重、出生缺陷率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 玻璃化冷冻较程序化冷冻有更高的胚胎复苏率及胚胎完整率,胚胎利用率高,两种冷冻方法的临床结局相似,适用于人类胚胎的冷冻.
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两种胚胎冻融方法对累积妊娠率的影响
目的 比较玻璃化法和程序法对人第3天卵裂期胚胎冻融移植周期累积妊娠率的影响.方法 选取程序化冻融周期92例、玻璃化法冻融周期179例,比较分析这两种冻融方法在存活率、累积临床妊娠率等方面的效果.结果 玻璃化法在胚胎复苏存活率(94.3％ vs 53.9％,P＜0.01)、复苏完整胚胎形态(89.4％ vs 36.3％,P＜0.01)、累积临床妊娠率(28.2％ vs 43％,0.01＜P ＜0.05)等方面均明显优于程序化法,但在在胚胎植入率(13.7％ vs 13.5％)、流产率(18.2％ vs 22.4％)等方面差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 与程序化法比较,玻璃化法可以提高累积妊娠率,是一种高效胚胎冻融方法.
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D3卵裂期胚胎玻璃化冷冻技术在IVF实验室中的应用
目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类卵裂期胚胎冻存中的应用价值.方法 回顾性分析本中心261个冷冻胚胎复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎存活率、完好率、妊娠率和种植率等数据.结果 玻璃化冷冻组的存活率(97.11％)、完好率(89.02％)和种植率(23.12％)显著高于程序化组(91.31％、63.73％、16.31％) (P ＜0.05),而妊娠率和平均年龄、平均移植胚胎数、平均内膜厚度两组间无统计学差异(40.26％ vs40.22％、31.3 ±5.3vs32.2±5.5、2.25±0.55vs2.27±0.70、8.9±1.1vs9.1±1.6)(P＞0.05).结论 玻璃化冷冻是卵裂期胚胎保存的优选方法.
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胚胎冷冻技术的变迁与发展
胚胎冷冻是人类辅助生殖技术的重要组成部分,在增加移植机会、提高累积妊娠率、减少卵巢过度刺激、降低多胎妊娠率等方面起重要作用.随着生殖医学专家对胚胎冷冻过程逐渐深入的了解和实践,胚胎冷冻方法由初的程序化法到玻璃化法并不断的改进,如开放式塑料细管冷冻法、快速冷冻法、小容积超快速冷冻法.然而,包括玻璃化冷冻法在内的胚胎冷冻方法在实施过程中仍存在一些关键性问题还未得到完全解决.该文综合近年来广泛应用的胚胎冷冻方法的改进和研究进展,对目前存在的问题及其研究前景作以综述,以探讨如何建立佳的胚胎冷冻方案用于临床.
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玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响
目的:比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响.方法:回顾性分析590个复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率等各项指标.结果:玻璃化冷冻组的平均移植胚胎数(2.2±0.5枚)显著少于程序化组(2.5±0.6枚)(P＜0.05),复苏率(94.4％)、完整胚胎率(73.7％)、临床妊娠率(50.8％)和种植率(30.2％)显著高于程序化组(77.2％、44.3％、36.2％、21.1％)(P＜0.05),而流产率和周期取消率组间均无统计学差异(16.6％ vs 27.7％,1.3％ vs 2.3％)(P＞0.05).程序化冷冻胚胎的种植率在完整胚胎(13.5％)和非完整胚胎(16.0％)组间无统计学差异(P＞0.05)；玻璃化冷冻完整胚胎组的种植率(30.4％)显著高于非完整胚胎组(20.1％)(P＜0.05)；而2种冷冻方法的流产率完整胚胎组(35.7％,15.1％)均显著高于非完整胚胎组(8.7％,2.9％)(P＜0.05).在玻璃化冷冻中,卵裂期胚胎组的各项指标与囊胚期组相比均无统计学差异(P＞0.05).结论:玻璃化冷冻法适用于人类胚胎的保存,对卵裂期和囊胚期胚胎有同样理想的保存效果和临床结局,玻璃化冷冻中,胚胎完整性对胚胎种植率起着重要的作用.
