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人类端粒酶逆转录酶基因转染对足叶乙甙诱导Raji细胞凋亡的影响
探讨人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转入Raji细胞后足叶乙甙(VP-16)对细胞凋亡的影响.采用脂质体介导的转染方法将重组的hTERT基因转入Raji细胞,G418筛选;采用间接免疫荧光标记法及端粒酶聚合酶链反应-酶联免疫测定法检测hTERT蛋白表达水平和端粒酶活性的变化;姬姆萨染色及流式细胞仪观测细胞凋亡.结果发现:转染hTERT入 Raji细胞后,其表达hTERT的蛋白及端粒酶活性显著增加(P＜0.05).10μmol/L VP-16作用转染hTERT的Raji细胞48h、72h对细胞生长抑制作用不如转染空载体组及未转染组明显(P＜0.05).10μmol/L VP-16作用转染hTERT的Raji细胞72h,光镜下仅可见到很少量的细胞出现凋亡,流式细胞仪测定的细胞凋亡率(4.34±1.03)%显著降低,分别与转染空载体组(33.21±3.12)%及未转染组(31.63±3.06)%比较,P＜0.05.表明端粒酶活性过表达可使Raji细胞对VP-16产生抗凋亡作用.
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p53基因对HL-60细胞端粒酶活性和人端粒酶逆转录酶基因表达的影响
为了研究野生型p53基因转染的HL-60细胞端粒酶活性和人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的变化,采用脂质体法将野生型p53基因转染HL-60细胞,用TUNEL检测细胞凋亡,用端粒重复扩增法(TRAP)-酶联免疫吸附试验(ELISA)检测端粒酶活性变化,以及用RT-PCR方法检测hTERT mRNA表达的变化.结果显示:转染野生型p53基因的HL-60细胞在32.5℃培养24小时和72小时后,凋亡率分别为8.3%和21.0%,hTERT mRNA和端粒酶活性分别下降至对照组的68.4%和55.8%及27.3%和8.9%.结论:p53基因能下调HL-60细胞hTERT mRNA和端粒酶活性,这可能是野生型p53基因诱导细胞凋亡机制之一.
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卡铂诱导卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、hTERT基因表达改变的关系
目的 研究卡铂诱导的卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、hTERT基因表达改变的关系.探讨检测端粒酶活性和hTERT基因表达作为铂类药物治疗卵巢癌细胞的监测指标的潜在应用价值.方法 在卵巢癌细胞HO-8910、COC1中采用PCR-ELISA方法检测端粒酶活性、RT-PCR半定量方法检测hTERT基因mRNA的表达.采用流式细胞仪分析Annex-V-Fluos染色的肿瘤细胞细胞凋亡情况.结果 不同浓度卡铂1 μM,10 μM 和100 μM诱导卵巢癌细胞凋亡后,卵巢癌细胞HO-8910、COC1中的端粒酶活性和hTERT基因的表达浓度呈现出剂量依赖性和时间依赖性的下降.端粒酶活性和hTERT基因的表达的下降与卡铂诱导的卵巢癌细胞凋亡增加呈负相关(R=0.613,P=0.034 7), 而且hTERT基因表达的改变比端粒酶活性更为敏感.结论 检测端粒酶活性和hTERT基因的表达程度有助于判定卡铂诱导的卵巢癌凋亡的敏感性.
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siRNA 沉默hTERT基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 应用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的效应.方法 体外化学合成针对hTERT基因的siRNA序列,在脂质体介导下转染MCF-7细胞,实时定量PCR检测hTERT mRNA表达水平,Western blot检测hTERT蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡状况,MTT法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测克隆形成率.结果 所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比均可有效抑制hTERT的表达,hTERT siRNA转染MCF-7细胞48 h后,siRNA1～siRNA3组hTERT mRNA表达分别为(35.3±4.2)%、(30.7±2.8)%、(31.3±3.6)%,与阴性对照组(96.4±2.8%)相比,差异有统计学意义.MTT结果显示MCF-7细胞增殖能力显著降低,转染48 h后,siRNA1～siRNA4细胞抑制率分别为(57.6±3.6)%、(61.3±4.3)%、(65.6±6.3)%和(3.1±4.5)%,细胞克隆形成能力下降,凋亡率明显增加.结论 体外化学合成的hTERT siRNA可以有效地抑制MCF-7细胞hTERT的表达,从而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
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hTERT基因修饰神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤
目的 对神经干细胞的生物学特性进行观察,探讨hTERT基因修饰神经干细胞移植对修复大鼠脊髓损伤的影响.方法 体外培养的大鼠神经干细胞,用病毒PLXSN为载体介导hTERT基因反转录转染神经干细胞,分为阴性转染组、对照组与hTERT转染组3个组.经Western blot法检测分析hTERT蛋白的表达.运用细胞生长曲线、CCK-8比色法两种方法,分析细胞生长的优化作用.将造模成功的72只大鼠随机分为hTERT-NSCs、NSCs与对照组3组,每组各分24只,通过改良的Allen打击法来建立大鼠急性脊髓损伤模型.通过斜板试验,BBB评分给各组大鼠进行运动功能检测.通过HE染色及荧光显微镜研究,PKH-26标记的分布情况及NSC存活取材进行病理切片.术后72h通过RT-PCR分析脊髓损伤区周围MMP9/2、AQP/9基因的表达,运用UNEL法分析细胞凋亡情况.荧光显微镜观察PKH-26标记的分布情况及NSCs存活.结果 hTERT基因转染大鼠神经干细胞后,hTERT基因转染组蛋白水平有高表达、细胞的生长速度出现明显增快,相比与阴性hTERT转染组与对照组,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).对照组的细胞凋亡指数略低于阴性转染组,阴性转染组略低于hTERT转染组大鼠下肢运动功能评价.与对照组相比hTERT转染组AQP4/9基因表达均较显著降低.PKH-26标记的阳性细胞数:对照组少,hTERT转染组多,阴性hTERT转染组次之,各组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过PLXSN病毒为载体介导hTERT基因逆转染神经干细胞,可以促进大鼠神经干细胞增殖.hTERT基因修饰神经干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,降低脊髓损伤区周围AQP/9、神经细胞凋亡和MMP9/2基因的表达,且能够促进大鼠的电生理及肢体运动功能的恢复.
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hTERT基因与肿瘤的研究进展
端粒酶是一种核糖核蛋白复合物,能引起染色体的末端结构端粒的完全复制.端粒作为一种保护性结构,是由短的重复DNA序列组成.在人体中这种序列为TTA-GGG,其平均长度为5～15kb[1],细胞每经过一次分裂端粒缩短50～200bp,这种分子侵蚀作用使得细胞的分裂次数有了生理限制,从而限制了体细胞的寿命.
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硒-甲基硒代半胱氨酸对乳腺癌细胞端粒酶活性和hTERT基因表达的影响
目的 研究有机硒化合物硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methylselenoey-stein,MSC)对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞端粒酶活性的影响,探讨其诱导细胞凋亡的作用机制. 方法 不同浓度的MSC (12.5、25、50、100、200 μmol/L) RPMI-1640培养液分别作用于人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞24h、48h,ELISA法检测端粒酶活性;RT-PCR法检测细胞hTERT mRNA基因的表达;SPSS16.0进行数据录入及统计学分析.结果 各MSC浓度处理组明显抑制端粒酶活性和hTERT mRNA的表达(P＜0.01).结论 MSC能够抑制人乳腺癌细胞的增殖并诱导凋亡,其发生机制可能与端粒酶活性、hTERTmRNA表达的降低有关.
关键词： 硒-甲基硒代半胱氨酸 乳腺癌细胞 端粒酶 hTERT基因 -
hTERT反义寡核苷酸对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响
目的:研究hTERT基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞诱导凋亡作用及细胞周期的影响.方法:应用hTERT ASODN封闭HL-60细胞hTERT基因,RT-PCR方法检测目的基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分析,TUNEL方法检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA梯带.结果:hTERT ASODN作用细胞72h后,hTERT基因表达明显受到抑制(P＜0.01).流式细胞仪检测显示:ASODN组细胞阻滞于G0/G1期,S、G2/M期细胞减少(P＜0.05);细胞增殖指数(PI)明显降低(P＜0.05);检测出早期凋亡峰.Annexin V/PI检测及TUNEL检测均显示:ASODN组凋亡细胞阳性率明显高于SODN组(P＜0.01).琼脂糖凝胶电泳显示:ASODN组出现凋亡DNA梯带.结论:hTERT ASODN能够封闭目的基因表达,阻滞HL-60细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,对治疗白血病具有潜在应用价值.
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hTERT-RNAi表达载体抑制子宫内膜癌细胞生长研究
目的:研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)的RNA干扰表达载体pSilencer-hTERT对子宫内膜癌Ishikawa-3-H-12细胞生长的抑制作用.方法:将pSilencer-hTERT转染人子宫内膜癌Ishikawa-3-H-12细胞,24、48、72、120、144h后分别采用蛋白印迹技术检测hTERT蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,原位末端标记法检测细胞凋亡.结果:pSilencer-hTERT转染后48 hIshikawa-3-H-12细胞mRNA表达36.2%±3.4%、蛋白表达44.2%±4.1%降低明显,与空质粒对照组96.5%±2.2%、98.3%±2.0%比较差异有统计学意义(P＜0.01).pSilencer-hTERT处理后48 h细胞增殖抑制率70.8%±4.1%高,72 h凋亡细胞阳性率69.3%+4.7%高,与空质粒对照组8.2%±1.5%、7.4%±2.2%比较差异有统计学意义(P＜0.01).pSilencer-hTERT的这些作用可持续144h.结论:pSilencer-hTERT能有效、持续抑制人子宫内膜癌Ishikawa-3-H-12细胞生长,可望成为其基因治疗的有效工具.
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宫颈病变中hTERT基因扩增与高危型HPV感染的关系
目的：探讨人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因扩增和高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染在宫颈病变中的关系。方法获取34例正常人，31例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级，33例CINⅡ级，34例CINⅢ级，20例宫颈癌患者的宫颈脱落细胞标本，应用聚合酶链反应（PCR）-反向杂交芯片法检测HPV DNA阳性情况，应用荧光原位杂交技术（FISH）检测hTERT基因扩增情况。结果共检出20种HR-HPV：HPV16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,67,68,69,73,82。CINⅡ级（72.73%）、CINⅢ级（85.29%）、宫颈癌组（90.00%）的HR-HPV DNA阳性比例高于对照组（20.59%），对照组与CINⅠ级（54.84%）组比较差异无统计学意义。宫颈癌组（80.00%）hTERT基因扩增的阳性率高于对照组（0）、CINⅠ级（3.22%）、CINⅡ级（18.18%），宫颈癌与CINⅢ级组（41.18%）比较差异无统计学意义。hTERT基因扩增与HR-HPV感染呈正相关(r=0.238，P<0.05)。结论宫颈病变中hTERT基因扩增与HR-HPV感染呈正相关，HR-HPV感染可能是hTERT基因异常扩增的早期事件，hTERT基因检测可能作为宫颈癌前病变监测的辅助指标，应用于临床早期宫颈病变的诊断中。
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人端粒酶反转录酶基因修饰骨髓间充质干细胞静脉移植治疗糖尿病
背景：胰腺或胰岛细胞移植以及干细胞移植治疗为根治糖尿病带来了希望，但是胰腺或胰岛移植会出现供者缺乏和免疫排异反应问题而限制了其在临床的发展，因此干细胞移植治疗成为目前研究的热点。
目的：观察人端粒酶反转录酶基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对SD大鼠糖尿病的治疗效果。
方法：以反转录病毒PLXSN为载体介导人端粒酶反转录酶基因转染骨髓间充质干细胞。从36只雄性SD大鼠中随机取6只作为对照组，注射生理盐水，其余30只注射链脲霉素(按45 mg/kg)建立糖尿病模型后，随机等分为干细胞组、人端粒酶反转录酶基因转染干细胞组和糖尿病组。造模后干细胞组、人端粒酶反转录酶基因转染干细胞组大鼠通过尾静脉注入1 mL骨髓间充质干细胞(1.5×1010 L-1)和1 mL人端粒酶反转录酶基因转染骨髓间充质干细胞(1.5×1010 L-1)。
结果与结论：注射链脲霉素24 h 后，与对照组相比，糖尿病组大鼠空腹血糖明显增加，且高于正常值(6.7 mmol/L)；移植后15 d，与糖尿病组相比，干细胞组、人端粒酶反转录酶基因转染干细胞组大鼠空腹血糖水平显著下降(P <0.05)，体质量显著增加(P <0.05)，人端粒酶反转录酶基因转染干细胞组较干细胞组更为明显；移植后45 d，干细胞组、人端粒酶反转录酶基因转染干细胞组大鼠空腹血糖水平与体质量接近对照组(P>0.05)，人端粒酶反转录酶基因转染干细胞组优于干细胞组，而糖尿病组大鼠空腹血糖维持较高水平，且体质量持续下降。上述结果提示人端粒酶反转录酶基因转染的骨髓间充质干细胞能有效治疗大鼠糖尿病。 -
人端粒酶反转录酶基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死
背景：研究表明，人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)具有加强细胞增殖能力、保持端粒长度恒定、延长体外培养细胞寿命等作用。目的：观察hTERT基因转染骨髓间充质干细胞移植对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响。方法：建立大鼠大脑中动脉阻塞模型，随机分为脑梗死组、骨髓间充质干细胞移植组和hTERT转染骨髓间充质干细胞移植组，每组20只，分别于尾静脉注射1 mL PBS，1 mL第9代骨髓间充质干细胞悬液(细胞浓度2.5×107 L-1)和第9代hTERT基因转染骨髓间充质干细胞悬液(细胞浓度2.5×107 L-1)。于移植前及移植后对各组大鼠进行改良神经功能学评分，应用RT-PCR、Western Blot检测梗死脑组织中hTERT基因及蛋白表达的变化，TUNEL法测定脑组织中细胞凋亡情况。结果与结论：hTERT基因转染骨髓间充质干细胞的细胞生长周期明显延长，随着传代次数的增加，细胞生长良好，无明显形态改变；hTERT转染骨髓间充质干细胞移植组的hTERT基因及蛋白表达明显优于骨髓间充质干细移植组，差异有显著性意义(P <0.05)；与脑梗死组及骨髓间充质干细胞移植组比较，hTERT转染骨髓间充质干细胞移植组的神经功能缺损评分明显降低，脑组织中凋亡细胞数目明显减少(P <0.05)。结果显示hTERT基因转染骨髓间充质干细胞能促进脑梗死大鼠神经功能恢复。
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siRNA靶向沉默hTERT基因对宫颈癌Caski细胞特性的影响
目的 研究siRNA靶向沉默hTERT基因后对宫颈癌Caski细胞特性的影响.方法 设计、合成特异性针对hTERT mRNA的siRNA,将其克隆入pGenesil-1.1质粒中,重组成hTERT mRNA-siRNA的表达载体,导致目的基因沉默,是由电转染入宫颈癌Caski细胞,从而产生RNA干扰作用.应用Western印迹法及RT-PCR法检测沉默hTERT基因后对于宫颈癌Caski细胞的蛋白及mRNA的表达情况;检测细胞周期运用流式细胞仪;沉默hTERT基因后宫颈癌Caski细胞的增殖能力可通过CCK-8 增殖实验检测.沉默hTERT基因后宫颈癌Caski细胞的侵袭能力可通过小室侵袭实验检测.结果 hTERT基因沉默48 h以后,与空白组及未转染组相比,转染组宫颈癌Caski细胞的蛋白及mRNA表达出现明显降低(P<0.05);细胞周期的检测结果显示S期的细胞数目明显减低,转染组的宫颈癌Caski细胞停留于G0/G1周期,空白组、转染组及未转染组相比差异显著(P<0.05);宫颈癌Caski细胞在转染组的增殖过程中被明显抑制(P<0.05);转染组穿过滤膜的细胞数量明显减少(P<0.05).结论 Si RNA靶向沉默hTERT基因电转染后,使宫颈癌Caski细胞的增殖和迁移能力得到抑制,一定程度上改善了宫颈癌患者的预后.
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乳腺癌的hTERT基因表达和端粒酶活性关系分析
目的为了分析端粒酶催化亚基在乳腺癌组织中的表达情况.方法对52例各型乳腺癌病理样本进行了端粒酶活性(TRAP-ELISA方法)和端粒酶催化亚基(hTERT)mRNA表达检测(RT-PCR).同时还比较了同一样本的癌组织和癌组织端粒酶活性和hTERT的表达情况.结果表明乳腺癌组织样本中94%呈端粒酶阳性,癌旁组织中有部分样本(2/35)呈弱阳性;hTERT(P＜0.01).结论认为端粒酶活性可能成为乳腺癌恶性程度或肿瘤易发指标,并且有可能采用更为廉价的RT-PCR进行辅助诊断.
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pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA对结直肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤的抑制
目的:研究靶向hTERT基因的重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA对人结直肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤的治疗作用.方法:于裸鼠右侧腋下皮下注射人结直肠癌SW480细胞建立结直肠癌移植瘤动物模型,随机分为生理盐水组(NS组)、pGPU6/GFP/Neo-NC-shRNA组(NC-shRNA组)和pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA组(hTERT-shRNA组),各组连续进行相应治疗6次后,观察肿瘤的生长状况,测量肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线,H-E染色观察肿瘤组织形态学变化,免疫组织化学法检测移植瘤组织中hTERT蛋白的表达,TUNEL法检肿瘤组织中细胞凋亡情况,RT-PCR法检测瘤组织中hTERT mRNA的表达.结果:与NC-shRNA组和NS组比较,hTERT-shRNA组移植瘤体积增长速度减慢；hTERT-shRNA组移植瘤组织中见肿瘤细胞形态明显改变,凋亡细胞数明显增多[(36.30±5.05)％vs(5.25±1.06)％、(6.95±1.07)％,P＜0.01]；hTERTshRNA组hTERT的mRNA和蛋白表达均明显受到抑制(171.42±30.94 vs 146.89±21.43、137.35±25.49,P＜0.01；0.39±0.09 vs 0.81±0.335、0.750±0.206,P＜0.05).结论:重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA通过下调hTERT mRNA和蛋白水平的表达促进肿瘤细胞的凋亡,抑制结直肠癌移植瘤的生长.
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三氧化二砷对HL-60细胞hTERT基因表达和端粒酶活性的影响
目的探讨三氧化二砷(As2O3)处理HL-60细胞前后人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达和端粒酶活性的改变.方法采用姬姆萨染色及碘化丙锭染色置流式细胞仪检测来观察细胞的凋亡;以RT-PCR分析hTERT基因的mRNA表达水平;应用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量;利用多聚酶链反应-酶联免疫反应(PCR-ELISA)方法检测As2O3处理HL-60前后端粒酶活性的改变.结果 2μmol/L As2O3诱导HL-60细胞凋亡的过程中,hTERT mRNA表达水平显著下调,细胞内hTERT蛋白含量也相应降低,其端粒酶活性明显受到抑制.结论 As2O3可通过下调hTERT基因的表达而抑制HL-60细胞的端粒酶活性.
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卵巢癌及癌旁组织端粒酶活性与凋亡相关性研究
目的 研究端粒酶活性和抗凋亡基因Bcl-2及促凋亡基因Bax在卵巢癌发生、发展过程中的变化.方法 应用SP免疫组织化学方法,对50例卵巢癌及癌旁正常组织进行hTERT、Bcl-2、Bax基因蛋白的检测.结果 hTERT和Bcl-2阳性表达率在卵巢癌组织中高于癌旁组织.而Bax阳性表达率在卵巢癌组织低于癌旁组织,2组间均有明显差异.hTERT蛋白表达阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期和临床Ⅲ、Ⅳ期分别为16/23(69.56%)和26/27(96.30%),差异有显著性(P<0.05).高分化组织与低分化组织中阳性率分别为18/23(78.26%)和25/27(92.59%),差异也有显著性(P<0.05).对于Bcl-2蛋白表达阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期中分别为8/23(34.78%)和16/27(59.26%),高分化组织和低分化组织阳性率分别为9/23(39.13%)和18/27(66.67%),差异均有显著性(P<0.05).卵巢癌组织凋亡指数明显低于卵巢癌旁组织,差异有显著性(P<0.05).结论 凋亡调控功能失调与肿瘤的形成有关,hTERT、Bcl-2、Bax基因蛋白的异常表达与卵巢癌发生有关;hTERT、Bcl-2在卵巢癌的发生发展中可能有协同作用,hTERT、Bcl-2与Bax在卵巢癌的发生发展中可能有拮抗作用.hTERT、Bcl-2蛋白的表达可能是反映卵巢癌生物学行为的重要参数.
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基底细胞癌中hTERT基因及增殖细胞核抗原的表达
端粒酶的表达与恶性肿瘤的发生、发展、转移及预后有着高度相关性,hTERT(human telomerase reverse transcriptase)是调控端粒酶活性的主要因素.增殖细胞核抗原(PCNA)又称周期素(cyclin),它的合成及表达与增殖细胞的增殖周期有关.本研究观察hTERT、PCNA与基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)的关系.
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PSA启动子调控并荷载hTERT－siRNAs的条件增殖型腺病毒的构建及生物学活性
目的：构建前列腺特异抗原（ PSA）启动子调控并荷载hTERT－siRNAs的条件增殖型腺病毒，研究其对前列腺癌的特异性抗肿瘤作用。方法 EcoRⅤ和XbaⅠ分别酶切pZD55－hTERT－shRNA和pZXC2－PSA－E1A，将目的片段连接重组，获得质粒pPSA －ZD55－hTERT，将其与质粒pBHGE3共转染293细胞。 PCR鉴定正确者即为条件增殖型腺病毒PSA －ZD55－hTERT。结晶紫染色观察其对前列腺癌细胞毒性。 RT－PCR、Western blot检测前列腺癌细胞中hTERT基因沉默效果。 Western blot检测E1A在前列腺癌细胞中的表达。结果成功构建PSA启动子调控并荷载hTERT－siRNAs的条件增殖型腺病毒PSA－ZD55－hTERT，初步证实PSA－ZD55－hTERT复制具有前列腺癌靶向性和特异的hTERT沉默效果。结论成功构建条件增殖型腺病毒PSA－ZD55－hTERT，为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础。
关键词： 前列腺癌 前列腺特异抗原启动子 hTERT基因 RNA干扰 腺病毒 -
条件增殖型腺病毒PSA-ZD55-hTERT对人前列腺癌细胞移植瘤的抑制作用
目的 探讨条件增殖型腺病毒PSA-ZD55-hTERT对人前列腺癌LNCaP细胞移植瘤端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达和肿瘤生长的抑制作用.方法 建立人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠移植瘤模型,瘤体内注射PSA-ZD55-hTERT,定期测量肿瘤体积,免疫荧光检测移植瘤组织中E1A及hTERT表达,原位末端标记法(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡.结果 PSA-ZD55-hTERT能有效沉默hTERT基因,PSA-ZD55-hTERT组hTERT表达水平显著低于Ad-hTERT组、Ad-EGFP组及PBS组,差异显著;Ad-hTERT组、Ad-EGFP组及PBS组细胞凋亡阳性率分别为(49.7±5.1)％、(28.8±4.0)％和(2.8±2.4)％,而PSA-ZD55-hTERT细胞凋亡阳性率为(73.5±6.4)％,表明PSA-ZD55-hTERT能有效诱导肿瘤细胞凋亡;PSA-ZD55-hTERT接种7周后肿瘤体积为(131.5±28.2) mm3,明显低于Ad-hTERT组[(469.2±74.3) mm3]、Ad-EGFP组[(583.0±98.5) mm3]和PBS组[(1547.5±196.4)mm3].结论 PSA-ZD55-hTERT对裸鼠人前列腺癌LNCaP细胞移植瘤有显著的治疗效果,为治疗前列腺癌提供新的平台.
关键词： hTERT基因 RNA干扰 条件增殖型腺病毒前列腺癌
