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5-氮-2′-脱氧胞苷逆转膀胱癌细胞hepaCAM基因的表达及对其生长的抑制
目的 研究5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-CdR)逆转hepaCAM表达及抑制膀胱癌细胞的生长.方法 MTT法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；RT-PCR检测hepaCAM mRNA的表达.结果 在T24细胞中,3.0和10.0 μmol/L5-aza-CdR药物浓度的抑制率明显高于0.3和1.0 μmol/L 5-aza-CdR(P＜0.05),在BIU-87细胞中,5.0 μmol/L5-aza-CdR药物浓度的抑制率明显高于0.1和0.5μmol/L(P＜0.05),并且药物处理细胞72 h的抑制率明显高于24和48 h(P＜0.05)；5-aza-CdR处理细胞后,T24和BIU-87细胞凋亡数明显增加(P＜0.05)；并可逆转hepaCAMmRNA表达.结论 5-aza-CdR可使hepaCAM基因重新表达,并通过诱导凋亡而抑制膀胱癌细胞的生长.
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顺铂对膀胱癌细胞自噬和凋亡的作用及其相关性
目的：研究顺铂（ DDP）能否激活人膀胱癌T24细胞自噬以及其中可能的机制，并且探索自噬和凋亡之间相关性。方法用MTT法检测不同浓度的顺铂（0、10、20和40μg／mL）对T24细胞的增殖作用。透射电镜观察细胞内自噬小体；用Western blot技术检测细胞内LC3-Ⅱ、 P62蛋白和细胞外信号调节蛋白激酶1／2（ ERK1／2）和磷酸化ERK1／2蛋白的表达量。研究自噬对于DDP处理后T24细胞增殖和凋亡的影响。结果 DDP可显著抑制 T24细胞的增殖（ P ＜0.05），并呈浓度依赖性，半数抑制浓度（ IC50）为（30.3±2.4）μg／mL。 DDP可以诱导T24细胞发生自噬，细胞自噬体数目明显增加；明显上调LC3-Ⅱ蛋白的表达（ P＜0.05），下调 P62蛋白的表达（ P ＜0.05）。 DDP 能上调 ERK1／2的磷酸化（ P ＜0.05）；ERK1／2通路抑制剂U0126可以抑制DDP诱导的自噬，表现为LC3-Ⅱ蛋白表达明显下降（ P＜0.05）。自噬抑制剂渥曼青霉素（ WTM ）抑制自噬后明显加强 DDP 对 T24细胞的增殖抑制和凋亡促进作用（ P＜0.05）；在DDP和WTM联合处理组，细胞凋亡相关蛋白多聚 ADP-核糖聚合酶1（ PARP 1）裂解增强， cleaved-caspase-3增多（ P＜0.05）。结论自噬对 T24细胞具有保护作用，可抑制 DDP诱导的细胞凋亡，自噬活化的机制可能与ERK信号通路的激活有关。
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miR-130b-3p有望作为人膀胱癌的标志物
目的 进一步了解miRNA在膀胱癌中的潜在机制.方法 芯片分析4对人膀胱癌组织和相邻正常组织中的miRNA的表达.并用RT-qPCR来验证两个上调的miRNA及其靶基因的表达是否符合miRNA/mRNA芯片结果.通过相关性分析和双荧光素酶报告实验推断并验证miR-130b-3p可以靶向PTEN.应用CCK8、EDU、流式细胞术、划痕、Transwell和细胞骨架等实验证明miR-130b可以影响膀胱癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭.用Western blot检测PI3K/AKT和整合素β1/FAK信号通路的关键靶蛋白.结果 人膀胱癌中miR-130b-3p表达高于癌旁且与PTEN表达呈负相关.miR-130b3-p可下调PTEN表达,导致PI3K/AKT和整合素β1/FAK信号通路的激活,且与膀胱癌EJ细胞的增殖、迁移和侵袭相关.细胞转染miR-130b-3p抑制剂时,可以重排细胞骨架.结论 本结果揭示miR-130b/PTEN有望用于人膀胱癌诊断和治疗的标志物.
关键词： 芯片 miR-130b-3p PTEN 膀胱癌 -
阻断PLCE基因对膀胱癌细胞侵袭能力的影响
目的 构建PLCE基因的shRNA表达载体转染膀胱癌细胞T24株,观察其对T24细胞转移侵袭等恶性行为的影响.方法 设计合成PLCE基因mRNA的寡核苷酸序列,插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中,构建重组载体pGenesil-PLCε.重组载体转染T24细胞后,RT-PCR和Western blot检测PLCE基因和蛋白表达；以侵袭小室、明胶酶谱分析及免疫组化检测细胞侵袭能力.结果 成功构建了针对PLCE基因的shRNA表达载体.两个阳性重组质粒P1和P2转染膀胱癌细胞T24,P1和P2组目的基因/内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低(P＜0.01)；P1和P2组目的蛋白/内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低(P＜0.01).细胞侵袭实验中阳性质粒P1和P2转染组穿膜细胞数也明显低于空白对照组和阴性质粒HK-A转染组(P＜0.01)；转染P1、P2均使细胞分泌MMP-2、MMP-9明显低于空白对照和HK-A转染组(P＜0.01).结论 阻断PLCE基因能有效抑制膀胱癌T24细胞系中PLCE基因和蛋白表达,并对T24细胞的侵袭转移能力具有一定的抑制作用.
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Notch信号通路调控上皮-间质转化影响膀胱癌侵袭性和耐药性
目的：体外探讨Notch信号通路对膀胱癌细胞侵袭性与耐药性的影响及分子机制。方法采用Notch信号通路受体完全阻断剂（γ分泌酶抑制剂）处理膀胱癌T24、5637和J82细胞48 h后，倒置显微镜观察膀胱癌细胞增生及形态；用RT-PCR和Western blot在mRNA和蛋白水平检测上皮-间质转化（ EMT）分子标志物E-cadherin、N-cad-herin、vimentin和Alpha-smooth muscle actin的表达；MTT、Transwell检测膀胱癌细胞耐药性及侵袭能力。结果完全阻断Notch信号通路后，镜下显示膀胱癌细胞形态变小，细胞分散；EMT分子标志物E-cadherin mRNA和蛋白水平表达上调（ P＜0.05），N-cadherin、vimentin、Alpha-smooth muscle actin mRNA 和蛋白水平表达下调（ P＜0.05）；膀胱癌细胞T24、5637和J82增殖明显被抑制（ P＜0.05）；膀胱癌细胞T24、5637和J82穿过微孔膜的细胞数明显减少（ P＜0.05）。结论 Notch信号通路可通过调控EMT的变化而改变膀胱癌的侵袭性与耐药性。
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膀胱尿路上皮癌分子标志物的研究进展
肿瘤标志物作为非侵入性的检查手段不仅可以用于肿瘤诊断和分型,对监测疾病复发和疗效判断等方面也有重要作用.目前现有的检测方法没有达到理想的敏感性和特异性.随着高通量技术的发展,新发现的许多膀胱癌的分子标志物如DNA/RNA类、蛋白质类和代谢产物类或多种标志物的组合为膀胱癌的检测提供了更准确的方法.
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采用尿survivin和NMP22诊断膀胱移行细胞癌的临床评价
尿核基质蛋白(nuclear matrix protein,NMP22)测定在临床上已经被广泛用于膀胱癌的早期诊断,但尿survivin用于检测膀胱癌才刚刚开始[2].我们对48例膀胱癌患者同时行尿survivin、NMP22和脱落细胞学检测,探讨其诊断早期膀胱癌的临床价值.
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顺铂注射液膀胱灌注预防膀胱癌术后复发
目的:探讨顺铂(PDD)注射液在预防膀胱癌术后复发中的作用.方法:对行保留膀胱手术治疗的28例膀胱癌患者,术后采用PDD注射液60mg/次定期膀胱灌注,总疗程2a.结果:28例均获随访,随访时间20月～37月,平均20.4月.复发2例,复发率为7.1%(2/28);并发尿道狭窄3例.结论:PDD注射液膀胱灌注预防膀胱癌术后复发具有较好的临床效果及较少的毒副作用,值得临床推广使用.
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雌激素、雌激素受体与膀胱癌间关系的研究进展
目的:探讨雌激素与雌激素受体对膀胱癌发生、发展的影响,为膀胱癌的内分泌治疗提供新的思路.方法:查阅近年来国内外膀胱癌与雌激素、雌激素受体间关系的相关文献,对其进行研究总结.结果:膀胱癌的病因、发病机理、复发机理还不十分明确,治疗方法也不完善.雌激素、雌激素受体可能对膀胱癌的发生发展有一定作用.结论:研究雌激素、雌激素受体与膀胱癌发生、发展的关系,对膀胱癌的诊断与治疗方面有重要意义.
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膀胱癌造口患者心理健康状况和生存质量的关系
目的:分析膀胱癌造口患者术后心理健康、生存质量现状,探讨二者之间的关系.方法:选取膀胱癌造口手术患者90例和与之匹配的正常人90例,采用世界卫生组织生存质量测定量表(WHOQOL-100)、症状自评量表(SCL-90),分别测评患者的生存质量状况和心理健康状况.结果:①膀胱癌造口组患者术后生活质量总分低于正常人组(t=4.073,P=0.000),在生存质量生理、心理、独立性、精神/宗教信仰维度上,膀胱癌造口组低于正常人组(t=4.641,3.337,-3.933,-2.536;P＜0.01),差异有统计学意义;②SCL-90总分为181.036分,高于正常人组132.885(t=11.030,P=0.000),患者在焦虑、躯体化、人际关系敏感、抑郁、强迫症状因子得分的平均分均较高(＞2分);③SCL-90总分与生存质量生理、心理、社会关系、环境领域得分总分呈负相关(r=-0.403,-0.399,-0.330,-0.288,-0.247,-0.357;P＜0.01).结论:膀胱癌造口术患者术后存在一定的心理健康问题,生存质量有一定程度的下降.健康的心理状况与患者膀胱癌造口术后生存质量水平存在相关.
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心理护理干预对膀胱癌患者膀胱全切回肠代膀胱术后生存质量的影响
目的:研究膀胱癌患者膀胱全切回肠代膀胱术后心理护理干预对生存质量的影响.方法:选取我院2012年1月至2017年7月240例膀胱癌患者为研究对象,所有患者在我院接受膀胱全切回肠代膀胱术治疗.将纳入患者按随机敖表法分为观察组与对照组,每组120例.对照组给予膀胱全切回肠代膀胱术后常规护理,观察组在常规护理基础上给予心理护理干预,包括造口宣教、示范教育、自信心训练、积极情绪疗法、视听注意力转移、家庭心理教育、出院后心理干预等.评估两组患者干预前与干预6周后心理状态、自我护理能力以及生存质量,统计膀胱全切回肠代膀胱术后并发症发生率.结果:观察组干预6周后心理状态评分(POMS)总分,显著低于对照组的(t=-12.252,P=0.000),自我护理能力(ESCA)总分、生存质量(WHOQOL-BREF)总分,显著高于对照组的(t=4.097、6.195,P=0.000、0.000).结论:心理护理干预可以改善膀胱全切回肠代膀胱术后膀胱癌患者心理健康状况,提高患者生存质量.
关键词： 膀胱癌 膀胱全切回肠代膀胱术 心理护理 生存质量 -
RNA干扰MEX3A基因对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨通过慢病毒介导的RNA干扰技术抑制MEX3A基因表达对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用GV115载体构建针对MEX3A基因的shRNA慢病毒载体,转染包装细胞293T产生慢病毒颗粒,收集并滴度测定后转染5637膀胱癌细胞,实验组转染MEX3A-shRNA慢病毒,对照组转染阴性对照慢病毒;实时定量PCR(Real-time PCR)检测MEX3A基因敲减效率;慢病毒转染3d后,使用Celigo连续细胞计数5d检测细胞生长;慢病毒转染5d后,进行膜联蛋白V(Annexin V)染色并用流式细胞术检测细胞凋亡.结果 成功构建MEX3A-shRNA慢病毒载体以及稳定抑制MEX3A表达的细胞株,MEX3A基因敲减效率达到74％;Celigo细胞计数检测显示,与对照组相比,实验组5637细胞的增殖速率受到显著抑制;流式细胞术检测显示,实验组发生凋亡的5637细胞显著增加.结论 MEX3A基因促进膀胱癌细胞的增殖,抑制膀胱癌细胞的凋亡.
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膀胱癌尿液生物标记物的现状与展望
膀胱癌是世界上常见的肿瘤之一，膀胱肿瘤的早期检测对改善病人预后至关重要。目前检测和监视膀胱肿瘤的常规方法是膀胱镜检查联合应用尿细胞学检查，但其局限性已经表明膀胱癌需要更好的诊断方法。理想中的诊断方法应该是非侵袭性的，既能够诊断，也能监测疾病的复发，并且能够为治疗提供依据。因此，以尿液为基础的非侵袭性方法将会给患者和医院带来福音。本文综述了近年来报道的膀胱癌尿液生物标记物及相关新技术。
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浅表型膀胱癌的生物治疗
浅表性膀胱癌的治疗是膀胱癌治疗中的重要的环节,治疗的方法包括手术、化疗和生物治疗,其中生物治疗是有希望、有潜力的方法,受到广泛关注.本文对其现状和进展进行综述.
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卡介苗素膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的临床研究
目的探讨卡介苗素膀胱内灌注预防膀胱癌术后复发的疗效、安全性.方法 47例膀胱癌术后患者分2组,分别应用卡介苗素和卡介苗定期行膀胱内灌注,随访10～32个月,了解灌注后肿瘤复发情况及并发症,并于灌注前、后检测2组尿液中IL-2、IL-6、IL-8的变化情况.结果卡介苗膀胱灌注组肿瘤复发4例(17.4%),副反应发生18例(78.3%),卡介苗素膀胱灌注组肿瘤复发5例(20.8%),副反应发生率11例(45.8%),2组尿液中IL-2、IL-6、IL-8值灌注后高于灌注前(p<0.05).两组肿瘤复发率、IL-2、IL-6、IL-8值灌注前后比较无显著差异,副反应卡介苗组明显高于卡介苗素组(p<0.05).结论卡介苗素膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的有效率与卡介苗相同,但不良反应明显减少,患者耐受性好,因此卡介苗素可成为膀胱浅表移行上皮细胞癌临床治疗和预防复发的一种有效药物.
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膀胱癌术后沙培林膀胱灌注的临床疗效观察
目的观察沙培林膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的疗效及并发症.方法 42例膀胱癌术后患者应用沙培林定期行膀胱内灌注,并随访8～24个月,了解灌注后肿瘤复发情况及并发症.结果肿瘤复发率为14.3%(6/42),无肿瘤复发率为85.7%(36/42),并发症发生率为11.9%(5/42).结论沙培林膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的有效率高,不良反应小,患者耐受性好,值得临床推广应用.
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膀胱癌脆性组氨酸三体FHIT蛋白表达缺失及其意义
目的探讨膀胱癌中脆性组氨酸三体(FHIT)基因蛋白表达状况及其与临床病理的关系.方法采用兔抗人FHIT蛋白抗体和枸橼酸-微波-SP免疫组化方法,检测膀胱移行细胞癌、癌旁组织、乳头状增生病变和正常膀胱组织标本中FHIT的表达状况,并分析其与组织学分级的关系.结果 51例膀胱移行细胞癌组织FHIT表达20例(+),31例(-);51例癌旁组织FHIT表达48例(+),3例(-);15例乳头状增生病变和10例膀胱正常组织FHIT均为(+);乳头状增生的移行上皮细胞FHIT均为(+),而Ⅰ级乳头状癌则阳性和阴性细胞混合存在.FHIT阳性表达癌Ⅰ级53.3%,Ⅱ级50%,Ⅲ～Ⅳ级20%;Ⅰ～Ⅱ期癌46.7%,Ⅲ～Ⅳ期癌28.6%.结论 FHIT表达可能与膀胱癌的发生和分化有关,FHIT阴性表达可能成为膀胱癌诊断的一项辅助性新指标.
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膀胱前列腺切除术中偶发前列腺癌的临床病理特点及前列腺标本规范化取材的意义
目的 观察膀胱前列腺切除术标本中偶发前列腺癌的检出率、临床病理特点及术后前列腺标本规范化取材对其检出率的影响.方法 收集73例行膀胱前列腺切除术膀胱癌患者的临床病理资料,观察偶发前列腺癌的临床病理特征,并对比前列腺标本全部取材与部分取材间前列腺癌的检出率.结果 73例患者中,26例(35.6％)术后病理诊断合并前列腺癌,多数为前列腺腺泡腺癌(84.6％);Gleason评分≤6分(预后分组1组)16例(72.7％),Gleason评分3+4 =7分(预后分组2组)4例(18.2％),Gleason评分4+3=7分(预后分组3组)2例(9.1％);20例(90.9％)局限于前列腺内(分期在pT2以内),2例(9.1％)累及前列腺外有/无精囊腺侵犯(即pT3);1例前列腺切缘阳性(4.5％).前列腺标本规范化全部取材组的检出率高于部分取材组(21/45 vs.5/28 and46.7％ vs.17.8％,P＜0.05).结论 膀胱前列腺切除术后前列腺标本规范化取材有助于更多偶发前列腺癌被检出,因此推荐病理医师参考根治性前列腺癌标本处理原则,仔细并全面地对膀胱前列腺切除术后前列腺标本进行规范化取材.
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继发性阴囊Paget病伴复发性膀胱癌1例
患者男性,75岁.2年前确诊为膀胱移行细胞癌2级,行部分膀胱切除术,近期因阴囊湿疹不愈就诊.查体:见双侧阴囊皮肤糜烂、隆起.行阴囊皮肤组织活检术,同时行膀胱活检术发现膀胱癌复发,形态同原发.病理检查 巨检:右侧阴囊皮肤组织5.6 cm×3.2 cm×1 cm大小,表面糜烂中央散在不规则隆起,3.4 cm×1.5 cm×0.3 cm大小.左侧阴囊皮肤组织2.6 cm×1.5 cm×0.6cm大小,表面糜烂、不规则微隆起.镜检:表皮全层见大圆形细胞,胞质丰富,淡染透亮或轻度嗜酸性,核大而空,可见明显核仁,核分裂象易见(图1);肿瘤细胞局灶排列呈腺样结构.免疫组化:肿瘤细胞CK7(图2)、CK20、CAM5.2、EMA、Her2、CEA和UroplakinⅢ(图3)(+),HMB45、GCDFP15和S-100(-);PAS染色阳性.膀胱移行细胞CK20、CK34βE12、EMA和CD44v6(+),CK14散在(+),p53(++),vimentin(-);Ki-67阳性率25％.
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膀胱小细胞癌1例
患者男性.71岁.无诱因出现终末血尿伴疼痛2周.膀胱镜活检示膀胱低分化癌.肺部及全身其他器官未发现肿瘤临床诊断:膀胱癌.
