首页 > 文献资料
-
D2-40和annexin-1在诊断室管膜来源肿瘤中的应用
目的 探讨D2-40和annexin-1两种抗体标记室管膜来源肿瘤的情况及诊断意义。方法 收集宣武医院病理科2005年至2009年52例室管膜来源肿瘤，包括48例室管膜肿瘤（4例黏液乳头型室管膜瘤，38例室管膜瘤，6例间变型室管膜瘤），4例脉络丛乳头状瘤，以10例非肿瘤性脑组织作为对照。应用EnVision二步法进行免疫组织化学染色，观察D2-40、annexin-1、上皮细胞膜抗原( EMA)和Ki-67的表达情况。结果 D2-40在室管膜肿瘤总的阳性率为32/48( 66.7％)，其中21/38(55.3％)的室管膜瘤和5/6的间变型室管膜瘤可见特异性结构即点状(dot-like)或环状(ringlike)结构。室管膜肿瘤D2-40标记阳性等级与Ki-67阳性指数之间无相关性(r=-0.013，P=0.931)。annexin-1在室管膜肿瘤总的阳性率为87.5％ (42/48)，1/4的黏液乳头型室管膜瘤、28.9％(11/38)的室管膜瘤出现特异性的颗粒状结构（granular structure）或室管膜上皮刷状缘。室管膜肿瘤annexin-1标记阳性等级与Ki-67阳性指数之间有相关性（r=-0.405,P=0.005）。D2-40、EMA和annexin-1三种抗体联合诊断室管膜肿瘤阳性率为100％。脉络丛乳头状瘤的D2-40和annexin-1标记均呈阳性。对照组D2-40完全阴性，annexin-1细胞背景阴性，小血管壁阳性。结论 D2-40和annexin-1在室管膜来源肿瘤中表达阳性率高，尤其是特异性结构的出现具有较高的诊断价值。D2-40和annexin-1联合EMA的免疫组织化学标记是诊断室管膜来源肿瘤的有效方法。
-
家兔下腔静脉血栓99Tcm-膜联蛋白Ⅴ显像的实验研究
目的：探讨99Tcm-膜联蛋白Ⅴ（Annexin Ⅴ）进行静脉血栓显像及鉴别新鲜与陈旧静脉血栓的可行性。材料与方法将15只家兔随机平均分为新鲜血栓组、陈旧血栓组及对照组，每组5只，新鲜血栓组及陈旧血栓组通过手术于下腔静脉置入螺旋铜丝建立下腔静脉血栓模型，对照组建立模型后不在下腔静脉内置入铜丝。新鲜血栓组及对照组于术后1 d、陈旧血栓组于术后14 d注射99Tcm-AnnexinⅤ，分别于注射后30、60、90 min及2 h显像，勾画感兴趣区，计算新鲜血栓组及陈旧血栓组血栓与本底放射性计数比值，对照组计算与血栓组血栓对应的下腔静脉部位与本底放射性计数比值，比较新鲜血栓组与陈旧血栓组、对照组血栓与本底放射性计数比值的差异。显像结束后处死实验兔，留存血栓标本行病理检查。结果新鲜血栓组5只实验兔血栓部位均呈放射性浓聚影，陈旧血栓组5只实验兔血栓部位均未见放射性浓聚表现，对照组5只实验兔下腔静脉均未见放射性浓聚；新鲜血栓组血栓与本底放射性计数比值（4.06±0.49）高于陈旧血栓组（2.46±0.38）及对照组对应的下腔静脉部位与本底放射性计数比值（2.27±0.24）（t=5.746、7.318, P<0.05）；新鲜血栓组血栓病理结果提示为新鲜混合血栓，陈旧血栓组血栓为机化混合血栓。结论99Tcm-AnnexinⅤ有望成为一种新的急性新鲜静脉血栓显像剂用于鉴别新鲜与陈旧静脉血栓。
-
单一检测体系内外周血白细胞凋亡相关指标Annexin-V、PI的时相变化特征
目的 综合分析外周血白细胞凋亡相关检测指标Annexin-V、PI的时相变化特征.方法 采用直接沉降-CD45/Annexin-V/PI法在单一检测体系内同时检测体外不同时相外周血粒细胞、单核细胞、淋巴细胞凋亡,分析其凋亡特征.结果 (1)体外0.5 h时,三类细胞Annexin-V阳性率从高到低依次为单核细胞、粒细胞、淋巴细胞,其差异具有统计学意义(H=25.055,P<0.001);PI阳性率依次为粒细胞、单核细胞、淋巴细胞,其差异具有统计学意义(H=18.762,P<0.001).(2)随着时间的延长,各类细胞的Annexin-V阳性率均逐渐上升,特别是单核细胞、粒细胞在6 h检测结果显示大多数细胞Annexin-V阳性(>60%);PI阳性率随着时间的延长也呈升高态势,粒细胞、单核细胞PI阳性率在3 h内上升缓慢,但6 h时,变化增大;(3)无论0.5 h,还是6 h,三类细胞Annexin-V阳性率均明显高于PI阳性率,差异具有统计学意义(P<0.001).结论 外周血粒细胞、单核细胞、淋巴细胞凋亡各有其特点,在设计外周血白细胞凋亡相关研究方案时应考虑其不同凋亡特点,以得到准确、敏感的结果.
-
99锝m标记膜联蛋白Ⅴ检测细胞凋亡评价动脉粥样斑块的实验研究
目的 细胞凋亡会导致斑块易损,检测凋亡部位有助于确定易损斑块的存在.本实验将99锝(99Tcm)-膜联蛋白Ⅴ(annexin Ⅴ)用于实验性动脉粥样硬化斑块的凋亡检测,探讨此方法 用于体外无创检测斑块和评价斑块稳定性的方法 学及可行性.方法 11只雄性新西兰大白兔分为2组,实验组8只给予2%高胆固醇饲料,建立动脉粥样硬化模型,对照组3只给予普通饲料.将99Tcmannexin Ⅴ经耳缘静脉注射入实验组和对照组动物体内.使用伽马照相机摄取左侧位二维全身照片.成像后处死实验组动物,取出腹主动脉进行离体伽马照相.将动脉按病变分布分成若干部分称重,测量计算单位放射量,并进行组织病理学分析.结果 注射99Tc-annexin Ⅴ 2 h后,活体伽马摄像显示实验组腹主动脉内放射标记的清晰轮廓.取出主动脉后,离体γ摄像显示膈下腹主动脉摄取放射标记物明显,与活体成像一致.离体成像与离体标本的动脉粥样硬化病变分布区域一致.腹主动脉标本按病变分为18个片段,除1～4段为AHA Ⅰ型或Ⅱ型病变外,其余14个片段为AHA Ⅳ型和Ⅴ型病变(易损病变).斑块纤维帽厚度以及帽/核厚度比值与单位放射量呈负相关,帽/核厚度比值与单位放射计数的相关性(r=-0.904,P＜0.01)强于纤维帽厚度与单位放射计数的相关性(r=-0.8,P＜0.01).凋亡检测显示,斑块annexin Ⅴ的摄取与凋亡指数呈正相关(r=0.651,P=0.012).结论 放射标记的annexin Ⅴ是良好的凋亡示踪剂,99Tcm-annexin Ⅴ核素成像可能成为无创检测易损斑块的一种有效方法.
-
子宫内膜浆液性癌患者输卵管伞端组织的病理特征研究
目的 通过研究子宫内膜浆液性癌(ESC)患者输卵管伞端组织的病理特征,初步探讨ESC的发生与输卵管伞端组织病变的关系.方法 收集北京大学人民医院1999年至2013年间收治的所有典型ESC患者共30例(包括Ⅰ期13例,Ⅱ期2例,Ⅲ期15例),取其石蜡包埋的典型ESC组织、双侧输卵管伞端组织.(1)通过HE染色切片观察ESC患者的输卵管伞端组织的病理特征,分析输卵管伞端上皮内病变特点、程度及其与ESC期别的关系.(2)利用免疫组化法检测ESC患者的内膜癌组织与其输卵管伞端组织中p53、人类表皮生长因子2(HER2/neu)、高迁移率族蛋白A2(HMGA2)、膜联蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)蛋白的表达,并分析其相关性.结果 (1)30例ESC患者中,15例(50%)合并输卵管伞端上皮的病变,包括输卵管浆液性癌9例(Ⅲa期5例,Ⅲc期4例),输卵管上皮内癌(STIC)2例(Ⅰa期、Ⅰb期各1例),输卵管上皮增生2例(Ⅰa期),输卵管浆液性癌合并STIC 1例(Ⅲa期),输卵管浆液性癌合并输卵管上皮增生1例(Ⅲc期).(2)ESC患者的内膜癌组织中p53蛋白的阳性表达率为87%(26/30),其输卵管伞端组织中为30%(9/30),两者比较,差异有统计学意义(P=0.001).ESC患者的内膜癌组织与其输卵管伞端组织中p53蛋白的表达呈中度正相关(r=0.506,P=0.022).(3)ESC患者的内膜癌组织中ANX-Ⅳ蛋白的阳性表达率为83%(25/30),其输卵管伞端组织中为20%(6/30);内膜癌组织中HER2/neu蛋白的阳性表达率为70%(21/30),其输卵管伞端组织中为23%(7/30);内膜癌组织中HMGA2蛋白的阳性表达率为83%(25/30),其输卵管伞端组织中为20%(6/30).上述3个蛋白在内膜癌组织与其输卵管组织中分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但上述3个蛋白在ESC患者的内膜癌组织与其输卵管伞端组织中的表达均无相关性(P>0.05).结论 Ⅰ期ESC患者的输卵管伞端合并STIC,提示STIC与ESC的发生可能存在一定的关系;在内膜癌与其输卵管组织中,p53蛋白的表达存在相关性,而HER2/neu、ANX-Ⅳ、HMGA2的表达无相关性.
-
膜联蛋白及其与胶质瘤关系的研究进展
膜联蛋白属于钙离子依赖性磷脂结合蛋白家族,其在调节炎性反应、信号转导、细胞增殖、分化和凋亡等方面发挥着重要的作用.胶质瘤发病机制尚不明确,诊断胶质瘤的辅助检测方法也缺乏特异性.近年来,研究表明膜联蛋白参与调节胶质瘤的形成、转移和耐药等过程[1-2].有研究报道,某些膜联蛋白水平与胶质瘤恶性程度相关[3-5].因此,膜联蛋白有可能成为诊断和治疗胶质瘤的一个方向.本文就膜联蛋白与胶质瘤关系的研究进展综述如下.
-
系统性红斑狼疮患者循环annexin Ⅱ水平的变化及临床意义
目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血自细胞annexinⅡ的表达水平及其在SLE中的临床意义.方法 采用流式细胞术检测SLE患者35例,慢性肾炎患者10例,糖尿病肾病(DN)患者10例,健康对照组20名血白细胞annexinⅡ的表达水平,并分析其与临床指标间的相关性.采用t检验、方差分析及直线相关性分析进行统计学分析.结果 SLE、DN组患者血白细胞annexin Ⅱ水平[(7.1±2.9)%,(8.0+3.7)%]均显著低于健康对照组[(10.6±1.6)%](P<0.01,P<0.05);有活动性[(SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分≥9分]的SLE患者annexinⅡ水平[(5.6±2.4)%]显著低于非活动性(SLEDAI评分<9分)的SLE患者[(7.8±2.8)%](P<0.05);SLE患者annexinⅡ水平与尿蛋白/肌酐呈负相关(r=-0.382,P<0.05),与血白蛋白呈正相关(r=0.439,P<0.01),与SLEDAI呈负相关(r=-0.417,P<0.05),与D-二聚体呈负相关(r=-0.336,P<0.05).结论 SLE患者血白细胞annexin Ⅱ表达水平降低,参与了SLE患者高凝和继发性纤溶亢进状态的发生发展的病理生理过程,可作为一种早期反映SLE血栓前状态的良好指标,对判断SLE的活动性及疗效有一定的帮助.
-
胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织Annexin-1的表达
目的探讨胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜组织膜联蛋白-1(Annexin-1)的表达及意义.方法采用Western blot法检测模型组及正常组大鼠在不同时间点滑膜组织Annexin-1的表达,运用ImageTool 3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析.结果正常组及模型组皆表达Annexin-1.模型组Annexin-1表达在25、35和45 d水平递减,45 d与25 d相比,差异有统计学意义(P＜0.05).45 d Annexin-1表达明显低于正常组(P＜0.05).结论CIA大鼠滑膜组织Annexin-1表达下调.
-
应用重组改良型人膜联蛋白检测动脉粥样硬化斑块的实验研究
目的:探讨99mTc标记重组改良型人膜联蛋白(H-Annexin V)检测兔动脉粥样硬化(AS)病变的价值.方法:7只雄性大耳白兔随机分为模型组和正常对照组.模型组4只(其中1只用于模型对照研究)大白兔通过球囊损伤腹主动脉内膜,并饲喂含2%胆固醇、5%猪油的高脂饲料15周制备AS模型.3只正常对照组大白兔饲喂普通饲料15周.15周后取3只模型组大白兔自耳缘静脉注射99mTc-H-Annexin V 37～55.5MBq/kg(含500μg H-Annexin V),进行活体及离体血管显像.正常对照组显像方法相同.对模型组兔降主动脉分段,测定各段质量和放射性计数,并进行病理学检查.剩余1只模型对照组兔静脉注射99mTcO4- 37～55.5MBq/kg.结果:3只模型组兔注射99mTc-H-Annexin V后10min降主动脉可见放射性摄取,随着时间的延长,显像剂摄取增加,显像剂注射后2h,模型组兔降主动脉显影为清晰.正常对照组兔在注射显像剂后10min可见降主动脉放射性摄取,随着时间的延长,显像剂摄取减少,注射显像剂后2h,降主动脉放射性摄取不明显.注射显像剂后2h模型组靶/非靶(T/NT)比值(2.68±0.25)明显高于对照组(1.57±0.24,t=5.44,P＜0.01).含AS斑块血管片段的放射性摄取为(63.33±14.11)cpm/mg,明显高于非斑块的血管片段(21.75±8.30)cpm/mg(t=9.53,P＜0.01).1只模型对照组兔静脉注射后10min到2h均未见明显主动脉影像.结论:99mTc-H-Annexin V核素显像可成为一种无创检测AS斑块的方法.
-
膜联蛋白Ⅱ基因短发夹RNA表达载体的构建和鉴定
目的:构建针对膜联蛋白(annexin)Ⅱ的短发夹RNA(shRNA)的表达载体,观察其对目的基因表达的影响.方法:根据GenBank中annexinⅡ基因已知序列设计了2条序列,即annexinⅡshRNA1、annexinⅡshRNA2,同时设计1条非特异性序列作为阴性对照.据此设计合成各自的寡核苷酸链,退火后连接人pGenesil1载体,转化扩增后进行序列测定.3种重组表达载体均转染HEK293细胞,通过实时荧光定量RT-PCR和Western印迹法分别在基因和蛋白水平上检测各自annexinⅡ的表达,以未转染细胞作为空白对照.结果:3种重组表达载体(pGenesil1-annexinⅡshRNA1、pGenesil1-annexinⅡshRNA2和pGenesil1- negative shRNA)经限制性酶切及测序分析证明基因插入正确.转染HEK293细胞后,转染pGenesil1-annexinⅡshRNA2组细胞annexinⅡ基因和蛋白表达明显低于转染pGenesil1-annexinⅡshRNA1、pGenesil1-negative shRNA以及空转染细胞(P＜0.05),而后三者间没有明显差异.结论:成功构建了针对annexinⅡ的shRNA表达载体(pGenesil1-annexinⅡshRNA2),转染细胞后可抑制annexinⅡ基因表达.
-
肝细胞癌组织中膜联蛋白A10表达及与基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子相关性研究
目的 检测膜联蛋白A10(ANXA10)在人肝细胞癌(HCC)组织中的表达水平,分析其与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)的相关性,为临床诊断、评估HCC提供依据.方法 选择HCC患者88例,均进行手术治疗,HCC癌组织Ⅰ期11例、Ⅱ期25例,Ⅲ期31例、Ⅳ期21例,应用免疫组织化学法检测患者HCC癌组织、癌旁肝组织和正常肝组织中ANXA10、MMP-9、VEGF的表达,分析ANXA10与MMP-9、VEGF之间相关性.结果 HCC癌组织ANXA10吸光度值为(0.074±0.012),低于癌旁肝组织的(0.091±0.013)和正常肝组织的(0.131 ±0.025),且癌旁肝组织ANXA10表达低于正常肝组织,差异均有统计学意义(t=8.96、9.44、8.71,均P＜0.05);HCC癌组织MMP-9和VEGF吸光度值分别为(0.147 ±0.017)和(0.127 ±0.028),高于癌旁肝组织的(0.096 ±0.012)和(0.091 ±0.015)、正常肝组织的(0.075±0.014)、(0.077 ±0.019),且癌旁肝组织MMP-9和VEGF表达高于正常肝组织,差异均有统计学意义(t=8.05、9.30、8.11,8.28、9.51、8.02,均P＜0.05);Ⅲ期+Ⅳ期HCC癌组织ANXA10吸光度值为(0.056 ±0.010),低于Ⅰ期+Ⅱ期的(0.082 ±0.016),差异有统计学意义(t=8.90,P＜0.05),Ⅲ期+Ⅳ期HCC癌组织MMP-9和VEGF吸光度值为(0.157±0.022)和(0.169±0.033),高于Ⅰ期+Ⅱ期的(0.114±0.015)和(0.091±0.021),差异均有统计学意义(t=9.13、9.72,均P＜0.05).ANXA10与MMP-9和VEGF具有显著相关性(r=0.324,0.295,均P＜0.05).结论 ANXA10在肝细胞癌组织中呈现低表达,并随着分期的增加表达下降,与MMP-9和VEGF呈现负相关,ANXA10表达缺失或失活可能是恶变的人肝细胞癌的重要特征之一.
-
膜联蛋白与子(疒间) 前期关系的研究进展
子(疒间) 前期(preeclampsia,PE)是一种妊娠期间特有的原因不明的多系统疾病,严重危害母婴健康,是孕产妇及围生儿妊娠不良结局的重要原因,发病率约占妊娠妇女的5%～8%[1].其发病机制可能与血管痉挛发作、凝血系统的激活及炎症反应的过度应答等有关.笔者就膜联蛋白与子疒 间前期研究进展综述如下.
