首页 > 文献资料
-
小鼠骨髓间充质干细胞生物学特性和体外诱导分化
目的研究小鼠骨髓间充质干细胞的生物学性状和多系分化潜能.方法取Balb/c小鼠骨髓单个核细胞在低糖的培养液中培养出贴壁生长的细胞,进行形态学观察、细胞周期和免疫表型分析;在不同的因子作用下诱导向成骨细胞、软骨细胞,脂肪细胞分化,并检测诱导后细胞相应的基因表达.结果小鼠骨髓间充质干细胞贴壁生长后形态较均一,增殖能力随着传代逐渐增强,但从第8代后增殖能力明显减退.细胞表达CD29, CD38, CD44, CD106等标记,但CD34和H-2k表达阴性.在不同的诱导培养体系里间充质干细胞能分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞,相应的骨钙蛋白基因,Ⅱ型胶原基因,脂蛋白脂酶基因表达都明显增强.结论从小鼠骨髓可以分离培养出间充质干细胞,在体外有效扩增和诱导分化.表明可以以小鼠为模型研究间充质干细胞在组织工程、细胞移植、基因治疗等领域的运用.
-
常见胎儿骨骼发育异常的产前诊断
胎儿骨骼发育异常是临床常见的出生缺陷之一,绝大多数是遗传性疾病,其种类繁多,症状有重叠,常以短肢畸形为主要表现,产前超声诊断往往难以确定其具体类型.临床上常见的短肢畸形有软骨发育不全(achondroplasia)、软骨发育低下(hypochondroplasia)、致死性发育不良(thanatophoric dysplasia)、成骨不全(osteogenesis imperfecta)、软骨生成不全(achondrogenesis)等.另外,还有短肋-多指综合征、软骨外胚层发育不全等.胎儿骨骼发育异常总体上可分为致死性和非致死性骨骼发育异常两大类,前者常因胸廓发育不良引起肺发育障碍致胎儿死亡;后者胎儿虽能存活,但由于骨骼畸形而致残,甚至引发神经系统并发症,严重影响了患者的生存质量;存活至成年的患者可能将致病基因传至下一代.对骨骼发育异常尤其是短肢畸形高危胎儿进行准确的产前诊断,是有效预防该类先天性缺陷儿出生的重要措施.
-
罕见遗传性骨病大家系调查
遗传性骨病是一大类具有广泛遗传异质性的骨软骨发育不良性疾病，大多是发病率很低的罕见病。根据2010年修订的国际遗传性骨病的新分类标准，共分为40组456种［1-2］。临床相对常见的为软骨发育不全（achondroplasia, ACH）、致死性侏儒症（thanatophoric dysplasia, TD）、软骨发育低下（hypochondroplasia, HCH）、假性软骨发育不全（pseudoa-chondroplasia, PSACH）、多发性骨骺发育不良（multiple epiphyseal dysplasia, MED）、先天性脊柱骨骺发育不良（spon-dyloepiphyseal dysplasia congenita, SEDC）、迟发性脊椎骨骺发育不良（spondyloepiphyseal dysplasia tarda，SEDT）、X连锁低血磷性佝偻病（X-linked hypophosphatemic rickets，XLH）、黏多糖贮积症（mucopolysaccharidosis，MPS,分为7大型17种亚型）、干骺端软骨发育不良（metaphyseal chondrodysplasia schmid type）、软骨生成不全（achondrogenesis, ACG）、软骨外胚层发育不良（Ellis-Van Creveld syndrome, EVC）、窒息性胸廓发育不良（asphxiating thoracic dyaplasia, ATD）、短肋-多指（趾）综合征（short-rib polydactylia syndrome）、致密性骨发育障碍（pycnodysostosis）［3-4］及成骨不全（osteogenesis imperfec-ta,OI,分为I~XV共15型）［5］等30多种。这些骨病发病早，症状明显，通常导致患者致残，甚至致死，且此类骨病还会逐代或隔代遗传，故危害十分严重，往往给家庭和社会带来沉重的经济负担，也给患者及其亲属带来巨大的心理负担和精神负担。
-
体外培养时间对兔间充质干细胞软骨形成的影响
目的探讨生长因子(bFGF,TGF-β1)诱导下,培养时间对兔间充质干细胞(MSCs)体外软骨形成的影响.方法取兔MSCs梯度离心,分离培养.取P3、P5、P7、P10代细胞,在bFGF、TGF-β1各20 ng/ml诱导下培养.观察细胞生长形态变化,用甲苯胺蓝染色观察细胞蛋白多糖的分泌.RT-PCR半定量检测Ⅱ型胶原mRNA的相对表达量,取关节软骨细胞作阳性对照.结果各代细胞形态无明显差异.MSCs甲苯胺蓝染色呈异染性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原阳性表达,各代细胞灰度值,P3 0.16±0.05,P5 0.37±0.03,P7 0.88±0.08,P10 0.47±0.05,软骨细胞2.08±0.13.P7代细胞灰度值达大(P＜0.01),软骨细胞是MSCs的3倍以上.结论生长因子能维持MSCs细胞活性,促进生长繁殖.一定培养时间内,软骨生成能力渐增强,但随时间进一步延长,软骨分化减弱.
-
调控软骨生成和软骨内骨化的转录因子及其相关机制研究进展
在脊椎动物骨骼系统发生过程中,除颅盖骨、颌面骨等少数骨骼经膜内化骨,由间充质细胞直接分化为成骨细胞的方式形成外,构成肢体的大部分骨骼是经软骨内骨化的方式发生的.这种成骨方式的特征是:间充质细胞先分化为软骨细胞,软骨细胞中极少数终生保持软骨细胞特性,构成关节软骨细胞,其余部分经一系列分化演变过程,终成熟、肥大、凋亡,继之以血管侵入、骨基质代替软骨基质,逐步形成成熟的骨骼[1].源于胚胎期的这一连续性过程是在多种信号分子、生长和转录因子的密切调控下程序完成的.
-
富含半胱氨酸蛋白61的研究进展及其在眼科的应用
CCN家族属于基质细胞蛋白,富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)是其中第一个被克隆的基因.CYR61蛋白参与调节细胞的增生、黏附、迁移、分化、凋亡以及细胞外基质的生成.CYR61与某些细胞因子和生长因子相互作用并调节其生物活性,包括转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TN F-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、骨形成蛋白(BMPs)以及Wnt家族成员等.CYR61是血管生成及骨和软骨生成的重要调控因子,在胚胎发育、创伤修复、肿瘤的发生和发展以及其他多种疾病的发病中起着重要的作用.研究发现,CYR61在体外可促进视网膜毛细血管内皮细胞的增生、迁移及生成管状结构,糖尿病大鼠视网膜及增生型糖尿病视网膜病变(PDR)患者玻璃体内CYR61均明显增高,且与VEGF有一定的关系,CYR61很可能参与视网膜新生血管性疾病,特别是糖尿病视网膜病变(DR)的发生和发展,对CYR61在DR中的作用及通路的研究为该病的发病机制及治疗提供了新的思路.就近年来CYR61的研究进展进行综述.
-
骨形态发生蛋白复合肌瓣的自体气管的移植
移植段气管局部应用骨形成蛋白(BMP)可诱导软骨生成,抑制移植段软骨吸收[1],其血供仍不满意.我们采用肌瓣包绕自体气管移植段,促进移植段血液循环建立,并复合BMP进行自体气管移植实验研究.
-
大鼠软骨生成过程表达的小分子 RNA 生物信息学分析
目的：分析大鼠软骨形成过程中小分子 RNA(sRNA)表达谱变化及其基因功能,探讨软骨细胞增殖与分化的机制。方法取新生、断乳、性成熟3个时间节点的雌性 SD 大鼠股骨头软骨构建 sRNA 文库,Solexa 测序平台鉴定软骨组织全部 sRNA 序列表达,所得的全部清洁序列与 SD 大鼠基因组信息比对,并做生物信息学分析。结果3个文库筛选出与基因组序列完全匹配序列,分别对应着217921条(41.23%)、196650条(38.74%)、245436条(41.54%)unique sRNA 序列。长度为20~24 nt 的 sRNA 占比：d 0为71.94%、d 21为72.85%、d 42为86.39%；其中,长度为22 nt的 sRNA 约占清洁序列的一半。文库序列分布特征,符合高质量 sRNA 文库的特征。超过总数62%的清洁序列来自于成熟 miRNA 序列,但在3个文库中的占比却仅仅只有0.69%、0.78%和0.63%。约60%的unique sRNA 序列无法与 miRBase 20.0和 Rfam9.1匹配。结论3个 sRNA 文库的 miRNA 这种分布模式,可能暗示着有功能不同或者来源各异的 miRNA,参与了对骨骼发育和骨形成关键阶段软骨细胞增殖与分化的调控。
