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龙葵碱药理作用研究进展
龙葵碱主要存在于茄科植物马铃薯（Solanum tuberosum）的块茎及龙葵（Solanum nigrum）的全草中。近年研究发现，龙葵碱除具有毒性作用外，还具有抗肿瘤、抗病原微生物作用。国内外学者对其药理、毒理作用及机制进行了深入研究。本文对龙葵碱药理学和毒理学研究相关进展进行综述，为其进一步的研究和应用提供参考。
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龙葵碱抗肿瘤作用及机制
龙葵碱是龙葵的主要成分,主要包括澳洲边茄碱、澳洲茄碱及龙葵碱等;研究表明龙葵碱在肺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、宫颈癌、前列腺癌、黑色素瘤、脑胶质瘤、骨髓瘤、白血病等肿瘤中具有广泛的抗癌作用;可以抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期、诱导细胞自噬、增强放化疗作用、抑制上皮-间质转化、抑制肿瘤转移和抑制血管生成;这些研究为龙葵碱的合理应用及开发提供了新的基础.
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龙葵碱抗肿瘤作用机制研究进展
龙葵(Solanum nigrum L.)别名苦菜、苦葵、老鸦眼、天茄子,为茄科1年生草本植物,分布于全国各地,以东北、华北为多.龙葵具有清热解毒、活血消肿、利水通淋功效,临床上用龙葵水煎剂或注射剂治疗宫颈癌、食道癌、乳腺癌、肺癌、肝痛、绒毛膜上皮癌、卵巢癌、肉瘤等多种恶性肿瘤,均取得了一定的疗效.其主要成分为生物碱,龙葵碱是从龙葵的全草或末成熟的果实中提取分离出的一种生物碱,研究表明其对S180、H22荷瘤小鼠有显著的抗肿瘤活性.现就龙葵碱抗肿瘤作用机制的研究进展综述如下.
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龙葵碱损伤睾丸支持细胞诱导生精障碍的研究
目的:通过龙葵碱对睾丸支持细胞的损伤研究,阐释龙葵碱诱导生精障碍的途径.方法:选取小鼠睾丸的支持细胞进行实验,体外实验观察流式细胞仪检测细胞的周期变化,CyclinA和CDK2蛋白的表达;激光共聚焦检测细胞早期凋亡形态;免疫组化法测定支持细胞波形蛋白表达;体内实验Western blot法测定雄激素结合蛋白(ABP蛋白)表达.结果:龙葵碱引起支持细胞S期周期阻滞;降低睾丸支持细胞内Cycli-nA和CDK2蛋白的表达量;细胞出现早期凋亡的形态学特征;龙葵碱使支持细胞波形蛋白解聚消失;ABP蛋白的表达显著下降(P＜0.01).结论:龙葵碱通过周期阻滞诱导睾丸支持细胞出现凋亡,同时对支持细胞的骨架和分泌功能产生影响造成生精障碍.
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龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的线粒体通路研究
目的 观察龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡与线粒体通路的关系.方法 MTT法测定龙葵碱对HepG2细胞的细胞毒作用;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察龙葵碱对HepG2细胞形态学的影响;TMRE和Fluo-3/AM双染,激光共聚焦扫描显微镜同时观察细胞线粒体膜电位和细胞内[Ca2+];的变化.结果 龙葵碱对HepG2细胞有细胞毒作用;龙葵碱诱导HepG2细胞形态出现凋亡形态时TMRE和Fluo-3/AM双染观察表明,龙葵碱在降低线粒体膜电位的同时能够升高细胞内[Ca2+];浓度.结论 龙葵碱降低膜电位,开放细胞膜PT通道,使细胞内Ca2+顺浓度梯度转运,从而升高细胞内Ca2+浓度启动细胞凋亡机制.
关键词： 龙葵碱 HepG2人肝癌 细胞内Ca2+ 膜电位 激光共聚焦扫描显微术 -
龙葵碱对HepG2细胞NAT1酶活性及动力学影响的研究
目的 探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的芳香胺Ⅳ-乙酰化转移酶(NAT)1的影响.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),以对氨基笨甲酸(PABA)为底物,以PABA被NAT1乙酰化为乙酰对氨基苯甲酸(Ac-PABA)的量反应NAT1酶的活性.观察不同浓度、不同时间龙葵碱对完整HepG2细胞NAT1酶活性的影响;龙葵碱对HepG2细胞细胞质中NAT1酶活性的影响;通过改变底物PABA浓度,采用双倒数作图法,以底物PABA浓度的倒数(1/S)对NAT1反应速率的倒数(1/V)作直线,得出回归方程,计算K<,m>和<,max>.结果 在NAT1酶活性测定中,龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT1的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT1的活性;随着作用时间的增加Ac-PABA生成的量逐渐增加,但在相同作用时间段龙葵碱能显著降低Ac-PABA生成的量.动力学研究表明,以PABA为底物,对于HepG2完整细胞,阴性对照组的K<,m>和V<,max>分别为(1.04 x 10<'-3>±8.36×10-5)mmol·L<'-1>、(1.64×10<'-4>±9.57×10<'-6>)nmol·10<'6>cells<'-1>,龙葵碱组的K<,m>和K<,max>分别为(1.06×10<'-3>±6.97×10<'-5>)mmol·L<'-1>和(1.48×10<'-4>±4.28×10<'-6>)nmol·10<'6>cells<'-1>·h<'-1>.对于HepG2细胞质,阴性对照组的K<,m>和V<,max>分别为(3.32×10<'-1>±2.35×10<'-4>)mmol·L<'-1>、(2.60×10<'-3>±6.79×10<'-6>)nmol·h<'-1>·mg pro<'-1>,龙葵碱组的K<,m>和K<,max>分别为(3.35×10<'-1>±1.66×10<'-4>)mmol·L<'-1>和(2.22x10<'-3>±8.12×10<'-6>)nmol·h<'-1>·mg(Pro)<'-1>,经统计学处理表明,对于HepG2完整细胞和细胞质,阴性对照组和龙葵碱组的K<,m>没有差异,而V<,max>差异显著结论 龙葵碱是HepG2细胞NAT1酶的非竞争性抑制剂.龙葵碱通过作用于NAT1与PABA结合位点以外的其他位点抑制NAT1酶的活性而诱导HepG2细胞凋亡.
关键词： 龙葵碱 HepG2人肝癌细胞 N-乙酰化转移酶 来氏常数 最大反应速率 -
马铃薯片治疗静脉造影剂渗漏的实验研究及临床应用
针对临床治疗中常见的静脉输液及静脉造影时药液外渗给病人带来的痛苦和给治疗抢救、检查诊断带来的影响,笔者采用富含龙葵碱的马铃薯做主要治疗剂,结合动物实验,在临床应用中取得了良好的效果,现报告如下.
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土豆里的有毒物质
土豆(马铃薯)里的有毒物质主要有两类:一类是茄碱(龙葵碱Solanine)和卡可碱(Chaconine),一类是蛋白酶抑制剂.茄碱和卡可碱都是由茄啶这种物质和糖结合而生成的糖苷.两者的区别只是结合的糖不同,所以,两者的性质相近,毒性也相近.它们都是生物碱,呈弱碱性,都几乎不溶于水,但都可以溶解在稀醋酸水溶液里.
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龙葵碱调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG2细胞凋亡的研究
目的 探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的作用机制.方法 透射电镜观察凋亡细胞形态变化,原位缺口末端榆测法(TUNEL法)检测DNA断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,间接免疫荧光法激光共聚焦扫描显微术检测Bcl-2与Bax蛋白表达,比色法检测caspase-3活性的变化.结果 在透射电镜下观察,龙葵碱组细胞出现细胞固缩,染色质致密,核凝聚固缩,染色体断裂形成核碎块,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态.TUNEL法发现龙葵碱高、中、低剂量组HepG2细胞均有绿色荧光,阴性对照组无荧光.流式细胞术分析表明0.4、2、10μmol/L龙葵碱作用HepG2细胞24 h凋亡率分别为4.0%、8.5%、20.1%.同时,龙葵碱升高caspase-3活性,下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达.结论 龙葵碱通过降低Bcl-2/Bax的值,激活caspase-3酶活性诱导HepG2细胞凋亡.
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龙葵碱对荷瘤小鼠肿瘤细胞DNA和RNA的影响
目的观察龙葵碱对S180和H22荷瘤小鼠肿瘤细胞DNA和RNA的影响.方法将S180和H22荷瘤小鼠分为龙葵碱37.50、18.75、9.37 mg/kg组、阴性对照组和环磷酰胺(30 mg/kg)组,各组sc给药.利用激光共聚焦扫描显微镜,分别测定各组肿瘤细胞中的DNA和RNA.结果龙葵碱(37.50、18.75 mg/kg)组对S180和H22小鼠肿瘤细胞RNA和DNA的比值均有明显的降低作用.结论龙葵碱降低S180和H22小鼠肿瘤细胞RNA和DNA的比值可能是其抗肿瘤作用机制之一.
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龙葵碱对U251细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨龙葵碱对人胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响.方法 使用不同质量浓度的龙葵碱处理U251细胞,采用CCK-8法、划痕法、Transwell法、Hochest法、流式细胞术、免疫印迹法分别检测细胞增殖率、细胞迁移与侵袭、细胞凋亡及凋亡相关蛋白的表达.结果 龙葵碱对U251细胞的48 h半数抑制浓度(IC50)为20.05 μg/μL,其质量浓度在5～35 μg/μL时,能够抑制细胞增殖(P＜0.05);与对照组相比,龙葵碱组抑制细胞迁移和侵袭的能力随药物质量浓度增高而增强(P＜0.05),同时细胞也出现明显凋亡特征,并均呈浓度依赖性;免疫印迹法显示龙葵碱可使凋亡相关蛋白Bax表达增加,Bcl-2表达降低,Bcl-2/Bax值降低.结论 龙葵碱在有效剂量(5～35 μg/μL)对U251细胞增殖生长具有抑制作用,并呈浓度依赖性;龙葵碱可抑制U251细胞的侵袭与迁移,可以影响凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,使Bcl-2/Bax值降低,从而抑制U251细胞的增殖生长.
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龙葵碱对S180小鼠红细胞膜唾液酸和封闭度的影响
目的观察龙葵碱对S1 80小鼠红细胞膜唾液酸(SA)水平和红细胞膜封闭度的影响.方法采用比色法测定S180荷瘤小鼠的红细胞膜表面的SA水平和封闭度.结果龙葵碱能显著升高S180小鼠红细胞膜表面的SA水平和增加红细胞膜的封闭度,差异显著(P＜0.05).结论龙葵碱可能是通过增加红细胞膜表面的SA水平和增加封闭度来达到抗肿瘤作用的.
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龙葵碱对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响
目的 探讨龙葵碱对S180及H22荷瘤小鼠红细胞免疫功能的作用.方法 观察S180荷瘤小鼠和H22荷瘤小鼠的红细胞免疫黏附肿瘤细胞能力,采用DPH荧光探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P),并计算膜的微黏度(η)研究红细胞膜脂流动性(LFU).结果 龙葵碱能升高S180和H22荷瘤小鼠的红细胞黏附肿瘤细胞的花环率,提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性.结论 龙葵碱可能是通过提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性,从而恢复荷瘤小鼠红细胞免疫功能进而达到抗肿瘤作用.
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龙葵碱调控还原型谷胱甘肽和活性氧氧化还原体系损伤线粒体超微结构诱导HepG2细胞凋亡
目的 探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡与线粒体损伤的关系.方法 倒置显微镜观察细胞形态,Annexin V/PI 双染激光共聚焦扫描显微术检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率.透射电镜观察细胞线粒体超微结构,CDFH-DA染色激光共聚焦扫描显微术检测活性氧(ROS)相对量,比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)量.结果 龙葵碱组HepG2细胞贴壁细胞数量减少,部分出现死亡.Annexin V/PI双染激光共聚焦扫描显微镜下观察发现龙葵碱组细胞Annexin V-FITC高染,细胞膜呈绿色荧光;PI低染,细胞核呈红色荧光,呈现明显的早期凋亡特征.流式细胞术分析0.4、2、10 μmol/L龙葵碱作用HepG2细胞24 h后,早期凋亡率分别为4.0%、8.5%、20.1%.透射电镜观察发现龙葵碱作用HepG2细胞24 h,细胞线粒体超微结构出现肿胀,嵴排列紊乱、嵴消失,重度空泡样变性等变化;细胞内ROS水平升高,GSH的水平降低.结论 龙葵碱通过降低HepG2细胞内GSH量,使ROS不能被及时清除而损伤线粒体结构,导致HepG2细胞凋亡.
关键词： 龙葵碱 细胞凋亡 线粒体 活性氧(ROS) 还原型谷胱甘肽(GSH) -
龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响
目的 研究龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响.方法 MTT法检测龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析龙葵碱对MCF-7细胞周期的影响以及细胞内α-微管蛋白及微管相关蛋白(MAP-2)的变化.结果 龙葵碱对MCF-7细胞的IC50为22.08 μg/mL,能够将MCF-7细胞阻滞于S期；能够增加MCF-7细胞内α-微管蛋白和MAP-2的量.结论 龙葵碱通过升高MCF-7细胞内的微管蛋白及MAP-2的表达,将MCF-7细胞阻滞于S期,从而抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长.
关键词： 龙葵碱 乳腺癌MCF-7细胞 细胞周期 微管蛋白 细胞增殖 -
龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾液酸和封闭度的影响
目的研究龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾液酸(SA)水平和封闭度的影响.方法建立H22荷瘤小鼠模型,荷瘤小鼠分别sc生理盐水、环磷酰胺、龙葵碱(9.375、18.75、37.5 mg/kg).采用比色法测定H22小鼠肿瘤细胞膜SA水平和封闭度.结果龙葵碱可剂量依赖性地降低荷瘤小鼠肿瘤细胞膜SA水平和肿瘤细胞膜封闭度.结论龙葵碱通过降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜SA水平和肿瘤细胞膜封闭度起抗肿瘤作用.
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龙葵碱对人肝癌HepG2细胞N-乙酰基转移酶活性的影响
目的 探讨龙葵碱对HepG2细胞Ⅳ-乙酰基转移酶(NAT)活性的影响.方法 采用HPLC方法,以2-氨基芴(2-AF)为底物,以2-AF被NAT乙酰化为2-乙酰氨基芴(2-AAF)的量来反应NAT的活性.结果 龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT的活性,作用具有剂量依赖性.结论 龙葵碱通过抑制HepG2细胞NAT的活性发挥细胞毒作用.
关键词： 龙葵碱 HepG2细胞 N-乙酰基转移酶(NAT) -
不能吃的菜
青番茄尚未成熟的番茄因含有龙葵碱,会对胃肠黏膜有较强的刺激作用;而且还会麻痹人体的中枢神经;会引起呕吐、头晕、流涎等症状.无论是生食还是熟食,都对肌体有很大的危害.无根豆芽对于那些以激素和化肥生发的无根豆芽,您也要小心.这类含氮的化合物在肠道细菌的作用下,会转化为亚硝胺.长期食用可使人患胃癌、肝癌、食道癌、直肠癌等.
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谨防蔬菜中的隐形杀手
发芽的马铃薯 发芽及变青部分的马铃薯含有有毒的生物碱--龙葵碱,可使人中毒而致视力模糊,神经过敏、精神恍惚.在食用时,应削皮、剔芽,冷水浸泡,烧熟并加醋才可以食用.
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龙葵碱抗肿瘤作用的研究进展
目的 综述龙葵碱抗肿瘤的作用.方法 对近几年关于龙葵碱抗肿瘤作用的文献进行查阅、分析、归纳和总结.结果 龙葵碱对多种恶性肿瘤如肺癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌和乳腺癌等均有抑制其生长及增殖的作用,促进恶性细胞的凋亡,并可抑制肿瘤细胞的侵袭和转移.结论 龙葵碱具有抗癌活性.
