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  • 细胞角蛋白片段19-2G2对鼻咽癌的辅助诊断价值

    作者:雷旦生;喻晶;童先丽;王明伟;王堃;陈虎

    目的 研究细胞角蛋白(CK)片段19-2G2对鼻咽癌的临床价值.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定102例鼻咽癌组织细胞中CK19 mRNA的基因表达;采用Western blot验证CK19-2G2在癌组织细胞中的表达,并用免疫组织化学测定角蛋白片段CK19-2G2在癌组织细胞中的定位;采用化学发光法检测102例鼻咽癌患者、90例良性鼻咽病患者及150例健康人血清样本中的CK19-2G2的含量,同时用酶联免疫吸附(ELISA)法检测患者和健康人血清中EB-VCA IgA水平,进行统计学比较分析,研究其在鼻咽癌中的临床应用价值.结果 RT-PCR扩增产物CK19mRNA在102例鼻咽癌组织中64例为阳性,Western blot显示CK19-2G2蛋白片段60例为阳性,CK19-2G2在癌组织细胞中的定位表达20例强阳性、34例阳性、12例弱阳性,均证实CK19-2G2在鼻咽癌组织中有高表达.同时在鼻咽癌患者血清中角蛋白片段19-2G2水平高于良性鼻咽病患者及健康人.单项CK19-2G2检测鼻咽癌的灵敏度为49.0%,特异度为89.2%;EB-VCA IgA检测鼻咽癌的灵敏度为52.9%,特异度为85.4%;CK19-2G2联合EB-VCA IgA检测鼻咽癌的灵敏度可提高至73.5%,特异度保持80.0%.结论 CK19-2G2在鼻咽癌组织和血清中均有高表达,CK19-2G2检测可用于鼻咽癌辅助诊断,联合CK19-2G2和EB-VCA IgA检测可明显提高诊断鼻咽癌的灵敏度,并保持较高的特异度.

  • 细胞角蛋白(CK)7、CK8/18、CK19和p40在食管鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系

    作者:杨召阳;张红燕;王丰;马怡晖;李蕴蕴;贺红柳;王超;李珊珊

    目的 评估细胞角蛋白(CK)7、CK8/18、CK19和p40在食管鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达及其与预后的关系.方法 收集郑州大学第一附属医院2012年间手术切除并经病理确诊的食管鳞癌190例,其中男性116例,女性74例;年龄28~82(60.3±8.6)岁,<60岁88例,≥60岁102例.同时选取154例癌旁正常食管黏膜作为对照.采用免疫组织化学SP法检测食管鳞癌、正常食管组织中CK7、CK8/18、CK19和p40的表达情况,并分析CK7、CK8/18、CK19和p40在食管鳞癌中表达的意义、与临床病理参数之间的关系以及对患者预后的影响等.结果 在190例食管鳞癌中,p40和CK19均有表达,其中高表达者(弥漫阳性)分别为77.4%(147/190)、79.5%(151/190),低表达者(局部/斑片状)分别为22.6%(43/190)、20.5%(39/190);二者的表达水平均与淋巴结转移和pTNM分期显著相关(P<0.05);其中CK19低表达者较高表达者预后差(P<0.01),但p40表达水平与预后无关(P>0.05).CK7和CK8/18可在部分食管鳞癌中表达,阳性率分别为15.3%(29/190)、31.1%(59/190),二者阳性率均与肿瘤分化程度和淋巴结转移显著相关,且阳性表达者较阴性表达者预后差(P<0.05).进行多因素生存分析后发现,除pTNM分期外,CK19的低表达和CK8/18的阳性表达是影响患者预后的独立危险因素.结论 在低分化食管上皮源性肿瘤中,p40的低表达和CK7、CK8/18的阳性表达并不能除外鳞癌的诊断;食管鳞癌中p40、CK19的低表达和CK7、CK8/18的阳性表达提示患者易发生淋巴结转移,且预后差;CK19的低表达和CK8/18的阳性表达是影响食管鳞癌患者预后的独立危险因素.

  • 正常皮肤和新生疤痕组织表达角蛋白19的比较性研究

    作者:罗成群;周鹏翔;谷永红;杨元华;贺全勇;杨军;李高峰;彭长缨;彭浩;李萍;高新明;姜冰;陈铁夫;周建大

    研究正常皮肤和新生疤痕组织中表皮干细胞分布、增殖分化特征,并探讨这些特征与皮肤创伤修复的关系.方法:选择有Ⅲ度烧伤创面的成人患者8例,在获得了患者的知情同意后用手术尖刀分别切取正常皮肤、肉芽中的皮丁及新生疤痕组织(创面愈合后2个月内的疤痕)各一块,约2cm×1cm×0.5cm大小,应用过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)免疫组化法,以小鼠抗人角蛋白19型的单克隆抗体检测表皮干细胞的分布、增殖分化特征.结果:肉芽中的皮丁组织内有散在分布的角蛋白19表达阳性细胞,新生疤痕组织中的表皮基底层有多层角蛋白19表达阳性细胞,在再生表皮的中部,即位于基底细胞层与角质细胞层之间有大量的角蛋白19表达阳性细胞,且分布广泛,而正常皮肤只有表皮基底层和附件有角蛋白19表达阳性细胞.结论:新生疤痕组织中表皮再生仍很活跃,在皮肤创伤愈合过程中的重塑期,如果能够结合抑制疤痕增生的有效治疗,这种新生疤痕组织有可能转变成正常皮肤.

  • 半乳糖凝集素3、细胞角蛋白19及甲状腺过氧化物酶在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

    作者:南润玲;尚培中;谷化平;曹怀宇;王铁山

    目的检测半乳糖凝集素3(Galectin-3)、细胞角蛋白19(CK19)和甲状腺过氧化物酶(TPO)在甲状腺腺瘤(TA)、结节性甲状腺肿伴乳头状增生(NGWPH)和甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达状况,探讨三种抗体联合检测在甲状腺乳头状癌的早期诊断及良恶性病变鉴别诊断中的临床价值。方法采用EliVi-sionTM plus两步免疫组化方法,检测Galectin-3、CK19和TPO在55例PTC、40例NGWPH和40例TA中的表达状况。结果在55例PTC中,Galectin-3、CK19和TPO阳性率分别为92.73%、96.36%、18.18%。 Galectin-3、CK19在PTC组中的阳性表达率显著高于NGWPH和TA组( P<0.01);而TPO在PTC组中的阳性表达率显著低于NGWPH和TA组,差异具有统计学意义( P<0.01);在PTC组中Galectin-3、CK19及TPO联合检测的阳性率高于NGWPH和TA组,三种抗体同时表达在PTC与甲状腺良性疾病之间的差异具有统计学意义( P<0.01)。结论 Galectin-3、CK19和TPO联合检测更有助于PTC的准确诊断,为临床治疗提供可靠的依据。

  • 肝硬化背景下细胞角蛋白19不同表达的肝细胞癌超声造影量化参数分析

    作者:张溢;李锐;张晓航;段光杰;郭燕丽;唐春霖;陈朝晖

    目的分析肝硬化背景下细胞角蛋白19(CK19)表达阳性与阴性的肝细胞癌(HCC)超声造影量化参数的差异。方法收集2005年6月至2013年10月第三军医大学西南医院收治的164例经手术或穿刺活检病理证实为HCC及肝硬化患者超声造影检查资料,其中79例患者CK19阳性,85例患者CK19阴性。使用DFY-Ⅱ型超声图像定量分析仪分别测量、计算CK19阳性与CK19阴性HCC超声造影动脉期增强不均匀度、峰值强度,超声造影门脉期增强强度,肿瘤及肿瘤旁肝实质超声造影门脉期增强强度比值,并进行比较。结果 CK19阳性HCC超声造影动脉期增强不均匀度高于CK19阴性HCC(2.64±0.64 vs 2.29±0.31),CK19阳性HCC超声造影动脉期峰值强度低于CK19阴性HCC[(102.83±29.78)dB vs(120.65±25.49) dB],CK19阳性HCC超声造影门脉期增强强度低于CK19阴性HCC[(66.83±20.13) dB vs(79.99±27.15) dB],CK19阳性HCC肿瘤与肿瘤旁肝实质超声造影门脉期增强强度比值低于CK19阴性HCC(0.74±0.03 vs 0.92±0.22),且差异均有统计学意义(W=4.4,P=0.000;t=3.887,P=0.000;t=3.115,P=0.002;t=5.221,P=0.000)。结论肝硬化背景下CK19不同表达的HCC超声造影量化参数存在明显差异。

  • 非小细胞肺癌患者治疗前血清 CEA和 CYFRA21-1水平与 EGFR 突变及 EGFR-TKI 疗效的关系

    作者:孙宇晶;刘畅;龙彦;孙媛媛;樊春红;夏长胜;王辉;赵晓涛

    目的:探讨非小细胞肺癌患者治疗前血清CEA和细胞角蛋白19( CYFRA21-1)水平与表皮生长因子( EGFR)基因突变的相关性并分析其对酪氨酸激酶抑制剂( TKI)疗效的预测价值。方法本研究为临床研究,共收集北京大学人民医院2012至2013年101例非小细胞肺癌患者配对癌组织和外周血标本。采用ADx-ARMS法和直接测序法检测上述标本EGFR基因18、19、20、21外显子基因突变,同时采用电化学发光方法检测患者血清CEA和CYFRA21-1表达水平。采用χ2检验、Log-rank检验和cox回归,分析患者肿瘤标志物水平与EGFR突变和EGFR-TKI疗效的关系。结果双环探针扩增阻滞突变系统(ADx-ARMS)总突变检出率为60.4%(61/101),直接测序法为33.7%(34/101)。突变多见于治疗前血清CEA浓度升高(≥5μg/L,78.8%)患者,但突变率不随CEA浓度增加而升高。靶向治疗疗效方面,治疗前血清CYFRA21-1水平和EGFR突变状态与TKI治疗的无进展生存期(PFS)相关(χ2=8.903,P=0.003;χ2=28.590,P<0.001),同时也是影响靶向治疗患者PFS的独立因素( RR=0.298,P<0.001;RR=0.086,P<0.001)。结论治疗前CEA浓度与EGFR突变相关,同时可与CYFRA21-1作为预测非小细胞肺癌接受EGFR-TKI治疗的疗效指标。(中华检验医学杂志,2015,38:407-411)

  • 动脉化疗对进展期胃癌CEA mRNA及CK19 mRNA表达的影响

    作者:张强;姚惠香;孙群;朱金水

    目的:探讨外周血细胞CEA mRNA,CK19mRNA水平与胃癌EAP方案介入化疗近期疗效相关意义.方法:选择30例中晚期胃癌患者(Ⅱ期3例,Ⅲ期15例,Ⅳ期12例),于EAP(VP-16+ADM+CBP)介入化疗前2-3d及化疗后2-3 wk取外周血,全自动发光免疫法检测血清CEA及TPA,逆转录聚合酶链反应检测CEA及CK19 mRNA.用超声内镜(EUS)结合CT测量肿块对化疗的有效率(CR+PR)情况.结果:介入化疗前后外周血CEA及CK19mRNA均有显著差异[CEA:60.0%(18/30)vs33.3%(10/30),x2=4.29,P<0.05;CK19:73.3%(22/30)vs46.7%(14/30),x2=4.34,P<0.05].CEA及CK19 mRNA联合检测阳性率在介入化疗前后也有显著差异[90.0%(27/30)vs50.0%(15/30),x2=8.52,P<0.05].影像学诊断显示,外周血CEA mRNA,CK19 mRNA联合检测阳性患者治疗前后分别为16例及5例(x2=8.86,P<0.05).结论:外周血细胞CEA mRNA、CK19 mRNA水平在EAP方案介入化疗后阳性率显著下降,CEA mRNA、CK19 mRNA联合检测的敏感性高于血清CEA、TPA联合检测,可反应EAP方案介入化疗后肿瘤体积的变化情况.

  • 不同发育阶段人皮肤表皮干细胞增殖分化特征及其与创面修复结局关系的研究

    作者:赵志力;付小兵;孙同柱;杨银辉;陈伟;孙晓庆;盛志勇

    目的:从细胞分化角度研究人胎儿期、少儿期、成年人期皮肤中表皮干细胞增殖分化特征,以及这些特征与创面修复结局的关系.方法:分别取因创伤等原因致流产的22~24周龄胎儿和4~12周岁少儿、35~53岁成年人3组全层皮肤.采用免疫组化方法检测表皮干细胞特异表达的β1整合素和细胞角蛋白19(K19).结果:胎儿期皮肤表皮基底层细胞β1整合素和K19染色均为强阳性.少儿期表皮基底层细胞中60%~80%的细胞表达β1整合素和K19.成年人表皮基底层中表达β1整合素和K19的细胞较少儿组进一步减少,且染色强度较弱.结论:本实验结果提示,胎儿期表皮基底层增殖细胞均为表皮干细胞和短暂扩充细胞,而少儿期表皮基底层中部分细胞为于细胞和短暂扩充细胞,成年人期干细胞与短暂扩充细胞所占的比例则进一步降低.这种干细胞增殖分化的差异可能与三种不同发育阶段皮肤损伤的完全与不完全修复有关.

  • 角蛋白19在皮肤癌组织中表达特征的实验研究

    作者:周鹏翔;罗成群;谷永红;彭长缨;杨军;杨元华;贺全勇;姜冰

    目的:了解角蛋白19在皮肤鳞癌和皮肤基底细胞癌组织中的表达特征.方法:选择皮肤鳞癌标本6个和皮肤基底细胞癌标本4个,分别切取癌组织各一块,同时切取正常皮肤组织2块作对照,应用过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)免疫组化法,以小鼠抗人角蛋白19型的单克隆抗体来检测角蛋白19表达阳性细胞.结果:正常皮肤组织只有表皮基底细胞层和附属器的部分细胞表达角蛋白19:I级鳞癌组织中无角蛋白19表达阳性细胞,但有部分细胞核大小不等,形态各异,而且细胞分布较紊乱,并有许多角化珠;Ⅱ级皮肤鳞癌有局灶性的角蛋白19表达阳性细胞,这些细胞分布紊乱,细胞核大小不等,形态各异;Ⅲ级皮肤鳞癌和基底细胞癌组织内有大量的角蛋白19表达阳性细胞,且分布紊乱,其核大小不等,形态各异.结论:角蛋白19在皮肤鳞癌组织中的表达特征与皮肤鳞癌的分化程度有关,分化程度越低,角蛋白19表达越强,分化程度越高,角蛋白19表达越弱,甚至不表达.

  • CK19、CD56与 PCNA 在甲状腺乳头状癌与乳头状增生中的表达及意义

    作者:魏丽

    目的:探讨CK19、 CD56与PCNA在甲状腺乳头状癌( PTC )与甲状腺乳头状增生( BPH)中的表达及意义。方法回顾性分析自2009年10月至2011年1月收治的46例PTC及42例BPH患者,应用免疫组织化学EnVision法测定CK19、CD56与PCNA表达情况,及其在PTC及BPH中的灵敏率及特异度。使用SPSS 15.0软件进行统计分析, CK19、CD56与PCNA在PTC、BPH中的表达率采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 CK19在PTC、BPH中的表达阳性率分别为93.5%(高表达)及31.0%(低表达)χ2=37.08, P<0.005;CD56在PTC、BPH中的表达阳性率分别为15.2%(低表达)及66.7%(高表达)χ2=23.03, P<0.005;PCNA在PTC、BPH中的表达阳性率分别为63.0%(高表达)及33.3%(低表达)χ2=7.73, P<0.01;差异均具有显著统计学意义。 CK19、CD56与PCNA在PTC 表达中的灵敏率为93.5%、15.2%、63.0%,特异度为69.0%、33.3%、42.9%。三者联合检测灵敏度为93.5%,特异度为73.9%。CK19、 CD56与PCNA在BPH表达中的灵敏率为31.0%、66.7%、33.3%,特异度为6.5%、84.8%、37.0%。三者联合检测灵敏度为66.7%,特异度为69.0%。结论 CK19、CD56与PCNA在甲状腺乳头状癌与良性乳头状增生中的表达有显著差别,可以对二者进行鉴别诊断,联合测定提高灵敏性及特异性。

  • CT、病理和CK19 RT-PCR在诊断肺癌淋巴结转移的对照研究

    作者:蒋晓东;朱广迎;王绪

    目的:探索检测肺癌淋巴结转移的新途径。方法:应用CT、病理和细胞角蛋白19(CK19)逆转录聚合酶链反应(reverse-transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)法,对15例可手术的原发性肺癌患者60枚区域淋巴结分别进行癌转移检测。结果:60枚区域淋巴结中,16枚经CT诊断为转移,其中有11枚CK19 RT-PCR为阳性,44枚CT阴性中有24枚阳性;15枚经病理诊断为转移的,CK19 RT-PCR均为阳性,而45枚病理诊断为阴性的淋巴结中有20枚为阳性。结论:与传统的CT、组织病理检查相比,CK19 RT-PCR法可提高淋巴结癌转移的检出率,从而准确地评价其转移状况。

  • 荧光定量聚合酶链反应和流式细胞术检测乳腺癌微转移的研究

    作者:董秀玲;黄英;佟倩;薛红;高亚杰

    目的 探讨采用实时荧光定量聚合链反应(FQ-PCR)和流式细胞术(FCM),检测乳腺癌患者外周血中CK-19的表达情况及其临床意义.方法 用FQ-PCR和FCM方法检测98例Ⅱ~Ⅲ期乳腺癌患者外周血中CK-19的表达情况,另取同期52例乳腺良性肿瘤手术患者作为对照组.结果 采用FQ-PCR术和FCM法检测乳腺癌组患者CK-19的阳性率分别为39.8%(39/98)和28.6%(28/98);对照组未检测到CK-19的阳性表达.两种方法及两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).激素受体阳性患者CK-19的阳性率分别为39.6%(21/53)和24.5%(13/53),与阴性患者间差异无统计学意义(P>0.05).HER-2阳性患者检测CK-19的阳性率分别为42.9%(12/28)和35.7%(10/28),与HER-2阴性患者间差异无统计学意义(P>0.05).有淋巴结转移者CK-19的阳性率分别为49.1%(28/57)和36.8%(21/57),与无淋巴结转移患者差异有统计学意义(P<0.05).Ⅲ期CK-19的阳性率分别为55.6%(22/36)和41.7%(15/36),高于Ⅱ期的30.6%(19/62)和21.0%(13/62),差异有统计学意义(P<0.05).结论 FQ-PCR检测微转移的敏感性高于FCM.CK-19的表达与淋巴结转移和肿瘤分期有关,与激素受体、HER-2表达无关.

  • 趋化因子受体4核阳性以及血管内皮生长因子C和细胞角蛋白19的表达水平与肝细胞癌淋巴结转移风险的关系

    作者:向作林;曾昭冲;汤钊猷;樊嘉;孙惠川;吴伟忠;谭云山

    目的 探讨趋化因子受体4(CXCR4)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和细胞角蛋白19(CK-19)蛋白在肝细胞癌(HCC)肿瘤组织中的表达,以及与淋巴结转移和患者预后的关系.方法 收集123例术后出现淋巴结转移和145例术后无淋巴结转移的HCC石蜡包埋组织,制备组织芯片;采用免疫组化半定量法检测CXCR4、VEGF-C和CK-19蛋白的表达水平,并分析3种蛋白的表达与HCC淋巴结转移和其他临床病理因素之间的关系.结果 T分期、细胞核CXCR4蛋白的表达、VEGF-C蛋白的表达和CK-19蛋白的表达是HCC发生淋巴结转移的独立因素.细胞核CXCR4蛋白、VEGF-C蛋白高表达和CK-19蛋白阳性能预测HCC的淋巴结转移.123例有淋巴结转移的HCC患者中,细胞核CXCR4蛋白高表达和低表达患者的中位生存时间分别为15.1和24.5个月;VEGF-C蛋白高表达和低表达患者的中位生存时间分别为15.1和31.1个月;CK-19蛋白阳性和阴性患者的中位生存时间分别为12.0和19.2个月.细胞核CXCR4蛋白、VEGF-C蛋白高表达和CK-19蛋白阳性患者的预后均明显差于相应的低表达组和阴性组(均P<0.05).有无门脉癌栓、T分期、细胞核CXCR4蛋白和VEGF-C蛋白的表达以及CK-19蛋白的表达是伴淋巴结转移的HCC患者的独立预后因素.结论 细胞核CXCR4蛋白、VEGF-C高表达和CK-19蛋白阳性与HCC淋巴结转移和预后差有关,并可作为HCC淋巴结转移的独立预后因素.

  • 肺特异性X蛋白角蛋白19及癌胚抗原基因在非小细胞肺癌淋巴结微转移中的比较

    作者:王潍博;崔言刚;姚舒洋

    目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA、角蛋白19(CK19)mRNA和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达及与NSCLC淋巴结转移和分期的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测56例NSCLC患者的肺癌组织和103枚区域性淋巴结的LUNX mRNA、CK19 mRNA和CEA mRNA的表达情况.对所有淋巴结做常规病理切片并行HE染色,观察转移情况.结果 (1)LUNX mRNA、CK19 mRNA和CEA mRNA在肺癌患者淋巴结中的表达明显高于肺良性病变者(P<0.05).(2)与常规病理学方法检查淋巴结相比,RT-PCR技术的敏感性显著增高(P<0.05).(3)LUNX mRNA、CK19 mRNA在淋巴结中的阳性表达率与肺癌病理类型之间无明显相关性(P>0.05),但CEA mRNA在肺腺癌组织中的表达明显增高(P<0.05).(4)区域淋巴结中,LUNX mRNA表达的阳性率随TNM分期的升高而增加(P<0.05).结论 LUNX mRNA与CK19mRNA均可作为RT-PCR检测肺癌患者区域性淋巴结微转移的分子标志物;在特异性和敏感性上,LUNX mRNA优于CK19 mRNA.采用RT-PCR方法,有利于早期诊断肺癌转移.

  • 新型肿瘤标志物细胞角蛋白19片段2G2诊断肺癌的临床价值

    作者:张宏艳;梁峰;刘畅;贾志凌

    目的 探讨新型肿瘤标志物细胞角蛋白19片段2G2(CK19-2G2)血清水平对肺癌的诊断价值.方法 采用化学发光法检测并比较了150例肺癌、50例肺炎和150名健康体检者空腹血清中CK19-2G2水平,对比血清CK19-2G2与CYFRA21-1水平对肺癌的诊断效能.结果 CK19-2G2诊断肺癌的敏感度和准确度分别为55.3%(83/150)、80.3%(281/350),而CYFRA21-1诊断肺癌的敏感度和准确度分别为28.0%(42/150)、67.4%(236/350).CK19-2G2敏感度和准确度高于CYFRA21-1(P< 0.001).结论 新型肿瘤标志物CK19-2G2血清水平能够起到肺癌临床辅助诊断的作用.

  • 非小细胞肺癌血清CYFRA21-1和VEGF及PDGF联合检测的意义

    作者:杜岩;周静敏;秦建文;马淑萍;史东升

    目的 探讨联合检测血清细胞角蛋白片段19(CYFRA21-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)对非小细胞肺癌(NSCLC)诊断和分期的指导作用.方法 NSCLC患者及健康对照组血清CYFRA21-1采用电化学发光法测定,VEGF及PDGF采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定.结果 NSCLC组CYFRA21-1、VEGF及PDGF测定值均高于正常对照组(P<0.005).血清CYFRA21-1、VEGF和PDGF测定值与NSCLC分期有关(P<0.05).血清CYFRA21-1测定值与病理分型有关(P<0.05),血清VEGF和PDGF测定值与病理分型无关(P>0.05).血清CYFRA21-1、VEGF与PDGF测定值之间呈正相关(P<0.01).结论 CYFRA21-1、VEGF及PDGF的联合检测对NSCLC的诊断和分期具有一定的临床指导意义.

  • 不同发育阶段人皮肤表皮干细胞增殖分化特征及其与创面修复结局关系的研究

    作者:赵志力;付小兵;孙同柱;杨银辉;陈伟;孙晓庆;盛志勇

    为从细胞分化角度研究人胎儿期、少儿期、成年人期皮肤中表皮干细胞增殖分化特征,以及这些特征与创面修复结局的关系,分别取因创伤等原因致流产的22~24周龄胎儿和4~12周岁少儿、35~53岁成年人3组全层皮肤.采用免疫组化方法检测表皮干细胞特异表达的β1整合素和细胞角蛋白19(K19). 结果发现,胎儿期皮肤表皮基底层细胞β1整合素和K19染色均为强阳性,少儿期表皮基底层细胞中60%~80%的细胞表达β1整合素和K19,成年人表皮基底层中表达β1整合素和K19的细胞较少儿组进一步减少,且染色强度较弱.结果提示,胎儿期表皮基底层增殖细胞均为表皮干细胞和短暂扩充细胞,而少儿期表皮基底层中部分细胞为干细胞和短暂扩充细胞,成年人期干细胞与短暂扩充细胞所占的比例则进一步降低.这种干细胞增殖分化的差异可能与三种不同发育阶段皮肤损伤的完全与不完全修复有关.

  • 雷公藤甲素体外对人表皮干细胞增殖的调控作用

    作者:江惟苏;何友珍;王鹏;欧阳资章;汤素环

    目的:探讨雷公藤甲素体外对人表皮干细胞增殖的影响。方法:应用中性蛋白酶-Ⅳ型胶原黏附方法分离正常人的包皮表皮干细胞,采用细胞免疫组化法检测培养传代细胞的角蛋白19(CK19)、角蛋白10(CK10)、β1整合素表达,鉴定人表皮干细胞。培养传代细胞中加入不同浓度的雷公藤甲素,用倒置显微培养后观察细胞的形态学变化,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖情况,探索雷公藤甲素对人表皮干细胞增殖的影响。结果:免疫组化法检测提示培养传代细胞,β1整合素、CK19表达阳性,CK10表达阴性,MTT法检显示雷公藤甲素能显著抑制人表皮干细胞的增殖,且存在一定的浓度依赖性。结论:雷公藤甲素能有效抑制人表皮干细胞增殖。

  • 人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响

    作者:霍双枝;施萍;庞希宁

    目的 观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响.方法 采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并与单纯羊膜组和对照组进行比较.结果 HAM负载hAMSCs组大鼠创面的平均愈合时间为(18.3±0.9)d,明显快于对照组的(26.4±0.7)d(P<0.01)和单纯羊膜组的(21.5±1.2)d(P<0.05);术后11d和14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠的创面愈合率分别为(81.5±7.2)%和(94.3±3.6)%,明显高于对照组的(48.5±3.2)%和(74.3±4.3)%及单纯羊膜组的(68.5±4.5)%和(86.8±4.8)%(P均<0.01).皮肤切片HE染色结果证实,HAM负载hAMSCs组大鼠的伤口愈合质量明显优于单纯羊膜组和对照组.免疫组织化学染色结果显示,术后14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠皮肤CK19阳性表皮干细胞数为48.2±3.2,明显高于单纯羊膜组的37.7±3.1(P <0.05)和对照组的29.6±2.4(P<0.01);血管内皮生长因子阳性颗粒表达数为64.5±4.5,也明显高于单纯羊膜组的52.6±3.8(P <0.05)和对照组的40.7±3.1(P <0.01).结论 HAM负载hAMSCs可能是通过促进表皮干细胞和毛细血管再生,促进皮肤损伤修复.

  • ProGRP及CYFRA21-1检测对胸腔积液鉴别诊断的价值

    作者:刘运秋;林江涛

    目的探讨胸腔积液胃泌素前体释放肽片段31-98(ProGRP)及细胞角蛋白19(CYFRA21-1)单项及联合检测对肺癌所致恶性胸腔积液的诊断价值.方法将75例肺癌所致的恶性胸腔积液患者分为小细胞肺癌(SCLC)组36例和非小细胞肺癌(NSCLC)组39例,并以良性胸腔积液组37例进行对照.比较胸腔积液ProGRP、CYFRA21-1单项及联合检测对恶性胸腔积液的诊断价值.结果胸腔积液ProGRP在SCLC组、NSCLC组和良性胸腔积液组的阳性率分别为91.7%、2.6%和2.7%;CYFRA21-1在SCLC组、NSCLC组和良性胸腔积液组的阳性率分别为55.6%、82.1%和13.5%.胸腔积液ProGRP单项检测、CYFRA21-1单项检测、ProGRP+CYFRA21-1联合检测(按序列试验)和ProGRP+CYFRA21-1联合检测(按平行试验)诊断SCLC所致的恶性胸腔积液的敏感度分别为91.7%、55.6%、50.0%及94.4%,特异度分别为97.3%、86.5%、97.3%及83.8%,Youden指数分别为0.889 6、0.420 4、0.473 0和0.782 3.ProGRP单项检测、CYFRA21-1单项检测、ProGRP+CYFRA21-1按序列实验联合检测和按平行试验联合检测诊断NSCLC所致的恶性胸腔积液的敏感度分别为2.6%、82.1%、2.6%和82.1%,特异度分别为97.3%、89.2%、97.3%及86.5%,Youden指数分别为-0.001 4、0.712 4、-0.001 4和0.685 4.ProGRP单项检测、CYFRA21-1单项检测、ProGRP+CYFRA21-1按序列试验联合检测和按平行试验联合检测,诊断肺癌所致的恶性胸腔积液的敏感度分别为45.3%、69.3%、40.0%和98.7%,特异度分别为97.3%、86.5%、97.3%和83.8%,Youden指数分别为0.426 3、0.558 2、0.373 0及0.824 5.结论胸腔积液ProGRP和CYFRA21-1分别为SCLC和NSCLC所致的恶性胸腔积液患者首选的肿瘤标志物.按平行试验联合检测胸腔积液ProGRP和CYFRA21-1对肺癌所致的恶性胸腔积液鉴别诊断有很大的临床价值.

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