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  • 玻璃化冻融后单个囊胚移植周期的临床结局分析

    作者:朱莉;丁晨晖;李涛;曾艳红;刘瑜亮;徐艳文;周灿权

    目的 分析玻璃化冻融后单个囊胚移植周期中妊娠结局的影响因素. 方法 回顾性分析中山大学附属第一医院2011年1月至2012年8月的109个单个冻融囊胚移植周期资料.根据囊胚玻璃化冷冻时的受精天数,将其分为2组:D5单囊胚移植组(n=48)、D6单囊胚移植组(n=61).比较两组的胚胎复苏率、植入率和流产率,并分析囊胚形态参数预测胚胎植入潜能的价值. 结果 D5单囊胚移植组的植入率为45.83%,D6单囊胚移植组为24.59%,两组比较有统计学差异(P<0.05).D5移植组的流产率有低于D6移植组的趋势(9.09% vs.26.67%),但差异无统计学意义(P>0.05).Logistics回归分析结果显示,囊胚分期、内细胞团和滋养外胚层形态均与植入潜能无显著相关性(P>0.05,95%CI分别为0.879~3.061、0.318~3.184和0.328~1.362).然而分别对D5与D6囊胚进行分析,结果显示D6囊胚扩张程度与植入潜能相关(P<0.05,95%CI 1.080~10.013). 结论 D5单囊胚移植结局优于D6单囊胚移植;D6囊胚的发育速度与囊胚的植入潜能相关.

  • 含雌激素的冷冻保护剂对少弱精子玻璃化冻存效果的研究

    作者:李凤华;刘蔚;刘丽;袁莹莹;贾韶彤;赵君利

    目的 比较添加雌激素的冷冻保护剂对少弱精子的冻存效果.方法 将40例少弱精子患者的精液标本分别采用甘油、甘油-卵黄-柠檬酸钠(GYC)、甘油+雌激素(甘油+ E2)、甘油-卵黄-柠檬酸钠+雌激素(GYC+ E2)四种冷冻保护剂(CPM)冷冻,比较冻融前后精子活率、活力(a+b级)、正常精子形态百分率、精尾低渗肿胀率(HOSR).结果 四种CPM对少弱精子的冷冻效果存在差别,精子活率、活力、正常形态百分率、精子尾部低渗肿胀率在冻后都有不同程度下降(P<0.05),但甘油+E2、GYC+ E2 能显著提高冻存后精子的活率及活力(a+b级).结论玻璃化冻存对精子存在损伤,含雌激素的冷冻保护剂可以提高低质量精液的冻存效果.

  • 玻璃化冷冻囊胚复苏移植与新鲜胚胎移植的围产期状况比较

    作者:甄璟然;孙正怡;邓成艳;郁琦;周远征;刘美芝;何方方

    目的 比较体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中玻璃化冷冻囊胚复苏移植与新鲜胚胎移植的围产期状况. 方法 回顾性分析2005年5月至2007年11月经我院生殖中心实施玻璃化冷冻囊胚复苏移植术后妊娠分娩132例(A组)的围产结局,以同期IVF-ET新鲜卵裂球期胚胎移植250例(B组)的围产期状况作为对照.比较两组的早产率、双胎出生率、剖宫产率、新生儿男女性别比;另外对两组单、双胎妊娠的新生儿胎龄、出生体重、身长、新生儿窒息、新生儿出生缺陷及新生儿死亡的发生率等进行比较. 结果 A组132例共分娩163个新生儿,男女性别比为1.26∶1;B组250例分娩332个新生儿,男女性别比为0.91∶1;两组比较无统计学差异(P>0.05).单胎新生儿分析:A组单胎新生儿共有101个,平均胎龄为(277.4±15.1)d,平均体重和身长分别为(3,377.1±580.0)g和(49.9±2.6) cm;B组单胎新生儿共有165个.平均胎龄为(273.4±17.7) d,平均体重和身长分别为(3,257.9±542.6) g和(49.3±2.8) cm;两组比较无统计学差异(P>0.05).巨大儿出生率A组(15.8%)显著高于B组(7.3%)(P<0.05);两组低体重出生率、极低体重出生率、新生儿窒息率、新生儿出生缺陷和新生儿死亡率比较无统计学差异(P>0.05).双胎新生儿分析:A组和B组中双胎分别有62个和168个新生儿,两组的新生儿平均胎龄、平均体重和身长,分别为(266.7±15.1) d和(258.9±17.8) d;(2,643.6±642.6) g和(2,468.6±501.7) g;(47.7±2.7) cm和(46.8±3.1) cm;低体重出生率分别为21%和37.1%,两组比较均有统计学差异(P<0.05).两组双胎新生儿的极低体重、巨大儿、新生儿窒息、新生儿出生缺陷及死亡率之间无统计学差异(P>0.05). 结论 玻璃化冷冻囊胚复苏移植后妊娠分娩的新生儿孕周、出生体重及身长均不低于新鲜胚胎移植后分娩的新生儿.玻璃化冷冻囊胚复苏移植不增加新生儿出生缺陷、死亡率及早产率.

  • 人卵裂期胚胎玻璃化冻融体外培养时间对妊娠结局的影响

    作者:刘晓音;薛松果;金炜;吕祁峰;彭秋平;曹少锋;匡延平

    目的 研究人卵裂期胚胎玻璃化冻融体外培养时间对妊娠结局的影响.方法 对我中心进行的解冻胚胎数不超过3枚,解冻胚胎全部存活并全部移植的274例患者分为当日移植组(A组)和次日移植组(B组),比较组间临床妊娠率、种植率和流产率.结果 胚胎龄为第2天(D2)的共163个周期,其中A组130个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:23.08%、11.71%和6.67%,B组33个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:27.27%、11.84%和11.11%;胚胎龄为第3天(D3)的共111个周期,其中A组94个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:36.17%、19.35%和8.82%,B组17个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:35.29%、20.45%和16.67%.D2和D3胚胎当日移植组和次日移植组之间的临床妊娠率、种植率和流产率均无统计学差异.结论 延长体外培养时间不显著影响玻璃化冻融卵裂期胚胎的发育潜能,可根据需要灵活安排玻璃化冷冻胚胎的解冻时间.

  • 封闭式载杆玻璃化冷冻和程序化冷冻的临床效果比较

    作者:张顺吉;陆长富;唐小成;张硕屏;卢光琇;林戈

    目的 回顾性分析封闭式玻璃化冷冻技术与程序化冷冻技术在胚胎冷冻解冻及移植临床效果的差异. 方法 首先比较2010年11~12月采用三种开放式载杆和一种封闭式载杆对卵裂期胚胎进行的玻璃化冷冻.然后对2010年11月至2011年11月采用封闭式载杆行玻璃化冷冻和2009年1月至2010年12月采用程序化冷冻的数据进行对比,比较两组的复苏率、着床率和临床妊娠率等. 结果 三种开放式载杆与封闭式载杆的复苏率及着床率、临床妊娠率无显著性差异(P>0.05).封闭式玻璃化冷冻和程序化冷冻两种冷冻方法比较显示:卵裂期胚胎采用玻璃化冷冻共2,619周期,解冻6,627枚胚胎,复苏6,276枚,复苏率为94.7%(6,276/6,627),1,522枚胚胎着床,着床率为24.3%(1,522/6,276),共1,135周期获得临床妊娠,移植妊娠率为43.3%(1,135/2,619),均显著高于程序冷冻组(P<0.05),后者的复苏率、着床率和移植妊娠率分别为59.9%(7,797/13,016),20.6%(1,603/7,797)和39.3%(1,224/3,117).玻璃化冷冻囊胚共331周期,解冻677枚胚胎,复苏589枚,复苏率为87.0%(589/677),214枚胚胎着床,着床率为36.3%(214/589),168周期获得临床妊娠,移植妊娠率为50.8%(168/331),均显著高于程序冷冻组(P<0.05),后者共114周期,解冻217枚胚胎,140枚复苏,复苏率为64.5%(140/217),着床率为22.1%(31/140),妊娠率23.7%(27/114). 结论 采用封闭式载杆玻璃化冷冻胚胎是一种较程序化冷冻更有效、更安全的胚胎冷冻方法.

  • 冻融液的温度对人未成熟卵母细胞玻璃化冻融效果的影响

    作者:龙晓林;黄玉玲;孙筱放;范勇;杜红姿;石宇;张文红;李莉

    目的 探讨冻融液的操作温度对未成熟人卵母细胞(GV、MI)玻璃化冻融效果的影响.方法 收集卵胞浆内单精子注射(ICSI)患者的GV、MI卵母细胞,根据冻融液操作温度的不同分为A、B、C组.冻融后存活及未冷冻对照组(D组)卵母细胞体外成熟(IVM)培养,成熟的MII卵母细胞固定后进行免疫荧光染色,然后用Nikon CISI激光扫描共聚焦显微镜观察纺锤体、染色体形态.结果 实验组GA、GB、GC 卵母细胞冻融后的存活率和体外成熟率分别为100%、81.3%、68.8%和33.3%、83.3%、72.7%,仅GC组的存活率与对照比较存在显著性的差异(P<0.05);实验组中只有GB组获得了纺锤体(20%)和染色体(10%)形态正常卵母细胞.实验组MA、MB、MC卵母细胞冻融后的存活率分别为71.4%、100%、83.3%,各实验组与对照组比较无显著性差异(P>0.05);MA组体外成熟率与对照组比较存在极显著性的差异(0%比57.1%,P<0.01),MB、MC与对照组的体外成熟率比较无显著性的差异(66.7%、80%比57.1%,P>0.05);仅MC获得1个正常纺锤体和染色体形态卵子.结论 冻融液的合适操作温度可以提高未成熟卵子的冻融效果.

  • Cryotop玻璃化冻融人类囊胚79例报告

    作者:张军强;武恂;李秀玲;赵静;陈静琴;童国庆

    目的 探讨玻璃化冷冻保存技术在人类囊胚冷冻复苏中的应用效果. 方法 将接受体外受精-胚胎移植患者第5天(D5)或第6天(D6)所获得的剩余囊胚进行Cryotop玻璃化冷冻保存,分析囊胚复苏后的复苏率、妊娠率及种植率等指标. 结果 玻璃化法冷冻囊胚共 224个周期、543个囊胚;玻璃化冷冻复苏 79个周期、142个囊胚、存活116个(81.7%);移植70个周期、116个囊胚,临床妊娠25个周期(35.7%),其中4例流产(16%),3例足月分娩3个正常新生儿,18例继续妊娠. 结论 Cryotop玻璃化冷冻法适于人类囊胚的冷冻保存,获得较理想的复苏率、妊娠率和种植率,流产率没有明显提高,在临床中值得应用和推广.

  • 程序化冷冻与玻璃化冷冻卵裂期胚胎移植的母婴结局对照分析

    作者:王宇峰;于春梅;杨海燕;陈莉

    目的 探讨分析程序化冷冻与玻璃化冷冻卵裂期胚胎复苏周期移植的母婴结局. 方法对102例程序化冷冻复苏周期及109例玻璃化冷冻复苏周期进行回顾性分析,比较两组的临床结局及新生儿情况. 结果 两组患者的一般情况相似;程序化冷冻组和玻璃化冷冻组的胚胎复苏率分别为89.7%和99.6% (P<0.05),两组的临床妊娠率、着床率、活产率分别为56.6%、38.1%、79.2%和54.1%、33.3%、71.2%,差异无统计学意义(P>0.05);两组新生儿的孕周、出生体重、出生缺陷率无显著性差异(P>0.05),玻璃化冷冻组早产率(19.2%)有高于程序化冷冻组早产率(12.3%)的趋势,但无显著性差异(P>0.05). 结论 玻璃化冷冻显著提高胚胎复苏率,能提高胚胎利用率,程序化冷冻组与玻璃化冷冻组相比拥有相似甚至更好的母婴结局,玻璃化冷冻在成为常规工作之前还需加强对其母婴结局的后续研究及子代的长期随访.

  • 卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育及妊娠结局的影响

    作者:严正杰;蔡令波;冯婷;马龙;陈娟;王媁;冒韵东;刘嘉茵

    目的 探讨玻璃化冷冻对卵母细胞体外受精、胚胎发育以及妊娠结局的影响.方法 将193枚玻璃化冷冻卵母细胞解冻复苏,采用卵胞浆内单精子注射法受精,观察胚胎发育形态,经72 h体外培养后移植.结果 成熟卵母细胞解冻复苏率为75.6%,正常受精率为72.6%,卵裂率为88.7%,优质胚胎率为48.9%.共移植19例,9例妊娠,已分娩2例,临床妊娠率为47.3%.新鲜周期与冻卵解冻周期相比,卵裂率、可移植胚胎率和优质胚胎率均无显著性差异(P>0.05).结论 玻璃化冷冻方法对成熟卵母细胞的胚胎发育及妊娠结局无显著影响.

  • 三种不同内膜准备方案在玻璃化冻融囊胚移植周期中的应用

    作者:张玉婷;苏迎春

    目的 探讨3种不同内膜准备方案在玻璃化冻融囊胚移植周期中的应用. 方法 回顾性分析2012年1月至201 5年12月间在我中心接受玻璃化冻融囊胚移植的1 264个周期的临床资料,根据内膜准备方案的不同分为3组:自然周期组(A组,467个周期,首次解冻周期移植);人工周期组(B组,725个周期,首次解冻周期移植);降调节+人工周期组(C组,72个周期,首次解冻周期移植未妊娠再次行解冻移植者),比较3组的一般资料及妊娠结局. 结果 A组的女方年龄显著高于B组,体重指数显著低于B组,基础FSH、移植日子宫内膜厚度显著高于B、C组(P均<0.05);A、B组的移植囊胚数显著低于C组(P<0.05).A组优质囊胚率显著高于B、C组,B组显著高于C组(P<0.05).3组间着床率、临床妊娠率、早期流产率、晚期流产率、早产率及活产率比较无显著性差异(P>0.05).进行Logistic多因素回归分析提示,移植日内膜厚度、移植囊胚数及移植优质囊胚数是临床妊娠率的独立影响因素(P<0.05),内膜准备方案并不是临床妊娠率的影响因素(P>0.05). 结论 对于<35岁月经周期规律的患者行首次或再次玻璃化冻融囊胚移植时,不同子宫内膜准备方案并不影响妊娠结局.

  • 人类胚胎冷冻:真的到了由慢速向玻璃化方法过渡的时代?

    作者:蔡学泳;徐阳

    自第一例冻融人类胚胎获得妊娠以来,胚胎冷冻已经成为辅助生殖技术中的一项常规操作.近年来,玻璃化冷冻技术成功用于冻存人类卵母细胞及胚胎.那么,玻璃化冷冻方法已经安全到可以广泛应用,甚至可以取代慢速冷冻方法了吗?实际上仍有许多问题有待解决,包括冷冻保护剂毒性、开放式载体的交叉污染、复苏胚胎发育潜能及损伤鉴定等.

  • 未成熟卵母细胞冻存

    作者:姜李乐;韦多;张翠莲

    随着人类辅助生殖技术的发展,人未成熟卵母细胞的冷冻技术因其特有优势得到了较多的关注,研究数据支持未成熟卵母细胞冻存是保存女性生育力的一种有临床应用前景的方式.冷冻和复融过程会对卵母细胞造成一系列形态结构、细胞代谢、生理生化及发育潜能的影响.作为一个较新的方向,未成熟卵母细胞的冷冻技术缺乏标准方案,很多相关研究成果尚存在争议.本文着重未成熟卵母细胞冷冻技术的意义、优势、影响因素等方面的新观点予以综述.

  • 不同冷冻方法对小鼠卵母细胞发育潜能及细胞骨架的影响

    作者:陈雅;葛红山;叶碧绿

    目的 比较不同冷冻方法对不同成熟阶段小鼠卵母细胞复苏、胚胎发育及细胞骨架的影响,寻求佳的卵母细胞冷冻方法. 方法 分别以SOPS玻璃化及慢速法冷冻小鼠中期(MII)和生发泡期(GV)卵母细胞.解冻复苏后,分别作体外培养成熟(IVM)、体外受精(IVF)或固定作免疫荧光标记,统计复苏率、成熟率、受精率、囊胚率及纺锤体等细胞骨架指标. 结果 玻璃化冷冻组MII卵和GV卵母细胞的复苏率及囊胚率均显著高于慢速冷冻组(P<0.05).慢速冷冻组中MII卵复苏率显著低于GV卵(40.4% vs 57.1%,P<0.01).但同一种冷冻方法保存的MII卵和GV卵的受精率及囊胚率相比,均无显著性差异(P>0.05).两组的GV卵成熟率无显著差异.玻璃化冷冻组GV卵的纺锤体、染色体及纺锤体和染色体正常率均高于慢速冷冻组GV卵但无显著差异. 结论论 玻璃化冷冻能有效改善冻融卵母细胞的复苏及胚胎发育;与MII卵比较,冷冻GV卵对细胞骨架损伤较小;两种冷冻方法均不影响GV卵冻融后成熟.

  • 不同方法冻融山羊卵巢组织的研究

    作者:吴志南;丁家桐;沈宗姬

    目的 探讨山羊卵巢组织不同玻璃化冷冻方法对其卵母细胞体外成熟、体外受精及胚胎发育的影响.方法 采用三种不同的冷冻保护液(I、II、III)保存的卵巢组织吸入0.25 ml麦管中直接投入液氮中冷冻保存.采用慢速解冻法解冻后对卵巢组织进行形态学观察;收集卵母细胞进行体外培养.结果 三种不同冷冻方法冷冻卵巢组织解冻后收集的卵母细胞存活率分别为55.2%、48.9%和46.7%,组间比较无显著性差异(P>0.05);成熟率分别为58.5%(I组)、28.9%(II组)、33.3%(III组),I组显著高于II、III组(P<0.01);三组的受精率、卵裂率、8细胞胚胎的形成率均无显著性差异(P>0.05);卵巢组织解冻后形态学分析表明,I组效果好于II、III组.结论 采用玻璃化方法冷冻卵巢组织,在冷冻保护液中加入卵黄可提高冷冻保护效果.

  • 小鼠卵巢组织冷冻保存方法对组织内分泌功能的影响

    作者:朱夏琴;孙正怡;郁琦;甄璟然;王雪;何方方

    目的 比较不同的冷冻方法对小鼠卵巢组织的保存效果及对组织内分泌功能的影响. 方法 25只6周龄ICR雌鼠,取卵巢皮质切块后,根据不同冷冻方法随机分成5组:新鲜对照组、二甲亚砜慢速冷冻组(A组)、丙二醇慢速冷冻组(B组)、冷冻管玻璃化冷冻5min组(C组)及冷冻管玻璃化冷冻8min组(D组).分别进行卵巢组织冷冻复苏,复苏后体外培养2周以及复苏后同种移植饲养2周实验.比较各组体外培养液中以及复苏移植后小鼠静脉血中雌二醇(E2)水平. 结果 体外培养过程中,各组培养液中E2水平均随培养时间不断增加(F=14.146,P<0.001);同一天的E2水平比较,A、B组显著高于对照组及C,D组(P<0.05),C、D组与对照组无统计学差异(P>0.05).移植饲养2周后,DMSO慢速冷冻复苏移植组、PROH慢速冷冻复苏移植组的平均E2水平显著高于两组玻璃化复苏移植组、新鲜组织移植对照组、未处理自然对照组及去势未移植对照组(P<0.05),新鲜移植对照组、两组玻璃化复苏移植组及去势未移植对照组的平均E2水平显著低于未处理的自然对照组(P<0.05). 结论 慢速冷冻及玻璃化冷冻的小鼠卵巢组织复苏后,经过体外培养及同种移植均能保持一定的内分泌功能;慢速冷冻效果可能优于冷冻管玻璃化冷冻.

  • 兔卵巢组织慢速冷冻和玻璃化冷冻保存方法的研究

    作者:符晓倩;何方方;甄璟然

    目的 比较不同冷冻方法对兔卵巢组织的保存效果.方法 15只新西兰雌兔,取卵巢皮质切块后,随机分成5组:新鲜组(A组)、二甲亚砜慢速冷冻组(B组)、丙二醇慢速冷冻组(C组)、冷冻管玻璃化冷冻组(D组)及固相表面玻璃化冷冻组(E组).比较各组卵巢组织的原始和初级卵泡形态正常率;通过体外培养测定培养液中雌二醇(E2)水平;比较冻融后卵巢组织的内分泌功能;通过TdT介导的dUTP缺口末端标记技术,检测细胞凋亡情况.结果 原始卵泡正常形态率与A组相比,B、D组显著降低(P<0.05),C、E组无显著性差异;初级卵泡正常形态率5组间无显著性差异.培养14d后,各实验组原始卵泡形态正常率均低于A组(P<0.001),各实验组间无显著性差异;组间初级卵泡形态正常率无明显差异.体外培养过程中,培养液E2水平不断增加(P<0.001),慢速冷冻和玻璃化冷冻的E2平均浓度有显著性差异(P<0.05).细胞凋亡检测显示,无论是原始卵泡还是初级卵泡,与A组相比,各实验组的卵泡凋亡率均无显著性差异.结论 本实验中,慢速冷冻和固相表面玻璃化冷冻均能很好地保存兔卵巢组织,经过体外培养,能保持一定的内分泌功能.

  • 以细胞筛为载体的玻璃化冷冻和慢速程序化冷冻保存人卵巢组织的效果比较

    作者:姬萌霞;孙正怡;郁琦;甄璟然;王雪;刘美芝

    目的 比较以细胞筛为载体的玻璃化冷冻与慢速程序化冷冻用于人卵巢组织冷冻的效果. 方法 人卵巢组织取皮质切块后,随机分为3组:新鲜组织对照组(F组)、慢速程序化冷冻组(S组)及以细胞筛为载体玻璃化冷冻组(V组).卵巢组织冷冻复苏后,固定切片后行苏木素-伊红染色,观察卵泡形态;使用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术,观察卵泡凋亡情况;部分卵巢组织体外培养,隔日采集培养液后检测雌二醇(E2)浓度.比较三组卵泡正常形态率、卵泡凋亡率及E2浓度. 结果 与F组原始卵泡正常形态率(91.1%)相比,V组原始卵泡正常形态率(88.1%)无显著差异(P>0.05),而S组原始卵泡正常形态率(79.6%)显著下降(P<0.001);V组初级卵泡正常形态率(74.2%)与S组(73.6%)相似,但两组均低于F组(89.0%)(P<0.05);凋亡检测中,3组凋亡率无显著差异(P>0.05);体外培养2周,各组E2浓度持续上升,F组B浓度显著高于S组、V组(P<0.001),而S组与V组E2浓度无显著差异(P>0.05). 结论 以细胞筛为载体的玻璃化冷冻能较好地保存人卵巢组织,复苏后组织体外培养后,还可持续分泌E2.

  • 卵母细胞玻璃化冷冻对早期胚胎发育潜能和卵母细胞特异性基因表达的影响

    作者:郎婧雯;孙贻娟;谷瑞环;冯云

    目的 研究玻璃化冷冻-复苏液及冷冻-复苏过程对卵母细胞体外受精后早期胚胎发育潜能及卵母细胞特异性发育相关基因表达的影响. 方法 C57BL/6小鼠417枚成熟期卵母细胞随机分为三组,新鲜对照组154枚,新鲜-复苏液处理组105枚,玻璃化冷冻复苏组158枚,行体外受精比较三组2-细胞率及囊胚率,比较三组卵母细胞特异性基因H1foo、Bmp15、Gdf9、Sohlh2、Nobox的mRNA表达水平. 结果 体外受精后玻璃化冷冻复苏组2-细胞率(63.93%)显著低于其他两组(81.25%、77.42%) (P<0.05),囊胚率三组无统计学差异.Bmp15、Gdf9、Sohlh2、Nobox的mRNA表达水平三组无统计学差异(P>0.05),H1foo αmRNA和蛋白表达在玻璃化冷冻复苏组显著低于新鲜-对照组和新鲜-复苏液处理组(P<0.05).结论 玻璃化冷冻-复苏液对卵母细胞体外受精后早期胚胎发育及卵母细胞特异性基因表达无显著影响,而冷冻复苏过程会降低体外受精后2-细胞率及H1foo-αmRNA和蛋白表达水平.

  • 玻璃化冷冻小鼠胚胎对胎鼠及胎盘H19DMD甲基化状态的影响

    作者:王增艳;何方方;徐苓

    目的 研究胚胎玻璃化冷冻对胎鼠及胎盘H19基因印记控制区(DMD)甲基化状态的影响. 方法 以正常生育期雌雄鼠合笼获得的14 d胎龄的胎鼠及胎盘为对照组;以促排卵、体外受精、体外培养及胚胎移植后获得14 d胎龄的胎鼠及胎盘作为体外受精组;冷冻组与体外受精组不同的是体外培养的胚胎经玻璃化冷冻复苏后再移植.对获得的胎鼠及胎盘提取基因组DNA,经亚硫酸盐变性后克隆测序分析H19 DMD的甲基化状态. 结果 体外受精组胎鼠H19 DMD区有甲基化丢失,胚胎冷冻组中丢失更严重;胎盘中也存在明显的甲基化丢失,但冷冻组与体外受精组相比无明显改变. 结论 本研究提示小鼠胚胎的玻璃化冷冻过程会加重体外操作等引起的植入后胎鼠H19 DMD甲基化丢失;对胎盘H19 DMD甲基化状态无明显影响.

  • 自然周期成熟卵和未成熟卵体外培养成熟获得的剩余胚胎经玻璃化冻融35例分析

    作者:周国萍;徐野;李建华

    1983年Wood等[1]通过冻融胚胎移植获得首例临床妊娠,1985年Cohen等[2]将首例冻融胚胎移植获得了健康婴儿,此后胚胎冷冻技术开始成为辅助生殖技术的一个重要组成部分.本院生殖中心自2005年4月,开展了自然周期体外受精(IVF)结合未成熟卵体外成熟(IVM)技术(IVF/M)治疗不育症,并将剩余胚胎经玻璃化冷冻保存,待机进行解冻胚胎移植,提高了体外受精/体外成熟-胚胎移植(IVF/M-ET)的移植机会和累积妊娠率.

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