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还原型谷胱甘肽对六价铬诱导L-02肝细胞凋亡的影响
铬(Cr)是环境中常见的重金属污染物.Cr(Ⅵ)可通过细胞内还原过程产生的活性氧族[1-2](reactive oxygen species,ROS)及一系列中间产物造成细胞凋亡(apoptosis),肝脏是其毒作用的主要靶器官.还原型谷胱甘肽(GSH)是公认的细胞内氧化还原状态的重要生物调节因子,对毒物所致的氧化损伤具有保护作用.目前,国内外学者多侧重于Cr(Ⅵ)诱导细胞凋亡的机制研究,而较少涉及Cr(Ⅵ)的毒性拮抗剂.故本次实验重点在于利用体外试验系统,研究外源性施加GSH对Cr(Ⅵ)诱导L-02肝细胞凋亡的影响.这对研制和开发铬中毒防治药物,减轻Cr(Ⅵ)对人体健康的危害具有一定的实际意义,并为今后开展其他重金属污染危害的防治研究提供依据.
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还原型谷胱甘肽对六价铬诱导的L-02肝细胞毒性的保护作用
目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对六价铬[Cr(Ⅵ)]诱导的L-02肝细胞毒性的影响.方法分别设Cr(Ⅵ)、GSH单独作用组、联合作用组和空白对照组,采用MTF法检测细胞生存率的变化.结果在2、4、8、16、32和64μmol/L Cr(Ⅵ)处理浓度,Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞具有明显细胞毒性,细胞存活率与Cr(Ⅵ)处理浓度呈负相关(r=-0.910).仅浓度为20μmol/L的GSH对Cr(Ⅵ)诱导的细胞毒性具有拮抗作用,Cr(Ⅵ)+GSH联合组的生存率与Cr(Ⅵ)不同浓度单独处理组比较差异均具有显著性(P＜0.05).结论适宜浓度的GSH可能对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞毒性具有保护作用.
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还原型谷胱甘肽(GSH)治疗有机磷中毒心脏损害的临床疗效分析
目的:观察还原型谷胱甘肽(GSH)对有机磷中毒心肌损害的临床疗效.方法:68例急性中重度口服有机磷中毒患者随机分成治疗组和对照组.治疗组38例经过有机磷中毒的常规治疗后,加用还原型谷胱甘肽;对照组应用有机磷中毒的常规治疗.以两组患者血肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)升高的病例数作为评价疗效标准.结果:治疗组血肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)升高的病例数少于对照组(P＜0.01).结论:还原型谷胱甘肽(GSH)是防治有机磷中毒心脏损害的有效药物.
关键词： 还原型谷胱甘肽(GSH) 有机磷中毒 心脏损害 肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ) -
还原型谷胱甘肽对大鼠局灶性脑梗死后丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶表达的影响
目的 观察还原型谷胱甘肽对大鼠短暂性局灶性脑缺血时丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响.方法 采用大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为假手术组、缺血模型组和还原型谷胱甘肽治疗组(1200 mg/kg),缺血2 h再灌注6 h后观测各组的神经行为变化,脑梗死体积,脑组织病理学变化,脑组织MDA含量和SOD、GSH-PX活性.结果 还原型谷胱甘肽可以改善大鼠局灶性脑缺血引起的神经行为障碍,减少脑梗死体积(P＜0.05);可以降低脑组织MDA含量,提高脑组织GSH-PX、SOD活力(P＜0.05).结论 外源性谷胱甘肽可通过提高GSH-PX、SOD活力,降低MDA含量,增强机体清除自由基的能力,及减少大鼠脑组织氧自由基的堆积而发挥对脑缺血再灌注时的保护作用.
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龙葵碱调控还原型谷胱甘肽和活性氧氧化还原体系损伤线粒体超微结构诱导HepG2细胞凋亡
目的 探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡与线粒体损伤的关系.方法 倒置显微镜观察细胞形态,Annexin V/PI 双染激光共聚焦扫描显微术检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率.透射电镜观察细胞线粒体超微结构,CDFH-DA染色激光共聚焦扫描显微术检测活性氧(ROS)相对量,比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)量.结果 龙葵碱组HepG2细胞贴壁细胞数量减少,部分出现死亡.Annexin V/PI双染激光共聚焦扫描显微镜下观察发现龙葵碱组细胞Annexin V-FITC高染,细胞膜呈绿色荧光;PI低染,细胞核呈红色荧光,呈现明显的早期凋亡特征.流式细胞术分析0.4、2、10 μmol/L龙葵碱作用HepG2细胞24 h后,早期凋亡率分别为4.0%、8.5%、20.1%.透射电镜观察发现龙葵碱作用HepG2细胞24 h,细胞线粒体超微结构出现肿胀,嵴排列紊乱、嵴消失,重度空泡样变性等变化;细胞内ROS水平升高,GSH的水平降低.结论 龙葵碱通过降低HepG2细胞内GSH量,使ROS不能被及时清除而损伤线粒体结构,导致HepG2细胞凋亡.
关键词： 龙葵碱 细胞凋亡 线粒体 活性氧(ROS) 还原型谷胱甘肽(GSH) -
DEM对Galn/LPS介导小鼠急性肝损伤发生的影响
目的:耗竭肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)导致氧化还原失平衡后,探讨是否可通过改变枯否细胞信号转导途径而影响肝损伤的发生.方法:将雄性昆明种小鼠随机分为4组,除对照组、Galn/LPS致肝损伤组和单纯DEM组外,另设DEM加Galn/LPS组.分别测各组的ALT活性,TNFα,GSH和MDA含量,并做组织切片进行比较.结果:给小鼠注射半乳糖胺/脂多糖 6 h后,肝损伤组除血浆谷丙转氨酶(ALT)活性显著升高外,肝脏丙二醛(MDA)、GSH和肿瘤坏死因子α(TNFα)水平与其他组相比有统计学差异.结论:利用二乙基顺丁烯二酸盐(DEM)耗竭肝脏GSH,可通过调整GSH/GSSG比值,使氧化还原失平衡,抑制脂多糖(LPS)所致枯否细胞活化以及TNFα释放,从而减轻肝损伤.
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氟化钠对体外培养大鼠肾细胞增殖的影响
目的研究不同浓度NaF对体外培养大鼠肾细胞增殖反应的影响以及VE、 Vc、 Se和GSH对其保护效应.方法大鼠肾细胞分离培养,分别施加不同浓度NaF、一定浓度V E、Vc、Se和GSH,采用ELISA方法测定OD值,计算肾细胞增殖率.结果 NaF对肾细胞增殖反应具有双向性作用,即低浓度刺激、高浓度抑制.结论一定浓度V E、Vc和GSH能拮抗1 mmol/LNaF对大鼠肾细胞增殖反应的抑制作用.
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13例急性毒鼠强中毒患者肝功能变化情况分析
目的探讨毒鼠强中毒患者肝功能损伤变化情况.方法对13例毒鼠强中毒患者1~10 d每天上午检测肝功能并记录其变化情况.结果13例毒鼠强中毒患者AST第2天升高,第4天达到峰值,第5天开始下降.ALT第3天开始升高,第6天达到峰值,第7天开始下降.TP与GLO第3天达到低值.ALB维持在正常低值.AST/ALT第3天达到高值,第9天比例倒置.A/G第2天比例升至高,第4天比例倒置.结论毒鼠强中毒早期即可损害肝细胞线粒体且肝损伤在第3天严重,同时可损伤免疫功能,并与中毒浓度及血液透析无关.还原型谷胱甘肽(GSH)对其有一定的保护治疗作用.
关键词： 毒鼠强 中毒 肝功能 变化 还原型谷胱甘肽(GSH) -
多器官功能障碍综合征患者血清对内皮细胞氧化损伤的影响及还原型谷胱甘肽的保护作用
目的 探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及外源性还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的保护作用.方法 选择MODS患者20例,用其血清对HUVEC进行干预,建立体外细胞损伤模型,同时以健康血清组和胎牛血清组作对照,将细胞分为正常对照组(A组)、健康血清组(B组)、MODS血清损伤组(MODS患者血清浓度分别为C1组5％、C2组10％、C3组20％)和GSH干预组(10％ MODS患者血清细胞培养基中GSH终浓度分别为D1组0.064 mmol/L、D2组0.32 mmol/L、D3组1.6 mmol/L、D4组8.0 mmol/L、D5组40mmol/L).采用MTT法检测各组细胞生存率;荧光倒置显微镜下观察B组和C2组HUVEC形态学变化;分别检测B组、C2组和D3组药物干预24、48、72 h后细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和总抗氧化能力(T-AOC)水平,同时用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.结果 ①B组细胞生存率与A组比较差异无统计学意义(P＞0.05),C1、C2、C3组细胞生存率较B组明显下降(P＜0.05),D2、D3、D4组细胞生存率较C2组明显升高(P＜0.05);②C2组HUVEC显微镜下可见损伤性改变,细胞变大变圆、界限模糊、胞体碎裂、部分细胞脱落;③C2组细胞培养上清液SOD、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平较B组下降,而D3组各时间点较C2组均明显升高,其中以药物干预72 h后升高更明显;④C2组细胞内ROS水平较B组明显升高,D3组各时间点ROS水平较C2组明显降低,其中以药物干预72 h后下降明显.结论 MODS患者血清可造成内皮细胞损伤,GSH可通过提高SOD 、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平,降低细胞内ROS水平,从而发挥内皮细胞保护作用,减轻血管内皮细胞的氧化损伤.
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还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠阴茎海绵体氧化损伤的影响
目的 探讨氧化损伤在糖尿病性ED发病机制中的作用,以及还原型谷胱甘肽(GSH)对氧化损伤的干预作用,为临床治疗提供新的手段.方法 成年雄性SD大鼠50只,随机分为4组:A组为对照组(N=10),B组为糖尿病无干预组(N=13),C组为糖尿病胰岛素干预组(N=13)和D组为糖尿病胰岛素+GSH干预组(N=14).采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型并进行筛选.8周后取大鼠阴茎海绵体组织进行组织匀浆,采用黄嘌呤氧化法测定阴茎海绵体组织中超氧化物岐化酶(SOD)活性:用TBA法测定丙二醛(MDA)含量;RT-PCR法检测胞外型SOD基因(SOD_(EX)基因)的表达;WESTERN-BLOT法检测CUZNSOD蛋白含量.结果 A组大鼠海绵体组织基本无过氧化产物蓄积.与A组相比,B、C、D组的SOD活性显著下降(P<0.05),MDA含量均显著升高(P<0.05),B、C、D组SOD_(EX)基因的表达、CUZNSOD蛋白含量显著下降(P<0.05);与B组相比,C、D组的SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),SOD_(EX)基因的表达及CUZNSOD蛋白含量显著升高(P<0.05).与C组相比,D组SOD_(EX)基因的表达及CUZNSOD蛋白含量显著升高(P<0.05).结论 糖尿病性雄性大鼠阴茎海绵体组织自由基代谢明显障碍,脂质过氧化产物增加,同时氧自由基清除能力下降;而抗氧化剂GSH的应用能部分减弱氧化损伤.提示氧化损伤可能在糖尿病性ED的发生发展中起一定作用.本研究为糖尿病性ED的预防和治疗提供新的策略.
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还原型谷胱甘肽对C57BL/6J小鼠体外受精的影响
目的 探讨受精液中添加还原型谷胱甘肽(GSH)对C57BL/6J小鼠体外受精的影响.方法 以体外受精液(HTF)作为对照,在HTF液中添加不同浓度(0.25 mmol/L、0.50 mmol/L、0.75 mmol/L、1.00 mmol/L、1.25 mmol/L和1.50 mmol/L)的GSH,对C57BL/6J近交系小鼠进行体外受精实验,观察体外受精和早期胚胎发育情况.同时,用5种C57BL/6J小鼠背景的基因工程小鼠加以验证.结果 与对照组相比,实验组的体外受精率显著升高,浓度为0.50 mmol/L时,体外受精率提高显著(P＜0.05),浓度在1.25 mmol/L时,体外受精率高(P＜0.01).受精卵的体外囊胚发育率实验组与对照组无显著性差异(P＞0.05).C57BL/6J背景的基因工程小鼠的体外受精率和体外囊胚发育率与C57BL/6J近交系小鼠相似.结论 在HTF中添加一定浓度的GSH能够提高C57BL/6J小鼠及C57BL/6J背景的基因工程小鼠的体外受精效果.
关键词： 还原型谷胱甘肽(GSH) C57BL/6J小鼠 体外受精 -
毛细管电泳电化学法(CE-ECD)检测人全血中的同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)和还原型谷胱甘肽(GSH)
目的 建立毛细管电泳电化学技术(capillary electrophoresis with electrochemical detection,CE-ECD)检测人全血中同型半胱氨酸( homocysteine,Hcy)、半胱氨酸(cysteine,Cys)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的方法.考察缓冲液的浓度、酸碱度、分离电压、进样时间和检测电压等参数对分离和检测的影响,确定佳的实验条件.方法 以直径为500 μm的铂圆盘电极作为检测电极,用长度为50 cm的熔融石英毛细管对一系列待检物标准溶液和人全血样本进行毛细管电泳电化学检测.结果 在优条件下,当电极电位为+1.05 V(相对饱和甘汞电极)、分离电压为18 kV时,Hcy、Cys和GSH于100 mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.8)中在10 min内获得理想分离.检测下限(S/N=3)在).29～0.80 μmol/L范围内,且在3倍数量级浓度范围内,3种组分的浓度与峰电流呈良好线性关系.对0.5 mmol/L的混合标准溶液连续检测7次,Hcy、Cys和GSH峰高的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为3.7％、3.1％和2.9％.结论 CE-ECD方法可对Hcy、Cys和GSH等3种生物活性巯基化合物进行高效分离及检测,具有分析速度快、成本低、灵敏度高、试剂及样品用量小等优点,因此在生物医药领域具有广泛的应用前景.本实验采用的铂圆盘电极具有污染少、重复性好的特点.
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冷应激对铜预投大鼠血清铜锌代谢、SOD活性及GSH含量的影响
为揭示应激对体内微量元素代谢的影响和机制,预先给予大鼠不同水平的铜3周后,采用冷束缚法使大鼠产生应激,测定了血清铜、锌水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量.结果表明,高铜给予没有对清洁级大鼠生长产生明显的影响,血清铜、锌及铜锌比值变化不明显,但适量的铜给予能显著提高血清中 SOD 活性和 GSH 含量;冷应激处理后大鼠血清中 Cu 水平下降,Zn 水平升高,同时 SOD 消耗降低,而 GSH 含量显著升高.表明冷应激可使大鼠体内铜锌代谢及 SOD 活性和 GSH 含量发生变化,适量的铜给予在应激状况下才发挥出积极的生理作用.
关键词： 冷应激 大鼠:铜 锌 超氧化物歧化酶(SOD) 还原型谷胱甘肽(GSH) -
桑菊清解汤对急性吸烟大鼠氧化与抗氧化系统影响的研究
目的:探讨桑菊清解汤对急性吸烟大鼠氧化与抗氧化系统的影响.方法:将50只雄性大鼠,按体重随机分为正常对照组、模型组、NAC(乙酰半胱氨酸颗粒)组及高、低剂量桑菊清解汤组,每组10只.正常对照组、模型组灌胃蒸馏水；高、低剂量组桑菊清解汤灌胃相应剂量桑菊清解汤,均按1mL/100g体重给药；NAC组将NAC以蒸馏水溶解,配制成浓度为0.2g/mL的溶液,按200mg/kg体重灌胃给药.除正常对照组外,其他各组每天空腹灌胃1次后进行被动吸烟造模,连续7天.第7天后取血浆及肺泡灌洗液(BALF),检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量及测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:与正常对照组比较,模型组BALF、血浆中GSH含量及BALF和血清中SOD活性均低于正常对照组(P＜0.01)；与模型组比较,低剂量桑菊清解汤组BALF中GSH含量及BALF和血清中SOD活性升高(P＜0.05),而高剂量桑菊清解汤组和NAC组BALF、血浆中GSH含量及BALF和血清中SOD活性均升高(P＜0.01).高、低剂量桑菊清解汤对急性被动吸烟损伤动物模型气道有一定保护作用且其作用呈一定的剂量依赖关系.结论:桑菊清解汤对被动吸烟所致大鼠急性肺损伤有一定的保护作用,且其保护作用可能与抑制自由基的产生、减少脂质过氧化有关.
关键词： 桑菊清解汤 吸烟 还原型谷胱甘肽(GSH) 超氧化物歧化酶(SOD) -
细胞内GSH耗竭逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM对阿霉素的耐药性
目的:探讨癌细胞内GSH浓度在肿瘤细胞耐药机制中的作用.方法:以马来酸二乙酯(DEM)处理人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM 3小时,以消耗其细胞内还原型谷胱甘肽(GSH),MTT法检测DEM处理前后MCF-7/ADM细胞对ADM耐药程度的变化,并采用荧光分光光度法同步检测其细胞内GSH的消耗程度,分析细胞内GSH浓度的变化与MCF-7/ADM细胞对ADM耐药程度变化间的相关关系.结果:0.1umol/L DEM使细胞内GSH浓度减少37.4%(P＜0.01);ADM亦使细胞内GSH含量呈ADM浓度依赖性的下降;DEM与ADM合用时,GSH浓度显著下降,其下降程度大于DEM和ADM单独应用之和.随着细胞内GSH数量的减少,MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性增强、耐药性下降(P＜0.01).结论:DEM耗竭细胞内GSH的作用与ADM有协同效应,耗竭细胞内GSH可部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性.
关键词： 还原型谷胱甘肽(GSH) 马来酸二乙酯 阿霉素 耐药 -
还原型谷胱甘肽辅助治疗急性重症胰腺炎前后血浆Ghrelin CRP IL-8和TNF-α浓度的变化
目的 探讨还原型谷胱甘肽(GSH)辅助治疗急性坏死性胰腺炎前后血浆Ghrelin、CRP、IL-8和TNF-α浓度的变化.方法 100例急性坏死性胰腺炎患者随机分为GSH辅助治疗组(A组,n=50)和一般治疗组(B组,n=50).于入院时和治疗3天后进行APACHE-Ⅱ评分；并在入院时、治疗1天和3天后,观察血淀粉酶、血脂肪酶、血浆Ghrelin、CRP、IL-8和TNF-α浓度的变化.另外选择门诊体检健康成年人为对照组(C组,n=50).结果 GSH辅助治疗组和一般治疗组患者APACHE-Ⅱ评分在治疗3天后均明显下降,GSH辅助治疗组下降更明显(均P＜0.05).GSH辅助治疗组和一般治疗组患者血淀粉酶、血脂肪酶、血浆Ghrelin、CRP、IL-8和TNF-α浓度均进行性下降,且GSH辅助治疗组下降更明显(均P＜0.05).结论 GSH对SAP有辅助治疗作用.血浆Ghrelin、CRP、IL-8和TNF-α浓度与SAP病情严重程度相关.
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海藻糖氧钒对小鼠胃肠道的氧化损伤以及Vc和GSH的抗氧化保护作用
目的 探讨海藻糖氧钒(VT)对小鼠胃肠道的氧化应激损伤、GSH/GSTs通路基因表达的影响以及维生素C(Vc)和还原型谷胱甘肽(GSH)的保护作用.方法 30只雄性昆明小鼠随机分组:VT组(B组)、Vc+VT组(C组)、GSH+VT组(D组)、Vc+GSH+VT组(E组),每天灌服VT(125 mg/kg),而正常对照组(A组)灌服等量生理盐水,Vc和GSH在VT给药前1 h灌服,连续15 d.取各组小鼠胃和十二指肠,DTNB法测定GSH含量,谷胱甘肽氧化法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,实时荧光定量PCR法检测GSH/GSTs通路相关基因GCLC、GSS、GSR和GSTpi的表达.结果 VT组胃、十二指肠的GSH含量、GSH-Px活性及GCLC、GSS、GSR和GSTpi的表达均低于A组(P<0.05).C、D、E组各指标显著提高,但仅E组小鼠胃组织的指标恢复到正常对照组水平.C组和D组除十二指肠中GSR表达显著差异外,其余指标差异均无统计学意义.结论 灌服VT对小鼠胃肠道产生一定的氧化应激损伤,并可影响GSH含量和GSH-Px活性以及GSH/GSTs通路相关基因的正常表达.外源补充Vc、GSH及两者联用有一定的抗氧化保护作用,降低了VT的毒性,且两者联用的效果更优,使胃中的相关指标达到正常水平.
