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以Apo A-Ⅰ为靶点的基因表达上调剂筛选模型的建立
目的 建立靶向人Apo A-Ⅰ转录调控序列的高通量药物筛选模型,用于筛选Apo A-Ⅰ基因表达上调剂.方法 以人基因组DNA为模板,PCR扩增Apo A-Ⅰ上游的启动子序列,克隆至荧光素酶报告基因质粒pGL4.17上游,采用脂质体介导的方法将重组质粒转染人肝癌细胞HepG2,在G418抗性存在的条件下,通过有限稀释法筛选稳定转染细胞株.对溶剂浓度和药物作用时间进行条件优化,应用阳性化合物染料木素评价模型有效性,通过检测荧光素酶的表达活性变化来筛选人Apo A-Ⅰ基因表达上调剂.结果 通过PCR成功扩增了人Apo A-Ⅰ基因上游的启动予序列,构建了相应的重组荧光素酶报告基因质粒pGL4-ApoP,并建立稳定转染细胞株ApoP-Luc HepG2.对筛选条件优化后,应用阳性化合物进行评价,筛选窗相关系数Z'因子为0.68,大于0.5,适于进行高通量筛选.应用该筛选模型对5000余种化合物进行筛选,4个黄酮类化合物和白藜芦醇显示出较好的活性,半数有效浓度均小于10μg/ml.结论 成功建立了人Apo A-Ⅰ基因表达上调剂筛选模型,并利用该模型筛选到5个活性化合物.
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载脂蛋白AⅠ-CⅢ基因簇多态性在心脑血管疾病低发的云南德宏傣族中的分布情况
目的 探讨载脂蛋白(apolipoprotein,apo)AⅠ-CⅢ基因簇的apoAⅠ/MspⅠ和apoCⅢ/SstⅠ基因多态性在心脑血管疾病低发的云南德宏傣族人群中的分布情况.方法 2002年4～5月在云南德宏和昆明两地随机抽样168名傣族和72名汉族人,提取基因组DNA后,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测apoAⅠ-CⅢ基因簇中apoAⅠ启动子区MspⅠ多态性(-75 bp G/A和+83 bp C/T)和apoCⅢ 3′端非编码区的SstⅠ多态性.结果 apoAⅠ-CⅢ基因簇的apoAⅠ/MspⅠ和apo CⅢ/SstⅠ的等位基因M1+、M1-、M2+、M2-、S+、S-在傣汉两民族的分布频率依次为傣族:0.735、0.265、0.938、0.062、0.310、0.690;汉族:0.715、0.285、0.917、0.083、0.347、0.653.apoAⅠ-CⅢ基因簇的这6个等位基因频率在傣汉两民族间无统计学意义(P＞0.05).比较分析21个不同人群apoAⅠ/MspⅠ基因多态性和35个不同人群apoCⅢ/SstⅠ基因多态性的结果表明,德宏傣族人群apoAⅠ-CⅢ基因簇多态性分布与同属于蒙古人种的人群接近,而与高加索人种和尼格罗人种有较大的差异性.结论 apoAⅠ-CⅢ基因簇的apoAⅠ基因启动子区-75 bp和+83 bp位点的基因多态性可能是德宏傣族人群心脑血管疾病患病率较低的重要遗传因素.而apoCⅢ的S+等位基因在该人群中并不是心脑血管疾病患病的易感因子.傣族人群具有较低的心脑血管疾病患病率应归因于遗传因素和环境因素协同作用的结果.
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载脂蛋白A1在精子中定位及其抗体对人精子功能的影响
目的 研究载脂蛋白A1在人精子中的定位和功能.方法 基础研究.收集2017年10至12月来解放军总医院查体的健康男性精液标本20份.采用免疫荧光和免疫印迹来定位载脂蛋白A1在人精子中的部位.设空白对照组、兔多克隆IgG组、10、20和40μg/ml的APOA1抗体处理健康查体精液标本,37℃温箱孵育1、2和3 h后,通过计算机辅助系统(CASA)观察精子前向运动变化,流式细胞分析仪检测精子的凋亡率和透射电镜观察精子凋亡形态学变化.精子前向运动和凋亡率的变化,采用独立样本t检验.结果 APOA1蛋白主要定位于精子细胞头部,相对分子质量大小为31000.精子前向运动在APOA1抗体孵育1、2和3 h后显著下降,空白对照组与APOA1抗体浓度20μg/ml组和40μg/ml组间差异有统计学意义.孵育1 h后空白对照组(68.65％ ±15.70％)与APOA1抗体浓度20μg/ml组(48.45％±5.20％)和40μg/ml组(39.25％±7.89％)差异有统计学意义,t=2.442和3.345,P均<0.05.孵育2 h后空白对照组(55.33％±10.12％)与APOA1抗体浓度20μg/ml组(28.68％±11.70％)和40μg/ml组(18.13％±10.52％)差异有统计学意义,t=3.445和5.097,P均<0.05.孵育3 h后空白对照组(35.73％±14.08％)与APOA1抗体浓度20μg/ml组(15.53％±8.42％)和APOA1抗体浓度40μg/ml组(9.98％±7.08％)差异有统计学意义,t=2.462和3.268,P均<0.05.APOA1抗体孵育精子2 h后,随着其浓度的增加精子凋亡率逐渐增加,空白对照组(16.02％±4.28％)与抗体浓度20μg/ml组(21.72％ ±2.67％)和40μg/ml组(28.01％ ±3.93％)间差异有统计学意义(t=3.177和5.834,P均<0.01).40μg/ml APOA1抗体处理精子细胞4h后,透射电镜观察到精子出现核空泡、膜疏松、不同凋亡期精子细胞等现象.结论 精子头部APOA1在维持精子活力和调节精子凋亡中发挥一定作用,其作用机制还需进一步的研究.
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ID-LC-MS检测血清载脂蛋白A-I和B载脂蛋白的多肽释放研究
目的 研究质谱技术检测载脂蛋白A-I和载脂蛋白B的多肽释放情况,为准确定量蛋白提供依据.方法 方法学研究.确定载脂蛋白A-I和B的目标肽段.以目标肽段为检测对象,用同位素稀释液相色谱串联质谱法测定5份市售人血清样本中的载脂蛋白A-I和B,浓度范围分别为0.90～2.54 g/L和0.54～1.39 g/L.计算不同时间点的多个肽段释放量和速率,并绘制散点图.计算不同样本间,肽段释放量的相关系数R2.结果 多数肽段在4 h内即达释放峰值.Apo A-Ⅰ的肽段VQ、DY和VS,以及Apo B的肽段TE和FP生成速度相对较慢.达到峰值后,TEV/SIL-TEV、AK/SIL-AK和VQ/SIL-VQ的比值相对稳定.对于Apo A-I,不同肽段之间的相关性较高,R2在0.904～0.999之间;对于Apo B,部分肽段之间的相关性较低,如TG-SV的R2=0.543(3 h).结论 Apo A-I和Apo B不同肽段的酶解释放情况不同,合适的选择代表性肽段和酶解条件将有助于准确定量目标蛋白.
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高密度脂蛋白组分中血浆淀粉样蛋白A与载脂蛋白A-Ⅰ比值在冠心病诊断中的价值
目的：探讨高密度脂蛋白（HDL）组分中血浆淀粉样蛋白A（SAA）与载脂蛋白A-Ⅰ（apoA-Ⅰ）比值在冠心病诊断中的价值。
方法：入选我院冠状动脉造影患者152例，按冠状动脉狭窄程度分为冠心病组77例，对照组75例。密度梯度超速离心法分离提取血浆HDL，酶联免疫吸附法分别检测HDL及血浆中SAA与apoA-Ⅰ的含量。
结果：与对照组相比，冠心病组HDL组分中SAA（HDL-SAA）显著升高（P<0.001），HDL组分中apoA-Ⅰ（HDL-apoA-Ⅰ）显著降低（P<0.001）。多因素logistic回归分析显示HDL-SAA/HDL-apoA-Ⅰ比值与冠心病风险独立相关（比值比：9.521,95%可信区间：3.345~27.100，P<0.001)。受试者工作特征曲线分析显示HDL-SAA/HDL-apoA-Ⅰ比值具有中等程度诊断冠心病的能力（曲线下面积：0.712，95%可信区间：0.632~0.793，P<0.001），佳诊断临界点为3.27。血浆中SAA/apoA-Ⅰ比值与HDL-SAA/HDL-apoA-Ⅰ比值呈显著正相关（r=0.857，P<0.001），诊断冠心病的能力相似（曲线下面积：0.676，95%可信区间：0.591~0.761，P<0.001），诊断的佳临界点为8.3。
结论：HDL组分中SAA/apoA-Ⅰ比值与冠心病风险独立相关，可能成为冠心病诊断的线索。 -
糖尿病和冠心病患者高密度脂蛋白结构与其抗炎作用的相关性研究
目的：比较2型糖尿病和冠心病患者与健康人高密度脂蛋白(HDL)对内皮细胞表达粘附分子的抑制能力,并研究其与 HDL 中血清淀粉样蛋白 A(SAA)含量改变的相关性。方法通过密度梯度离心法从健康人、单纯糖尿病患者、糖尿病合并冠心病患者以及单纯冠心病患者血浆样本中提取 HDL,用酶联免疫吸附法检测 HDL 中 SAA 及载脂蛋白 AⅠ(apoAⅠ)含量。将健康人及不同患者的 HDL 与脐静脉内皮细胞(HUVEC)共同孵育,通过肿瘤坏死因子α刺激,分别与抗人 CD54-PE、CD106-FITC 单克隆抗体及 Calcein-AM 荧光染色剂标记后的 THP-1细胞共同孵育后,流式细胞术检测平均荧光强度获得 HUVEC 细胞间粘附分子1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)表达数量及 THP-1细胞粘附数量,从而比较不同组别 HDL 抑制粘附分子表达及抑制细胞粘附的能力。结果健康人群 HDL 中 SAA 含量与单纯糖尿病及单纯冠心病患者 HDL 中 SAA 含量相比均明显降低[(4.89±1.46)ng/μg 比(22.54±7.40)ng/μg 及(13.28±5.05)ng/μg,均为 P ﹤0.05]。健康对照组及各疾病组 HDL 均可使 HUVEC 表达 ICAM-1、VCAM-1水平明显下降,其中健康对照组 HDL 抑制ICAM-1表达能力均明显强于糖尿病组及糖尿病合并冠心病组(17318.60±4364.77比34171.67±13918.07及39633.60±8728.22,均为 P ﹤0.05)。健康对照组 HDL 抑制 VCAM-1表达能力明显强于糖尿病合并冠心病组(244.80±119.55比388.80±75.76,P =0.04)。健康对照组及各疾病组 HDL均可抑制 THP-1细胞粘附 HUVEC 的能力,但健康对照组 HDL 抑制细胞粘附能力明显强于糖尿病组、冠心病组及糖尿病合并冠心病组(503.24±63.50比2918.00±0.00、1510.33±1353.87及4196.50±412.60,均为 P ﹤0.05)。 HDL 中 SAA 的含量与其抗 ICAM-1表达(回归系数为1.57,t =3.22,P ﹤0.01)及 THP-1细胞粘附能力(回归系数为1.16,t =3.05,P =0.01)具有明显相关性。 HDL 中apoAⅠ的含量与其抗 ICAM-1表达能力具有明显相关性(回归系数为-0.35,t =-2.40,P =0.02)。结论糖尿病和冠心病患者 HDL 抑制血管内皮细胞粘附分子表达及抑制单核细胞粘附能力均显著减弱。SAA 含量越多,HDL 抑制粘附能力越弱；apoAⅠ含量越高,HDL 抑制细胞粘附能力越强。
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急性脑梗死患者颈动脉狭窄程度与相关载脂蛋白关系的研究
目的 探讨急性脑梗死患者颈动脉狭窄程度与血清载脂蛋白B(apoB)、载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)及其比值之间的关系.方法 入选131例急性脑梗死患者为脑梗死组,根据颈动脉狭窄程度又分为狭窄1组36例,狭窄2组33例,狭窄3组32例,狭窄4组30例.另选择健康体检者38例为对照组.检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、apoA-Ⅰ、apoB水平,比较2组及各狭窄组患者载脂蛋白及各血脂水平的差异,以及颈动脉狭窄程度与载脂蛋白及各血脂水平的相关性.结果 与对照组比较,脑梗死组血清apoB、apoB/apoA-Ⅰ水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01),血清apoA-Ⅰ水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).各狭窄组血清apoB、apoA-Ⅰ、apoB/apoA-Ⅰ水平比较差异有统计学意义(P＜0.01).apoB/apoA-Ⅰ、apoB水平与颈动脉狭窄程度呈正相关(r=0.567,r=0.402,P＜0.01),apoA-Ⅰ与颈动脉狭窄程度呈负相关(r=-0.197,P＜0.05).逐步回归分析显示,apoB/apoA-Ⅰ与脑梗死患者颈动脉狭窄呈正相关(P＜0.01).结论 急性脑梗死患者的血清apoB/apoA-Ⅰ水平可能与颈动脉狭窄程度密切相关.
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颈动脉粥样硬化斑块炎性反应程度与血清胆红素水平的相关性研究
目的：探讨颈动脉粥样硬化斑块炎性反应程度与血清胆红素水平的相关性及临床意义。方法选取颈动脉粥样硬化患者30例，应用正电子发射断层显像，计算颈动脉斑块局部反射性活度标准化靶‐本底比，定量患者颈动脉粥样硬化斑块的炎性反应程度；通过全自动生化分析仪检测其血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素和其他心脑血管的危险因素指标。采用Pearson相关分析及多重线性回归分析患者颈动脉粥样硬化斑块炎性反应程度与血清胆红素水平的相关性。结果 Pearson相关分析显示，患者颈动脉斑块反射性活度标准化靶‐本底比值与体质量指数（ r＝－0．380，P＝0．038）、载脂蛋白B （ r＝0．392，P＝0．032）、载脂蛋白B／载脂蛋白A‐Ⅰ（ r＝－0．534，P＝0.002）和直接胆红素（ r＝－0．535，P＝0.002）存在相关性。多重线性回归分析校正相关危险因素后，反射性活度标准化靶‐本底比值仅与直接胆红素相关（β＝－0．257，P＝0.002）。结论血清中直接胆红素水平与颈动脉斑块的炎性程度存在独立的负性相关性。
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L-4F对载脂蛋白E缺失小鼠高密度脂蛋白抗炎抗氧化功能的影响
目的 观察载脂蛋白A-Ⅰ (apoA-Ⅰ)模拟肽L-4F对高脂喂养apoE缺失小鼠HDL抗炎、抗氧化功能的影响,探讨L-4F的抗动脉粥样硬化(AS)机制.方法 8周龄C57BL/6J小鼠18只,普通饲料喂养作为对照组；8周龄apoE缺失小鼠30只,高脂饲料喂养,喂养4周后,随机处死2种小鼠各6只,检测相应指标作为研究基线(第4周).其余apoE缺失小鼠随机分为AS组和L-4F组[L-4F 1 mg/(kg·d)腹腔注射)],每组12只.实验第8、16周末取标本测定血脂水平、血清对氧磷酯酶1(PON1)、髓过氧化物酶(MPO)活性、高敏C反应蛋白(hs-CRP)含量及HDL炎症指数(HⅡ),观察主动脉斑块面积.结果 实验16周后,与AS组比较,L-4F组血脂水平无明显变化,血清PON1活性明显升高,MPO活性、hs CRP、HⅡ显著下降,主动脉斑块/血管内膜表面积比值明显减小(P＜0.05,P＜0.01).结论 L4F可通过升高PON1活性、降低MPO活性,抑制炎性反应、降低HⅡ等,改善HDL抗炎抗氧化功能,从而减少主动脉内中膜厚度和斑块面积,发挥抗AS作用.
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微小RNA-130a调控人巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1在动脉粥样硬化的作用
目的 探讨微小RNA-130a(microRNA-130a,miR-130a)靶向调控人巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)在动脉粥样硬化的作用.方法 培养人单核巨噬细胞(THP-1),分为实验组和对照组.利用lipofectamine2000转染试剂,分别将miR-130a mimics或阴性对照转染到THP-1中,通过液体闪烁计数测定荷脂THP-1内胆固醇流出情况,高效液相色谱检测细胞内脂质含量;油红0染色显示细胞内脂滴情况.生物信息学软件预测miR-130a的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因系统进行验证.通过Western blot检测靶基因ABCA1蛋白表达变化.结果 实验组较对照组显著抑制THP-1内胆固醇流出[(5.24±2.36)％ vs (12.58±3.92)％,P＜0.05].实验组THP-1内胆固醇、胆固醇酯、游离胆固醇较对照组明显增高(P＜0.05),细胞内脂滴稠密且体积肥大.生物信息学分析显示,miR-130a的靶基因为ABCA1,经体外双荧光素酶报告基因系统检测,证实ABCA1是miR 130a的靶基因.实验组ABCA1蛋白表达水平较对照组明显降低(0.13±0.05 vs 0.38±0.09,P＜0.05).结论 miR-130a具有调控THP-1内胆固醇流出的功能,其机制可能与靶向调控ABCA1有关.
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调节高密度脂蛋白药物研究的新进展
血脂异常主要表现为LDL-C、TG水平升高和HDL-C水平下降.流行病学研究显示,LDL-C单一达标只能降低30%～45%的主要冠状动脉事件,低HDL-C水平同样具有高心血管事件风险,HDL-C每升高1%,心血管事件的发生率可降低2%～3%.
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糖尿病患者非高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白A-Ⅰ比值与冠状动脉病变程度的相关性
目的 探讨非HDL-C(NHDL-C)/载脂蛋白A-Ⅰ (apoA-Ⅰ)比值与2型糖尿病患者冠状动脉病变严重程度的相关性.方法 选择因劳力性胸痛而行冠状动脉造影的2型糖尿病患者373例,依据Gensini评分三分位分为3组,低分组＜8分(143例);中分组8～28分(109例);高分组＞28分(121例),评价NHDL-C/apoA-Ⅰ比值与冠状动脉病变严重程度的相关性.结果 3组患者HDL-C、脂蛋白(a)、apoB、NHDL-C、NHDL-C/apoA-Ⅰ比值等比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);Pearson相关分析和Spearman相关分析均显示,2型糖尿病患者NHDL-C/apo-A-Ⅰ比值与Gensini评分呈正相关(r=0.146,P＜0.01;r=0.127,P＜0.05).多元线性回归分析显示,2型糖尿病患者NHDL-C/apoA-Ⅰ比值与冠状动脉病变严重程度独立相关(偏相关回归系数=3.361,P＜0.05).结论 NHDL-C/apoA-Ⅰ与2型糖尿病患者冠状动脉病变严重程度独立相关.
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罗格列酮联合依折麦布对脂化后血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的影响及可能机制的研究
目的 探究罗格列酮联合依折麦布对脂化血管平滑肌细胞(SMC)胆固醇含量的影响及可能机制.方法 将原代大鼠胸主动脉SMC分空白对照组、泡沫细胞组、依折麦布3.0、10.0、30.0μmol/L组、罗格列酮组(25.0tμmol/L)、联合组(罗格列酮25.0 μmol/L+依折麦布30.0 μmol/L).采用酶荧光法检测各组细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)的含量,并计算胆固醇酯(CE)值.RT-PCR检测肝X受体α(LXRα)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)mRNA表达,Western blot检测LXRα和ABCA1蛋白表达量.结果 泡沫细胞组较空白对照组LXRα和ABCA1 mRNA(0.2980±0.0247 vs1.0010±0.0554,0.3022±0.0266 vs1.0009±0.0526)以及蛋白表达均减少(P＜0.05),TC、FC和CE含量显著增加(P＜0.05);与泡沫细胞组比较,依折麦布组3.0、10.0、30.0tμmol/L、罗格列酮组和联合组LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白表达均增加,依折麦布组则呈现浓度依赖性;依折麦布组30.0 μmol/L、罗格列酮组和联合组TC、FC和CE含量减少(P＜0.05);且联合组LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白增加更为明显(P＜0.05).结论 罗格列酮与依折麦布联合,显著减少细胞内胆固醇含量,增加SMC内的胆固醇逆转运效率,其机制可能与LXRα-ABCA1通路有关.
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激动β3肾上腺素能受体上调载脂蛋白A-Ⅰ促进泡沫细胞胆固醇流出的研究
目的 通过激动或抑制HepG2细胞的p3肾上腺素能受体(β3-AR),探讨β3-AR调节胆固醇逆转运过程的可能机制.方法 将培养的HepG2细胞随机分为对照组、β3-AR激动剂组(激动剂组)和β3-AR拮抗剂组(拮抗剂组),ELISA法检测上清液载脂蛋白(apo) A-Ⅰ、apoA-Ⅱ及β3-AR水平;测定细胞内胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯水平,3H标记的胆固醇测定胆固醇流出率,实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1 (ABCA1)和肝X受体α亚型(LXRα)的表达.结果 与对照组比较,激动剂组apoA-Ⅰ、游离胆固醇、胆固醇流出率显著增加,胆固醇、胆固醇酯显著降低,ABCA1和LXRα mRNA及ABCA1和LXRα蛋白显著增加;拮抗剂组胆固醇、胆固醇酯显著升高,apoA-Ⅰ、胆固醇流出率显著减少,ABCA1和LXRα mRNA及ABCA1和LXRα蛋白显著降低.与激动剂组比较,拮抗剂组ABCA1和LXRα mRNA及ABCA1和LXRα蛋白显著降低(0.49±0.10vs 1.24±0.02,0.85±0.05 vs 1.32±0.05,0.38±0.01 vs 1.45±0.20,0.08±0.01 vs 0.76±0.02,P＜0.01).结论 激动HepG2细胞的β3-AR,可上调apoA-Ⅰ表达,促进巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白的表达.
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PPAR单核苷酸多态性基因-基因交互作用与载脂蛋白AⅠ/载脂蛋白B100比值的关系
目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) 10个单核苷酸多态性(SNP)与载脂蛋白AⅠ(ApoAⅠ)/载脂蛋白B100(ApoB100)比值水平的关联以及多个SNP的交互作用对ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平的影响.方法 对630名研究对象进行PPAR 10个SNP多态性检测.运用线性回归模型分析10个SNP与ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平的关联,采用广义多因子降维法(GMDR)模型分析10个SNP的基因-基因交互作用.结果 在调整性别、年龄、吸烟、饮酒、高脂饮食、低纤维饮食和职业体力活动后,与野生型基因携带人群相比,rs 1800206位点(LV+VV)基因型携带者以及rs3856806位点(CT +TT)基因型携带者的ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平均较低,差异值(95％ CI)分别为-1.19(-1.88～-0.50)和-0.77(-1.40～-0.14);rs4253778位点(GC+ CC)基因型携带者的ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平较高,差异值(95％ CI)为0.80(0.08 ～ 1.52).GMDR模型发现二、三、四、五、六和八阶交互作用模型差异有统计学意义(P＜0.05),其中八阶模型(包括PPARα的rs4253778、rs1800206,PPARβ的rs2016520、rs9794,PPARγ的rs10865710、rs3856806、rs709158和rs1805192)交叉验证一致性为7/10,平均检验准确度为0.624,为佳模型(P=0.01).结论 PPARα的rs1800206及PPARγ的rs3856806与ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平降低有关联;PPARα的rs4253778与ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平升高有关联.PPARα的rs4253778、rs 1800206和PPARβ的rs2016520、rs9794和PPARγ的rs10865710、rs3856806、rs709158和rs 1805192等8个SNP之间的交互作用对ApoA Ⅰ/ApoB100比值水平有显著影响.
关键词： 载脂蛋白A-Ⅰ 载脂蛋白B100 过氧化物酶体增殖物激活受体 多态性 单核苷酸 -
载脂蛋白A1-75bp位点多态性与血脂及冠状动脉病变程度的相关性
目的 探究载脂蛋白(Apo)A1-75 bp(G/A)位点多态性与血脂谱及冠状动脉病变程度的相关性.方法 入选2011年10月到2013年10月就诊于广东省人民医院的胸痛患者723例,根据冠状动脉造影结果分为冠心病组444例和正常对照组279例,其中男472例,女251例,平均年龄(62.4±10.2)岁.比较两组间一般资料、血脂及-75 bp位点多态性,分析-75 bp位点多态性对血脂谱的影响.采用logistic多因素回归分析冠心病的危险因素,并根据Gensini评分进行分组,Gensini评分=0(n=98),0＜ Gensini评分≤30(n=223),30＜ Gensini评分≤60(n=184),Gensini评分＞60(n =218),比较各组-75 bp位点多态性的差异.结果 冠心病组中男性、吸烟和糖尿病比例、总胆固醇(rC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均高于正常对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、ApoA1水平低于正常对照组(P＜0.05);冠心病组的ApoA1-75 bp位点A等位基因频率为43.7％(194/444),低于正常对照组的56.6％ (158/279) (P =0.003).在血脂谱分析中,-75 bp位点突变型(GA/AA)的HDL-C、ApoA1水平高于野生型(GG),差异有统计学意义(男:P=0.033,0.011;女:P=0.007,0.036).logistic多因素回归分析提示-75 bp位点变异是冠心病的保护因素(OR=0.649,P=0.021).随着Gensini评分的增加,A等位基因频率减少(男:P=0.012;女:P=0.006).同时,-75 bp位点突变型与冠状动脉病变严重程度相关,以Gensini评分=0为对照,0＜Gensini评分≤30、30＜Gensini评分≤60及Gensini评分＞60的OR值分别为0.541、0.446、0.331(P均＜0.05).结论 ApoA1-75 bp位点多态性与冠心病患者血脂谱和冠状动脉病变程度相关,ApoA1-75 bp位点突变型是冠心病的保护因素.
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载脂蛋白AⅠ改变炎症型巨噬细胞极性发挥抗炎作用
目的 观察载脂蛋白(apo)AⅠ对炎症型巨噬细胞极性的影响,探讨高密度脂蛋白(HDL)抗炎的细胞和分子机制.方法 选取C57BL/6小鼠,培养其骨髓来源巨噬细胞.实验分为3组:(1)对照组:常规培养小鼠骨髓源性巨噬细胞48 h,不给予任何药物处理；(2)模型组:细胞培养24 h后加γ干扰素(100 U/ml)和脂多糖(5 ng/ml)后继续培养24 h;(3)处理组:先予10μg/ml浓度的人apoA Ⅰ孵育细胞24 h,换液后加入γ干扰素(100 U/ml)和脂多糖(5 ng/ml)孵育24 h.应用流式细胞仪检测膜分子CD16/32、CD206的表达；应用ELISA检测白细胞介素(IL)-10和IL-12的分泌；应用实时荧光定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88 (MyD88)、干扰素调节因子5(IRF5) mRNA的表达.结果 处理组巨噬细胞CD16/32表达阳性率(91.17％±1.99％比50.47％±1.02％,P＜0.05)、IL-12分泌[(747.27±3.74) pg/ml比(73.80±4.56) pg/ml,P＜0.05]明显低于模型组；CD206阳性率(0.33％±0.12％比3.00％±0.36％,P＜0.05)、IL-10分泌[(23.56±4.30) pg/ml比(32.91±2.47) pg/ml,P＜0.05]明显高于模型组.TLR4 mRNA(1.000±0.025比0.708±0.003,P＜0.05)、MyD88 mRNA(1.591±0.005比1.341±0.005,P＜0.05)和IRF5 mRNA(0.954±0.005比0.463±0.003,P＜0.05)表达均显著低于模型组.结论 apoAⅠ促进炎症型巨噬细胞向抗炎型巨噬细胞转变,此效应可能与抑制TLR4-MyD88-IRF5通路有关.
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多囊卵巢综合征患者血清apoB/apoA Ⅰ比值对代谢综合征的诊断价值
目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者apoB/apoA Ⅰ比值对代谢综合征(MS)的诊断价值.方法 收集185例符合2003年鹿特丹诊断标准的PCOS患者,采集病史并对其进行体格测量和性激素、糖脂代谢等各项生化指标测定.结果 MS患病率为19.46％,而至少合并一项MS组分异常的患病率则为56.76％; apoB/apoA Ⅰ比值与体重指数(BMI)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平呈正相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平呈负相关,且随着MS组分异常项数的增加而升高；以0.66为截断值时,apoB/apoA Ⅰ比值对MS的诊断价值较高(敏感度为0.917,特异性为0.700).结论 PCOS患者的apoB/apoA Ⅰ对MS有较好的诊断和监测价值.
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双生子人群apoAⅠ和apoB100水平及遗传度分析
目的:描述双生子人群的apoAⅠ、apoB100水平,并探讨遗传和环境因素对其水平的影响程度.方法:选择双生子502对,采用免疫透射比浊法检测血清apoAⅠ、apoB100水平.在基因法卵性鉴定的基础上,结合年龄和性别因素,用大似然法在Mx程序包进行遗传模型拟合.结果:本双生子人群包括同卵双生子329对,异卵双生子173对.apoAⅠ水平为(1.33±0.23) g/L,apoB100水平为(0.75±0.19) g/L.apoAⅠ的适模型为AES模型,apoB100的适模型为等级效应性别限制AE模型.遗传方差在apoAⅠ中所占的比重为60%;在apoB100中所占的比重为69%.结论:在本双生子人群中,apoAⅠ的遗传度为60%,apoB100的遗传度为69%.
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孕期不同甲状腺功能状态血清高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白A-Ⅰ的变化趋势
目的:研究不同甲状腺功能状态对孕妇血清高密度脂蛋白胆固醇( high density cholesterol, HDL-C)和载脂蛋白A-Ⅰ( apolipoprotein A-Ⅰ, ApoA-Ⅰ)代谢的影响. 方法:采集30名甲状腺功能正常(正常组)、19名亚临床甲状腺功能减退(亚甲减组)及8名亚临床甲状腺功能亢进(亚甲亢组)孕妇孕9~12、14~17、23~26和37~40周的空腹血清标本,测其血清HDL-C和ApoA-Ⅰ含量. 采用重复测量数据方差分析的秩和检验分析4个妊娠时段孕妇血清HDL-C、ApoA-Ⅰ含量的变化;采用一般线性模型( general linear model, GLM )分析3 组孕妇孕期血清HDL-C、ApoA-Ⅰ含量的差异. 结果:孕期各组孕妇血清HDL-C含量的变化差异均无统计学意义(χ2 =5. 428,P=0. 143;χ2 =2. 027,P=0. 567;χ2 =2. 885,P=0. 410),正常孕妇和亚甲减孕妇血清ApoA-Ⅰ的含量增高,差异均有统计学意义(χ2 =46. 343,P<0. 001;χ2 =35. 984,P<0. 001),亚甲亢孕妇血清ApoA-Ⅰ含量的变化差异无统计学意义(χ2 =6. 750,P=0. 080). 亚甲亢孕妇孕期血清HDL-C和ApoA-Ⅰ的含量均低于正常孕妇,差异均有统计学意义(P=0.025,P=0.027),正常孕妇与亚甲减孕妇孕期血清 HDL-C和 ApoA-Ⅰ含量的差异均无统计学意义(P =0. 378,P =0. 549). 结论:妊娠期亚甲亢影响孕妇血清HDL-C和ApoA-Ⅰ代谢,进而影响胎儿的生长发育;妊娠期亚甲减(经优甲乐治疗后)未发现影响孕妇血清HDL-C和ApoA-Ⅰ代谢.
