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天龙仿生酶解制备小分子肽优选工艺
目的:优选天龙仿生酶解工艺.方法:采用福林酚比色法测定样品中小分子肽的含量,并以此为指标,分别对胃蛋白酶和胰蛋白酶的加酶量及酶解时间进行考察.结果:加5倍量去离子水,加热至沸腾,放至室温,用稀盐酸调pH 2.0,加入药材质量2.0％的胃蛋白酶,37℃保温振荡2.0h,用10％氢氧化钠溶液调pH 8.0,加入药材质量2.0％的胰蛋白酶,50℃保温振荡4.0h,放至室温,离心(5000r·min-1 ×5 min),分离上清液,微滤(0.22 μm),超滤,收集相对分子质量＜3000的滤液.结论:所优选的仿生酶解工艺稳定.
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蛋白质含量测定方法的规范化研究
组成蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸通过脱水缩合形成肽链.蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子,其含量测定是生化药品研究中常用、基本的分析方法之一.目前其常用的测定方法有凯氏定氮法、福林酚法、双缩脲法、BCA法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法及荧光法.
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贻贝粘蛋白创面修复敷料蛋白质含量分析方法的研究
目的 建立贻贝粘蛋白创面修复敷料中蛋白质含量的测定方法.方法 采用Lowry法测定创面修复敷料中蛋白质的含量.结果 蛋白质浓度在9.5～190.0 μg·mL1范围内呈线性关系,回归方程为Y=1.39×102X+3.9×10-3,r=0.999.加样回收率为102.8％～103.2％,RSD为0.13％～0.37％.结论 Lowry法测定创面修复敷料中蛋白质含量经方法学验证,可用于创面修复敷料类产品中蛋白质含量的检测和质量控制.
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4种常用蛋白质测定方法用于中药注射剂中大分子蛋白检测的适用性研究
目的 探究4种常用蛋白质测定方法用于中药注射剂中大分子蛋白检测的适用性.方法 比较磺基水杨酸法、考马斯亮蓝法、福林酚(Lowry)法、体积排阻色谱(SEC)法的灵敏度、专属性,并将4种方法分别用于测定5种市售中药注射剂中的大分子蛋白,比较测定结果.结果 磺基水杨酸法灵敏度不高,考马斯亮蓝法和Lowry法的专属性较差,SEC法灵敏度高且专属性好.以SEC法测定5种市售中药注射剂样品,均未检出大分子蛋白.结论 SEC法可用于中药注射剂中大分子蛋白测定.
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福林酚法测定注射用肌氨肽苷中多肽的含量
目的：建立福林酚法测定注射用肌氨肽苷中多肽的含量。方法：用国家药品标准肌氨肽苷注射液规定的福林酚法测定注射用肌氨肽苷中多肽的含量。结果：牛血清蛋白在0.030mg～0.270mg（r=0.99964）范围内与吸光度值呈现良好的线性关系，平均加样回收率为99.28%，三批样品多肽含量均在85.0%～115.0%之间。结论：该方法结果可靠、专属性强，可用于注射用肌氨肽苷的质量研究。
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UV法测定叠鞘石斛中总酚含量方法研究
目的:建立叠鞘石斛中总酚的含量测定方法,并对叠鞘石斛中的总酚含量进行测定.方法:考察磷钼酸显色法、普鲁士蓝显色法和福林酚法3种显色方法对叠鞘石斛中总酚定量分析的适用性,通过L9(34)正交实验选择佳的显色条件.结果:福林酚法适用于叠鞘石斛中总酚含量的测定;显色条件:检测波长760 nm,福林酚试剂用量为1 mL,10％ Na2CO3溶液用量为5mL,反应时间为1h,反应温度为30℃,线性范围为 4～12μg·mL-1,平均加样回收率为98.14％,RSD为1.64％;总酚平均含量为6.75～7.85 mg/g.结论:该方法可用于叠鞘石斛中总酚含量的测定,且简单易行,稳定可靠,重现性好.
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叶下珠薄层色谱鉴别及福林酚法测定总多酚含量研究
目的:建立闽产叶下珠的薄层色谱鉴别法,考察比较叶下珠中总多酚含量测定法,优化测定条件.方法:采用聚酰胺薄层色谱法,选取叶下珠主成分没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和芦丁为对照品,以冰醋酸-乙醇-乙酸乙酯-甲酸(8∶6∶2∶0.5)为展开剂,取出,晾干,喷以5％氯化铁乙醇溶液、晾干、显色.以峰形、灵敏度、显色稳定性以及准确度等为评价指标,考察普鲁士蓝法(PB法)与福林酚法(FC法)测定叶下珠中总多酚含量的方法适宜性,选定采用FC法作为叶下珠中总多酚的含量测定方法.通过单因素考察和L9(34)正交试验,优化福林酚试剂的用量、碳酸钠溶液的浓度、显色时间和显色温度.结果:主成分斑点分离良好,供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显示相同颜色的斑点.测定叶下珠中总多酚含量的FC法佳测定条件为1.0 mL样品提取液中加2.0 mL福林酚试剂,放置5 min,加3.0mL10％碳酸钠溶液,加水稀释至10 mL,摇匀,25℃显色1h,760 nm波长处测定吸光度.结论:所建立的聚酰胺薄层色谱法及优选的总多酚含量测定福林酚法稳定可靠,可作为闽产叶下珠药材品质评价的方法.
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芙蓉李中总多酚含量测定方法的优选
目的:优选永泰芙蓉李果实中总多酚含量测定的方法和条件.方法:以显色稳定性、峰形、灵敏度以及准确度等为评价指标,考察普鲁士蓝法(PB法)与福林酚法(FC法)测定芙蓉李中总多酚含量的方法适宜性,选定采用FC法作为芙蓉李中总多酚的含量测定方法.通过肠(34)正交试验对福林酚试剂的用童、碳酸钠溶液的浓度、显色时间和显色温度进行优化.结果:FC法佳测定条件为1.Oml样品提取液中加2.Oml福林酚试剂,放置5分钟,加3.Oml 7.5%破酸钠溶液,加水稀释至10m1,摇匀,45℃显色0.5小时,照紫外分光-可见分光光度法,在760nm波长处测定吸光度并计算总多酚含量.结论:优选的福林酚法稳定可靠,简单易行,快速准确,可作为芙蓉李中总多酚含量测定的方法.
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大孔树脂静态吸附香椿子多酚的热力学与动力学特征
目的 研究大孔树脂静态吸附香椿子多酚的热力学与动力学特征.方法 福林酚法测定香椿子多酚含有量,考察大孔树脂(DM130、AB-8、HPD400、HPD450、HPD-826)的吸附效果,绘制等温线、动力学的静态吸附曲线.结果 HPD400大孔树脂的吸附符合Freundlich、Langmuir方程,为吸热、熵增、可逆和自发进行的吸附,可用准二级动力学方程表示吸附动力学规律,其主要速控步骤为液膜扩散,吸附活化能为0.937 kJ/mol.结论 HPD400大孔树脂对香椿子多酚有较好的吸附性能.
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蛋白质含量测定方法对乌司他丁比活的影响
目的 考察2种不同蛋白质含量测定方法对乌司他丁比活的影响.方法 分别采用凯氏定氮法和福林酚法对乌司他丁原料药中的蛋白质含量进行测定,再结合效价计算比活.结果 由凯氏定氮法得到的比活分别为4 035、3 933和4 010mg·mg-1;由《日本药局方》福林酚法得到的比活分别为3 472、3 360和3 423 mg·mg-1;由《中国药典》2010年版福林酚法得到的比活分别为3 621、3 503和3 570 mg·mg-1.结论 由《日本药局方》和《中国药典》福林酚法测得的蛋白质含量结果差异较小,但与凯氏定氮法测得的蛋白质含量差异较大.
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忆思捷等营养保健产品多肽含量测定方法学研究
研究忆思捷蛋白饮等营养保健产品多肽含量测定方法的适用性.采用福林酚法测定忆思捷蛋白饮等多肽类产品的多肽含量,进行线性、精密度、专属性、准确度考察,并选取已上市同类多肽产品进行多肽含量测定验证,分析该法是否适用于忆思捷蛋白饮等多肽类产品多肽含量测定.多肽线性范围是47～ 235 μg/mL,r =0.998(n=5),线性关系良好.精密度试验和准确度试验的RSD均＜2％,精密度、准确度均良好.用辅料进行干扰试验,证明辅料对多肽含量测定无明显影响,该含量测定法专属性较好.福林酚含量测定法适用于测定忆思捷蛋白饮等营养保健产品多肽含量.
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福林酚法测定闽产盐肤木根茎中总酚酸的含量
目的 测定闽产盐肤木根茎中总酚酸的含量. 方法 用比色法,以没食子酸为对照品,在波长760 nm处测定闽产盐肤木根茎中总酚酸的含量. 结果 没食子酸在1.0～10.0μμg/mL有良好的线性关系,盐肤木根茎中总酚酸含量为35.44 mg/g. 结论 比色法可简便、准确、快速地测定闽产盐肤木根茎中总酚酸的含量,为闽产盐肤木的质量控制提高理论依据.
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福林酚法测定脑蛋白水解物溶液中的多肽含量
目的改进脑蛋白水解物的多肽检测法.方法用福林酚法测多肽与凯氏定氮法进行比较.结果福林酚法测得的多肽值与总氮结果一致,且方法更稳定.结论福林酚法可在脑蛋白水解物溶液多肽含量的检测时代替凯氏定氮法进行控制.
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永泰芙蓉李总多酚含量的比较
芙蓉李为蔷薇科植物芙蓉李(Prunus salicina Lindl.cv.furong)的果实,在福建省广为种植的著名品种是芙蓉李和胭脂李,其中芙蓉李为福建省的特有品种,主产于福建省永泰县,果实圆形,果肉深红,甜酸适中.永泰芙蓉李是一种既能鲜食又可加工的优良品种,含有丰富的多酚类化学成分、有机酸和多糖等成分[1-3].由于芙蓉李鲜果采收期短,容易腐烂,造成严重的损失,目前对其保存方法未见报道.我们运用优选的福林酚法[4],分析比较芙蓉李鲜果、加工后干品及食用李干中抗氧化活性部位总多酚含量的变化,为延长李果的商品寿命,探索李果的贮藏保鲜技术,增加鲜果的附加值利用,进一步开拓其消费市场,提供实验依据.
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福林酚法测定软胶囊中肽含量
肽,又称多肽,是一类由氨基酸组成,比蛋白质小,结构简单,生理活性强的物质,它们与蛋白质没有本质的区别,但又不同于蛋白质.多肽这类生物活性物质是生命活动的重要参与者,它们影响着细胞与细胞,组织与组织的生理活动.许多肽类的功能已经明确,具有多种生理调节作用[1].部分肽类物质已经作为保健品,进入了人们的日常生活.
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枇杷花水提液总酚含量的Folin-Ciocalteu法测定
目的 建立枇杷花水提液中总酚的含量测定方法,优化总酚测定的佳条件.方法 以没食子酸为对照品,在760nm处采用Folin-Ciocaheu法测定总酚的含量,考察福林-酚用量、Na2CO3溶液用量、显色时间等对测定的影响,并建立佳测定条件.结果 Folin-Ciocaheu法测定枇杷花水提液中总酚,佳福林-酚用量为3ml,佳10％ Na2CO3溶液用量为6ml,佳显色时间为50min,多酚质量浓度在0.4～ 3.2μg/ml范围内与吸光度线性关系良好,其回归方程为y=0.1419X+0.1427,R2=0.9974;加样回收率为96.19％,RSD为2.03％,该测定方法精密度、重复性和稳定性良好.结论 该方法简便易行,稳定性好,对提高枇杷花水提液的质量控制标准具有参考意义.
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福林酚法与考马斯亮蓝法测定甘露聚糖肽口服溶液中蛋白质含量的比较
目的:分别建立福林酚法与考马斯亮蓝法测定甘露聚糖肽口服溶液中蛋白质含量并做比较.方法:分别对两种方法的检出限、线性范围进行考察,并进行精密度、重复性、回收率和样品含量的测定.结果:福林酚法检出限为0.2μg,蛋白质浓度线性范围为0~112.0μg(r=0.9990),平均回收率为105.2%(RSD=1.9%),精密度RSD均<1%,样品测定结果分别为47.45,58.34,40.99μg·ml-1.考马斯亮蓝法检出限为0.8μg,蛋白质浓度线性范围0~99.6μg(r=0.9980),平均回收率为102.0%(RSD=2.7%),精密度RSD均<1%,样品测定结果均为未检出.结论:福林酚法测定甘露聚糖肽口服溶液中蛋白质含量可靠而有效.
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市售不同来源福林试剂对多肽含量测定结果的影响
目的:研究市售不同来源福林试剂对肌氨肽苷注射液中多肽含量测定结果的影响.方法:采用福林酚法测定多肽的含量;以牛血清白蛋白为对照制备标准溶液并绘制标准曲线;使用不同来源的福林试剂进行测定;应用统计学方法分析研究不同来源福林试剂对测定结果的影响.结果:多肽含量在0.024 9～0.224 l mg·ml-1浓度范围内线性关系良好,平均回收率为96.4％(RSD=1.5％,n=9);统计分析结果表明,使用不同来源福林试剂测得的结果有显著性差异.结论:市售不同品牌福林试剂对肌氨肽苷注射液中多肽含量测定的结果具有显著性影响,使用前应对福林试剂进行质量确认.
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延龄草不同提取部位总酚的含量测定
目的:测定延龄草不同提取部位中总酚的含量.方法:以没食子酸为对照品,采用福林酚法测定延龄草不同提取部位总酚含量.结果:没食子酸在0.312 5～40 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 3).延龄草不同提取部位中总酚含量由高到低的排列顺序为:醋酸乙酯部位、正丁醇部位、乙醇提取部位、水提取部位、石油醚部位.结论:延龄草中总酚含量较高,主要分布在醋酸乙酯部位和正丁醇部位.
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蜈蚣粉发酵前后水溶性活性物质含量对比研究
目的:探究蜈蚣粉发酵前后水溶性活性物质含量差异.方法:通过水提法对发酵前后蜈蚣粉进行水溶性活性物质的提取,分别采用苯酚-硫酸法、定磷法、福林酚法对总糖、总核酸、总蛋白进行含量的测定,并比较蜈蚣粉发酵前后水溶性活性物质含量的差异.结果:通过对蜈蚣粉发酵前后水溶性活性物质含量测定,得出发酵前每克样品中总糖含量为5.7807mg、总核酸含量为14.8141 mg、总蛋白含量为90.9678mg,发酵后每克样品中总糖含量为19.8494mg、总核酸含量为50.3089mg、总蛋白含量为101.7339mg.结论:蜈蚣粉发酵后总糖、总核酸和总蛋白含量,均大于发酵前总含量.
